学习手册谷氨酸发酵种子扩大培养.docx
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学习手册谷氨酸发酵种子扩大培养
学习手册
《子情境：
谷氨酸发酵种子扩大培养》
引导文-单元设计-技能考核标准-实训指导书
子情境：
引导文
谷氨酸发酵种子扩大培养
阅读材料
材料一：
谷氨酸的性质
中文名
L-谷氨酸
结构式
英文名
L-glutamicacid
商品名/别名/化学名
麸酸/L-2-氨基戊二酸
英文缩写
Glu
CAS号/PubChem
56-86-0/611
化学式
C5H9O4N
摩尔质量（g/mol）
147.12926
等电点
3.22
密度（kg/m3）
1.538
熔点
200℃升华，247-249℃分解
解离常数
pK1（-COOH）=2.19；pK2（-COOH）=4.25；pK3（-NH3）=9.67
溶解性
水中溶解度（%）：
0.34（0℃），0.72（20℃），1.51（40℃）2.19（50℃），5.52（75℃），14（100℃）。
在乙醇、丙酮、乙醚中不溶
稳定性
结晶状态稳定
光谱学性质
[α]20D=+31.8o
完成下列信息！
谷氨酸具有哪些性质？
----------------------------------------------------
材料二：
谷氨酸主要用途简介：
（一）食品工业：
谷氨酸钠俗称味精，是重要的鲜味剂，对香味具有增强作用。
（二）日用化妆品：
谷氨酸作为营养药物可用于皮肤和毛发。
N—酰基谷氨酸钠系列产品是由谷氨酸缩合而成的性能优良的阴离子表面活性剂，广泛用于化妆品、香皂、牙膏、香波、泡沫浴液、洗洁净等产品中。
焦谷氨酸钠（味精脱水生成的产物）具有极强的吸湿性，能保持皮肤湿润，防止干燥，并增强皮肤和毛发的柔软和弹力。
日本己有以谷氨酸钠（或谷氨酸）为原料生产的高级人造革、化妆品和洗涤剂等产品。
（三）医药行业：
谷氨酸作有较高的营养价值，医学上主要用于治疗肝性昏迷，还用于改善儿童智力发育。
（四）农业：
谷氨酸与某些激素配合，可制成柑桔增甜剂；还可作为微肥的载体，在氮磷钾基本满足的条件下，作为叶面喷洒的微肥具有投入少、效益高等特点。
谷氨酸钠既是西红柿保护性杀菌剂，又是防治果树腐烂病的特效杀菌剂。
氨基酸铜是目前生产上良好的杀菌剂，有机铜比无机铜的应用效果好。
思考一下：
谷氨酸属于发酵工业产品类型中的哪种？
A微生物菌体B微生物代谢产物C微生物酶制剂
材料三：
谷氨酸生产水平与市场分析
生产水平：
谷氨酸棒状杆菌-生物素敏感型高产菌株：
采用生物素亚适量工艺，发酵32h，产酸达140g/L以上，糖酸转化率达62%以上，国内同类研究的领先水平。
谷氨酸棒状杆菌-谷氨酸温度敏感型突变株：
在最佳发酵条件下，发酵24h，产酸达到160g/L，糖酸转化率达72%，国际同类研究的先进水平。
市场分析：
我国味精工业的产量稳居世界第一位，2007年全国味精产量达190万吨。
味精工厂的味精平均销售价格为7,800元/吨，成本为7,000元/吨。
按照上述产量计算，我国味精工业中纯味精的总产值约150亿元，加上相当于上述总值30%的副产品（主要是饲料蛋白、化肥、液态肥料）的产出，我国味精工业年生产总值约为200亿元人民币。
我国谷氨酸生产具有很大的市场效益，研究谷氨酸生产有重要意义！
相关资料
材料一谷氨酸生产工艺流程
材料二谷氨酸生产菌种
棒状杆菌属：
谷氨酸棒杆菌（Corynebacteriumglutamicum）、乳糖发酵短杆菌（Brevibacteriumlactofermentum）、黄色短杆菌（Brevibacteriumflavum）。
