黑 龙 江 中 医 药 大 学黑龙江中医药大学Word格式.docx

黑 龙 江 中 医 药 大 学黑龙江中医药大学Word格式.docx

《黑 龙 江 中 医 药 大 学黑龙江中医药大学Word格式.docx》由会员分享，可在线阅读，更多相关《黑 龙 江 中 医 药 大 学黑龙江中医药大学Word格式.docx（14页珍藏版）》请在冰豆网上搜索。

板书设计

【实验目的】

2．掌握利用苦参总碱中各生物碱溶解性差异分离氧化苦参碱的方法。

3．了解和熟练应用渗漉提取法及索式提取器连续回流提取。

4．掌握生物碱的常规定性检识方法。

【实验原理】

苦参生物碱有一定碱性，可与酸结合成盐，因此用酸水提取后，总生物碱呈阳离子状态而被阳离子交换树脂所交换，再用氨水碱化后生物碱游离，以有机溶剂回流提取。

【提取工艺】

苦参粗粉100g

以0.1%盐酸100ml湿润半小时装入渗漉中，

以0.1%盐酸1100ml渗漉，速度1~2d/s。

渗漉液

2.讲授（时间）（20－30min）

讲课内容

（1）离子交换树脂型号、适应类型及应用

（2）离子交换树脂法提取苦参总碱的原理

（3）苦参总碱的溶解性

（4）生物碱的定性检识方法

（5）索式提取器的使用

掌握要点

（1）生物碱的定性检识方法

（2）离子交换树脂法的应用

举例

离子交换树脂法的应用

提问

苦参碱与氧化苦参碱的碱性和溶解性

生物碱的定性检识方法

3.小结（时间）5－8min

总结本实验的基本情况，提出注意事项和新的要求。

4.布置作业

（1）试验报告一周内交齐

（2）预习第二个试验

通过装湿重60g（60ml）树脂的阳离子交换树脂柱交换，交换速度1~2d/s。

注意测定不同交换时间PH值的变化。

（每隔15分钟）

吸碱树脂

将树脂倒入烧杯中，以蒸馏水洗至洗液无色抽滤后室温晾干。

将树脂置烧杯中，加入浓氨水，拌匀（加氨水量以手握成团但不粘手为度），密闭放置。

碱化树脂

放置20分钟，装入滤纸袋置索氏提取器中以氯仿连续回流提取6~10小时，回收氯仿至尽，蒸去水分。

残留物

以丙酮回流残留物，抽滤，溶液回收部分丙

酮，加盖放置，结晶，抽滤，干燥。

粗品总碱结晶

【精制工艺】

粗品总碱

以少量丙酮（粗品量的30~40倍）回流溶解，白色总碱全部溶解后过滤。

滤液

回收少量丙酮后加盖放置，结晶后抽滤，干燥。

精品总碱（以氧化苦参碱为主）

【色谱鉴定】

色谱板：

自制硅胶-CMC硬板

样品：

精品总碱氯仿液

对照品；

氧化苦参碱的氯仿溶液

显色剂：

改良碘化铋钾试剂

展开剂：

氯仿：

甲醇：

氨水（15：

4：

0.5）

结果：

样品斑点与对照品斑点比较位置

并计算Rf值

【思考题】

（1）以反应式表示出离子交换树脂提取生物碱的原理。

（2）苦参碱渗漉中若氢离子浓度过高，通过树脂时对交换有何影响？

课题名称实验二槐米中芦丁的提取、分离、鉴定及槲皮素的制备

掌握黄酮成分的主要性质、黄酮苷及苷元结构研究的一般程序和方法。

通过芦丁的结构检识，了解苷类化合物结构研究的一般程序和方法。

根据溶解性掌握提取、分离芦丁的方法。

芦丁为黄酮苷，利用其可溶于热水、难溶于冷水的性质进行提取。

又利用其在冷、热醇中的溶解度差进行重结晶法分离精制。

芦丁可被稀酸水解，生成的苷元及糖可通过定性反应及色谱进行鉴别。

实验重点芦丁的结构检识和提取分离方法

教具薄层色谱装置

试验进程

1.导言（时间）3－5min

（1）复习芦丁和槲皮素的结构和性质

（2）复习芦丁的2种主要提取分离方法

【实验目的】掌握黄酮成分的主要性质、黄酮苷及苷元结构研究的一般程序和方法。

又利用其在冷、热醇中的溶解度差进行重结

晶法分离精制。

【实验内容】

1、提取：

槐花米20g（稍研磨）

以500ml的烧杯直火烧400ml蒸馏水，沸后将槐花米投入，继续加热保持微沸30分钟，四层纱布过滤。

药渣再加水250ml，煮沸20分钟，同上过滤，合并两次滤液。

药渣滤液

放置4~5小时，抽滤至干

滤液沉淀

2.讲授（时间）20－25min

（1）芦丁的提取方法

（2）芦丁的精制方法

（3）芦丁的水解方法

（4）芦丁、槲皮素的鉴定

（1）芦丁的提取、精制方法

（2）芦丁的检识方法

黄酮类化合物的主要性质

100℃以下干燥

粗品芦丁

2、精制：

粗品芦丁

加甲醇15~20ml，水浴加热（空气冷凝）溶解，至无黄色物，趁热过滤。

沉淀滤液

放置，待结晶析出，抽滤至干

沉淀

干燥

精品芦丁

3、水解：

精品芦丁0.5g

放入150ml圆底烧瓶中，加入2%稀硫酸50ml,空气冷凝直火加热（电炉上放石棉网）40分钟，趁热过滤。

水洗至中性

取10ml，加氢氧化钡约

