《基因工程的原理和技术》同步练习2文档格式.docx
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C．限制性核酸内切酶
D．不同的限制性核酸内切酶和DNA连接酶
4．将ada（腺苷酸脱氨酶基因）通过质粒pET28b导入大肠杆菌并成功表达腺苷酸脱氨酶。
下列叙述错误的是（ ）
A．每个大肠杆菌细胞至少含一个重组质粒
B．每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酸识别位点
C．每个限制性核酸内切酶识别位点至少插入一个ada
D．每个插入的ada至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子
知识点三 筛选含有目的基因的受体细胞和目的基因的表达
5．在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中，下列操作错误的是（ ）
A．用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸
B．用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体
C．将重组DNA分子导入烟草原生质体
D．用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞
知识点四 基因工程的全过程
6．回答有关基因工程的问题：
（1）构建基因工程表达载体时，用不同类型的限制酶切割DNA后，可能产生粘性末端，也可能产生________末端。
若要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接，则应选择能使二者产生______（相同、不同）粘性末端的限制酶。
（2）利用大肠杆菌生产人胰岛素时，构建的重组DNA含有人胰岛素基因及其启动子等，其中启动子的作用是
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
在用表达载体转化大肠杆菌时，常用________处理大肠杆菌，以利于表达载体进入；
为了检测胰岛素基因是否转录出了mRNA，可用标记的胰岛素基因片段作探针与mRNA杂交，该杂交技术称为__________________。
为了检测胰岛素基因转录的mRNA是否翻译成________，常用抗原—抗体杂交技术。
（3）如果要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的________中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的________________上。
基础落实
1．人们常选用的细菌质粒分子往往带有一个抗菌素抗性基因，该抗性基因的主要作用是（ ）
A．提高受体细胞在自然环境中的耐药性
B．对目的基因是否导入进行检测
C．增加质粒分子的分子量
D．便于与外源基因连接
2．下列获取目的基因的方法中需要模板链的是（ ）
①从基因文库中获取目的基因 ②利用PCR技术扩增目的基因 ③反转录法 ④通过DNA合成仪利用化学方法人工合成目的基因
A．①②③④B．①②③C．②③④D．②③
3．正确表示基因操作“五步曲”的是（ ）
A．目的基因的获得→重组DNA导入受体细胞→重组DNA的形成→筛选含有目的基因的受体细胞→目的基因的表达
B．目的基因的表达→目的基因的获得→重组DNA的形成→重组DNA导入受体细胞→筛选含有目的基因的受体细胞
C．目的基因的获得→重组DNA的形成→重组DNA导入受体细胞→筛选含有目的基因的受体细胞→目的基因的表达
D．重组DNA的形成→目的基因的获得→重组DNA导入受体细胞→筛选含有目的基因的受体细胞→目的基因的表达
4．下列有关基因工程技术的正确叙述是（ ）
A．重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、连接酶、载体
B．为育成抗除草剂的作物新品种，导入抗除草剂基因时只能以受精卵为受体细胞
C．选用细菌作为重组质粒的受体细胞是因为细菌繁殖快
D．只要目的基因进入了受体细胞就能成功表达
5．用基因工程技术可使大肠杆菌合成人的蛋白质。
下列叙述不正确的是（ ）
A．常用相同的限制性核酸内切酶处理目的基因和质粒
B．DNA连接酶和RNA聚合酶是构建重组质粒必需的工具酶
C．可用含抗生素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒
D．导入大肠杆菌的目的基因不一定能成功表达
6．利用外源基因在受体细胞中表达，可生产人类所需要的产品。
下列能说明目的基因完成了在受体细胞中表达的是（ ）
A．棉花二倍体细胞中检测到细菌的抗虫基因
B．大肠杆菌中检测到人胰岛素基因及mRNA
C．山羊乳腺细胞中检测到人生长素DNA序列
D．酵母菌细胞中提取到人干扰素蛋白
能力提升
7．质粒是基因工程中最常用的载体，它存在于许多细菌体内，某细菌质粒上的标记基因如图所示，通过标记基因可以推知外源基因（目的基因）是否转移成功。
外源基因插入的位置不同，细菌在培养基上的生长情况也不同，如图所示外源基因在质粒中可插入的位置有a、b、c点。
某同学根据实验现象对其插入的位点进行分析，其中分析正确的是（ ）
