化学发光免疫检测介绍PPT课件下载推荐.ppt

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将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面，使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行，用洗涤法将液相中的游离成分洗除。

常用的ELISA法有双抗体夹心法、间接法、捕获法和竞争法优点：

试剂成本低，操作简单缺点：

灵敏度低，适用于定性和半定量,免疫学检测方法介绍,金标记免疫（胶体金）分析技术：

简便、快速、不需要特殊仪器，适用于单人份操作，可用于较紧急和实验条件较差场合。

但是灵敏度、特异性较差，无法实现自动化，结果判断主观，受环境影响较大，成本高。

免疫荧光技术：

先将已知的抗原（抗体）标记上荧光素，再用这种荧光抗原（抗体）作为分子探针检查细胞或组织内的相应抗原（或抗体）。

在细胞或组织中形成的抗原抗体复合物上含有荧光素，利用荧光显微镜观察标本，从而确定抗原或抗体的性质、定位。

特异性好缺点：

灵敏度较差，结果判断主观，只能定性检测,免疫学检测方法介绍,时间分辨荧光分析法：

用3价稀土离子及螯合物为示踪物代替荧光物质、酶、同位素化学发光物质，标记抗体、抗原、激素、多肽、蛋白质、核酸及生物细胞，待反应体系发生后，用时间分辨检测仪测定反应产物中的荧光强度。

根据产物荧光强度和相对荧光强度的比值，判断反应体系中分析物的浓度，从而达到定量分析。

灵敏度高、特异性好、可实现自动化缺点：

成本较高,免疫学检测方法介绍,化学发光检测技术：

免疫反应系统和化学发光分析系统。

化学发光分析系统是利用化学发光物质经催化剂的催化和氧化剂的氧化,形成一个激发态的中间体,当这种激发态中间体回到稳定的基态时,同时发射出光子（hM）,利用发光信号测量仪器测量光量子产额。

免疫反应系统是将发光物质（在反应剂激发下生成激发态中间体）直接标记在抗原（化学发光免疫分析）或抗体（免疫化学发光分析）上,或酶作用于发光底物。

灵敏度高、特异性好、可进行自动化操作缺点：

成本较高,免疫学检测方法介绍,电化学发光免疫检测技术：

电化学发光法源于电化学法和化学发光法，而电化学发光免疫检测技术是电化学发光和免疫测定相结合的产物，是一种在电极表面由电化学引发的特异性化学发光反应优点：

成本较高,免疫学检测方法介绍唐氏筛查感染性疾病检测心血管及心肌标志物肿瘤标志物检测高血压辅助诊断甲状腺及甲状旁腺功能检测糖代谢肝纤维化检测骨代谢肾功能检测贫血类激素检测炎症自身抗体检测药物浓度优生优育,主要内容,甲型肝炎病毒（HAV）免疫检测HAV属于小RNA病毒科中的肝RNA病毒属HAV-IgM人感染HAV后，血液中首先出现anti-HAV-IgM,于发病后23周达峰值，12月后迅速下降，3个月后基本消失。

因此，anti-HAV-IgM是诊断甲型肝炎早期感染的指标。

HAV-IgGAnti-HAV-IgM一般在急性感染后312周出现，滴度缓慢上升，6个月后达到峰值，然后逐渐下降，但维持时间较长，可终生存在。

可作为既往感染或HAV感染恢复期的指标。

感染性疾病检测,乙肝五项标志物的检测1、HBsAg（HBV感染最先出现的指标，具有很强的免疫原性，可刺激机体产生相应抗体）临床意义：

（1）协助乙肝早期诊断及鉴别诊断，有助于乙肝预后估计

（2）筛选供血员及血制品，研究乙肝的流行病学注意事项：

（1）、HBsAg为诊断乙型肝炎的常用指标，其在患者血清中可持续数月、数月甚至终身

（2）、在窗口期，可为阴性；

阳性仅为感染指标，不能反映HBV复制增殖、传染性和病情预后,感染性疾病检测,乙肝五项标志物的检测2、HBsAb对HBsAg所产生的一种保护性抗体临床意义：

（1）乙型肝炎的恢复期；

（2）HBV既往感染;

（3）乙肝疫苗接种者,感染性疾病检测,乙肝五项标志物的检测3、HBeAg和HBeAb（HBeAg作为乙肝病毒复制增殖的间接指标）HBeAg阳性：

说明病毒复制活跃，传染性强，是乙肝患者具有传染性指标。

可见于急、慢性乙肝和乙肝病毒携带者，如持续阳性，表明乙肝转为慢性迁延性肝炎HBeAb在急性肝炎时，此抗体阳性表明乙肝复制缓解或终止，在慢性肝炎或肝硬化患者，此抗体阳性说明乙肝病毒DNA与肝细胞发生整合，提示病情较长，预后不佳。

