还原糖脂肪和蛋白质的鉴定Word下载.docx

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学生回答：

略。

如果回答不全教师补充：

④染色（质）体+醋酸洋红（或龙胆紫）红色（或紫色）

⑤淀粉+碘液蓝色

⑥DNA+二苯胺试剂蓝色（水浴加热）

⑦大肠杆菌+伊红-美蓝产生紫色，略带金属光泽

今天，我们学习鉴定生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的基本方法。

（一）、还原糖的鉴定

1、还原糖的鉴定步骤:

选材：

苹果：

洗净、去皮、切块，取5g放如研钵中

制备组织样液研磨成浆：

加石英砂，加5ml水研磨

注入组织样液2ml过滤：

将玻璃漏斗插入试管中，漏斗上垫一层纱布

加斐林试剂：

2ml（由斐林试剂甲液和乙液充分混合而成，不能分别加入）

水浴加热：

煮沸2min

观察溶液颜色变化：

浅蓝色→棕色→砖红色。

结论：

还原糖与斐林试剂在加热煮沸的过程中生成砖红色沉淀

2、实验成功的要点：

①还原糖的鉴定实验:

选择含糖量较高、颜色为白色或近白色的植物组织，以苹果、梨为最好。

②斐林试剂要两液混合均匀且现配现用。

斐林试剂的配制过程示意：

斐林试剂甲液（0.1g/ml的NaOH溶液）

斐林试剂乙液（0.05g/ml的CuSO4溶液）

③在鉴定尿液中是否含有葡萄糖时还能用其他那些鉴定方法？

还可以用斑氏试剂产生砖红色沉淀；

及糖尿试纸据糖的由少到多产生浅蓝、浅绿、棕或深棕色。

（二）、脂肪的鉴定

1、脂肪的鉴定步骤:

取材：

花生种子（浸泡3-4h）,将子叶削成薄片

取理想薄片

在薄片上滴2-3滴苏丹Ⅲ染液

去浮色

制成临时装片

观察：

先在低倍镜下，找到材料的脂肪滴，然后，转为高倍镜观察。

细胞中的圆形脂肪小颗粒已经被染成橘黄色。

①.脂肪的鉴定实验:

选择富含脂肪的种子，以花生种子为最好（实验前浸泡3h～4h）。

②该试验成功的关键是获得只含有单层细胞理想薄片。

③滴苏丹Ⅲ染液染液染色2-3min，时间不宜过长，以防细胞的其他部分被染色。

（三）、蛋白质的鉴定

1、蛋白质的鉴定步骤：

卵清稀释液或黄豆（浸泡1-2d）豆浆滤液

蛋白质与双缩脲试剂发生紫色反应。

①蛋白质的鉴定实验:

