Evlution300紫外操作规程Word文档格式.docx
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1.目的
1.1.规范Evolution300紫外分光光度计的操作,保证正确使用Evolution300紫外分光光度计。
2.适用范围
2.
2.1.适用于赛默飞公司的Evolution300紫外分光光度计。
3.责任者
3.
3.1.仪器操作员:
严格按SOP操作仪器,保持仪器的干净整洁;
确保仪器能够正常运行,确认仪器是否在计量效期内。
3.2.质量总监:
相关仪器文件的审批,仪器使用的管理。
4.相关定义
无
5.工作程序
4.
5.
5.1.准备
5.1.1.开机前检查
5.1.1.1.每次开机前应检查样品室应洁净、无异物。
5.1.1.2.检查仪器是否在检定效期内。
5.1.2.检查电源
5.1.2.1.紫外分光光度计应有良好的接地,并配有220V(±
5%)电压,零地电压小于5V,每次开机前应检查插头与插座吻合是否正常。
5.1.3.检查放置环境
5.1.3.1.紫外分光光度计应放置在稳定、无振动的位置,周围环境温度应在10℃~30℃、相对湿度不超过75%RH的范围内。
5.1.4.仪器使用记录填写
5.1.4.1.检查上述项目,没有不符合项判定为正常状态,有不符合项判定为不正常状态。
5.2.操作
5.2.1.点击电脑桌面上的VISIONpro快捷图标,根据不同的要求,可以选择不同的测量模式。
ainmenubarToolbar
DatastoreStatusbar
5.2.1.1.自左向右:
1.建立一个新的方法;
2.从磁盘调用方法;
3.使用当前文件名把采样方法保存到磁盘;
4.从磁盘调用结果文件;
5.使用当前文件名把选择的数据文件保存到磁盘。
5.2.1.2.自左向右选择:
1.扫描扫描应用;
2.固定波长Fixed应用;
3.定量Quant应用;
4.Rat应用;
5.多成份分析MulticomponentAnalysis应用;
6.DNA应用。
5.2.1.3.自左向右:
1.开始运行批样品测量;
2.暂停Rate应用中的数据采集;
3.按照所选方法,采集样品基线或调零;
4.停止当前的运行;
5.访问Help系统。
5.2.1.4.自左向右:
1.扫描应用记忆当前的;
2.恢复到记忆的窗口版面;
3.按照不重叠方式的平铺窗口;
4层.叠式窗口;
5.从磁盘调用窗口版面(窗口版面可以通过File菜单存储和调用)。
5.2.1.5.自左向右:
1.选到Method窗口;
2.选到Graph窗口;
3.选到Results窗口;
4.选到Calibration窗口;
5.选到Kinetics窗口。
5.2.1.6.自左向右选择:
1.取消跟踪光标;
2.使用跟踪光标(使用箭头键,可沿逐个数据点移动。
);
3.清除所有数据的图谱;
4.栅格形式的切换;
5.设置图谱坐标范围;
6.切换图注显示7.切换峰标显示;
8.背景色的白/灰切换9.图谱线形的点/线切换。
5.2.2.使用扫描
5.2.2.1.启动VISION。
5.2.2.2.点击扫描图标进入扫描应用。
5.2.2.3.设置扫描方法(ScanMethod)。
a.从下拉菜单可选的内容中选择数据格式(DataMode)。
b.点击起始波长(选择数据格式)的数值框,将打开数值输入对话框。
可以用鼠标点击数值输入对话框的虚拟键盘,或直接用计算机的键盘,输入起始波长值。
波长终点(stopwavelength)的设置也是一样的。
c.选择带宽(bandwidth),扫描速度(Scanspeed)和数据点间隔(datainterval),也可能还有换灯波长(LampChangewavelength)。
d.输入样品个数。
e.设置循环(Cycles)和循环时间(CycleTime)。
f.在数据采集过程中,或采集完成后,可使用Math菜单中的功能,选择操作所需的显示特性、平滑(Smooth)和结果表。
g.设置自动坐标(AutoScale)。
h.要使用自动保存(AutoSave),点击其On/Off方框使其on,并输入子文件名和序号。
i.要将方法锁定,点击锁定(Lock)按键,输入自己的口令。
j.如要将方法锁定,点击锁定(Lock)按键,输入自己的口令。
5.2.2.4.若使用了池控制器,参考“样品池控制器方法设置”。
5.2.2.5.点击基线校正(BaselineCorrection)按钮,建立相关应用的基线。
此时打开下面窗口
5.2.2.6.按照需要的运行,选择相关的基线校正。
100%TBaseline为标准的用户基线。
如果仪器装有漫反射附件(DRA),其他两个,即0%TBaselineCorrection和StandardReferenceCorrectionwith0%TBaseline也供选择。
5.2.2.7.点击Zero-Base(调零-基线)图标。
5.2.2.8.点击Run(运行)图标。
5.2.2.9.点击Proceed(运行)按键。
5.2.2.10.在时间或动力学实验中,可以选择SynchronizationStart(同步启动)选项,通过Tools>
Options>
SystemSettings>
页使该项可选。
将仪器设置为同步启动后,数据的采集将在点击OK按键或倒计时结束时立即开始。
