海洋生物学试验指导书Word文档格式.docx

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2．实验报告纸。

3．绘图用具：

HB或2H或3H绘图铅笔一支，软橡皮，尺及铅笔刀等。

三、学生如何进行实验

1．学生在每次实验前应把实验指导书上关于该次实验的部分认真地阅读一遍，明确实验目的，内容与操作方法。

把必需的实验用品带到实验室。

2．实验开始时，应认真听取老师对实验的讲解，提示和要求，不得在没有听完老师的讲解之前，盲目动手实验或作其他小动作。

3．准备好实验用的仪器和材料、工具。

4．严格根据实验指导进行实验。

独立操作、认真观察、作好记录，并思考和回答实验指导书和老师提出的问题。

实验的主要目的之一在于培养学生的独立操作能力，因此每个学生在实验中要做到不依赖别人，只有当自己经过努力仍不明白时才请老师帮助。

5．在海洋生物学实验中绘制观察标本图形是一顶很重要的实验任务，每个学生应认真对待，但绘图并不是实验的唯一目的，它只是实验观察的记录。

观察若不精确，绘图也不可能准确。

一般绘图时间不能超过实验时间的三分之一，大部分时间应用于观察和解剖。

6．必须按规定格式写实验报告。

实验报告的书写和绘图只可用铅笔。

实验报告必须是自己实验观察的真实记录、独立完成、独立思考，不准抄袭。

每次实验应在老师指定时间内完成，并当场交出实验报告。

四、生物绘图的基本要求

1．绘制生物图应以精确为主，因此要求学生首先要认真地观察标本，在此基础上根据实物标本的大小按适当比例放大或缩小一定倍数绘出其图形，绘图时要注意保持同一生物图形不同结构部分的大小比例协调一致。

某些不易观察清楚的结构可以适当参考教科书上图谱绘制，但不可以在没有认真观察基础上就随意模仿教科书上的图谱随便绘制或抄袭他人实验报告。

2．一张绘图纸上绘制几个生物图时，要注意布局合理、比例适当、大小适宜。

图于图之间要留有一定间隙，避免拥挤。

3．绘图时，先用削尖的软铅笔（HB）按照观察到的标本各部分的大小比例，部位关系在灰图纸上轻轻绘出草图，经过修改，在用2H或3H铅笔绘出清晰的正式图。

如果标本是两侧对称的，则应先划一条线垂直经过图中央，这样就很容易把图形两侧画的对称。

4．细胞壁和细胞核等轮廓用实线画出，要求线条光滑匀称、粗细一致。

细胞质和核质等用圆点表示，其浓密、明暗程度用点的疏密表示，不可用铅笔涂抹。

图中点线不可重复描绘。

5．注名称和标引线要对准表示的部位，尽可能向左引出，标引线尽可能平行，终点要对齐，图的注字要横写。

每图的标题应写在图的下方，并将本次实验的题目写在绘图纸的正上方，字体楷书或仿宋体，不可潦草。

藻类学实验方法

一、实验要求

1，通过典型种类的观察，了解和掌握各门藻类的形态特征。

2，通过制片，观测，掌握藻类植物显微观察临时装片的制作方法和显微结构的观察方法。

3，识别常见海洋藻类并能正确分类。

4，进一步熟悉生物绘图技术和显微镜的使用技术。

5，初步掌握海洋藻类植物的定性，定量测定方法。

二．仪器，用品

生物显微镜，栽玻片，盖玻片，吸管，尖头镊子，纱布，擦镜纸，解剖针，碘夜（6克碘化钾+四克碘+100ml蒸馏水）。

三．操作方法

（一）藻类标本临时装片制作方法

将要观察的藻类标本材料，取一滴滴于载玻片中央，加盖盖玻片，制成临时观察的标本玻片，称为临时装片。

藻类标本临时装片的制作方法如下：

1．把盖玻片与载玻片洗净。

载玻片和盖玻片一般用自来水可冲洗干净，如有油污，可先用70%酒精浸泡，然后再用水冲洗。

载玻片和盖玻片洗净应用洁净的纱布或软布擦干。

盖玻片小而薄，容易破碎，擦拭时，要用左手母指和食指轻轻夹住盖玻片的边缘一侧，用右手的拇指和食指掂着纱布或软布把盖玻片夹在其间，来回擦拭盖玻片非手持一侧，然后再转换擦拭另一侧。

