高中生物实验大全详连平附城中学学年高三生物实验强化记忆概要Word下载.docx
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检测DNA,呈绿色
13、吡罗红:
检测RNA,呈红色
14、伊红美蓝大肠杆菌深紫色
15、斐林试剂(甲液0.1g/mLNaOH、乙液0.05g/mLCuSO4)/班氏试剂:
鉴定可溶性还原性糖(沸水浴,砖红色沉淀)
16、双缩脲试剂:
用于蛋白质的鉴定(紫色)
17、苏丹Ⅲ染液(橘黄色)和苏丹Ⅳ染液(红色):
用于脂肪鉴定
18、碘液:
用于鉴定淀粉(变蓝色)
19、龙胆紫溶液或醋酸洋红:
碱性染料,用于染色体染色时,前者呈深蓝色,后者呈红色
20、纤维素刚果红红色
21、健那绿:
检测线粒体,专一性让线粒体染色呈蓝绿色
22、重铬酸钾溶液:
检测酒精,呈灰绿色
23、溴麝香草酚蓝水溶液:
检测CO2,由蓝变绿再变黄
25、伊红美蓝:
鉴定有无大肠杆菌的存在,呈黑色
27、pH试纸:
检验物质的酸碱性,如乳酸
28、卡诺氏固定液:
用于细胞有丝分裂根尖的固定
29、解离液(15%盐酸和95%酒精按1:
1的比例配成):
有丝分裂中根尖的分离与固定
30、层析液:
用于叶绿素的分离
31、20%新鲜肝脏研磨液:
含有H2O2酶,可促进H2O2分解产生O2
32、无土营养液:
用于植物无土栽培
33、柠檬酸钠:
血液抗凝剂
36、滤纸:
过滤或纸层析
37、纱布、尼龙布:
过滤,遮光
38、云母片:
阻止生长素传递
39、微电流计:
测量神经元受刺激时,神经元细胞内或细胞间的兴奋传递情况
(1)增加水中氧气——泵入空气;
吹气;
放入绿色植物
(2)减少水中氧气——容器密封;
油膜覆盖;
用凉开水
(3)除去容器中CO2——NaOH溶液
(4)除去叶中原有淀粉——置于黑暗环境中
(5)除去叶中叶绿素——酒精水浴加热
(6)除去光合作用对呼吸作用的干扰——给植株遮光
(7)得到单色光——棱镜色散;
彩色玻璃(薄膜)滤光
(8)获得单一的细胞器——细胞匀浆超速离心
(9)动物细胞破裂――蒸馏水渗透胀破;
搅拌;
离心
(10)杀灭细菌――煮沸;
烘烤;
酒精;
高浓度NaCl;
含青霉素培养基
(11)控制容器的温度——用保温瓶或绒棉来隔热,避免生物所产生的热会散失至四周。
或用水浴加热、恒温箱保温。
实验结果的显示方法——实验现象的观测指标
⑴光合作用:
O2释放量或CO2吸收量或有机物生成量。
⑵呼吸作用:
O2吸收量或CO2释放量或有机物消耗量
例:
水生植物可依气泡的产生量或产生速率;
离体叶片若事先沉入水底可依单位时间内上浮的叶片数目;
植物体上的叶片可依指示剂(如碘液)处理后叶片颜色深浅
⑶原子或分子转移途径:
同位素标记法或元素示踪法
⑷细胞液浓度大小或植物细胞活性:
质壁分离与复原
⑸溶液浓度的大小:
U型管+半透膜
⑹甲状腺激素作用:
动物耗氧量、发育速度等
⑺生长激素作用:
生长速度(体重、体长变化)
⑻胰岛素作用:
动物活动状态(是否出现低血糖症状——昏迷)
⑼胰高血糖素作用:
尿糖的检测(在尿液中加班氏试剂进行沸水浴,看是否出现砖红色沉淀)
⑽菌量的多少:
菌落数、亚甲基蓝褪色程度
⑾生长素作用及浓度高低的显示:
可通过去除胚芽鞘后补充生长素后的胚芽生长情况来判断(弯曲、高度)
⑿淀粉:
碘液(变蓝色)放射性元素标记法的应用
①一般常用的放射性元素有:
15N、3H、2H、32P、14C、18O、35S
②用放射性因素35S、32P分别标记噬菌体,可验证
噬菌体侵染细菌的过程,DNA分子能保持连续性,从而说明DNA是生物的遗传物质。
