高中生物学业水平测试必修实验Word文档格式.docx
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脂肪的检测和观察
方式一：
花生种子匀浆+3滴苏丹
方式二：
（此法需要利用显微镜，因为要在脂肪细胞中找到脂肪油滴）
取材：
做脂肪的鉴定实验，应选择富含脂肪的种子，以花生种子为最佳，实验前需浸泡3-4h。
将子叶削成薄片
取理想的薄片
制片
滴2~3滴苏丹
染液
洗去浮色（1~2滴体积分数50%的酒精溶液）
制成临时装片（1滴蒸馏水，加盖玻片）
观察：
先在低倍镜下寻觅到已着色颗粒再用高倍镜观察
圆形小颗粒呈橘黄色，说明有脂肪存在
蛋白质的检测和观察
选材与制备：
豆浆或蛋清（利用蛋清做实验材料要稀释）
说明组织样液中存在蛋白质
【实验结果分析】（C）
【小结】①斐林试剂与双缩脲试剂的比较
试剂
斐林试剂
双缩脲试剂
鉴定成分
还原糖
蛋白质
鉴定原理
还原糖中的醛基（-CHO）在加热条件下能将Cu（OH）2中的Cu2+还原成Cu+，从而生成砖红色的Cu2O沉淀
双缩脲（H2NOC-NH-CONH2）在碱性溶液中能与Cu2+结合生成紫色络合物，蛋白质分子中含有与双缩脲结构相似的肽键
试剂浓度
甲液:
质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液；
乙液:
质量浓度为0.05g/mL的CuSO4溶液
A液:
质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液
B液:
质量浓度为0.01g/mL的CuSO4溶液
使用方法
甲液、乙液混合均匀后，再加入样液
先加A液造成碱性环境，再加B液
使用条件
加热（水浴50~65℃）
不加热，摇匀即可
实验现象
浅蓝色→棕色→砖红色
紫色
②溶液颜色的转变进程为浅蓝色→棕色→砖红色
③脂肪的鉴定能够利用花生匀浆或花生切片来做，后者需要利用显微镜
④鉴定的材料必然要选择白色的
⑤斐林试剂只能证明是不是还原性糖，不能肯定是哪一种还原性糖
考点2观察植物细胞的质壁分离和恢复
【实验原理】：
（B）
①质壁分离的原理：
当细胞液浓度小于外界溶液浓度时，细胞就会通过渗透作用而失水，细胞液中的水分就透过原生质层进入到溶液中，使细胞壁和原生质层都出现必然程度的收缩。
由于原生质层比细胞壁的收缩性大，当细胞不断失水时，原生质层就会与细胞壁分离。
②质壁分离恢复的原理：
当细胞液的浓度大于外界溶液的浓度时，细胞就会通过渗透作用而吸水，外界溶液中的水分就通过原生质层进入到细胞液中，整个原生质层就会慢慢地恢复成原来的状态，紧贴细胞壁，使植物细胞逐渐发生质壁分离恢复。
【实验材料用具、实验方式步骤】：
（A）
（1）实验材料——紫色的洋葱鳞片叶（细胞具有紫色大液泡，容易观察），质量浓度为0.3g/mL的蔗糖溶液，清水等。
（2）主要实验仪器----载玻片，盖玻片、光学显微镜
（3）实验方式步骤
步
骤
注意问题
分
析
1．制作洋葱表皮临时装片。
在载玻片上滴一滴水，撕取洋葱鳞片叶外表皮放在水滴中展平，盖上盖玻片。
盖盖玻片应让盖玻片的一侧先触及载玻片，然后轻轻放平。
防止装片产生气泡。
2．观察洋葱（或水绵）细胞
可看到：
液泡大，呈紫色，原生质层紧贴着细胞壁。
液泡含花青素，所以液泡呈紫色。
先观察正常细胞与后面的“质壁分离”起对照作用。
3．观察质壁分离现象。
从盖玻片一侧滴入0.3g/ml的蔗糖溶液，在另一侧用吸水纸吸引，重复几次。