我国使用的生产菌株是北京棒杆菌（Corynebacteriumpekinenesen.sp.）AS1.299、北京棒杆菌D110、钝齿棒杆菌（Corynebacteriumcrenatumn.sp）AS1.542、棒杆菌S-914和黄色短杆菌T6~13（BrevibacteriumflavumT6~13）等。
在己报道的谷氨酸产生菌中，除芽孢杆菌外，虽然它们在分类学上属于不同的属种，但都有一些共同的特点，如菌体为球形、短杆至棒状、无鞭毛、不运动、不形成芽孢、呈革兰氏阳性、需要生物素、在通气条件下培养产生谷氨酸。
材料三谷氨酸发酵的菌种扩大培养
斜面菌种→一级种子培养→二级种子培养→发酵罐
1，斜面菌种的培养
菌种的斜面培养必须有利于菌种生长而不产酸，并要求斜面菌种绝对纯，不得混有任何杂菌和噬菌体，培养条件应有利于菌种繁殖，培养基以多含有机氮而不含或少含糖为原则。
（1）斜面培养基组成
葡萄糖0.1%，蛋白胨1.0%，牛肉膏1.0%，氯化钠0.5%，琼脂2.0%，pH7.0～7.2（传代和保藏斜面不加葡萄糖）。
（2）培养条件
33～34℃，培养18～24h。
2，一级种子培养（摇瓶培养）
一级种子培养的目的在于大量繁殖活力强的菌体，培养基组成应以少含糖分，多含有机氮为主，培养条件从而有利于长菌。
（1）培养基组成
葡萄糖2.5%，尿素0.5%，硫酸镁0.04%，磷酸氢二钾0.1%，玉米浆2.5%，pH7.0。
（2）培养条件
用1000mL三角瓶装入培养基200mI或者500ml三角瓶装入100ml培养基，灭菌后，置于往复式摇床上振荡培养12h，设置摇床转速100rpm，培养温度33～34℃。
（3）一级种子质量要求
种龄：
12h，pH值：
6.4±0.1
光密度：
净增OD值0.5以上
残糖：
0.5％以下无菌检查：
（-）
噬菌体检查：
（-）
镜检：
菌体生长均匀、粗壮，排列整齐
革兰氏阳性反应。
3，二级种子培养
为了获得发酵所需要的足够数量的菌体，在一级种子培养的基础上进而扩大到种子罐的二级种子培养。
种子罐容积大小取决于发酵罐大小和种量比例。
（1）培养基组成
培养基组成（%）
T6-13
B9
T738
AS1.299
水解糖
玉米浆
磷酸氢二钾
硫酸镁
尿素
Fe++（ppm）
Mn++（ppm）
pH
2.5
2.5-3.5
0.15
0.04
0.4
2
2
6.8-7.0
2.5
2.5-3.5
0.15
0.04
0.4
2
2
6.8-7.0
2.5
2.5-3.5
0.2
0.05
0.5
2
2
7.0
2.5
2.5
0.1
0.04
0.5
2
2
6.5-6.8
（2）培养条件
接种量：
0.8~1.0％
培养温度：
32~34℃
培养时间：
7~8h
通风量：
50L种子罐1:
0.5
搅拌转速340r/min；
250L种子罐1:
0.3
搅拌转速300r/min
500L种子罐1:
0.25
搅拌转速230r/min
（3）二级种子的质量要求
种龄：
7~8h
pH：
7.2左右
OD值净增0.5左右
无菌检查（-）
噬菌体检查（-）
材料四无菌操作接种技术
微生物接种技术是进行微生物实验和相关研究的基本操作技能。
无菌操作是微生物接种技术的关键。
因实验目的、培养基种类及实验器皿等不同，所用接种方法不尽相同。
斜面接种、液体接种、固体接种和穿刺接种操作均以获得生长良好的纯种微生物为目的。
因此，接种必须在一个无杂菌污染的环境中进行严格的无菌操作。
由于接种目的不同，采用的接种工具也有区别，如固体斜面培养体转接时用接种环；穿刺接种时用接种针，液体转接用移液管等。
一、实验材料
1、超净工作台，振荡培养箱。
2、接种环、无菌吸管、酒精灯。
3、种子培养基（上次实验配制的）。
4、斜面菌种。
二、方法步骤
（一）接种的操作
1、斜面接种
（1）操作前，先用75%酒精擦手，待酒精挥发后点燃酒精灯。
