SLE和PSS患者的自身免疫抗体检测及临床价值Word下载.docx
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检测110例SLE和PSS患者血清,ANA采用间接免疫荧光法,抗ENA抗体用免疫印迹法,ds-DNA用免疫胶体金技术检测。
结果:
SLE患者ANA阳性率最高(90.0%),PSS患者抗SSA阳性率最高(80.3%),两组患者中抗Sel-70阳性率最低,分别为1.9%和1.8%。
结论:
自身免疫性疾病患者体内常存在有一种或多种高效价的自身抗体,SLE和SS患者各有特异性抗体存在,联合检测多种自身免疫抗体,对临床诊断有重要意义。
【关键词】自身免疫抗体;
系统性红斑狼疮;
原发性干燥综合征
〔Abstract〕ObjectiveToinvestigationthesignificanceofautoimmuneantibodiesANA,anti-ENAantibody,ds-DNAantibodyinsystemiclupuserythematosus(SLE)andprimarySjogren'
ssyndrome(PSS).MethodsTodetect110serumsamplesofSLEandPSSpatients.ANAwasdetectedbyimmunofluorescenceassay,anti-ENAantibodywasdetectedbyimmunoblotmethod,ds-DNAwasdetectedbycolloidalgoldmethod.ResultsThepositiverateofANAwasthehighest(90.0%)intheSLEpatients,thepositiverateofanti-SSAwasthehighest(80.3%)inthePSSpatients,whilethepositiverateofantiScl-70waslowerintheboth,theywere1.9%and1.8%respectively.ConclusionThereweremorethanoneautoimmuneantibodiesinpatient'
sserumofautoimmunediseases.CharacteristicantibodyexistsintheLSEandPSS.Simultaneouslydetectionmanifoldautoimmuneantibodywasimportanttoclinicaldiagnosis.
〔KeyWords〕AutoimmuneAntibody;
SystemicLupusErythematosus;
PrimarySjogren'
sSyndrome
自身免疫性疾病是指机体的免疫效应细胞或免疫效应分子,针对自身组织或细胞产生的一系列病理性免疫应答反应,导致自身组织器官损伤的一大类疾病,其发病机制十分复杂,临床表现多变。
系统性红斑狼疮(systemiclupuserythematosus,SLE)和干燥综合征(sjogren'
ssyndrome,SS)是临床上较为常见的两种自身免疫性疾病[1,2],SLE免疫发病机理是TS细胞缺陷,B细胞功能亢进,产生大量自身抗体,导致Ⅱ型(主要是抗自身淋巴细胞,红细胞和血小板等细胞毒型抗体)及Ⅲ型(主要是DNA-抗DNA免疫复合物)变态反应,主要损害血管、肾脏、皮肤和关节等,SLE患者血清中有多种自身抗体。
SS以外分泌腺高度淋巴细胞浸润为特征,早期侵害泪腺和唾液腺,患者血清丙种球蛋白增多,血清出现多种自身抗体。
近年生物化学和免疫学检测技术发展迅速,自身免疫抗体检测已广泛应用于临床,自身免疫性疾病病人血循环中存在多种自身抗体,其中抗核抗体(ANA)、抗双链脱氧核糖核酸(抗ds-DNA)、抗核提取物抗体(抗ENA)3项联检为临床对自身免疫性疾病的诊断、治疗及预后提供了重要依据。
我们对110例自身免疫性疾病病人的血清进行了ANA、抗ds-DNA、抗ENA的检测,并对这些自身抗体与自身免疫性疾病各疾病的关系进行了分析,现报道如下。
1资料与方法
1.1一般资料
所选病例为2003年2月至2006年1月在我院门诊或病房住院治疗的患者,符合2002年国际风湿病学会修订的风湿病诊断(分类)标准,其中SLE患者54例,PSS患者56例,共110例,病程1~20年,女性104例,男性6例,年龄16~68岁,平均年龄46岁。
另取20名健康体检人员血清作对照。
1.2检测方法
1.2.1ANA检测用欧蒙公司提供的抗核抗体(ANA)马赛克间接免疫荧光法检测试剂盒,用HEp-2细胞和猴肝细胞印片包被,血清按1:
100稀释,出现特异清晰的荧光核型(核均质型,核颗粒型,核仁型等)可判断为阳性,1:
100以上稀释度阳性者为阳性。
1.2.2ENA多肽抗体检测采用欧蒙公司提供的ENA抗体谱欧蒙斑点法(EUROASSAY)检测试剂盒,膜条上包被有nRNA/Sm,Sm,SSA,SSB,Scl-70,Jo-1靶抗原,严格按说明书操作,反应区出现明显的蓝紫色条带为阳性,根据膜条上各抗原带着色判定结果。