镜检。
观察到：
液泡由大变小，颜色由浅变深，原生质层与细胞壁分离。
原生质层与细胞壁之间充满蔗糖溶液。
重复几次
糖液浓度不能过高
蔗糖溶液浓度大于细胞液浓度，细胞通过渗透作用失水，细胞壁伸缩性小原生质层伸缩性大，液泡和原生质层不断收缩，所以发生质壁分离。
重复是为了使细胞完全浸入蔗糖溶液
糖液浓度过高细胞会严重失水死亡，看不到质壁分离的复原。
4．观察细胞质壁分离复原现象。
从盖玻片的一侧滴入清水，在另一侧用吸水纸吸引，重复几次。
液泡由小变大，颜色由深变浅，原生质层恢复原状。
发生质壁分离的装片不能久置，要马上滴加清水，使其复原。
重复几次。
细胞液浓度高于外界溶液，细胞通过渗透作用吸水，所以发生质壁分离复原现象。
不能久置因为细胞失水过久，也会死亡。
重复几次为了使细胞完全浸入清水中。
【实验结果的分析】：
（C）
细胞液浓度＜外界溶液浓度细胞失水（质壁分离）
细胞液浓度＞外界溶液浓度细胞吸水（质壁分离恢复）
【小结】
①本实验不仅能证明成熟的植物细胞是一个渗透系统，而且还能够用来判断细胞死活和测量植物细胞细胞液浓度范围。
②若用于实验的洋葱鳞片叶表皮颜色较浅（乃至接近无色），应降低视野亮度
③质壁分离时刻不能太长，不然细胞会死亡，无法观察质壁分离的恢复。
质壁分离的时候液泡会缩小，紫色加深。
细胞大小大体不变，因为外有细胞壁。
④在实验顶用的蔗糖溶液浓度要适当。
浓度太低，细胞不能发生质壁分离；
浓度太高，细胞失水太快，致使细胞死亡，不能发生质壁分离恢复。
⑤植物细胞发生质壁分离后，原生质层和细胞壁之间充满的液体时外界溶液，因为细胞壁是全透的。
⑥过量施肥引发的“烧苗”其本质就是由于过量施肥引发根系所处的外界溶液浓度太高，引发植物大量失水，发生烧苗时仍能进行矿质元素的吸收，烧苗的对策是交替浇灌几回以稀释土壤溶液浓度。
⑦渗透作用的条件是半透膜和浓度差。
本实验的观察指标是中央液泡大小（按照紫色大小）、原生质层的位置、细胞大小。
⑧质壁分离的“质”与“壁”：
“质”是指原生质层而不是细胞质，“壁”则指细胞壁。
质壁分离发生时，水分子由细胞内向外渗出，依次通过液泡膜、细胞质、细胞膜，最后通过细胞壁离开细胞。
质壁分离发生后，“质”与“壁”之间间隙里的物质：
由于细胞壁是全透性的，而细胞膜具有选择透过性，所以一些不被细胞膜选择吸收的溶质分子能够通过细胞壁上的孔洞却不能通过细胞膜。
如此，在原生质层与细胞壁之间的间隙中实际上充满着外界溶液。
⑨用“内外因法”来理解质壁分离及其恢复的原理。
内部原因：
组成植物细胞的细胞壁和原生质层都具有必然程度的伸缩性，但细胞壁的伸缩性较小，而原生质层的伸缩性较大，如此细胞壁和原生质层之间才能发生分离和恢复现象。
外部原因：
与外界溶液有关。
考点3探讨影响酶活性的因素
【实验原理】（B）
温度或pH等能够影响酶的催化活性，在必然范围内，随着温度或pH的升高酶活性升高；
越过这一范围酶活性下降，乃至失活。
【实验材料用具、实验方式步骤】（A）
．材料：
新配置的淀粉酶溶液，新鲜肝脏研磨液，可溶性淀粉溶液，过氧化氢溶液等。
．方式步骤
．探讨温度对酶活性的影响
步骤
项目
试管1
试管2
试管3
1
加入可溶性淀粉溶液
2mL
2
放置在不同温度环境下5分钟
0℃
100℃
60℃
3
加入新配置的α-淀粉酶溶液
1mL
4
完成反应
5min
5
滴入碘液
2滴
观察结果
变蓝
不变蓝
注：
实验室利用的α-淀粉酶最适温度为50~70℃；
由于H2O2不稳固，因此探讨温度对酶活性影响，不选择H2O2作为反映物。