感染性疾病检测,乙肝五项标志物的定量检测4、HBcAb阳性：

表示既往感染乙肝病毒，如高抗体水平持续存在提示乙肝病毒可能还在复制，乙肝病毒感染后，此抗体是最早出现的标志性抗体，持续时间长，并且几乎所有患者均产生抗体，所以此抗体是流行病学调查指标。

5、前S1抗原：

阳性常提示乙肝病毒复制活跃，具有较强的传染性，若长期存在患者血清中，提示转为慢性。

抗体：

阳性常提示提示急性乙肝预后良好，而且出现越早预后越好,感染性疾病检测,丙型肝炎（HCV）抗体检测阳性：

提示丙型肝炎病毒感染，可能患丙型肝炎注意事项：

丙肝病毒抗体分IgG和IgM，在丙肝急性感染期，IgM多为阳性，在慢性期或持续性感染期，IgG多为阳性。

所以IgM是判断急、慢性丙肝的重要标志。

在丙肝恢复期，患者血清中IgG抗体多为阳性，滴度不高。

感染性疾病检测,戊型肝炎病毒（HEV）检测是单链RNA病毒，肝炎病毒科，肝炎病毒属，急性感染死亡率高，需引起重视。

HEV-IgM可作为急性感染或近期感染的诊断指标HEV-IgG可作为既往感染或HAE感染恢复期的指标,感染性疾病检测,人类免疫缺陷病毒（HIV）检测人类免疫缺陷病毒是两条相同的RNA构成的RNA病毒抗体检测1、HIV筛查通过Elisa、化学发光、胶体金等方法检测gp41、pg36、gp120、P24来筛查HIV2、确诊试验通过免疫印迹的方法检测HIV特异性抗体。

3、抗原检测主要是通过检测P24抗原，缩短检测的窗口期，相对应抗体检测，抗原检测提前1周。

4、核酸检测通过检测HIV的RNA病毒缩短检测的窗口期，相对应抗原检测，核酸检测可提前1周,感染性疾病检测,梅毒螺旋体（TP）检测梅毒螺旋体病毒是DNA病毒，在患者血清中，能检测到病毒颗粒的时间很短，一般不采用核酸检测的方式筛查梅毒患者。

梅毒螺旋体特异性抗体（IgG和IgM）检测1、检测方法：

Elisa、化学发光、胶体金、PA2、临床意义：

只能说明现症感染或既往感染，不能作为梅毒疾病活动性与否的判断，也不能作为疗效检测的手段。

非梅毒螺旋体特异性抗体（反应素）检测1、检测方法：

RPR、TRUST2、临床意义：

可用于有临床症状的梅毒患者的辅助诊断检测和治疗效果检测。

感染性疾病检测,免疫学检测方法介绍唐氏筛查感染性疾病检测心血管及心肌标志物肿瘤标志物检测高血压辅助诊断甲状腺及甲状旁腺功能检测糖代谢肝纤维化检测骨代谢肾功能检测贫血类激素检测炎症自身抗体检测药物浓度优生优育,主要内容,肿瘤标志物的定义：

在肿瘤发生和发展过程中，由肿瘤细胞合成、分泌或由机体对肿瘤细胞反应而产生的一类物质。

存在：

一般存在于血液、尿液、其他体液、细胞和组织中检测方法：

生物化学、免疫学和分子生物学作用：

肿瘤的辅助诊断、鉴别诊断、治疗监测及疗效评估、预后判断、复发监测及高危人群随访等。

肿瘤标志物,甲胎蛋白（AFP）临床意义：

常见于原发性肝炎、大多数卵巢和睾丸胚胎性肿瘤或畸胎瘤，生殖腺外生殖细胞瘤，肝母细胞瘤，肝细胞瘤，转移性肝癌等，也可见于婴幼儿肝炎，肝硬化、急性肝炎、重症肝炎恢复等，但多为一过性升高，胎盘梗塞、剥离、羊水栓塞、高危妊娠、母儿血型不合、糖尿病孕妇等血清AFP也升高。