③用放射性元素15N标记研究DNA的复制过程,可说明DNA具有半保留复制的特点
④用4H标记氨基酸,可以研究氨基酸在细胞内合成分泌蛋白所经途径:
氨基酸→核糖体→内质网→高
尔基体→经细胞膜分泌到细胞外
⑤用放射性元素18O研究光合作用释放的氧气来H2O
H218O+CO2→18O2H2O+C18O2→O2
⑥用放射性元素14C研究光合作用中碳的同化途径
14CO2→C3→C6
⑦用放射性元素32P标记胸腺嘧啶可研究DNA的合成去向及细胞分裂的情况
⑧用放射性元素32P标记尿嘧啶可研究RNA的合成去向及蛋白质的合成情况
实验一:
使用高倍显微镜观察几种细胞
一、使用高倍显微镜观察细胞
1.显微镜的重要结构
2.使用方法
低倍镜下找到清晰物像→将要观察的物像移到视野中央→转动转换器,换上高倍镜→调节细准焦螺旋,直到物像清晰。
3.注意事项
(1)调节粗准焦螺旋使镜筒下降时,双眼要注视物镜与玻片标本之间的距离,到快接近时(距离约为0.5cm)停止下降。
(2)必须先用低倍物镜观察,找到要观察的物像,移到视野中央,然后转动转换器换用高倍物镜
(3)换用高倍镜观察时,可将光圈由小变大,将反光镜由平面镜转换为凹面镜以增加视野的亮度,同时慢慢调节细准焦螺旋,直至找到清晰的物像,使用高倍镜时千万不能调节粗准焦
螺旋。
4.显微镜的成像特点:
显微镜下所成的像是倒立的放大的虚像。
(1)倒立是指上下、左右均是颠倒的,相当于将观察物水平旋转了180度,所以要把左上方的图像移至视野中央,应该把装片向左上方移动,即“偏哪移哪”。
(2)视野的大小与放大倍数成反比,即放大的倍数越大视野越小,看到的标本范围就越小。
(3)目镜的放大倍数和镜头长度成反比,物镜的放大倍数和镜头的长度成正比。
5.显微镜的放大倍数
(1)显微镜的放大倍数=物镜倍数×
目镜倍数。
放大倍数指的是物体的宽度或长度的放大倍数,而不是面积或体积的放大倍数。
(2)放大倍数的变化与视野中细胞数量的变化呈负相关。
①在放大倍数10×
10的视野中能看到单行排列的细胞是64个,转换到放大倍数10×
40的视野中,就可以看到单行排列的细胞应为64÷
4=16个。
②在放大倍数10×
10的视野中能看到64个细胞充满整个视野,转换到放大倍数10×
40的视野中,则可以看到的细胞应为64÷
42=4个。
6.低倍物镜观察与高倍物镜观察(清晰时)的比较
低倍镜时
高倍镜时
镜头与装片的距离
远
近
所看到细胞的数目
多
少
所看到细胞的大小
小
大
视野的明暗
明
暗
视野的广度
宽广
狭窄
实验二:
检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
二、实验原理:
1、生物组织中普遍存在的可溶性糖类较多,有葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖。
前三种糖的分子内都含有游离的具还原性的半缩醛羟基,因此叫做还原糖;
蔗糖分子内没有,为非还原糖。
实验中所用的斐林试剂,只能鉴定生物组织中可溶性还原糖,而不能鉴定可溶性非还原糖。
可溶性还原糖(如葡萄糖、果糖、麦芽糖)与斐林试剂发生作用,可生成砖红色的Cu2O沉淀。
用斐林试剂鉴定还原糖时,溶液变化过程为:
浅蓝色→棕色→砖红色沉淀
淀粉遇碘变蓝色(直链)或紫(红)色(支链)。
3、蛋白质与双缩脲试剂发生作用,产生紫色反应。
(蛋白质分子中含有很多肽键,在碱性NaOH溶液中能与双缩脲试剂中的Cu2+作用,产生紫色反应。
)
三、实验材料:
1、做可溶性还原性糖鉴定实验,应选含糖高,颜色为白色的植物组织,如苹果、梨(因为组织的颜色较浅,易于观察。
