人体寄生虫学实验指导教材.docx

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人体寄生虫学实验指导教材

人体寄生虫学实验指导

（供临床医学、医学检验专业使用）

病原生物学教研室

上海第二医科大学

序言----------------------------------------------------------------------------------1

光学显微镜的使用------------------------------------------------------------------------2

人体寄生虫学英语单词------------------------------------------------------------------3

线虫-----------------------------------------------------------------------------------5

似蚓蛔线虫（蛔虫）--------------------------------------------------------------------5

钩虫（十二指肠钩口线虫，美洲板口线虫）-----------------------------------------8

蠕形住肠线虫（蛲虫）-------------------------------------------------------------------11

毛首鞭形线虫（鞭虫）-------------------------------------------------------------------12

丝虫（班氏丝虫，马来丝虫）----------------------------------------------------------12

旋毛形线虫（旋毛虫）-------------------------------------------------------------------14

吸虫-----------------------------------------------------------------------------------14

华支睾吸虫（肝吸虫）---------------------------------------------------------------14

布氏姜片吸虫（姜片虫）----------------------------------------------------------------16

卫氏并殖吸虫（肺吸虫）----------------------------------------------------------------17

日本裂体吸虫（日本血吸虫）及其它血吸虫---------------------------------------20

绦虫-----------------------------------------------------------------------------------23

链状带绦虫（猪带绦虫）和肥胖带绦虫（牛带绦虫）--------------------------------23

细粒棘球绦虫（包生绦虫）-------------------------------------------------------------25

微小膜壳绦虫（短膜壳绦虫）----------------------------------------------------------26

原虫-----------------------------------------------------------------------------------27

溶组织内阿米巴（痢疾阿米巴）----------------------------------------------------27

蓝氏贾第鞭毛虫-----------------------------------------------------------------------28

阴道毛滴虫-----------------------------------------------------------------------------29

疟原虫-----------------------------------------------------------------------------------29

杜氏利什曼原虫-----------------------------------------------------------------------33

机会致病原虫--------------------------------------------------------------------------34

Ⅰ.刚地弓形虫------------------------------------------------------------------------34

Ⅱ.卡氏肺孢子虫---------------------------------------------------------------------35

Ⅲ.微小隐孢子虫---------------------------------------------------------------------35

医学昆虫-------------------------------------------------------------------------------36

附复习思考题------------------------------------------------------------------40

序言

本实验指导系供医学系、儿科系、口腔系学生及留学生等使用，各专业班级可根据不同的具体情况选择有关进行实验。

实验注意事项

一、实验前应先阅读这次实验内容，实验时应保持肃静，并穿着白实验服。

二、实验过程中不得擅自移动示教标本；如有不清楚时，请教师代为整理，以免弄错影响其他同学观察。

三、实验结束时应将实验标本整理好，如有缺损应即向教师说明。

显微镜油镜镜头用过以后要用二甲苯擦镜纸擦干净。

四、实验后的污物、标本、玻片等必须放于指定地点，玻璃器皿用后一律清洗干净，每次实验应有清洁值日，在实验结束后进行整洁工作。

五、作业应在规定时间内完成，写报告要求简单扼要，字迹清楚，画图要力求正确、客观，并应择其较典型者画下。

光学显微镜的使用

实验过程中，常用仪器是显微镜，在生物学、组织胚胎学均已操作过，现在再将使用显微镜的方法及注意点，扼要提出如下：

（一）使用法：

使用显微镜时，先将反光镜调向光源，继用集光器调节光的强度，使强度适当而照熠均匀，然后将标本置于载物台上，先用低倍接物镜观察，用粗调节螺旋调节至能看出物象，再用细调节螺旋使物象更加清晰。

如换高倍镜观察时，可将待观察的部分移于视野中央，再旋换高倍接物镜。

镜检时，用左眼观察，并将右眼同时张开，养成双眼同时并用的习惯。

如需使用油镜时，可用一张血液薄涂片进行练习，先用低倍镜找到血片上颗粒状的血球，然后转开低倍镜，在玻片上加上一点油，旋换油镜，慢慢将镜头向下转或镜台向上转，眼从侧方看，使镜头浸入油中，到接触玻片即止，（当心压碎玻片），然后眼看接目镜，用细螺旋调节器慢慢旋转，调节至能看清楚血片上圆形红色的红细胞及蓝色的较大的白细胞，如此练习数次到熟练为止。