下面即为运行中同步/倒计时启动对话框实例:
5.2.2.11.如果需要,在第一样品池中加入反应试剂,关闭样品仓仓盖,点击Proceed按键。
5.2.2.12.将测量Cell控制器的第一个样品,后将下一个样品移动到位将得到下一个样品反应的提示。
5.2.2.13.采集过程中的任何时候,按Pause(暂停)图标或选择Command菜单中的Pause,将中断采集。
5.2.2.14.要是采集时间未结束,仪器将继续采集,只是不显示出来,直到再次按动Pause图标,数据采集将按照方法参数继续进行。
5.2.2.15.继续此过程,直至全部样品测试完成。
5.2.3.扫描数据处理
5.2.3.1.点击菜单栏中的Math,从菜单或子菜单中选取运算操作。
操作窗口即在工作区域打开。
5.2.3.2.在库区中,指到要处理的batch,sample或result,按住鼠标左键,把数据拖到运算窗口的Batch,SampleorResult位置。
当数据被拖动时,它的影像在库区中将伴随光标,之后随光标同一起转为带有斜杠的黑色圆环;
到达数据可放置区域时,光标与代表batch,sample或result数据的符号复原,释放鼠标按键时就把数据放到该处。
5.2.3.3.若需要,设置Math窗口中的参数。
比如进行标峰(PeakPick)时,其窗口中有3个下拉菜单:
点击数值区域时,将打开输入数值的数字小键盘,输入数值。
在Sensitivity下拉菜单中选择Manual的话,3个灵敏度参数就变成可选的。
5.2.3.4.在Scangraph中可以看到光谱数据的计算或修正结果。
a.将batch、sample或cycle从库区拖放到ScanGraph窗口。
b.点击cycle来查PeakPick后的cycle结果。
c.从Graph菜单选择需要的标记方式,在Graph工具栏(图谱工具栏)点击ToggleLabels(标记切换)按键开关标记。
5.2.3.5.与功能相关的,有可能从ResultsTable(结果表格)显示结果。
从Math窗口的下拉菜单,可以选择将结果以波长或吸光度的顺序排列。
5.2.4.固定波长(Fixed)应用。
5.2.4.1.点击本图标启用Fixed应用。
5.2.4.2.设置Fixed方法窗口中的参数。
a.依照所选的Fixed方法,可同时测量10个不同波长。
点击方框,然后用打开的屏幕数值小键盘或PC的键盘输入波长数值,没有顺序要求。
b.DataMode(数据方式)在Absorbance与%T之间选择。
c.FixedMode的设置在Normal(普通),ArithmeticCombinationof2wavelengths(双波长相关的计算)和PeakHeight(峰高)之间选择。
PeakHeight方式中要输入峰值和峰两侧起点的波长值。
d.设置方法余下的参数。
e.设置样品的个数,若需要,可以点击Details(详细资料)按键,编
辑样品名称和详情描述,作为方法的组成部分。
通过双击样品名称来编辑它。
f.要使用AutoSave(自动保存),点击On/Off方框到On,输入文件名的词根和号码。
g.点击Lock(锁定)按键,并按提示输入密码,即将方法锁定,之后解锁需重输密码。
5.2.4.3.使用样品池控制器时,referto“样品池控制器方法设置”。
a.点击Zero-Base(调零-基线)图标。
b.当PresentReference(s)(提供参比)对话框出现时,将参比放置到光路或对应的附件样品位置上,盖好样品仓盖,点击Proceed(运行)按键。
c.运行样品采集,点击Run(运行)图标。
将打开PresentSample(提供样品)对话框,如果样品名及其描述还未输入,此时也可以输入。
将样品放置到光路或对应的附件样品位置上,盖好样品仓盖。
d.点击Proceed(运行)按键。
5.2.5.运行定量方法校正(在样品浓度能够测量之前,必须用已知浓度溶液进行校正)。
5.2.5.1.点击应用工具栏的Quant(定量)图标,开始Quant应用。
5.2.5.2.在Quant方法窗口点击CalibrationMethod(方法校正)标签。
5.2.5.3.在CalibrationMethod页参数中输入所需的数值。
5.2.5.4.从下拉菜单中选择所需的Quantmode。
5.2.5.5.若需要,输入所需的波长和系数。
5.2.5.6.设置自动坐标(AutoScale):
选用扫描方法中的自动坐标按钮(任何与图形相干的应用方法都有此按钮),将在数据获取过程结束后,自动改变坐标以显示完整的采集到的数据。
如果不选这个项目,在数据获取过程结束后的吸光度坐标的范围,将保持在所指定的数值。
5.2.5.7.设置方法余下的参数。
5.2.5.8.输入标样(Standards)个数(1到50)和每个标样的重复(replicates)次数(1to3)。
5.2.5.9.点击More按键,打开第二个方法参数窗口。
在这个窗口里能选择初始曲线拟合(InitialCurveFit),浓度单位,小数点后位数,在“ValidUntil”中指定校正方法有效(使用)期,“FlierDetection”在On/Off间切换,也可能有参比阈值(ReferenceThreshold)和最大吸收值(MaximumAbsorbance),还能选择相关系数的高低限。
5.2.5.10.点击Clo