（2）将斜面菌种握在左手大拇指和其它四指之间，使斜面和有菌种的一面向上，并处于水平位置。
（3）先将菌种和斜面的棉塞旋转一下，以便接种时便于拔出。
（4）左手拿接种环（如握钢笔一样），以火焰上先将接种环端烧红灭菌，然后将有可能伸入试管其余部位也过火灭菌。
（5）用右手的无名指、小指和手掌将菌种管和待接斜面试管的棉花塞或试管帽同时拔出，然后让试管口缓缓过火灭菌（切勿烧过烫）。
（6）将灼烧过的接种环伸入菌种管内，接种环在试管内壁或未长菌苔的培养基上接触一下，让其充分冷却，然后轻轻刮取少许菌苔，再从菌种管内抽出接种环。
（7）迅速将沾有菌种的接种环伸入另一支待接斜面试管。
从斜面底部向上作“Z”形来回密集划线。
有时也可用接种针仅在培养基的中央拉一条线来作斜面接种，以便观察菌种的生长特点。
（8）接种完毕后抽出接种环灼烧管口，塞上棉塞。
（9）将接种环烧红灭菌。
放下接种环，再将棉花塞旋紧。
（二）液体接种
（1）由斜面培养基接入液体培养基：
①操作前，先用75%酒精擦手，待酒精挥发后点燃酒精灯。
②将斜面菌种握在左手大拇指和其它四指之间，使斜面和有菌种的一面向上，并处于水平位置。
③先将菌种和斜面的棉塞旋转一下，以便接种时便于拔出。
④左手拿接种环（如握钢笔一样），以火焰上先将接种环端烧红灭菌，然后将有可能伸入试管其余部位也过火灭菌。
⑤将灼烧过的接种环伸入菌种管内，接种环在试管内壁或未长菌苔的培养基上接触一下，让其充分冷却，然后轻轻刮取少许菌苔，再从菌种管内抽出接种环。
⑥迅速将沾有菌种的接种环伸入液体种子培养基中，摇匀即可。
⑦接种完毕后抽出接种环，灼烧斜面菌种管口，塞上棉塞。
⑧将接种环烧红灭菌。
放下接种环。
但使试管口向上斜，以免培养液流出接入菌体后，使接种环和管内壁磨擦几下以利洗下环上菌体。
接种后塞好棉塞将试管在手掌中轻轻敲打，使菌体充分分散。
（2）由液体培养基接种液体培养基：
菌种是液体时，接处除用接种环外尚用无菌吸管或滴管。
接种时只需在火焰旁拔出棉塞，将管口通过火焰,用无菌吸管吸取菌液注入培养液内，摇匀即可。
材料五谷氨酸发酵工艺控制
谷氨酸发酵是典型的代谢控制发酵，环境条件对谷氨酸发酵具有重要的影响，控制最适宜的环境条件是提高发酵产率的重要条件。
（1）碳源：
目前使用的谷氨酸生产菌均不能利用淀粉，只能利用葡萄糖、果糖等，有些菌种还能利用醋酸、正烷烃等做碳源。
在一定的范围内，谷氨酸产量随葡萄糖浓度的增加而增加，但若葡萄糖浓度过高，由于渗透压过大，则对菌体的生长很不利，谷氨酸对糖的转化率降低。
国内谷氨酸发酵糖浓度为125～150g/L，但一般采用流加糖工艺。
（2）氮源：
常见无机氮源：
尿素，液氨，碳酸氢铵。
常见有机碳源：
玉米浆，豆浓，糖蜜。
当氮源的浓度过低时会使菌体细胞营养过度贫乏形成“生理饥饿”，影响菌体增殖和代谢，导致产酸率低。
随着玉米浆的浓度增高，菌体大量增殖使谷氨酸非积累型细胞增多，同时又因生物素过量使代谢合成磷脂增多，导致细胞膜增厚不利于谷氨酸的分泌造成谷氨酸产量下降。
碳氮比一般控制在100：
15-30。
（3）磷：
当磷浓度过高时，很容易发生发酵转换，转向合成缬氨酸；但磷浓度过低，则菌体生长不好，不利于高产酸。
（4）生物素：
随着生物素添加量的不断增加，发酵产酸先增大后减小。
当生物素过量时酵解途径中的丙酮酸转变为乳酸,同时也使异柠檬酸转变为琥珀酸,菌体生长繁殖快,同时生物素又促进菌体细胞膜通透性障碍物的生物合成,使菌体不能及时将细胞内的谷氨酸排出,谷氨酸合成途径受阻,发酵液中由菌种细胞排出的谷氨酸仅能占氨基酸总量的12%；生物素亚适量时，菌体代谢失调,细胞膜通透性增强,细胞内的谷氨酸能及时排出,有利于谷氨酸的积累,发酵液内由菌体细胞排除谷氨酸能达总氨基酸的92%左右。
因此,要根据发酵时期来控制生物素的含量。