（二）放大倍数的计算：

一般显微镜的放大倍数，已在镜头上表明，所以只要用接目镜的放大倍数乘上接物镜的放大倍数即等于该显微镜的放大倍数，例如接目镜上为10X，低倍接物镜上常刻有8或10，高倍镜上常刻有40，油镜上刻有90或100，则低倍镜的放大倍数为8（或10）X10；80（或100）倍，高倍镜的放大倍数为40X10：

400倍，油镜的放大倍数90（或100）X10：

900（或1000）倍。

（三）显微镜下观察标本的方法

1．不论是血涂片或者粪涂片，观察时为避免遗漏，必需按一定方向循序前进，同时推动显微镜机械尺，按顺序寻找标本。

2．有些标本较小，如需用高倍镜观察应先用低倍镜找到之后再转换高倍镜，旋转螺旋调节器时要注意，不要将高倍镜头接触粪液，有的玻片标本上虽有盖玻片，但亦应注意不能将接物镜压到盖玻片上，以致标本压坏甚至损伤镜头。

3．看低倍镜时可将镜台下方的聚光镜转向下方，以减弱光源使视野更为清晰；看高倍镜或油镜时就向上转，或依靠光圈的开关来掌握光源的强弱。

人体寄生虫学英语单词

Parasitology寄生虫学Fasiolopsisbuski布氏姜片吸虫

Parasite寄生虫Paragonimuswestermani卫氏并殖吸虫

Parasitosis寄生虫病Schistosomajaponicum日本血吸虫

lifecycle生活史schistosomiasis血吸虫病

host宿主Oneomelania钉螺

definitiveorfinalhost终宿主cestode（ClassCestoda）绦虫

intermediatehost中间宿主Taeniasolium链状带绦虫

reserviorhost储蓄宿主Taeniasaginata肥胖带绦虫

paratenichost转续宿主Cystieercus囊尾蚴

infectivestage感染期cysticercosis囊虫病

epidemiology流行病学Echinococcusgranulosus细粒棘球绦虫

pathogenesis致病机理hydatidcyst棘球蚴

concomitantimmunity伴随免疫Protczca原生动物亚界

premunition带虫免疫Entamoebahistolytica溶组织内阿米巴

carrier带虫者trophozoite滋养体

ectopicparasitism异位寄生cyst包囊

helminth蠕虫opportunisticprotozoan机会致病原虫

nematode

（ClassNematoda）线虫（纲）malaria疟疾

Ascarislumbricoides似蚓蛔线虫Plasmodiumvivax间日疟原虫

adultworm成虫ringform环形滋养体

ovum（p1．ova）卵细胞sporozoite子孢子

directsmear直接涂片法relapse复发

Trichuristrichiura毛首鞭形线虫recrudescence再燃

hookworm钩虫flagellate鞭毛虫．

Ancylostomaduodonale十二指肠钩口线虫Leishmaniadonovani杜氏利什曼原虫

Necatoramericanus美洲板口线虫Kala-azar黑热病

larve（p1．1arvae）幼虫leishimaniasis利什曼病

brinefloration盐水浮集法Trichimonusvaginalis阴道毛滴虫

Trichinellaspiralis旋毛形线虫Giadialamblia蓝氏贾第鞭毛虫

filariasis丝虫病Toxoplasmagondii刚地弓形虫

microfilaria微丝蚴Pneumocystiscarinii卡氏肺孢子虫

Wuchereriabancrofti班氏吴策线虫tachymite速殖于

Brugiamalayi马来布鲁线虫bradyzoite缓殖子

noctunalperiodicity夜现周期性PhylumArthropoda节肢动物门

Enterobiusvermicularis蠕形住肠线虫insect昆虫

trematodeematoda）吸虫（钢）vector媒介

sucker吸盘metamorphosis变态

oralsucker口吸盘entomology昆虫学

ventralsucker腹吸盘tick蜱

miracidum毛蚴mosquito蚊

cercaria尾蚴metacercaria后尾蚴、囊蚴

Clonorchissinensis华枝睾吸虫

似蚓蛔线虫（蛔虫）

（Ascarislumbricoides）

[预习提要]蛔虫寄生在人体小肠里，虫卵随粪便排出，在外界发育为感染性卵，被人吞食后，幼虫在小肠里孵出，经移行至肺，再进入消化道而发育为成虫。

为何用直接涂片法诊断蛔虫感染?

