多糖提取外文文献以及中文翻译Word下载.docx
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确定了优化条件,并通过数学模型绘制了三维响应曲面图。
T检验和P值表明浸泡时间和水提时间(X2X4)在响应值中出现了互动效应,接着还出现了水萃取时间(X4)线性项,浸泡时间和水提温度(X2X3)互动效应。
考虑到效率因素,绞股蓝萃多糖提取优化条件是:
料液比比为1:
67,浸泡时间10分钟,水提温度为95℃,水提时间为15分钟。
在优化条件下,多糖提取率为11.29%,接近预测提取率。
因此,应用均匀设计法从绞股蓝中提取多糖,能够极大缩短提取时间。
关键词:
绞股蓝;
多糖;
提取;
均匀设计
摘要
1.前言.........................................................................................................................................2
2.材料和方法.............................................................................................................................3
2.1实验材料和仪器..................................................................................................................3
2.2绞股蓝中多糖提取..........................................................................................................3
2.3多糖含量测定..................................................................................................................3
2.4多糖提取率计算..............................................................................................................3
2.5多糖提取因素研究..........................................................................................................3
2.6实验设计和数据分析..........................................................................................................3
3.1单因素实验结果..............................................................................................................5
3.1.1浸泡时间对多糖提取率影响.......................................................................................5
3.1.2料液比对多糖提取率影响...........................................................................................5
3.1.3.水提温度对多糖提取率影响.......................................................................................6
3.1.4水提时间对多糖提取率影响.......................................................................................6
3.2数据分析和均匀设计..........................................................................................................7
4.结论........................................................................................................................................11
1.前言
碳水化合物能够作为细胞结构组成部分和能量源泉,这一点是大家所公认。
而更为有趣是,碳水化合物高度复杂结构使其能够进行各种非常特殊反应.。
这样,在和细胞间交流和信号传输相关一系列分子识别进程中,这些生物分子都能参和其中,如细胞附着、分化、发育、调整等等。
基于上述原因,人们对多糖基药物和多糖物质分析、提取这一学科发展产生了浓厚兴趣。
在东方国家,绞股蓝是一种著名可食用药用植物。
近来,绞股蓝以其抗癌活动、抗胃溃疡作用、免疫调节作用、抗氧化性能、和高脂血治疗作用吸引了众人眼球。
绞股蓝在医学上培植和提炼被大量生产,但是对于怎样优化提炼绞股蓝中多糖还没有很多研究。
均匀设计试验方法是一种建立在方开泰和王元研究举出上新方法。
它适用于多因素多水平正交试验,如正交设计,均匀设计提供了大均匀设计表为用户方便地使用。
均匀设计表形式是仿照正交设计表,除了水平数量等于一些试验个数。
均匀设计允许最大可能数额为每个因素以及水平数量可以和实验个数相同。
均匀设计确定影响因素特性和最佳条件因素。
本文采用正交阵列和方差分析作为分析工具。
当许多因素以及他们相互作用对结果产生影响时候,均匀设计是一种有效优化这个过程有效工具。
同时,均匀设计是一个集统计和数学技术于一身,并且成功地用于发展,改善和优化过程方法。
总之,均匀设计是首选方法,因为它减少了一些实验个数来评估多个参数及其相互作用。
所以,它是不费力费时并且能够更好地优化过程。
本研究涉及从绞股蓝中提取多糖方法,介绍了经优化热水提取法。
我们采用均匀设计研究料液比、浸泡时间、水提温度以及水提时间对于绞股蓝多糖提取量影响。
2.材料和方法
2.1实验材料和仪器
从中国福建省泉州市一个当地商店购买绞股蓝。
上海生命科学研究院、中国科学院以及所有其他使用葡萄糖(C6H12O6)(AR级)作为化学药品进行结构分析。
722紫外分光光度计来自上海3号设备公司。
桌面离心机高速离心机来自上海安亭科学仪器公司
2.2绞股蓝中多糖提取
对绞股蓝提纯应采用95%乙醇在50℃条件下对原料进行提纯6h,干燥后,再用蒸馏水提纯。
每次用3g样品。
绞股蓝汁提取则是将绞股蓝片按特定比例和时间浸水,然后在特定温度下水浴加热一定时间,最后收集上清用于测定多糖产量。
2.3多糖含量测定
采用苯酚-硫酸法测定总葡萄糖浓度。
每次处理时,取1ml(精确)上清液倒入10ml试管中。
然后加入0.5毫升6%苯酚并摇匀。
接下来再向装有混合物试管中加入2.5ml硫酸,摇匀后在室温下静置30分钟。
最后,用波长为490nm722分光光度计测量吸光度。
同时,以同样方式测量空白混合液作为对照组。
2.4多糖提取率计算
多糖提取率(%)为测定多糖含量和绞股蓝干重比值
2.5多糖提取因素研究
首先,我们研究单个个因素对多糖提取率产生影响。
也就是说,我们在保持其他因素不变情况下,研究单个因素不同水平对多糖提取率产生影响。
2.6实验设计和数据分析
本研究采用均匀设计,用于判定干绞股蓝多糖热浸提优化条件。
试验设计和结果分析使用数据处理系统(DPS3.0)软件,该软件用于提供试验设计、数据分析及回归模型建立。
根据以上单因素试验结果设定每个因素试验水平。
提取过程中独立变量X1(固体:
液体比例,g/ml)、X2(浸泡时间,min)、X3(浸提温度,°
C)和X4(水提时间,min)等组合效果,共13个变量水平(表1)列于表2。
根据DPS软件四因素设计,按随机顺序,共挑取13个组合。
其编码值和实际值亦列于表2。
响应函数(Y)即多糖产量。
这些数值和以下二次多项式
(1)所编码变量关联:
(1)
其中,Y是预测得率,、、和是回归系数,和为独立变量。
每个系数显著性由t值和p值决定。
最后取值是用于通过使用回归方程计算相应Y函数值。
响应会被检测,结果也将和其它预测值进行对比。
在这些条件下,最优条件将通过相关实验检测出来。
为了使每个因素实验水平和所得结果之间联系更加清楚,进而推论出最优条件,可用多项式方程和等高线图来表示。
表1单因素种类及其水平
单因素
水平
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
料液比(g/ml)
1:
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
70
浸泡时间(min)
80
90
100
110
120
水提温度(℃)
75
85
95
水提时间(min)
105
135
150
165
180
195
表2均匀设计法提取多糖实验安排表及实验结果
试验号
变量水平
实验值Ye
预测值Y
Y-Ye
X1
X2
X3
X4
7.13000
7.36332
-0.23332
5.3000