注意，擦拭时动作要轻，在盖玻片两侧用力要相等。

2．摇匀标本瓶，用吸管吸取一滴滴于载玻片之中。

标本液量要适当，量过多，盖玻片容易浮动或使液体溢出到载物台上；

过少时标本液不能布满盖玻片下面，容易产生气泡。

另外，由于藻类标本经固定后沉淀集中于标本瓶底部，吸取标本时如不摇匀，使吸出的标本不是过于稀疏难于在镜下找到目标，就是过于浓密使物象重叠难于观察分辨。

所以在制作浮游生物临时装片吸取标本液时，一要标本液量要适当；

二是要注意摇匀标本液，以便使标本液浓度适中，才利于观察。

3．盖好盖玻片。

盖盖玻片时，必须使盖玻片倾斜放下，使其一边先与水滴边缘接触再慢慢放下，可以避免装片内产生气泡。

若水过多盖玻片浮动，可用吸水纸靠近盖玻片一侧边缘下端吸取多余水分。

如果是活体运动标本，最好在盖玻片之前在水滴上加一些纤维，如棉花纤维等以减缓其运动速度和活动范围。

假如活体看毕后欲将其固定，便可吸取少量碘液从盖玻片旁侧渗入以杀死运动个体。

丝状或胶团块藻类的制片，需事先在载玻片上滴一滴固定或水，然后，用尖头镊子镊取少量藻丝轻放其中，盖上盖玻片。

临时装片的制作是研究海洋生物的基本技术之一。

要求反复练习，熟练掌握。

（二）藻类显微结构观察方法

临时装片制成后，即可将此片放在显微镜下观察。

观察时，先在低倍镜下观察，找到所需标本，将其移至视野中央，再转换高倍镜观察。

对于几种典型结构和部位的观察，可按下述方法

1．多角度观察：

为了从不同侧面多角度观察某些藻体细胞的形态结构特征，可用解剖针轻触盖玻片让其翻动。

如对硅藻细胞壳面，带面的观察。

2．细胞核观察：

通常细胞用碘液固定后，核被染成橙黄色，对碘液不敏感的可用苏木精染色法使其着色。

对裸藻等较大型个体可用挤压法，用手触压盖玻片使细胞破裂，核就可脱膜而出。

3．鞭毛观察：

先取活体标本在低倍镜下观察其活动状况，反运动比较迅速（旋转，游动等）的藻类（注意与运动缓慢的藻类如硅藻，颤藻严格区别开）均为鞭毛藻类，生活时的个体鞭毛无色，接近透明，光亮，转换高倍镜并将聚光镜调到最上位，缩小光圈可以看的比较清楚。