掌握蛔虫受精卵及未受精卵形态的区别有何实际意义?

是否随粪便排出的虫卵即有感染性?

目的要求

一、掌握蛔虫受精卵及未受精卵的形态。

二、掌握诊断蛔虫病的粪便直接涂片技术操作。

三、熟悉蛔虫的基本形态特征。

内容

一、虫卵：

载玻片上滴加保存在5％福尔马林中之浓集粪渣虫卵悬液一滴，涂开，先置低倍镜找虫卵后，小心转向高倍镜（注意勿使液体接触镜头）仔细观察构造。

1．受精卵：

椭圆·形，卵壳较厚而透明，壳的表面通常有一层粗糙不平的蛋白质膜，新鲜粪便中的卵因受宿主胆汁染色呈棕黄色，卵内有一大而圆的卵细胞。

2．未受精卵：

为长椭圆形，有时其形状不甚规则，也呈棕黄色，卵壳及蛋白质膜均较受精卵薄，卵内含有许多折光性强的卵黄颗粒。

3．脱蛋白质膜卵：

受精卵及未受精卵排出体外后，有时其外面的蛋白质膜已脱落，此时虫卵无色而透明，观察时应注意勿与其他虫卵和植物细胞（多角形）相混淆。

4．感染性卵：

受精卵排出体外，在外界经过一定时间可发育为感染性虫卵，卵内含有幼虫。

此种虫卵在新鲜粪便中看不到。

二、成虫（示教）：

1．保藏标本：

（1）外部形态：

①色泽形状：

活蛔虫是肉红色，经福尔马林固定后呈灰白色。

虫体圆柱形，两端较细，体表光滑而有细纹。

②雌雄识别：

雌虫较大，后端尖细而直；雄虫后端变曲。

③前后端识别：

前端有口及三片唇瓣围绕，后端或直或弯曲。

④背腹鉴别：

腹面有肛门（尾端）及雌虫阴门（虫体前1／3与中1／3交界处）的开口。

雄虫尾端变向腹面弯曲。

⑤背、腹、侧线：

分别在虫体背面、腹面及二侧沿虫体长轴纵行，色泽较周围稍深，隐约见于皮下。

⑥雄虫交合刺：

仔细观察雄虫弯曲的末端，有二根白色的交合刺，有时因脱落或缩入泄殖腔内不能见到。

（2）内部器官：

①消化器官：

为一连续纵行直管。

口开于虫体顶端，下连短棒状之食道，食道以下依次为中肠和直肠，雌虫直肠通于后端肛门，雄虫直肠与射精管相通而成为泄殖腔。

②生殖器官：

雌虫：

为二组相同的管状构造，盘绕于生殖孔后之体腔内，卵巢细长如线，一端游离，一端逐渐膨大形成输卵管，其下连接子宫，子宫为最粗的部分，内充满虫卵，二组子宫的末端合并而形成阴道，阴门开口于虫体腹面前1／3与中1／3交界处。

雄虫：

为单组曲折的管状构造，睾九细长，一端游离，一端逐渐膨大为输精管、储精囊（最粗）及射精管，射粗管末端与直肠相连而成泄殖腔，开口于虫体后端腹面，尾端并有交合刺二根，自射精管二侧向后伸入泄殖腔而通至体外。

2．玻片染色标本：

唇瓣：

位子虫体顶端，可见三片唇瓣，呈“品”字排列，唇瓣内缘具细齿、侧缘各有小乳突一对，为感觉器官。

3．蛔虫的形态与结构反映了线虫的基本特征：

（1）雌雄异体，雌大雄小；

（2）具完整的消化管道；

（3）体表覆盖角皮层；

（4）有原体腔；

（5）生殖系统为连续的管道，雌虫为双管型，雄虫为单管型。

三、病理标本（示教）：

标本系从尸体解剖而得，观察时联系蛔虫的生态习性与致病性的关系。

1．打结：

注意多条蛔虫扭一起可引起腹痛，甚至肠梗阻。

2．钻孔：

（1）蛔虫嵌入阑尾：

引起阑尾炎。

（2）蛔虫钻入胆道：

引起胆道蛔虫症。

四、病原诊断：

直接涂片法：

为蛔虫病最常用的病原学诊断法（示教）。

作业

正确地绘出蛔虫有受精卵及未受精卵，并注明放大倍数。

思考题

1．粪便检查是否可诊断所有的蛔虫感染?