)经试验比较,颜色反应的明显程度依次为苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜。
2、做脂肪的鉴定实验。
应选富含脂肪的种子,以花生种子为最好,实验前一般要浸泡3~4小时(也可用蓖麻种子)。
3、做蛋白质的鉴定实验,可用富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清。
4、淀粉的鉴定:
马铃薯匀浆。
四、实验用具:
双面刀片、试管(最好用刻度试管)、试管夹、试管架、大小烧杯、小量筒、滴管、酒精灯、三脚架、石棉网、火柴、载玻片、盖玻片、毛笔、吸水纸、显微镜
五、实验试剂:
1.斐林试剂(包括甲液:
质量浓度为0.1g/mLNaOH溶液和乙液:
质量浓度为0.05g/mLCuSO4溶液)
2.苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液
3.双缩脲试剂(包括A液:
质量浓度为0.1g/mLNaOH溶液和B液:
质量浓度为0.01g/mLCuSO4溶液)4.体积分数为50%的酒精溶液5.碘液6.蒸馏水
六、方法步骤:
一、可溶性糖的鉴定
操作方法
注意问题
解释
1.制备组织样液。
(去皮、切块、研磨、过滤)
苹果或梨组织液必须临时制备。
因苹果多酚氧化酶含量高,组织液很易被氧化成褐色,将产生的颜色掩盖。
2.取1支试管,向试管内注入2mL组织样液。
3.向试管内注入1mL新制的斐林试剂,振荡。
应将组成斐林试剂的甲液、乙液分别配制、储存,使用前才将甲、乙液等量混匀成斐林试剂;
切勿将甲液、乙液分别加入苹果组织样液中进行检测。
斐林试剂很不稳定,甲、乙液混合保存时,生成的Cu(OH)2在70~900C下分解成黑色CuO和水;
甲、乙液分别加入时可能会与组织样液发生反应,无CuOH生成。
4.试管放在盛有50-650C温水的大烧杯中,加热约2分钟,观察到溶液颜色:
浅蓝色→棕色→砖红色(沉淀)
最好用试管夹夹住试管上部,使试管底部不触及烧杯底部,试管口不朝向实验者。
也可用酒精灯对试管直接加热。
防止试管内的溶液冲出试管,造成烫伤;
缩短实验时间。
二、脂肪的鉴定
花生种子浸泡、去皮、切下一些子叶薄片,将薄片放在载玻片的水滴中,用吸水纸吸去装片中的水。
干种子要浸泡3~4小时,新花生的浸泡时间可缩短。
因为浸泡时间短,不易切片;
浸泡时间过长,组织较软,切片不易成形。
切片要尽可能薄些,便于观察。
在子叶薄片上滴2~3滴苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液,染色1分钟。
染色时间不宜过长。
用吸水纸吸去薄片周围染液,用50%酒精洗去浮色,吸去酒精。
酒精用于洗去浮色,不洗去浮色,会影响对橘黄色脂肪滴的观察。
同时,酒精是脂溶性溶剂,可将花生细胞中的脂肪颗粒溶解成油滴。
用吸水纸吸去薄片周围酒精,滴上1~2滴蒸馏水,盖上盖玻片。
滴上清水可防止盖盖玻片时产生气泡。
低倍镜下找到花生子叶薄片的最薄处,可看到细胞中有染成橘黄色或红色圆形小颗粒。
装片不宜久放。
时间一长,油滴会溶解在乙醇中。
三、蛋白质的鉴定
制备组织样液。
(浸泡、去皮研磨、过滤。
黄豆浸泡1至2天,容易研磨成浆,也可购新鲜豆浆以节约实验时间。
鉴定。
加样液约2ml于试管中,加入双缩脲试剂A,摇匀;
再加入双缩脲试剂B液3~4滴,摇匀,溶液变紫色。
A液和B液也要分开配制,储存。
鉴定时先加A液后加B液。
CuSO4溶液不能多加。
先加NaOH溶液,为Cu2+与蛋白质反应提供一个碱性的环境。
A、B液混装或同时加入,会导致Cu2