．探讨pH对酶活性的影响
加入过氧化氢溶液
加入蒸馏水
-
加入盐酸
加入NaOH溶液
滴加肝脏研磨液
6
37℃水浴
7
检验
放入带火星的木条
不能够复燃
能够复燃
试管内气泡产生量
很少
少
3．实验结果的分析（C）
（1）.说明温度太高和太低均无益于酶活性的发挥，在适宜温度下酶的活性才最高
（2）.产生气泡多的试管中酶活性越高。
只有在适宜PH条件下酶的活性才最高
考点4叶绿体中色素的提取和分离
提取原理：
叶绿体中的色素能够溶解在有机溶剂，所以，能够在叶片被磨碎以后用乙醇提取叶绿体中的色素
分离原理：
叶绿体中的色素在层析液中的溶解度不同，溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得快；
溶解度低的随层析液在滤纸上扩散得慢。
按照那个原理就可以够将叶绿体中不同的色素分离开来。
．实验材料用具：
新鲜绿叶（含有丰硕色素）；
无水乙醇（溶解叶绿体中的色素）；
SiO2（使研磨充分）；
CaCO3（避免研磨进程中色素分子受到破坏）；
层析液（分离色素分子）。
．实验方式步骤
叶绿体中色素的提取：
研磨（研钵中加入：
剪碎的新鲜绿叶、无水乙醇、SiO2、CaCO3，迅速、充分研磨）→过滤（不能用滤纸，能够用脱脂棉或尼龙网）→保留（搜集到的色素绿叶要加棉塞，以避免无水乙醇挥发）
色素的分离
制备滤纸条→画滤液细线（注意：
待滤液干燥后要重复画两到三次，要求滤液细线要细而齐）→层析法分离色素（注意：
必然不要让层析液没及滤液细线）→观察和记录
实验结果：
最后滤纸条上将分离出四条色素带，颜色从上往下别离是橙黄色、黄色、蓝绿色和黄绿色，四种色素别离是胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a和叶绿素b
【实验结果的分析】（C）
实验结果分析：
色素在滤纸条上的散布如下图：
（橙黄色）最快（溶解度最大）
（黄色）
（蓝绿色）最宽（最多）
（黄绿色）最慢（溶解度最小）
【小结】：
①无水乙醇的用途是提取（溶解）叶绿体中的色素，层析液的的用途是分离叶绿体中的色素；
石英砂的作用是为了研磨充分，碳酸钙的作用是避免研磨时叶绿体中的色素受到破坏；
②分离色素时，层析液不能没及滤液细线的原因是滤液细线上的色素会溶解到层析液中；
③叶绿素a和叶绿素b主要吸收蓝紫光和红光，胡萝卜素和叶黄素主要吸收蓝紫光。
④提取和分离叶绿体色素的关键是：
a.提取叶绿体色素的关键是：
①叶片要新鲜、浓绿；
②研磨要迅速、充分；
③滤液搜集后，要及时用棉塞将试管口塞紧，以避免滤液挥发。
b.分离叶绿体色素的关键是：
一是滤液细线要细且直，而且要重复划几回；
二是层析液不能没及滤液线。
⑤在圆滤纸的中央，点上含叶绿体色素的提取液进行层析，随着层析液从滤纸中央向周围扩散，形成四个同心的色素环，由外到内的顺序依次是：
胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a、叶绿素b
⑥注意区分提取和分离所用的试剂及原理的不同
⑦滤纸条上色素颜色太浅的可能原因：
研磨时加无水乙醇太多，色素浓度太低；
研磨时CaCO3没有加或加量太少，部份叶绿素受到破坏；
选材不够嫩绿；
多次划线之间没有注意等到干燥；
用绿叶量太少；
研磨不够充分；
未加入SiO2
⑧本
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