中药化学实验指导常用实验操作技术.doc

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常用实验操作技术

（一）浸渍法操作

冷浸法　取药材粗粉，置适宜容器中，加入一定量的溶剂如水、酸水、碱水或稀醇等，密闭，时时搅拌或振摇，在室温条件下浸渍1～2天或规定时间，使有效成分浸出，滤过。

药材再加入适量溶剂浸泡2～3次，使有效成分大部分浸出。

然后将药渣充分压榨、滤过，合并滤液，经浓缩后可得提取物。

温浸法　具体操作与冷浸法基本相同，但温浸法的浸渍温度一般在40～60℃之间，浸渍时间短，却能浸出较多的有效成分。

由于温度较高，浸出液冷却后放置贮存常析出沉淀，为保证质量，需滤去沉淀后再浓缩。

（二）渗漉法操作

1．渗漉装置常用的渗漉装置（实图-2），渗漉筒一般为圆柱形或圆锥形，筒的长度为筒直径的2～4倍。

渗漉提取膨胀性不大的药材时用圆柱形渗漉筒；圆锥形渗漉筒则用于膨胀性大的药材渗漉提取。

2．操作方法将药材粗粉放在有盖容器内，再加入药材粗粉量60％～70％的浸出溶剂均匀湿润后，密闭，放置15分钟至数小时，使药材充分膨胀后备用。

另取脱脂棉一团，用浸出液润湿后，铺垫在渗漉筒的底部，然后将已湿润膨胀的药材粗粉分次装入渗漉筒中，每次装药后，均须摊匀压平。

松紧程度视药材质地及浸出溶剂而定，若为含水量较多的溶剂宜压松些，含醇量高的溶剂则可压紧些。

药粉装完后，用滤纸或纱布将药材面覆盖，并加一些玻璃珠或碎瓷片等重物，以防加入溶剂时药粉被冲浮起来。

然后向渗漉筒中缓缓加入溶剂，并注意应先打开渗漉筒下方浸液出口之活塞，以排除筒内空气，待溶液自下口流出时，关闭活塞。

流出的溶剂应再倒回筒内，并继续添加溶剂至高出药粉表面数厘米，加盖放置24～48小时，使溶剂充分渗透扩散。

开始渗漉时，漉液流出速度如以1000g药粉计算，每分钟流出1～3ml或3～5ml为宜。

渗漉过程中需随时补充新溶剂，使药材中有效成分充分浸出。

渗漉溶剂的用量一般为1∶4～8（药材粉末∶渗漉溶剂）。

实图-2渗漉装置

3．注意事项

（1）供渗漉用的药材粉末不能太细，以免堵塞药粉颗粒间孔隙，妨碍溶剂通过。

一般大量渗漉时药材切成薄片或0.5cm左右的小段；小量渗漉时粉碎成粗粉。

若粉碎时残留的细粉较多时，应待粗粉充分湿润后将其拌入一起装筒，这样可避免堵塞渗漉筒现象。

（2）药粉装筒前一定要先放入有盖容器中用溶剂湿润，且经放置一定时间，使药粉充分湿润膨胀，以免在渗漉筒中膨胀后造成堵塞，或膨胀不均匀造成浸出不完全。

（3）装筒时药粉的松紧及使用压力是否均匀，对浸出效果影响很大。

药粉装得过紧会使出口堵塞，溶剂不易通过，无法进行渗漉。

药粉装得过松，溶剂很快流过药粉，造成浸出不完全，消耗的溶剂量多。

因此装筒时，要分次一层一层地装，每装一层，要用木槌均匀压平，不能过松过紧。

（4）渗漉筒中药粉量装得不宜过多，一般为渗漉筒容积的2/3，留有一定的空间以存放溶剂，可连续渗漉和便于操作。

（5）药粉填装好后，应先打开渗漉筒下口活塞，再添加溶剂，否则会因加溶剂造成气泡，冲动粉柱而影响浸出。

渗漉过程中，溶剂必须保持高出药面，否则渗漉筒内药粉干涸开裂，再加入溶剂时则会从裂隙间流过而影响浸出。

若采用连续渗漉装置（实图-3），则可避免此现象发生。

实图-3连续渗漉装置

