0621PCR培训班考试题最终版A文档格式.docx
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和。
其中前者监测和控制的是实验室测定的,而后者则通过对不同的实验室测定结果的比对而评价实验室测定的。
4.在进行荧光定量PCR检测之前,样本手工预处理应该在中进行,并且使用吸头进行样本操作。
5.PCR的基本反应过程包括、、。
6.荧光定量PCR使用的Taqman探针两端标记有7.根据遗传中心法则,遗传信息的流动方向为基团和基团。
。
8.普通临床基因扩增检验实验室一般包括下面四个分区:
、、、。
9.提纯的核酸样品可根据的比值计算出其纯度。
波长的光吸收值算出其含量,通过计算10.临床基因扩增实验室检测用的试剂应当经11.cfDNA的中文名称是,ctDNA的中文名称是批准。
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A卷二.是非题(在你认为正确的句子后面打√,错误的后面打×
,每题1分,共15分)1.DNA双链中,碱基A-T之间以三个氢键相连,G-C以两个氢键相连。
()2.PCR反应中,复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成。
()3.使用有防“污染”作用的尿苷糖基酶(UNG)的PCR试剂盒,该酶可以降解含有UTP的扩增产物。
()4.核酸的复制是由3'→5'方向进行的。
()5.自制室内质控品时,应对质控品的均匀性和稳定性进行评价。
()6.定量PCR与定性PCR测定原理的最主要的区别点在于前者的测定点在PCR的指数扩增期,而后者多为扩增平台期。
()7.处理PCR标本时,在没有生物安全柜的情况下,可用超净台操作。
()8.临床检验中的系统误差通常表现为质控物测定结果的SD增大。
()9.扩增管没有盖好会造成PCR反应液热蒸发,直接影响结果,但不会成为一个污染源。
()10.核酸是极性化合物,可溶于水,不溶于乙醇等有机溶剂。
()11.核酸的解链温度(Tm)与G+C含量有关,G+C含量愈大,Tm愈高。
()12.无法参加室间质量评价计划时,可以用室内质控替代。
()13.PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高。
()14.PCR可应用于遗传病、肿瘤、病原体检测及判断亲缘关系等方面。
()15.质量管理体系的要素包括质量方针、质量目标和质量指标。
()三.单选题(请将所选答案填写在题后的括号中,每题1分,共25分)1.PCR技术扩增DNA,需要的条件是()①目的基因②引物③四种脱氧核苷酸④DNA聚合酶等⑤mRNA⑥核糖体A.①②③④B.②③④⑤C.①③④⑤D.①②③⑥2.多重PCR需要的引物对为()A.一对引物B.半对引物C.两对引物D.多对引物3.TaqDNA聚合酶酶促反应最快最适温度为()A.35-40℃B.50-55℃C.70-75℃D.80-85℃2
A卷4.以下哪项不是临床PCR实验室设计的一般原则()A.各区合并B.注意风向C.因地制宜D.方便工作5.下列哪一种病毒的遗传物质为RNA()A.乙肝病毒B.人乳头瘤病毒C.巨细胞病毒D.人类免疫缺陷病毒6.在做结核分枝杆菌-荧光PCR检测之前,应采用下面哪个浓度的氢氧化钠对痰液标本进行液化。
()A.2%B.3%C.4%D.5%7.普通PCR基因扩增仪最关键的部分是()A.热盖B.温度控制系统C.软件系统D.荧光检测系统8.PCR技术的发明人是:
()A.WatsonJ.D.;
B.CrickF.H.C.;
C.KaryMullis;
D.RosalindFranklin.9.生物安全水平的级别共分为几个等级(A.1个B.2个C.3个D.4个10.以下在PCR反应中,对扩增产物的特异性起决定因素为(A.模板B.引物C.dNTPD.镁离子11.有关荧光定量PCR方法,下述哪一条是错误的?
(A.在扩增的指数期定量;
B.在扩增的终点测定定量;
C.可采用Taqman探针;
D.采用内标和外标方法均可。
12.在选择开展临床检验项目时,应首先考虑:
(A.临床有效性和分析有效性;
B.检测精密度和检测准确度;
C.临床有效性和检测精密度;
D.分析有效性和检测准确度。
13以下哪项有利于DNA的保存:
(A.加入EDTA螯合钙离子,去除核酸酶的活性;
B.加入少量DNase;
C.溶于pH3.0溶液;
D.加入少量RNase。
14.荧光定量PCR检测过程中,基线漂移的可能原因有:
(A.蒸发;
B.探针水解C.相邻荧光通道干扰D.以上都是15.将基因扩增检验实验室的产物分析区设置为负压状态,目的是:
(A.防止有生物传染危险的样本逸出;
B.防止扩增产物从该区逸出;
C.防止该区灰尘的逸出;
D.为了生物安全的目的3)))))))
A卷16.真核生物染色体DNA主要以下列哪种形式存在()A.环状单链分子B.线性单链分子C.环状双链分子D.线性双链分子17.TaqMan探针采用的是()A.荧光标记的探针B.生物素标记的探针C.同位素标记的探针D.SYBRGreen荧光染料18.最大量程为200ul的微量移液器,显示读数为020,实际的吸液容量值为:
()A.0.2ulB.2ulC.20ulD.200ul19.有关核小体的错误叙述是:
()A.核小体是染色体的基本单位B.DNA和组蛋白共同构成核小体C.DNA和组蛋白H1构成核小体连接区D.RNA和组蛋白共同构成核小体20.基因突变的实质是:
()A.染色体上的DNA序列变化了B.染色体上的DNA变成了RNAC.染色体上的DNA变成了蛋白质D.染色体上的DNA高级结构发生了局部改变21.如果一个PCR反应体系中加入模板200个,经过30个循环后扩增产物的数量将达到()A.200×
30×
2B.2002×
30C.200×
230D.200×
30222.双链DNA中的碱基对有:
()A.A-UB.G-TC.C-AD.T-A23.下列四个DNA片段中含有回文结构的是()A.GAAGAAB.TGGAAAC.GAAAAGD.GAATTC24.核酸分子中储存遗传信息的关键部分是:
A.mRNAB.tRNAC.rRNAD.DNA25.核酸检测探针的标志性特征是:
()()A.一小段已知序列的单链核酸;
B.一小段未知序列的单链核酸;
C.一小段已知序列的双链核酸;
D.有同位素或非同位素标记物。
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A卷四.简答题(每题5分,共25分)1.简述什么情况下应该对分子诊断检验程序进行性能验证?
(5分)2.临床PCR实验室质量管理体系文件应包含哪些内容?
(5分)5
A卷3.可用哪些方法对分子诊断实验室的员工进行技术工作能力评估(至少列出5种)。
(5分)4.感染性疾病的定量、定性检测,人基因组的基因型检测,对上述三类PCR检测的室内质控品的浓度水平和型别如何要求?
(5分)5.简述生物安全的概念、实验室生物安全水平的概念。
(5分)6
A卷五.论述题(共20分)1.某一开展乙肝DNA定性检测的临床PCR实验室,参加盲样测试(包括三个阳性样本,两个阴性样本),该实验室做出的结果为5份样本全部阳性,工作人员将盲样全部阳性的结果确认后立即发出。
第二天发现当天的室内质控结果也是全部阳性,并且当天的阳性率明显增高。
请回答:
(1)这样做是否正确?
(4分)
(2)应该如何处理?
(8分)(3)分析该情况产生的所有可能原因?
(8分)7