抽滤、干燥。

1g调PH7.5，过滤。

槲皮素

沉淀滤液

水浴浓缩至1~2ml

浓缩液（备检查糖用）

4、芦丁、槲皮素的鉴定

（1）试管定性反应：

①HCI-Mg粉反应：

取样品的乙醇溶液1ml加少许镁粉，再加浓HCI1~2滴，观察颜色。

②FeCl3反应：

取样品的乙醇溶液1ml加1%的FeCl3乙醇溶液2~3滴，观察颜色。

③中性醋酸铅反应：

取样品的乙醇溶液1ml加5%的中性醋酸铅溶液1~2滴，观察现象。

④α-萘酚、浓H2SO4反应：

取样品的乙醇溶液1ml加α-萘酚试液1~2滴后振摇，然后沿管壁加适量浓H2SO4，观察两界面处的颜色。

（2）AlCl3纸斑反应;

取样品的乙醇溶液，在滤纸上各滴一个点，干燥后置紫外灯下观察荧光。

然后在原斑点上喷AlCl3，干燥后重新置紫外光灯下观察荧光。

（1）试验报告一周内交齐。

（2）思考题

据黄酮类化合物的性质，再设计一种提取芦丁的方法。

苷类水解有几种方法？

怎样证明芦丁分子中只含有一分子葡萄糖和一分子鼠李糖？

如何确定芦丁结构中的糖连在槲皮素的3-OH上？

5、糖的检识（径向纸色谱）

正丁醇：

冰醋酸：

水（4：

1：

5）上层

邻苯二甲酸-苯胺试剂（95℃烘干）

水解浓缩液

对照品：

葡萄糖、鼠李糖的水溶液

展开方式：

径向

对照样品斑点及对照品斑点位置并计算Rf值。

6、芦丁及槲皮素紫外光谱测定

（1）芦丁溶液的配制

精密称取芦丁纯品1g，用无水甲醇溶解，并稀释至10ml，从中吸取5ml，置50ml容量瓶中，用甲醇稀释至刻度。

（2）槲皮素溶液的配制

精密称取槲皮素纯品1g，用无水甲醇溶解，并稀释至10ml，从中吸取5ml，置50ml容量瓶中，用甲醇稀释至刻度。

（3）芦丁及槲皮素紫外光谱测定

甲醇光谱：

取样品置石英杯中，加入甲醇钠溶液3滴后，立即测定，放置5分钟后再测定一次。

甲醇钠光谱：

取样品置石英杯中，200－500nm进行扫描，重复一次，观察紫外光谱。

三氯化铝光谱：

在盛有样品液的石英杯中，加入三氯化铝6滴，放置1分钟后进行测定。

测定后加入3滴盐酸溶液（盐酸：

水＝1：

1）再进行测定。

乙酸钠光谱：

取样品液约3ml，加入过量的无水乙酸钠固体，摇匀（杯底剩约2ml的乙酸钠），加入乙酸钠后2分钟内进行测定，5分钟到10分钟再测定一次。

乙酸钠－硼酸光谱：

在测定用的盛有样品液和乙酸钠00溶液的石英杯中加入足够量的硼酸使成饱和溶液进行测定。

课题

第六章黄酮类化合物

第六节结构研究

教学目的

1、掌握1H-NMR在黄酮类化合物结构研究中的应用

2、掌握13C-NMR在黄酮类化合物结构研究中的应用

教学重点

1、1H-NMR光谱特征

2、13C-NMR光谱特征

教学难点

教学方法

讲授

教具

多媒体幻灯片

教学进程

1.导言（时间）：

3～5分钟

1H-NMR谱是黄酮类化合物结构研究的一种重要方法，具有简便、快速而且可获得大量信息等优点。

13C-NMR也以广泛应用于黄酮类化合物结构研究，下面我们就这两种方法逐一进行。

复习提问

1、何谓诊断试剂？

常用黄酮类化合物的诊断试剂有哪几种？

2、如何利用UV光谱区别黄酮和黄酮醇类化合物？

板书设计

二、1H-NMR的应用

（一）C环质子

（二）A环质子

1、5、7－二OH黄酮类化合物

2、7－OH黄酮类化合物

（三）B环质子

1、4＇－含氧取代

2、3＇、4＇－二氧取代

2.讲授（时间）：

80~85分钟

课题内容

掌握要点

1、1H-NMR在黄酮类化合物结构研究中的应用

2、13C-NMR在黄酮类化合物结构研究中的应用

举例

各光谱数据。

提问

综合解析课堂练习

3.小结（时间）：

今天的内容是重点，又是难点，大家可能觉得有些吃力，不过没关系，多做一些练习题效果就会好多了。

老师也尽量慢点讲，让大家慢慢理解、吸收。

4.布置作业

1、习题集本章相应练习题。

3．3＇、4＇、5＇－三氧取代

（四）糖基上质子

1、单糖苷类

2、双糖苷类

三、13C-NMR的应用

1、基本母核的碳信号

2、取代后的模式

*课堂练习

第七节天然药物实例

1、掌握黄酮类化合物MS的一般裂解规律

2、掌握含黄酮类化合物的天然药物实例（化学成分、性质及提取分离）

1、黄酮类化合物MS的裂解规律

2、天然药物实例（槐米、黄芩）

MS裂解规律。

讲授（讨论）

多媒体幻灯片

MS在黄酮类化合物的结构研究中作用很大，近来随着FD-MS和FAB-MS及ESI-MS等软电离质谱技术的应用，使得质谱在黄酮类化合物的结构研究中的应用更加广泛。

1、黄酮、黄酮醇类的C环质子有何区别（1H-NMR）

2、黄酮、