食品生物技术导论答案最终Word下载.docx

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最终产出改造过的Pr

5酶工程

酶工程（enzymeengineering）：

利用酶催化作用进行物质转化的技术，是酶学理论、基因工程、蛋白质工程、发酵工程相结合而形成的一门新技术

6发酵工程

发酵工程是将微生物学、生物化学和化学工程等学科基本原理有机结合，是建立在基因工程技术基础上的一门应用技术性学科。

7生物工程下游技术

生物工程下游技术（biotechniquedownstreamprocessing）：

将发酵工程、酶工程、蛋白质工程和细胞工程生产的生物原料，经过提取、分离、纯化、加工等步骤，最终形成产品的技术二问答题

1食品生物技术研究内容包括哪些？

内容：

基因工程、细胞工程、蛋白质工程、酶工程、发酵工程、生物工程下游技术、现代分子检测技术

2食品生物技术在食品工业发展的地位如何？

地位食品生物技术研究内容已涉及到食品工业的方方而面，从原料到加工无处不存在食品生物技术的痕迹。

利用基因工程技术以根据人类的需要人为地设计新型的食品及食品原料，基因工程还可以为发酵工程提供更优良的工株，促进食品发酵工业的发展。

（1）基因工程将处在21世纪食品工业的核心位置；

（2）发酵技术很早被人们用于生产食品，食品发酵工程在食品工业中占有举足轻重的作用；

（3）食品与酶的关系密切，食品生产离不开酶处理，蛋白质工程和酶匚程在食品工业中所占比重将会更大；

（4）生物工程下游技术作为现代食品工业不可缺少的部分将对食品工业的发展起到推动作用。

3叙述一下你对生物技术食品的安全性，特别是转基因食品的安全性有何看法？

①转基因食品中外源基因对人健康的潜在危险；

②转基因作物新基因对食物链其它环节的不良后果；

③转基因植物对生物多样性的影响。

第二章

一、名词解释

1基因工程

2基因工程载体

基因工程载体（vectororcarrier）：

在细胞内具有自我复制能力的、运载目的基因进入宿主细胞的运载体。

3限制性内切酶

限制性内切酶（restrictionenzyme:

RE）：

在特定部位限制性地切割DNA分子的酶。

通过该酶作用，生物基因被切成许多独立小片段，从中分离出目的基因，进一步克隆、鉴定它们。

有三种限制性内切酶！

4黏性末端

有些限制性内切酶切割DNA后产生5,磷酸基团突出的末端和3,羟基突出的末端，统称为黏性末端。

5平末端

一些在切割两条链两端平整（平末端）的DNA分子，这些末端叫平末端（bluntend）o

6DNA连接酶

能将两段DNA拼接起来的酶称DNA连接酶（ligase）

13外源基因

插入到载体内的非自身的DNA片段称为外源基因（foreigngene）。

14目的基因（objectivegene）

目的基H（objectivegene）,又叫靶基H（targetgene）,是指根据基因工程的目的和设计所需

要的某些DNA分子的片段，含有一种或几种遗传信息的全套密码（code）o

15人工接头

人工接头（linker）是人工合成的具有特定限制性内切酶识别和切割序列的双股平端DNA短序列，将其接在基因片段和载体DNA上，使它们具有新的内切酶位点，用相应的内切酶切割，就可以分别得到互补的黏性末端

16转化与转染

转化（transformation）使重组体DNA分子在热休克（heatshock）的短暂时间内被导入受体。

转染未包装病毒DNA导致基因转移的现象。

17受体细胞

受体细胞也叫宿主细胞，分原核受体细胞（最主要是大肠杆菌）、真核受体细胞（最主要是酵母菌）、动物细胞和昆虫细胞（真核受体细胞）。

18DNA体外重组

将目的基因与载体连接在一起，称DNA体外重组。

19基因重组（generecombination）

是基因工程的核心，利用限制性内切酶和其他一些酶类，切割和修饰载体DNA和目的基因，并将两者连接起来

20亚克隆（sub-cloning）

把DNA片段从某一类型的载体无性繁殖到另一类型载体的过程称亚克隆（sub-cloning）o

21同族酶

同族酶也叫同裂B（isoschizomer）,指来源于不同机体但具有相同识别和切割序列的酶。

22克隆（cloning）

目的基因与载体连接成重组DNA后，将其导入受体细胞进行扩增和筛选，得到重组子，这就是外源基因的无性繁殖一克隆（cloning）o

23热休克

24体外包装伽vitropackage）

在体外将重组体DNA放置到噬菌体蛋白质外壳内，再通过正常噬菌体感染过程导入宿主细胞。

将重组子噬菌体包装成噬菌体颗粒，使其能够感染细菌，并在宿主菌体内扩增和表达外源基因。

25共转化（co-transformation）

将外源基因与报告基因（reportgene）共同导入感受态真核细胞的方法，称“共转化"

（co-transformation）。

26电转化（electro-transformation）

电转化（electro-transformation）也称高压电穿孔法（high-voltageelectroporation,简称电穿孔法electro-poration）,向受体细胞施加短暂的高压脉冲电流，使质膜形成纳米大小微孔,DNA直接通过这些微孔，或作为微孔闭合时所伴随发生的膜组分重新分布而进入细胞质中。