如果加上碘液固定，鞭毛可以衬托出来，更为清晰。

4．蛋白核观察：

对周边由淀粉鞘组成的蛋白核（多数绿藻）只要加少许碘液令其变色（蓝黑色）就可看清；

对周边由副淀粉粒包被的蛋白核（如裸藻）即使加碘也不变色，但由此可衬托出几个椭球形，光亮的副淀粉粒围绕于一蛋白块的四周；

某些硅藻的无鞘蛋白核，不过是一些大小不一的白色颗粒，要注意和稍带黄色的而呈正圆球行脂肪粒区别开来。

5．同化产物观察

（1）淀粉有蛋白核的藻类如绿藻，淀粉都集中分布在蛋白核的周围形成所谓的“淀粉鞘”中，遇碘发生变色反应呈蓝黑色或紫黑色；

无蛋白核的种类（如某些隐藻、绿藻），淀粉粒分散于色素体或细胞质的不同部位。

无论位置和形状怎样，遇碘呈蓝黑色有时为紫黑色者即为淀粉。

（2）脂肪在细胞内呈反光较强的小球体，遇碘不发生变色反应，在硅藻色素体上最为常见，但数量、位置不定，有的个体缺乏。

通常在活体标本中清晰。

（3）副淀粉为裸藻门所特有的一种类淀粉物质，系演粉的同分异构物。

呈椭球形、环形、棒状、罕为球形，反光性很强，遇碘不发生变色反应，通常大型。

（4）蓝藻淀粉为蓝藻门所具有的一种类淀粉物质，也为淀粉的同分异构物。

呈颗粒状，比较均匀地分布于蓝藻细胞周边的色素区，遇碘呈淡紫色或淡褐色。

（5）白糖素为金藻（少数黄藻）所具有的一种糖类，是一种白色、光亮不透明，大小不定的球体，遇碘不发生变色反应，一般集中在细胞后端。

6、色素体观察：

色素体在原生质中存在的特点是有固定的形状，并呈现一定的颜色。

欲看清颜色务必用活体标本，否则只能从形状上加以区分。

对于不同形状色素体的观察，有一种简易可行的经验办法，即待临时装片水分蒸发殆尽时，用手指按住盖片揉搓，使细胞破碎，色素体可自然脱出，呈现于视野中。

7、胶被观察：

团藻目、四孢藻目的许多种类，群体的周边包被一层含水量极高的透明胶被，在装片水分蒸发殆尽时较易看清，加上适量碘液使原生质体着色后，也能衬托出胶被的存在。

四、分类识别

各门类常见淡水藻类的识别和细胞构造的观察将分别在各个实验中进行。

实验时先借助课本上检索表确定标本的分类位置及属名，再根据观察要点对细胞形态结构进行观察。

实验一硅藻（Bacillariophyta）和金藻的形态构造，

一、实验目的

通过对硅藻门、金藻门常见藻类的观察，了解硅藻、金藻的形态、细胞壁、（鞭毛）、色素体、光合作用产物、细胞核等胞器的构造特点；

掌握其形态构造特征，识别常见种类并正确分类。

二、标本备置

金藻门多出现于水温较低的早春、晚秋季节，由于金藻门运动种类不具细胞壁，在标本固定液中常易失去细胞特征，给鉴定种类带来困难，故一般以观察活体标本为准。

金藻门中唯有鱼鳞藻在温暖季节中大量出现。

硅藻类通常喜在较低温度的水中生活，在春秋两季大量繁殖，出现两次高峰。

硅藻又分羽纹硅藻目和中心硅藻目两大类，种类和数量都非常多，素有海洋牧草之称。

在春秋季节的海水中等处都很容易采集到硅藻类标本。

标本的具体采集，固定方法见藻类植物实验方法。

二、常见代表种类的观察与识别要点

（一）金藻门的常见种类

1、鱼鳞藻属Mallomonas

藻体为单细胞，呈椭圆形、卵形或梭形。

藻体的表面，盖有复瓦状的硅质鳞片，注意观察鳞片的形状及鳞片上有否硅质长刺。

细胞前端具一根约与细胞等长的鞭毛。

2、棕鞭藻属Ochromonas

藻体单细胞，具2条不等长的顶生鞭毛，后端常见一个大的白糖素颗粒。

细胞无壁，色素体1-2个，片状。

3、黄群藻属（合尾藻）Synura

藻体细胞辐射状连接成球形或椭圆形的群体，群体外无共公的胶被。

个体细胞梨形，细胞前端广宽，后端尖窄向着群体中央，鞭毛二条生于细胞前端，等长。

色素体两个，片状，位于细胞两侧。

4、锥囊藻属Dinobryon

藻体细胞外具倒锥形的硅质囊壳，彼此连接成树枝状群体。

5、三毛金藻属Prymnesium

藻体单细胞，细胞呈椭圆形、卵形、球形等，易变形。

鞭毛3条顶生，中间一条较短，实为类似鞭毛的丝体，称固着丝体。

近鞭毛基部有一伸缩泡。

色素体2个，叶状，侧生。

白糖素呈一大形球状或小形多数，位于细胞后端。

（二）硅藻门的形态观察

1.硅藻细胞壁的观察方法

取硅藻标本浓缩液一滴，加盖玻片，以低倍镜找一个角毛藻Chaetocerossp之群体，然后用高倍镜观察。

（1）群体系有很多细胞连接而成。

镜中所见者都为细胞的环面观。

（2）细胞呈短圆柱形。

细胞壁有上下两壳套合而成，每壳的壳面上有角毛两根，自壳面的两角上伸出，群体即借邻接细胞的角毛相连而成。

注意角毛的粗细、长短、伸出的方向及角毛与角毛相连接的情形。

（3）每壳的壳面周缘略弯曲的部分称为壳衣或壳套，与壳衣相连接和壳面垂直的部分称相连带。

上下两壳的相连带称为壳环或壳环带。

注意群体中各细胞的壳衣与壳环的长度有一定的比例，此比例随种而异。

（4）细胞与细胞间有一定形状的间隙，叫细胞间隙，不同种类其形状不同。

（5）有的种类群体两端的细胞形态与其他细胞不同，注