（三）煎煮法操作

取药材饮片或粗粉，置于适当容器（勿用铁器）中，加水浸没药材，充分浸泡后，加热煎煮，待药液沸腾后，继续保持微沸一定时间，然后进行滤过，得到水煎液。

药渣再加适量水，重复操作数次至水煎液味淡薄为止。

合并各次水煎液，浓缩即得提取物。

一般需煎煮2～3次，煎煮的时间可根据药材的量及质地而定。

对少量质松、轻薄的药材，第一次可煮沸20～30分钟，而药材量多或质地坚硬时，第一次约煎煮1～2小时，第二、三次煎煮时间可酌减。

（四）回流提取法操作

将药材粗粉装入圆底烧瓶内，添加溶剂使浸过药面1～2cm，烧瓶内药材及溶剂的总量一般不超过烧瓶容积的1/2～2/3。

烧瓶上方接通冷凝管，置水浴中加热回流一定时间，滤出提取液，药渣再添加新溶剂回流提取。

一般需提取3次，合并提取液（实图-4）。

实图-4回流提取装置

（五）连续提取法操作

1．连续提取装置在实验室中常用脂肪抽出器（索氏提取器），共分三部分，上部是冷凝管，中部是带有虹吸管的提取筒，下部为圆底烧瓶。

三部分通过磨口严密连接（实图-5）。

2．连续提取法操作先将研细的药材粉末装入滤纸筒中，轻轻压实，上盖以滤纸或少量脱脂棉，然后放入提取筒中，再将提取筒下端和盛有适量提取溶剂的烧瓶连接，上端接上冷凝管。

按装完毕后，水浴加热，当溶剂沸腾时，蒸汽通过提取筒旁侧的玻管上升到达冷凝管中，被冷凝成为液体后，滴入提取筒中，当筒中液体的液面超过虹吸管的最高处时，由于虹吸作用，提取液自动全部流入烧瓶中，烧瓶内的溶液再受热气化上升，而被溶出的中药成分因不能气化而留在烧瓶中，如此循环提取，直至药材中的可溶性成分大部分提出后为止，一般需要数小时才能完成。

如果大量提取时，可根据此原理设计类似的大量连续提取装置（实图-6）。

实图-5索氏提取器实图-6大量连续提取装置实图-7简易半微量提取器

若试样量少，可用简易半微量提取器（实图-7）：

把被提取中药粗粉放入折叠滤纸中，此装置操作方便，提取效果也较好。

3．注意事项

（1）滤纸筒可用定性滤纸捆扎而成（实图-8）。

滤纸筒高度以超过索氏提取器的虹吸管1～2cm为宜。

滤纸筒内径应小于索氏提取器的提取筒内径。

实图-8滤纸筒的捆扎

（2）药材粉末的装入量不宜过多，放入提取筒内后，药面应低于虹吸管。

并应注意不要把药粉流出滤纸筒外，以防堵塞虹吸管。

（3）加热前，应在烧瓶内加入止暴剂，注意事项同蒸馏法。

（六）蒸馏法操作

1．蒸馏装置及安装最常用的常压蒸馏装置（实图-9），由蒸馏瓶、温度计、冷凝管、接液管和锥形瓶组成。

根据待蒸馏液体的量选择大小合适的蒸馏瓶，把配有温度计的塞子塞入瓶口，调整温度计的水银球上限和蒸馏瓶支管的下限在同一水平线上。

蒸馏瓶与冷凝管相连的支管口应伸出塞子2～3cm。

安装时冷凝管上端的出水口应向上，保证套管中充满水，冷凝管下端通过塞子和接液管相连。

接液管和锥形瓶间不可用塞子塞住，而应与外界大气相通。

在安装仪器前首先选择合适规格的仪器，配妥各连接处的塞子，安装的顺序一般是先从热源处开始，然后由下而上，从左到右依次安装。

蒸馏瓶用铁夹垂直夹好，铁夹的位置应在蒸馏瓶支管以上的瓶颈上；安装冷凝管时，铁夹应夹在冷凝管的重心部位，调整它的位置使与蒸馏瓶的支管在同一直线上，然后松开冷凝管铁夹，使冷凝管沿此直线移动和蒸馏瓶相连，这样才不致折断蒸馏瓶支管。

