实验七土壤无机磷的测定_精品文档Word文件下载.doc
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2)提取液中正磷酸盐的测定:
在酸性条件下,试液中的P(正磷酸盐)与钼酸形成配合物-磷钼杂多酸(又叫磷钼酸杂聚配合物)。
H3PO4+12H2MoO4=H3P(Mo3O10)4+12H2O
P多时呈黄色,少时无色在一定酸度下,加入还原剂后,杂多酸中的Mo被还原,产生特殊兰色(钼兰),其中一部分Mo6+被还原成Mo5+或Mo3+,或Mo3+、Mo5+都有。
在钼兰的吸收光谱曲线中有两个吸收峰(660nm或880nm)。
测定时可以根据分光光度计的性能选用。
我国国标采用700nm波长。
三、实验仪器与药品
1仪器:
多用调速振荡器,离心机,分光光度计。
2试剂:
1)1mol•L-1HCl溶液:
准确移取83.3ml浓HCl溶于定容至1L;
2)(1+1)硫酸溶液
3)磷标准贮备液(50.0μg.mL-1):
称取0.2197±
0.001g于110℃干燥2h在干燥器中放冷的磷酸二氢钾(KH2PO4),用水溶解后转移至1000mL容量瓶中,加入大约800mL水、加5mL1+1硫酸用水稀释至标线并混匀。
1.00mL此标准溶液含50.0μg磷。
4)抗坏血酸(10%):
溶解10g抗坏血酸(C6H8O6)于水中,并稀释至100mL。
此溶液贮于棕色的试剂瓶中,在冷处可稳定几周。
如不变色可长时间使用。
5)钼酸盐溶液:
溶解13g钼酸铵[(NH4)6Mo7O24•4H2O]于100mL水中。
溶解0.35g酒石酸锑钾[KSbC4H4O7•½
H2O]于100mL水中。
在不断搅拌下把钼酸铵溶液徐徐加到300mL硫酸(1+1)中,加酒石酸锑钾溶液并且混合均匀。
此溶液贮存于棕色试剂瓶中,在冷处可保存二个月。
6)过100目筛土样0.2g。
四、实验步骤
1)土壤干样前处理:
称取0.2g土壤样品于50ml离心管中,加入1mol•L-1HCl溶液20mL,塞紧塞子。
在多用调速振荡器上振荡30mim,取出在离心机上以3000r/min的转速离心10mim,得到上清液。
如果不能在24h内进行,将上清液储存在冰箱中备用。
2)标准曲线的绘制:
A磷标准使用溶液的配制(含磷2.0μg/mL):
将10.0mL的磷标准溶液(磷标准贮备溶液:
含磷50.0μg/mL)转移至250mL容量瓶中,用水稀释至标线并混匀。
B取数支25mI具塞比色管,分别加入磷酸盐标准使用液0、0.5(1μg)、1.00、3.00、5.00、10.0、15.0ml,加水至25mL
C显色:
向比色管中加入0.5mL10%抗坏血酸溶液,混匀。
30s后加1mL钼酸盐溶液充分份昆匀,放置l5min。
D测量:
用10mm比色皿,于700nm波长处,以零浓度溶液为参比,测量吸光度,以其测定的吸光值为纵坐标,相应磷浓度为横坐标,绘制标准曲线。
磷标准溶液吸光度值
磷浓度(mg/L)
0.04
0.08
0.24
0.4
0.8
1.2
吸光度
0.008
0.016
0.056
0.097
0.194
0.294
3)样品测定
取上清液2ml(使含磷量不超过30μg)加入25mL比色管中,用水稀释至标线。
以下按绘制校准曲线的步骤进行显色和测量。
减去空白试验的吸光度,并从校准曲线上查出含磷量。
五、实验结果
土壤中无机磷含量(g·
kg-1)=C×
0.025×
(20/V)/m式中:
C——上清液正磷酸盐浓度;
V——取上清液体积(ml);
m——土壤质量(g)
结果记录表
样品编号
平行测定次数
1
2
3
空白
称样重(g)
无机磷含量(g/kg)
平均值(g/kg)