癌胚抗原（CEA）临床意义：

常见于结肠癌、直肠癌、胰腺癌、胃癌、肺癌、乳腺癌、转移性肝癌其他恶性肿瘤也有不同程度的升高。

一下良性疾病也有不同程度的升高，如直肠息肉、溃疡性结肠炎、胆囊炎、胰腺炎、肝外胆管阻塞、肺脓胸、长期吸烟者。

肿瘤标志物,糖类抗原19-9（CA19-9）临床意义：

常见于胰腺癌、胃癌、结直肠癌、胆囊癌、肝癌、卵巢癌、宫体腺瘤、淋巴瘤、食管癌、乳腺癌等恶性肿瘤；

在急性胰腺炎、胆汁淤积性胆管炎、胆囊炎、胆石症、急性肝炎及肝硬化等都有一定程度的升高。

检测值大小与肿瘤大小无关，不能作为胰腺癌的早期诊断指标。

糖类抗原125（CA125）临床意义：

主要见于浆液性卵巢癌、上皮细胞卵巢癌、子宫内膜癌。

其他非卵巢肿瘤如宫颈癌、乳腺癌、胰腺癌、肺癌、肝癌、结肠癌、良性卵巢瘤、子宫肌瘤等也可见CA125升高。

非恶性肿瘤如子宫内膜异位症、盆腔炎、卵巢囊肿、肝炎、肝硬化等也有不同程度的升高，但多为中轻度升高或一过性升高。

肿瘤标志物,糖类抗原15-3（CA15-3）临床意义：

主要见于乳腺癌。

也可见于卵巢癌、结肠癌、支气管癌、肺癌、胰腺癌、宫颈癌、子宫内膜癌、原发性肝癌等；

少数肝硬化患者也有轻度升高。

糖类抗原242（CA242）临床意义：

主要见于胰腺癌和直肠癌，也可见于胆管癌、肺腺癌、食管癌、乳腺癌、肺小细胞癌等,肿瘤标志物,糖类抗原72-4（CA72-4）临床意义：

主要见于胃癌，也可见于卵巢癌、结肠癌、胰腺癌、非小细胞肺癌、结肠癌、胆道系统肿瘤等糖类抗原50（CA50）临床意义：

主要见于前列腺癌、子宫癌、肝癌、肺癌、胃癌、结肠癌、直肠癌、胰腺癌、胆囊癌、肾癌、卵巢癌、乳腺癌、膀胱癌、淋巴瘤黑色素瘤，也可见于肺炎、肾炎、胰腺炎、结肠炎、溃疡性疾病、自身免疫性疾病等。

肿瘤标志物,组织多肽抗原（TPA）临床意义：

主要见于恶性肿瘤；

也可见于急性肝炎、胰腺炎、肝炎等，但增高程度较轻。

前列腺特异性抗原（PSA）临床意义：

主要见于前列腺癌，是前列腺癌首选和最有应用价值的肿瘤标志物。

前列腺增生、前列腺炎、良性前列腺瘤、肾脏和泌尿生殖系统疾病时，PSA可轻度升高,肿瘤标志物,游离前列腺特异抗原（F-PSA）与F-PSA/PSA比值临床意义：

F-PSA见于前列腺增生和前列腺癌，但前列腺癌增高程度不如前列腺增生明显。

F-PSA/PSA降低见于前列腺癌和前列腺增生，但前列腺癌的降低程度明显高于前列腺增生前列腺酸性磷酸酶（PAP）临床意义：

见于前列腺癌、前列腺增生，但前列腺癌增高更明显,肿瘤标志物,唾液酸（SA）临床意义：

见于前列腺癌、乳腺癌、卵巢癌、肺癌、各类淋巴瘤、上皮细胞癌等铁蛋白（SF）临床意义：

SF升高多见于再生障碍性贫血，溶血性贫血，珠蛋白生成障碍性贫血，急慢性白血病，恶性淋巴瘤，原发性肝癌，肾功能不全及炎症，心肌梗死早期等。

胃癌、直肠癌、食管癌、鼻咽癌、乳腺癌等有转移时，SF升高显著，因此动态观察SE对判断肿瘤有无转移、病程和预后有一定的临床意义。

肿瘤标志物,神经元特异性烯醇化酶（NSE）临床意义：

主要见于小细胞性肺癌、神经母细胞瘤，并可用于病情监测、疗效观察及预后非小细胞肺癌抗原（CYFRA21-1）临床意义：

主要见于肺癌；

也可见于头颈部癌、宫颈癌、膀胱癌、乳腺癌、消化道肿瘤等,肿瘤标志物,鳞状上皮细胞癌相关抗原（SCCA）临床意义：

主要见于宫颈癌、肺鳞状细胞癌、食管癌、皮肤癌等。

肝癌、肝硬化、肺炎、肾功能衰竭、结核等疾病，SCCA也可轻度升高,肿瘤标志物,血清人绒毛促性腺激素（-HCG）临床意义：

见于妊娠、绒毛膜上皮细胞癌、葡萄胎、畸胎瘤、睾丸非