生产中可以采取在发酵后期补加生物素的方法提高谷氨酸的合成。
（5）溶氧：
谷氨酸发酵是典型好氧发酵，溶解氧对谷氨酸产生菌种子培养影响很大。
溶解氧过低，菌体呼吸受到抑制，从而抑制生长，引起乳酸等副产物的积累；但是并非溶氧越高越好，当溶氧满足菌的需氧量后继续升高，不但会造成浪费还会由于高氧水平抑制菌体生长和谷氨酸的生成。
（6）pH：
在谷氨酸发酵过程中，随着谷氨酸的不断生成，发酵液的pH值不断的减小，对谷氨酸菌产生抑制，为了维持发酵的最佳条件，pH：
前期pH（7.5～8.0），中后期pH7.0～7.6。
采用流加尿素和液氨（现在大多采用的是液氨）的方法。
发酵法在微生物发酵阶段，主要是获得谷氨酸，在氨过量存在的情况下以谷氨酸铵的形式存在，所以从发酵罐出来的是谷氨酸铵，而不是我们所希望的谷氨酸。
（7）温度：
在整个流加发酵中，并非一定要控制恒温培养，因为菌体最适生长温度不一定是菌体积累代谢终产物的最佳温度。
谷氨酸菌体最适生长温度为30-32℃；谷氨酸最适合成温度为34～37℃；发酵初期温度提高可以缩短细胞生长时间，减少发酵总时间；发酵中、后期的菌体活力较强，适当提高发酵温度有利于细胞膜渗透性和产酸，故温度应控制稍高一些。
（8）泡沫：
谷氨酸发酵是好气性发酵,因通风和搅拌产生泡沫是正常的,但泡沫过多会带来一系列问题:
（1）泡沫形成泡盖时,代谢产生的气体不能及时排出,妨碍菌体呼吸作用,影响菌体的正常代谢；
（2）泡沫过多,发酵液会外溢,造成浪费和污染;（3）泡沫过多,易冲上罐顶,造成染菌。
因此，在谷氨酸的发酵过程中控制好过多的泡沫是发酵成败的关键。
谷氨酸发酵过程中，生产菌种的特性、生长素、发酵温度、pH值、溶氧和发酵产生的泡沫都是影响谷氨酸积累的主要因素。
在实际生产中，只有针对存在的问题，严格控制工艺条件,才能达到稳产、高产的目的。
材料六谷氨酸发酵过程中参数的测定
一.谷氨酸的检测
1.原理：
茚三酮溶液与氨基酸共热，生成氨。
氨与茚三酮和还原性茚三酮反应，生成紫色化合物。
该化合物颜色的深浅与氨基酸的含量成正比，可通过测定570nm处的光密度，测定氨基酸的含量。
2.试剂与材料
（1）标准氨基酸溶液：
配制成0.3mmol/L溶液。
（2）pH5.4，2mol/L醋酸缓冲液：
量取86mL2mol/L醋酸钠溶液，加入14mL2mol/L乙酸混合而成。
用pH检查校正。
（3）茚三酮显色液：
称取85mg茚三酮和15mg还原茚三酮，用10mL乙二醇甲醚溶解。
茚三酮若变为微红色，则需按下法重结晶：
称取5g茚三酮溶于15～25mL热蒸馏水中，加入0.25g活性炭，轻轻搅拌。
加热30min后趁热过滤，滤液放入冰箱过夜。
次日析出黄白色结晶，抽滤，用1mL冷水洗涤结晶，置干燥器干燥后，装入棕色玻璃瓶保存。
还原型茚三酮按下法制备：
称取5g茚三酮，用125mL沸蒸馏水溶解，得黄色溶液。
将5g维生素C用250mL温蒸馏水溶解，一边搅拌一边将维生素C溶液滴加到茚三酮溶液中，不断出现沉淀。
滴定后继续搅拌15min，然后在冰箱内冷却到4℃，过滤、沉淀用冷水洗涤3次，置五氧化二磷真空干燥器中干燥保存，备用。
乙二醇甲醚若放置太久，需用下法除去过氧化物：
在500mL乙二醇甲醚中加入5g硫酸亚铁，振荡1～2h，过滤除去硫酸亚铁，再经蒸馏，收集沸点为121～125℃的馏分，为无色透明的乙二醇甲醚。
（4）60％乙醇。
（5）样品液：
每毫升含0.5～50μg氨基酸。
（6）分光光度计。
（7）水浴锅。
3.操作步骤
①．标准曲线的制作
分别取0.3mmol/L的标准氨基酸溶液0，0.2，0.4，0.6，0.8，1.0mL于试管中，用水补足至1mL。
各加入1mLpH5.4，2mol/L醋酸缓冲液；再加入1mL茚三酮显色液，充分混匀后，盖住试管口，在100℃水浴中加热15min，用自来水冷却。