可用浸泡1d～2d的黄豆种子（或用豆浆、或用鸡蛋蛋白稀释液）。

②双缩脲试剂的使用，一定要先加入A液（即0.1g/ml的NaOH溶液），再加入双缩脲试剂B液（即0.01g/ml的CuSO4溶液）。

③还可设计一只加底物的试管，不加双缩脲试剂，进行空白对照，说明颜色反应的引起是蛋白质的存在与双缩脲试剂发生反应，而不是空气的氧化引起。

教学小结：

1、斐林试剂和双缩脲试剂的比较

相同点：

①都由NaOH溶液和CuSO4溶液构成；

②斐林试剂甲液和双缩脲试剂A都为0.1g/mLNaOH溶液。

不同点：

①CuSO4溶液浓度不一样：

斐林试剂乙液为0.05g/mLCuSO4溶液，双缩脲试剂B为0.01g/mLCuSO4溶液。

②配制比例不一样。

③使用方法不一样：

斐林试剂是甲、乙液一起混合后再使用，双缩脲试剂则是先向待鉴定材料加入A试剂摇匀后，再加入试剂B。

④鉴定的对象不一样：

斐林试剂鉴定的是还原糖，双缩脲试剂鉴定的是蛋白质。

⑤反应本质及颜色反应不一样。

2、还原糖、脂肪、蛋白质鉴定之比较

还原糖的鉴定

脂肪的鉴定

蛋白质的鉴定

材料的选取：

富含糖，颜色为白色或近于白色

富含脂肪

富含蛋白质

材料的处理：

去皮、研磨

浸泡

——

试剂的使用：

甲液与乙液混合均匀后使用

染色和洗浮色不宜过长

先加A液再滴加B液

反应的本质：

新制的Cu（OH）2溶液与—CHO（还原糖的醛基）反应

碱性条件下Cu2+与肽键反应

3、苏丹Ⅲ染液与苏丹Ⅳ染液的比较

都是用来鉴定脂肪。

苏丹Ⅳ染液更易溶于脂肪，所以染色更深，同时要求染色时间更短

课后作业：

基础检测

1.可用于鉴定生物组织中还原糖的试剂是（）

A.斐林试剂B.双缩脲试剂C.苏丹Ⅲ染液D.苏丹Ⅳ染液

2.下列哪个实验用到显微镜（）

A.还原糖的鉴定B.蛋白质的鉴定

C.脂肪的鉴定D.淀粉的鉴定

3.下列哪组试剂在使用过程中，必须经过加热（）

A.斐林试剂鉴定还原糖的过程中

B.苏丹Ⅲ和苏丹Ⅳ染液在鉴定动物组织中的脂肪时

C.双缩脲试剂鉴定蛋白质时

D.碘化钾溶液鉴定淀粉时

4.用斐林试剂鉴定还原糖时，溶液颜色的变化过程为（）

A.无色一砖红色（沉淀）B.浅蓝色一砖红色（沉淀）

C.浅蓝色一蓝色一砖红色（沉淀）D.浅蓝色一棕色一砖红色（沉淀）

5、用苏丹Ⅲ染液对脂肪组织进行染色时，可用来冲洗浮色的药品是（）

A.吸水纸B.H２ＯC.50%的酒精D.无水酒精

6.用斐林试剂鉴定还原糖时，必须注意以下几点：

（1）被鉴定材料应选择含较高，颜色为的植物组织，以为最好。

（2）斐林试剂很不，必须时再配制并立即使用。

配制的方法是将4－5滴滴入2m1中。

（3）鉴定反应必须在中进行。

7.在鉴定花生种子细胞内含脂肪的实验过程中，应先将花生子叶薄片用染色，然后用洗去，再制成最后，镜检结果是.

8.鉴定豆浆中的蛋白质时，应先加入2m1，摇荡均匀后，再加入3－4滴，再摇荡均匀后，颜色变化是.

能力素质提高

9.下列物质中，能被苏丹IV染液染成红色的是（）

A.马铃薯块茎B.浸软的蓖麻种子

C.蛋清液D.苹果

10．下列可用于鉴定脂肪的实验材料是（）

A.苹果B.梨C.卵白D.花生种子

11.对斐林试剂和双缩脲试剂的配方，叙述不正确的是（）

A.都含有NaOH溶液和CuSO4溶液

B.斐林试剂的配制是将4－5滴0.05g/ml的CuSO4溶液滴入2ml0.1g／ml的NaOH溶液中即成

C.双缩脲试剂是将3－4滴0.01g/ml的CuSO4溶液滴入2ML0.1g/ml的NaOH溶

液中混合而成的

D.双缩脲试剂含有两种试剂：

质量浓度为0.1g/ml的NaOH溶液和质量浓度为0.O1g/ml的CuSO4溶液

12．鉴定蛋白质样品时加双缩脲试剂的正确做法是（）

A.先加A液，混合后再加B液摇匀观察

B.先加B液，混合后再加A液摇匀观察

C.A、B液混合后加入，摇匀后观察

D.A、B液同时加入样液，摇匀后观察

迁移与扩展

13．与硫酸铜溶液在碱性环境中反应，生成紫色物质的是（）

A.淀粉B.脂肪

C.蛋白质D.核酸

14．将面团包在纱布中在清水中搓洗，鉴定黏留在纱布上的黏稠物质和洗出的白浆用的试剂分别是（）

A.碘液、苏丹Ⅲ溶液B.双缩脲试剂、碘液

C.亚甲基蓝溶液、苏丹ⅢD.碘液、斐林试剂

15．下列实验中所用试剂错误的是（）

A．在观察植物细胞有丝分裂实验中，使用醋酸洋红溶液使染色体着色

B．在提取叶绿体色素实验中，使用丙酮提取色素

C．在DNA的粗提取与鉴定实验中，使用氯化钠溶液析出DNA

D．在蛋白质的鉴定实验中，使用苏丹Ⅲ染液鉴定蛋白质

练习答案：

1—5：

ACADC

6、

（1）糖，白色或近白色，苹果、梨

（2）稳定，使用，斐林试剂乙液，斐林试剂甲液

（3）加热条件

7、苏丹Ⅲ染液，50％酒精，浮色，临时装片，细胞中的圆形脂肪小颗粒已经被染成橘黄色

8、双缩脲试剂A，双缩脲试剂B，变成紫色

9—15：

BDCACBD。