27微注射技术（micro-injection）

微注射技术（micro-injection）也称直接显微注射技术（directmicro-injection）,用微吸管吸取供体DNA溶液，在显微镜下准确插入受体细胞核中，将DNA注射进去。

此法常用于转基因动物的基因转移。

28脂质体（liposome,人工膜泡）

脂质体（liposome,人工膜泡）作为体内或体外输送载体的方法，一般都需要将DNA或RNA包囊于脂质体内，然后进行脂质体与细胞膜的融合，通过融合导入细胞。

39重组DNA载体转化法

简称载体法，是以载体为媒介的基因转移，即将目的基因连接于某一载体DNA±

然后通过宿主感染受体植物而将外源基因转入植物细胞的方法一最常用。

30反义RNA（antisenseRNA）

反义RNA（antisenseRNA）指有义（sense）DNA链转录成的、与特异靶RNA互补结合并能抑制靶RNA表达的一段序列。

31反义基因（antisensegene）

转录产生反义RNA的基因称之为反义基因（antisensegene）。

二简答题

1基因工程基本过程

基因工程基本过程：

利用重组DNA技术，经体外“cut〃和"

splice”等方法，改造和重组生物基因，再导入受体细胞中增殖、表达，产出人类需要的基因产物。

2基因工程主要内容

基因工程主要内容：

切、接、贴和检查、修复等。

基因工程操作4步骤

①由供体分离出目的基因or人工合成目的基因并制备运载体（质粒、病毒或噬菌体）；

②目的基因经DNA连接酶接入运载体一重组体；

③将重组体引入宿主细胞；

④筛选、鉴定出含有外源目的基因的菌体或个体。

3II型限制性内切酶命名原则：

II型限制性内切酶命名原则：

有机体属名第一个字母（大写、斜体）和种名前两个字母（小写、斜体）构成基本名称，株系数字通常省略；

若酶存在于一种特殊菌株中，在基本名称后面加上菌株名称符号；

罗马数字表示从同一个细菌中分离出来的不同限制性内切酶。

4II型限制性内切酶作用特点与主要用途

特点：

①位点特异性酶，识别双链DNA分子中特异序列，在特异部位水解双链DNA中每一条链上的磷酸二酯键，造成双链缺口，切断DNA分子。

②识别位点为4、5、6、8个或更多碱基对

③缺口DNA序列大多呈回文结构（正、反读一样）。

主要用途：

①在特异位点将DNA切成片段；

②建立DNA分子的限制性内切酶物理图谱；

③构建基因文库；

④切出相同的黏性末端，以便重组DNA。

5DNA连接酶用途

用途：

①连接带匹配黏端的DNA分子；

②使平端双链DNA分子互相连接或使合成的接头相连接

14理想的基因工程载体应具备的特征有哪些？

常见基因载体有哪些？

特征：

①在宿主细胞内独立、稳定地自我复制。

外源DNA插入其DNA之后，仍保持稳定复制能力和遗传特性。

②易于从宿主细胞中分离，并进行纯化。

③在DNA序列中有限制性内切酶单一酶切位点一位于DNA复制非必需区，在这些位点上插入外源DNA不影响载体自身DNA复制。

④有能直接观察的表形特征（报告基因），插入外源DNA后，这些特征可作为重组DNA选择标记。

常见的基因载体：

细菌质粒载体、农杆菌质粒载体、入噬菌体载体、柯氏质粒载体和病毒载体等。

18常用的噬菌体载体有哪些？

各有什么特点？

•入噬菌体：

入噬菌体是温和噬菌体，注入的DNA整合到大肠杆菌染色体中，与染色体一起复制，在某种营养或环境胁迫条件下，整合的入噬菌体DNA被切割出来，进入裂解循环。

入噬菌体是一种线状双链分子，其中大约20kb对于整合/切割过程极为关键，称整合/切割（I/E）区域。

构建核基因文库来时，将这20kbDNA片段去掉，强迫重组入噬菌体进入裂解循环。

•M13载体：

M13载体是一种细丝状的特异性大肠杆菌噬菌体一单链噬菌体载体。

可插入外源DNA而不影响噬菌体增殖。

M13感染细菌后呈双链复制型（RF）DNAo允许包装大于病毒单位长度的外源DNA；

感染细菌后复制环状DNA经包装形成噬菌体颗粒,分泌到细胞外而不溶菌。

这些特性便于分离单链DNA,旦在产生大量的单链DNA中，含有外源DNA序列。

可用于DNA序列分析、制备杂交探针、定点突变等。

19获得目的基因的方法有哪些？

鸟枪法（shotgun）；

物理化学法（①密度梯度离心法、②单链酶法、③分子杂交法）；

化学合成法；

酶促逆转录合成法；

PCR扩增法

20目的基因如何测序？

DNA序列分析指测定某段DNA分子或片段的核昔酸（A、T、G、C顺序。

测序常用于转化子的序列分析，可最直接、最客观反映转化子中有无目的基因。

DNA测序方法：

化学降解法、酶促法（双脱氧终止法）、自动测序法及PCR法等。

21连接目的基因与载体的方法有哪些？

亚克隆、黏性末端连接、平端连接、人工接头连接、同聚物加尾连接等。

22举例说明重组DNA导入受体细胞的方法。

①转化（transformation）②转染（transfection）：

③微注射