放置5min后，加入3mL60％乙醇稀释，充分摇匀，用分光光度计测定OD570nm。
（脯氨酸和羟脯氨酸与茚三酮反应呈黄色，应测定OD440nm）。
以OD570nm为纵坐标，氨基酸含量为横坐标，绘制标准曲线。
②．氨基酸样品的测定
取样品液1mL，加入pH5.4，2mol/L醋酸缓冲液1mL和茚三酮显色液1mL，混匀后于100℃沸水浴中加热15min，自来水冷却。
放置5min后，加3mL60％乙醇稀释，摇匀后测定OD570nm（生成的颜色在60min内稳定）。
4.将样品测定的OD570nm与标准曲线对照，可确定样品中氨基酸含量。
二、还原糖的测定（用3，5－二硝基水杨酸比色法）
1.原理
还原糖的测定是生化分析中常做的项目，最简单的方式是分光光度计法。
在碱性条件下，显色剂DNS与还原糖供热后被还原成红棕色氨基化合物，在一定范围内还原糖的量与显色后溶液的颜色强度成比例关系，因此可用分光光度法测定样品中还原糖的含量。
2.步骤：
样品稀释1000倍取1ml+DNS1mL沸水浴5min
梯度标样配制
520nm测吸光度定容至10ml
生物传感器测定还原糖含量的方法也非常简便快捷。
三、革兰氏染色
革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤，
具体操作方法是：
1）涂片固定。
2）草酸铵结晶紫初染1分钟。
3）自来水冲洗。
4）加碘液覆盖涂面染1分钟。
5）水洗，用吸水纸吸去水分。
6）加95%酒精数滴，并轻轻摇动进行脱色，30秒后水洗，吸去水分。
7）番红染色液（稀）染10秒钟后，自来水冲洗。
干燥，镜检。
染色的结果：
革兰氏正反应菌体都呈紫色，负反应菌体都呈红色。
四、生物素的检测
采用高效液相色谱法测定发酵液中生物素的含量。
色谱柱为SymmetryC18,流动相为V（甲醇）:
V（pH2.5磷酸缓冲溶液）=14:
86,检测波长为210nm,柱温为35℃。
结果表明,样品进样量在5-150μg/mL范围内线性关系良好,加样回收率在95%以上,相对标准偏差RSD为6.6%,最低检测限为0.01μg/mL。
该方法简便、快捷、准确、重现性好,可用于发酵液中生物素的含量测定。
五、菌浓的测定：
吸取样品菌液，用蒸馏水稀释一定倍数，以蒸馏水作为空白对照，采用752分光光度计于1cm光程测定OD620nm。
六、谷氨酸发酵液染菌（噬菌体）的原因、危害及防治
1.发酵产物是某一种微生物或几种微生物在培养基中培养时产生的，如果在发酵时夹杂有其他微生物，可引起下列的危害：
（1）产生菌和杂菌同时在培养基中生长，结果使生产菌丧失了生产能力；杂菌的生长速度有时会比产生菌生长得更快，结果使发酵器中以杂菌为主了（尤其是在连续发酵过程中）
（2）杂菌会污染最终产品，如生产单细胞蛋白质时，从发酵液中分离出的细胞夹杂有杂菌；
（3）杂菌本身和其所产生的物质，都可以使产物提取难度加大；
（4）杂菌降解所需要的产物。
如抗生素发酵时，污染细菌，有些细菌对抗生素有抗性，常见的抗性机制是降解抗生素。
如能产生β-内酰胺酶的细菌能降解β-内酰胺类抗生素。
（5）发酵时如污染噬菌体，可使产生菌发生溶菌现象。
2.染菌的预防
1）防止种子带菌
种子带菌的原因：
灭菌不彻底（如假压）；
移种污染；
养或保藏过程中污染；
无菌室管理不善；
制备壮、纯、量足的种子是发酵成功的关键，为此：
强化无菌室的管理（使用前灭菌）；
严格接种、移种的无菌操作；
在扩培各阶段定时取样做无菌实验；
严格接种管灭菌，并用无菌空气保压；
2）防止空气引起的染菌
流程或设备设计的合理性；
过虑介质选用、装填；
过虑介质的灭菌和管理；
空气冷却器的列管穿孔泄露，冷却水会渗入到空气中，造成染菌。