1.2.3抗ds-DNA抗体采用胶体金标记和快速膜斑点渗滤技术,用南京军区福州总院全军医学检验中心提供的抗ds-DNA抗体快速检测试剂盒,按说明书操作,以观察孔内出现可见淡红色圆点为阳性。
1.3统计学处理
用SPSS11.0统计软件分析资料,数据的各种率比较采用检验。
2结果
2.1ANA和ds-DNA检测结果
54例SLE患者中,ANA阳性率最高(90.0%),ds-DNA阳性率50.0%;
56例PSS患者的ANA和ds-DNA阳性率分别为67.9%和30.4%;
对照组的结果均为阴性。
结果见表1。
2.2ENA多肽检测结果
LLE患者的SS-A抗体阳性率最高46.3%,其次为Sm抗体和U1-nRNP抗体,分别为40.7%和38.9%,而且Sm阳性常伴抗SS-A阳性;
PSS患者的SS-A抗体阳性率最高,为80.3%,其次是SS-B抗体39.3%;
两组患者的Scl-70和Jo-1的阳性率最低。
结果见表2。
3讨论
自身免疫性疾病的免疫学特征是患者血液中存在有一种或多种自身免疫抗体,高效价的自身免疫抗体是确诊该疾病的重要指标,且以抗核抗体(ANA)为主。
ANA是以真核细胞的核成分为靶抗原的自身抗体的总称,其抗原位点是核酸、组蛋白、非组蛋白、磷脂和各种蛋白酶等多种物质,除细胞核外,细胞质和细胞器中也普遍存在。
其所对应的抗原可分为盐水可提取性核抗原、不溶性核抗原和细胞浆抗原,本文作者的ANA检测采用人上皮细胞(HEp-2)和灵长类肝脏冰冻组织切片两种基质联合检测,比较荧光模式使抗体预分型成为可能,同时灵长类肝脏组织切片扩充了可检测到自身抗体的范围。
目前ANA主要用于风湿病的筛查,是诊断风湿病的主要指标,其敏感性非常高,但特异性较差,多种自身免疫疾病存在有ANA抗体。
患者组的ANA检出率为79.1%,SLE组与SS组分别为90.0%和67.9%,与文献报道一致[3]。
ANA在SLE的诊断中具有十分重要的意义,我们的检测结果显示,SLE患者的ANA滴度在1:
320以上占98%,并且病情活动期患者抗体的滴度更高,可达1:
1280以上;
SS患者的滴度多在1:
320以下,占80%。
抗ds-DNA抗体的靶抗原是细胞核中的DNA双螺旋结构,抗ds-DNA抗体主要见于SLE,目前被列入SLE的诊断标准,是SLE最重要的诊断标志之一[4],抗ds-DNA与其相应自身抗体形成的免疫复合物可导致皮下组织、肾脏和其它器官的组织损伤,该抗体滴度与疾病的活动呈正相关,抗ds-DNA伴抗Sm抗体出现,则是SLE的特异性标志,本文作者进行检测所统计的SLE患者抗ds-DNA的阳性率为50%,SS患者的阳性率为30.4%,但SLE患者常伴有Sm抗体的阳性,Sm抗体的阳性率为40.7%,SS患者Sm抗体阳性率为0%;
抗U1-nRNP抗体是以抗核内的核糖蛋白(nRNP)得名,此抗体在多种结缔组织病可出现,是区分结缔组织病与非结缔组织病的重要依据[1],文中SLE比SS的检出率高;
SS-A和SS-B蛋白是同属于核糖核蛋白部分的两个核抗原,在SS患者中由于大量淋巴细胞浸润呈灶性,其主要是CD4+的T细胞,CD45RO+表型,表达αβ-T细胞受体,表明B细胞和T细胞功能亢进,HLA-DR和HLA-DQ的共同作用与抗SS-A及抗SS-B抗体的形成有关[5],抗SS-A和抗SS-B主要在干燥综合征中检出,抗SS-A的敏感性比抗SS-B高,但抗SS-B比抗SS-A特异性高,如两者同时出现则为SS的诊断依据,本文作者检测的SS患者抗SS-A的检出率为80.3%,阳性率远高于其它抗体。
我们的研究表明,SLE患者和SS患者血清均存在多种自身抗体,因此,寻找高敏感性,高特异性的自身抗体对SLE和SS的早期诊断、早期治疗有重要意义。
我们的研究结果显示抗ds-DNA及抗SS-A,抗SS-B在SLE和SS患者中的阳性率、特异性与文献报道相一致[6,7],但我们的ANA敏感性更高。
国内外关于自身抗体与疾病活动性的关系目前文献报道不一[8,9],我们的研究结果显示ANA,抗ds-DNA与疾病活动呈显著相关,在疾病活动期阳性率及滴度显著升高,可作为病情评价和观察治疗的指标。
综上所述,对自身免疫性疾病患者进行ANA,抗ds-DNA及ENA多肽抗体的联合检测,并结合临床分析检测结果,可为自身免疫性疾病的诊断、分类、疗效观察和预后判断提供重要依据。
【参考文献】
〔1〕张乃峥.临床风湿病学〔M〕.上海:
上海科学技术出版社,1999.89-96,112-117
〔2〕FoxRI,StrnM,MichelsonP.UpdateinSjogrensyndrome〔J〕.CurrOpinRheumatol,2000,12(5):
391-398
〔3〕余妍,彭道荣,于文彬,等.自身抗体检测358例分析〔J〕.第四军医大学学报,2003,24(23):
2195
〔4〕GillJM,QuiselAM,RoccaPV,etal.Diagnosisofsystemiclupuserythematosus〔J〕.AmFamPhysician,2003,68:
2179-2186
〔5〕BolstadAI,WassmuthR,HagaHJ,etal.HLAmarkerxandclinicalcharacteristicsinCaucasianswit