为什么?

2．受精卵与未受精卵有哪些形态不同?

3．虫卵如何与粪渣中的杂质和细胞区别?

粪中常见的混杂物有肌肉纤维、动物细胞、植物细胞、淀粉颗粒和脂肪滴等（见图2）。

粪便直接涂片法操作步骤（图1省略）：

1．滴加生理盐水一滴于玻片中央。

2．用牙签挠取火柴头大小的粪便于生理盐水内调匀。

3．将粪便匀浆左右摊开，成薄涂片

4.涂片厚薄以能透过并看清印刷字体为宜。

十二指肠钩口线虫

（Ancylostomaduodenale）

美洲板口线虫

（Necatoramericanus）

钩虫

（Hookworm）

[预习提要]钩虫寄生在人体小肠里。

虫卵随粪便排出，在泥土里和适宜条件下杆状蚴孵出并发育到丝状蚴，丝状蚴具感染性，可钻入人体皮肤而引起感染，传播途径与鲜粪施肥及耕作方式有关。

幼虫随血流至肺，再到小肠而发育为成虫。

十二指肠钩虫与美洲钩虫的成虫形态有显著差别，而虫卵相似。

怎样发现钩虫感染者?

怎样鉴别钩虫病便所属的虫种?

漂浮法检查钩虫卵的原理是什么？

目的要求

一、掌握十二指肠钩虫及美洲钩虫的形态鉴别及钩虫卵的形态特征。

二、掌握诊断钩虫感染常用的饱和盐水漂浮法。

内容

一、虫卯：

取保存于福尔马林液中的虫卵悬液或取新鲜粪便作直接涂片，用低倍镜检查，观察时光线不要太强。

钩虫卵为长椭园形，卵壳薄而透明，刚排出体外的虫卵，内含2~4个细胞（如粪便搁置1~2天后，则卵内细胞分裂为多细胞期或发育为幼虫期）。

卵壳与细胞间有明显空隙。

注意卵的大小、外形、颜色、卵壳及内容物。

十二指肠钩虫和美洲钩虫的虫卵在形态上没有区别。

二，杆状蚴（示教）：

用低倍镜观察，前端钝园，后端尖细，食道前半粗大，中间狭小，后端略呈球形，食道长度等于体长的1／3。

三、丝状蚴（示教）：

用低倍镜观察，注意食道后端的球状体不明显，尾端尖细，食道长度等于体长的1/5。

四、成虫形态：

1．保藏标本：

钩虫病患者经驱虫后，由粪便中收集成虫，保藏于5％福尔马林液中，可直接用肉眼观察其外部形态特征。

十二指肠钩虫及美洲钩虫，体壁皆略透明，呈乳白色，雌虫皆比雄虫大，雌虫尾端尖细而直，雄虫尾膨大成伞形：

二种钩虫虫体弯曲情况不同，可作为虫种鉴别特征之一，十二指钩虫头部与身体弯曲一致，似“C”字形，美洲钩虫头部与身体弯曲相反，似“S”字形。

观察标本时要注意雌雄的区别与二种钩虫虫体弯曲的情况。

2玻片染色标本：

经福尔马林液固定过的虫体，再经染色透明处理后，用树胶封片。

染色剂多采用酸卡红。

（1）十二指肠钩虫雄虫：

取已染色的玻片标本置于低倍镜下系统的进行观察。

首先观察虫体前端的口囊，此口囊位于虫体顶端中央，为卵圆形角质坚韧组织（在识别口囊的部位时应注意分清口囊与头部其他组织的界线），口囊内壁腹面二侧有切器二对（每侧一对），此切器呈牙齿状。

虫体后端由于体壁向后延伸并膨大而形成交合伞，在低倍镜下可见到交合伞为透明的膜状构造，宽度大于长度，其上有辐射排列并分支的伞辐肋构造，位于交合伞背面者称为背肋，背肋未端约1／3处分为二支，每一支再分为三小枝，由伞中伸出二根鬃状交合刺至体外，此二根交合刺末端是分开的。