棉花-活性炭过滤器长期使用后变薄的一边失效。
过滤介质受潮失效：
过滤器灭菌完毕应立即缓慢通入压缩空气，将水分吹干。
超细纤维纸作过滤介质，灭菌时必须将管道中冷凝水放干净，以免介质受潮失效。
在生产实践中，空气管道大多与其它物料管道相接，要装上止逆阀防止其它物料窜入空气管道污染过滤器，导致过滤介质失效。
3）防止培养基灭菌不彻底
培养基灭菌方法——高压蒸汽灭菌
分批灭菌121℃，30分钟
连续灭菌罐温125－130℃，30－45S
让我们回答问题吧！
1.谷氨酸棒杆菌摇瓶培养的目的？
2.谷氨酸棒杆菌种子培养条件？
3.谷氨酸棒杆菌种子扩大培养流程？
知识拓展：
1.实验室种子制备方法？
2.工业生产种子制备方法？
谷氨酸发酵种子扩大培养
学习情境设计方案
学习领域课程名称
谷氨酸发酵生产技术
总学时
72
学习子情境名称
谷氨酸发酵种子扩大培养
使用学时
6
学习目标︰
1.知识目标
●掌握种子扩大培养一般流程
●掌握实验室种子的制备方法
●掌握车间种子的制备方法
●掌握无菌接种操作技术
●掌握摇瓶培养技术
2.能力目标
①专业能力
●能够熟练进行无菌接种操作
●能够熟练使用超净工作台
●能够熟练使用振荡培养箱
●能够熟练进行摇瓶培养操作
②方法能力
●查阅资料及阅读操作标准的能力
●自主学习新技术、新知识的能力
●动手实践能力
●分析问题、解决问题的能力
●数据记录、处理分析能力
③社会能力
●团队工作能力。
●与人沟通能力。
●工作安全和保护能力
3.素质目标
●培养规范意识
●树立严谨、科学的态度
●加强安全意识
教学内容及组织过程
教学方法
●种子扩大培养的目的和意义
●实验室种子制备方法
●车间种子的制备方法
●无菌操作接种技术
●摇瓶培养技术
引导教学法，多媒体教学法
任务组织
（30分钟）
分配任务（发放生产指令），发放引导文；
组织几个学习小组；每组各选出一名组长
讲述法、引导教学法
任务策划
（60分钟）
根据各自学习，通过讨论等方式，初步确定谷氨酸无菌操作接种和摇瓶培养的方案。
教师指导下完善和细化方案。
讨论法、可视化报告法、互动交流教学法
产品试制
（150分钟）
1.根据实验清单清点仪器及其他用具来保证实施顺畅，做好生产记录。
2.检查超净工作台、振荡培养箱等仪器的正常使用，并做好生产记录。
3.每个学习小组独立完成从斜面种子无菌操作接种至液体培养基，并收拾工作台面。
4.每个学习小组独立完成设置振荡培养箱的温度、转速，开启培养箱的操作。
5.建立经验交流制度：
每完成一次学习任务，同学及小组间可进行经验交流，教师可针对共性问题在课堂上组织讨论。
实践教学法，引导教学法，示范教学法
任务评价
（30分钟）
各组组长综合评价小组成员在任务完成中的表现，同时总结任务完成过程中所欠缺和需要改善的方面；
各组成员对任务的组织、策划、实施过程进行自评与互评
教师就各组在不同操作过程中的表现情况进行评价
教师根据学生反馈提出问题，学生通过讨论方式尝试给出解决方法，教师总结归纳解决方法。
交互评价法、旋转交换讨论法、教师归纳法
教学环境与资源：
1.生物发酵实训室
2.模仿仿真生物实训室
3.校级精品课网站资源
教师知识与能力要求：
●具有发酵工程及相关专业的专业背景；
●取得发酵高级工资格；
●具备熟练的无菌操作接种技术；
●具备熟练的摇瓶培养操作技术；
●具有观察力及课堂的把控能力；
●具有与学生合作，沟通的能力。
学生知识与能力准备：
●掌握微生物基本操作技术；
●具备查阅资料等基本技能；
●具备阅读和学习仪器使用说明书；
●具备一定的自学能力和分析问题能力。
成果形式：
液体种子培养液。
考核评价：
评价方式：
过程性考核评价
作业考核
评价内
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