再装上接液管和锥形瓶。

各铁夹不应夹得太紧或太松，以夹住后稍用力尚能转动为宜。

实图-9蒸馏装置

整套装置要求准确端正，无论从正面或侧面观察，全套仪器中各部件的中心线都应在一条直线上。

所有的铁夹和铁座架都应尽可能整齐地放在仪器的背部。

2．蒸馏操作

（1）加料通过长颈漏斗加入待蒸馏的液体，或沿着面对支管的瓶颈壁小心地加入，必须防止液体从支管流出。

加入数粒止暴剂。

然后安装温度计，检查各仪器之间的连接是否紧密，有无漏气现象。

（2）加热先向冷凝管中缓缓通入冷水，然后开始加热。

加热时当蒸气的顶端到达温度计水银球部位时，温度计读数会急剧上升。

这时应控制温度，调节蒸馏速度，通常以每秒钟蒸出1～2滴为宜。

（3）收集馏液要准备两个接受器，因为在达到主要蒸馏液的沸点之前，可能有沸点较低的液体先蒸出。

待此部分蒸完，温度趋于稳定后，蒸出的就是主要蒸馏液，这时应更换一个接受器。

如果维持原来加热温度，不再有馏液蒸出，温度突然下降，这时就可停止蒸馏，切勿将蒸馏液全部蒸干，以免蒸馏瓶破裂及发生其他意外事故。

蒸馏完毕，先应停止加热，然后关闭水源，拆除仪器（程序和装配时相反）。

3．注意事项

（1）装配蒸馏装置时必须做到紧密整齐。

（2）加入蒸馏液的体积，应不超过蒸馏瓶体积的2／3，一般不少于1／3。

（3）当蒸馏易挥发和易燃的液体时，不能用明火，一般以水浴为热源。

（4）开始加热前必须在蒸馏瓶内加入止暴剂，如果蒸馏液已加热而没有加入止暴剂时，补加时必须将蒸馏液冷至沸点以下，方可加入，切忌将止暴剂直接加入已接近沸腾的蒸馏液中，否则蒸馏液可能突然放出大量蒸气，而将大部分液体从蒸馏瓶口喷出，造成火灾及烫伤事故。

如果因故中途停止蒸馏，在再次加热前，应加入新的止暴剂。

（七）减压蒸馏法操作

1．减压蒸馏的装置常用的减压蒸馏系统（实图-10），整个系统可分为蒸馏、抽气以及测压装置等三部分。

实图-10减压蒸馏装置

（1）蒸馏装置部分：

A是减压蒸馏瓶（又称克氏蒸馏瓶），有两个颈，其中一颈中插入温度计，另一颈中插入一根末端拉成毛细管的玻管C，其长度应使其下端距瓶底l～2mm。

玻管C上端有一段带螺旋夹D的橡皮管，蒸馏液的接受器用蒸馏瓶或抽滤瓶。

根据蒸出的液体的沸点不同，选用合适的热浴和冷凝管。

（1）玻璃制水泵

（2）金属制水泵

实图-11减压装置实图-12冷却阱

1）水泵：

系用玻璃或金属制成（实图-11），其效能与其构造、水压及水温有关。

水泵所能达到的最低压力为当时室温下的水蒸气压。

例如在水温为6～8℃时，水蒸气压为0.93～1.06kPa。

在夏天，若水温为30℃，则水蒸气压为4.20kPa左右。

现在还有一种循环水泵装置，可节约用水，配有指针式压力表，减压效能也较好。

2）油泵：

油泵的效能取决于油泵机械结构以及油的质量。

好的油泵能抽至真空度0.01333kPa（0.1毫米汞柱）。

油泵结构较精密，工作条件要求较严。

蒸馏中如果有挥发性的有机溶剂、水或酸的蒸气进入都会损坏油泵。

为了防止易挥发的有机溶剂、酸性物质和水气进入油泵，必须在馏液接受器与油泵之间顺次安装冷却阱和几种吸收塔。

冷却阱的构造如（实图-12）所示，将它置于盛有冷却剂的广口保温瓶中，冷却剂可用冰-水、冰-盐、干冰等。

吸收塔又称干燥塔（实图-13），通常设二个，前一个装无水氯化钙（或硅胶），后一个装粒状氢氧化钠。

有时为了吸除烃类气体，可再加一个装石蜡片的吸收塔。

（3）测压装置部分：

实验室通常采用水银压力计测量减压系统的压力。

开口式水银测压计（实图-14），两臂汞柱高度之差即为大气压力与系统中压力之差，因此蒸馏系统内的实际压力（真空度）应是大气压力减去这一汞柱差。

使用时应避免水或其他污物进入压力计内，否则将严重影响其准确度。

实图-13干燥塔实图-14开口式测压计

在泵前还应接一个安全瓶，瓶上的两通活塞G供调节系统压力及放气之用。

2．减压蒸馏操作当被蒸馏物中含有低沸点的物质时，应先进行普通蒸馏，然后用水泵减压蒸去低沸点物，最后再用油泵减压蒸馏。

在克氏蒸馏瓶中，放置待蒸馏的液体（不超过容积的1/2），按实图-10装好仪器，旋紧毛细管上的螺旋夹D，打开安全瓶上的二通活塞G，然后开泵抽气。

逐渐关闭G，从压力计F上观察系统所能达到的真空度。

如果因为漏气而不能达到所需的真空度，可检查各部分塞子和橡皮管的连接是否紧密等。

必要时可用熔融的固体石蜡密封（密封应在解除真空后才能进行）。

如果超过所需的真空度，可小心地旋转活塞G，使慢慢地引进少量空气以调节至所需的真空度。

调节螺旋夹D，使液体中有连续平稳的小气泡通过。

开启冷凝水，选合适的热浴加热蒸馏。

加热时，克氏蒸馏瓶的圆球部位至少应有2/3浸入浴液中。

控制浴温比待蒸馏液体的沸点高20～3