（2）十二指肠钩虫雌虫：

口囊构造与雄虫相同，阴门开口于虫体中央略后部位，在虫体末端有一尾刺（有的标本不易见到）。

（3）美洲钩虫雄虫：

与十二指肠钩虫雄虫的主要鉴别特征如下：

①口囊内切器一对板状的切板（每侧一个）。

②交合伞长度等于宽度或近似圆形，背肋在基部即分为二支，以后每一支再分为二小支。

③经交合伞伸出的二根交合刺在末端合并成倒钩状。

（4）美洲钩虫雌虫：

与十二指肠钩虫雌虫的主要鉴别特征如下：

①口囊内切器为一对板状的切板。

②阴门开口于虫体中央路前部位。

③尾端无尾刺。

五、病理标本（示教）：

犬钩虫成虫寄生于小肠。

六、病原诊断：

饱和盐水漂浮法：

本法利用比重较大的饱和盐水使比重较小的虫卵，特别是钩虫卵，漂浮在溶液上面，而达到浓集目的。

（1）器材及试剂：

①塑料漂浮瓶或玻璃漂浮瓶。

②载玻片。

③竹棒。

④滴管。

⑤饱和盐水（溶解普通食盐约40克于100毫升水中，加热至沸，冷后过滤）。

（2）操作方法：

（见图3）

作业

1．填图并注明鉴别虫种的结构名称

2．按比例绘钩虫卵

思考题

1，粪便检查钩虫卵时为何常见到多细胞期的卵?

2．粪便直接涂片法为何不适用钩虫的检查?

饱和盐水漂浮法操作步骤（图3省略）：

1．自粪便不同部位，取黄豆大小粪块（约1克），置于盛有少量饱和盐水的塑料漂浮瓶中。

为什么要在不同部位取样?

2．将粪便捣碎搅匀后，再加饱和盐水，加至略高于管口，但不溢出为止。

3．取洁净载玻片一块，盖于管口，静止约15分钟。

4．如图垂直向上提起起载玻片。

盖时应避免产生气泡。

为什么？

5．迅速地翻转载玻片，镜检。

翻转载玻片时应注意什么?

蠕形住肠线虫（蛲虫）

（Enterobiusvermicularis）

[预习提要]蛲虫寄生于人体盲肠、结肠及阑尾，雌虫在肛周产卵，适宜条件下很快发育为感染性虫卵，可自身反复感染和异体感染。

在蛲虫的形态生活史里哪几点与诊断有关系?

目的要求

一、掌握蛲虫卵的形态特征。

二、熟悉成虫的外形特征及诊断蛲虫病的技术操作。

内容

一、虫卵：

取保藏于福尔马林液中的虫卵液一滴，涂于载玻片上，用低倍镜观察，注意光线不宜太强，虫卵为卵园形，一边扁平，一边隆起，透明无色，卵壳较厚，卵内含有蝌蚪期胚胎（经短时即可发育为成熟幼虫）。

二、成虫形态

保藏标本：

患者经驱虫后由粪便中收集雌、雄成虫或当感染的儿童入睡时在肛门周围取得活的雌性成虫，保藏于5％福尔马林液中。

可用肉眼直接观察，成虫为乳白色雄虫很小，尾部弯曲，雌虫较大，体中部因内含充盈虫卵的子宫而较宽，尾端特别尖。

观察时注意其外形特征及雌雄区别。

，

三、病原诊断：

1.玻璃胶纸法：

取一段狭长的玻璃胶纸，把有胶的一面向外，用镊子镊住两端，在肛门周围粘几下，然后将胶纸平铺于载玻片上，用低倍镜检查。

2．棉棒拭子法：

将棉花棒置于盛有冷开水的试管中，用时将棉棒取出，在肛门周围都涂擦，然后放入试管水中充分振荡，经离心沉淀后，取出沉淀物检查，或加入饱和盐水漂浮虫卵检查。

·

以上二法是利用蛲虫在人体肛门周围产卵的特点，检查时间在清晨排便之前较好。

作业：

绘蛲虫卵。

思考题：

1．为什么蛲虫病诊断不用粪便检查?

2．在肛门拭子检查未发现蛲虫卵时，还有什么办法?

毛首鞭形线虫（鞭虫）

（Trichuristrichiura）

[预习提要