实验现象
实验推论
在含青霉素培养
基上的生长情况
在含四环素培养
目的基因
插入的位置
A
能生长
a
B
不能生长
b
C
c
D
8.科学家通过基因工程的方法，能使马铃薯块茎含有人奶蛋白。
以下有关该基因工程的叙述，错误的是（ ）
A．采用反转录的方法可得到目的基因
B．基因的某些非编码区对于目的基因在块茎中的表达是不可缺少的
C．马铃薯的叶肉细胞可作为受体细胞
D．用不同种限制酶分别处理质粒和含目的基因的DNA，可产生相同的粘性末端而形成重组DNA分子
9．如图表示基因工程中获取水稻某目的基因的不同方法。
相关叙述中正确的是（ ）
A．这三种方法都用到酶，都是在体外进行
B．①②③碱基对的排列顺序均相同
C．①②③片段均不含内含子，但含非编码区
D．方法a不遵循中心法则
10．人们试图利用基因工程的方法，用乙种生物生产甲种生物的一种蛋白质。
生产流程是：
甲生物的蛋白质的mRNA
与质粒DNA重组
导入乙细胞
获得甲生物的蛋白质，下列说法正确的是（ ）
A．①过程需要的酶是反转录酶，原料是A、U、G、C
B．②要用限制酶切断质粒DNA，再用DNA连接酶将目的基因与质粒连接在一起
C．如果受体细胞是细菌，可以选用枯草杆菌、炭疽杆菌等
D．④过程中用的原料不含有A、U、G、C
11.以重组DNA技术为核心的基因工程正在改变着人类的生活。
请回答下列问题：
（1）获得目的基因的方法通常包括__________________和________________。
（2）切割和连接DNA分子所使用的酶分别是________________和____________。
（3）运送目的基因进入受体细胞的载体一般选用病毒或________，后者的形状成_______。
（4）由于重组DNA分子成功导入受体细胞的频率________，所以在转化后通常需要进行_______操作。
（5）将人胰岛素基因分别导入大肠杆菌与酵母菌，从两者中生产的胰岛素在功能和________序列上是相同的。
综合拓展
12．回答下列有关基因工程的问题：
（1）基因工程中使用的限制酶，其特点是
下图四种质粒含有E1和E2两种限制酶的识别，Apr表示抗青霉素的抗性基因，Tcr表示抗四环素的抗性基因。
（2）将两端用E1切开的Tcr基因与用E1切开的质粒X－1混合连接，连接后获得的质粒类型有________________。
（可多选）
A．X－1B．X－2C．X－3D．X－4
（3）若将上图所示X－1、X－2、X－3、X－4四种质粒导入大肠杆菌，然后分别涂布在含有青霉素或四环素的两种培养基上。
在这两种培养基上均不能生长的大肠杆菌细胞类型有________________、________________。
（4）如果X－1用E1酶切，产生850对碱基和3550对碱基两种片段：
那么质粒X－2（Tcr基因的长度为1200对碱基）用E2酶切后的片段长度为________对碱基。
（5）若将外源的Tcr基因两端用E2切开，再与用E2切开的X－1混合链接，并导入大肠杆菌细胞，结果显示，含X－4的细胞数与含X－1的细胞数之比为1∶3，增大DNA连接酶用量能否提高上述比值？
________。
原因是
_______________________________________________________________________。
参考答案：
知识清单
一、1.目的基因 宿主细胞 2.工具酶 目的基因 载体 宿主细胞
二、1.
（1）需要的基因
（2）①化学方法 聚合酶链式反应 ②基因文库 2.相同 粘性末端 DNA连接酶 重组DNA分子 3.
（1）大肠杆菌 酵母菌
（2）大肠杆菌 氯化钙 通透性 4.
（1）重组DNA分子
（2）四环素抗性基因 四环素 目的基因 扩增 5.宿主细胞 功能物质
对点训练
1．D [目的基因应该是从供体细胞中提取，导入受体细胞中，而不能从受体细胞中提取，所以③不是获取目的基因的方法；
利用DNA转录出来的是RNA，但目的基因是DNA，所以不能用DNA转录来获取目的基因，⑤不正确。
]
思路导引 思考获取目的基因的方法→对照选项逐一排查判断→得出正确答案。
知识链接 获得目的基因的方法
（1）从基因文库中获得
（2）人工合成目的基因
①已知核苷酸序列的较小基因，直接利用DNA合成仪，用化学方法合成，不需要模板。
②反转录法：
利用已知的mRNA为模板，反转录获取目的基因。
（3）利用PCR技术扩增目的基因
①原理：
利用DNA双链复制的原理，在体外将基因的核苷酸序列不断地加以复制，使其数量成指数方式增加。
②过程：
如图所示
a．从上图中可以看出利用设计的特异性引物对基因文库进行PCR扩增，提取出了相应的目的基因，而不是对基因文库进行简单、全面地复制。
b．由于DNA聚合酶不能从头合成DNA，只能从3′端延伸DNA链，故目的基因的扩增需要引物。
引物是一小段单链DNA或RNA。
加入引物后，DNA聚合酶能从引物的3′端开始延伸DNA链。
2．B [PCR技术的条件有：
模板（即已知序列的DNA片段）、原料（即四种脱氧核苷酸）、酶（耐高温的DNA聚合酶）和ATP，至于引物，是根据模板合成的一小段单链DNA或RNA。
思路导引 了解PCR为体外复制DNA片段的核酸技术→对比与DNA体内复制的异同→确定P
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