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考研试题汇总
北京大学1991年攻读硕士学位研究生入学试题生物化学
一．名词解释
1.拼接体2.复制子3.反馈调节4.别构效应5.抗体酶
二．英译汉
1.THF2.ddTPP3.ACTH4.Hbs5.tRNAm6.micRNA7.ACP8.NADPH9.ΔGo'10.Cot1/2
三．填空
1.NAD+和NADP+还原时在________增加一个吸收峰.
2.常用的DNA超螺旋结构的嵌合剂是________
3.在癌变过程中同工酶谱发生________
4.哺乳动物的必须脂肪酸为________和________
5.某些蛋白质前体都具有它的________肽,它们大都相当于________左右氨基酸的长度.残基侧链一般是________,位于肽链的________末端.
6.糖蛋白中糖基与蛋白质肽链之间可通过酰糖苷键相结合,即________和________
7.DNA序列的末端终止法所用的工具酶是________
8.E.ColiRNA聚合酶的亚基组成为________,没有________亚基的酶称为核心酶,该亚基的功能为________
9．线粒体DNA的复制为________方式,大肠杆菌染色体的复制为________方式,ΦX174环状染色体和噬菌体λDNA后期复制为________方式,真核生物染色体DNA复制为________方式
10．呼吸链电子传递速度受________浓度控制的现象称为________
11．胆固醇合成的限速酶是________,________浓度升高其活性下降
12．嘧啶环由________和________合成的
13．丙酮脱氢酶系统受________和________.________三种调节控制
14．神经递质5-羟色胺是由________衍生而成
15．乙酰辅酶A进入三羧酸循环,还是形成酮体,由细胞中________浓度决定
16．生物固氮是微生物利用________转变成氨的作用
四．是非题
1,编码区的翻译效率彼此不同（）
2,酶的Kcat型抑制剂比Ks型抑制剂专一性更强（）
3,紫外线照射可使DNA互补双链间形成T^T（）
4,一个氨基酸残基就是一个肽单元（）
5,DNA复制需要RNA引物,RNA复制则不需要引物（）
6,蛋白质进化过程中构象是易变的（）
7,由于遗传的密码兼并性,一个氨基酸可以有几种tRNA,但常只有一种氨酰-tRNA合成酶（）
8,蛋白质在热力学上最稳定的构象是自由能最低的结构（）
9,当一种大肠杆菌突变型为DNA聚合酶III的3'-5'外切酶缺陷时,该突变型表现的特征为对紫外线敏感（）
10,在酸性条件下,DNA分子上的嘌呤不稳定,易被水解下来（）
11,严重糖尿病患者因其糖异生作用加强血酮症（）
12,杀鼠药氟乙酸的毒性是由于其抑制了顺乌头酸酶从而阻断了三羧酸循环（）
13,无糖膳食中用含有奇数碳脂肪酸比含有偶数脂肪酸作为食物更好（）
14,高胆固醇血患者因服用β-谷固醇而引起血浆胆固醇水平升高,增加动脉硬化危险（）
15,若amytal和抗霉素A阻断呼吸链的抑制百分数相同,amytal的毒性更大（）
五,分析与计算
1,当谷氨酸C3上标记C14,氨基标记15N,在肝脏中氧化降解,同位素将出现在下列代谢物的哪个原子上,
（1）,琥珀酸,
（2）,天冬氨酸,（3）,精氨酸,（4）,尿素
2,今有以下四种蛋白质的混合物:
（1）分子量为15,000,pI=10；
（2）,分子量为62,000,pI=4；（3）,分子量为28,000,pI=8；（4）,分子量为9,000,pI=6；若不考虑其它因素,当（A）用CM-纤维素层析柱分离时,（B）用SephadexG50凝胶层析柱分离时,试写出这些蛋白的洗脱顺序
3,在以下修饰碱基中,何者在形成双链时氢键结合的性质不同于和它相关的普通碱基
（1）2-甲基腺嘌呤
（2）5-甲基胞嘧啶（3）5-羟甲基胞嘧啶（4）1-甲基鸟嘌呤
4,假定下面的DNA双链分子是从右向左进行转录,写出RNA转录产物的序列
5'----ATTCGCTTAAGCAA----3'
3'----TAAGCGAATTCGTT----5'
5,某酶制剂的比活力为42单位/mg蛋白质,每ml含12mg蛋白质,
（1）计算1ml反应液中含5μl酶制剂时的反应初速度
（2）若1ml反应液内含5μl酶制剂,在10分钟内消耗底物多少?
为保证测定酶的初速度,所需要的最低底物浓度是多少?
6,有一酶分子使其变性后,用溴化氰降解,在降解产物种得到一个未知氨基酸顺序的九肽,试根据以下实验结果,推断出此九肽的氨基酸顺序
（1）氨基酸分析表明,它含有Ala,Arg,Cys,Glu,Lys,Met,Pro,Phe2,
（2）用Edman法降解得到一个Pro的衍生物
（3）用胰蛋白酶水解得到一个游离Arg,一个二肽和一个六肽,此六肽在PH6.4时呈电中性状态
（4）用胰凝乳蛋白酶降解得到一个二肽,一个三肽和一个四肽
A,二肽在PH6.4时呈负电荷
B,分析三肽发现里面含有硫
C,在PH6.4时分析四肽，静电荷为+2，在280nm分析表明不含有芳香氨基酸
六．第一题非生化专业，第二题生化专业。
（一）1．如何判明DNA制剂的纯度和是否为天然双链分子
2．如果细菌环状染色体的复制是双向的，并且从固定的复制起点开始，每个复制叉以16um
/min的速度移动，细菌染色体长1280um，完成整个染色体复制所需的时间是多少？
当细菌在营养丰富的培养基中每20分钟分裂一次，也就是说第一轮复制尚未完成就开始第二轮复制，此时染色体有几个复制叉？
（二）1．利用标记的16SrRNA和未标记的细菌DNA进行分子表明，在饱和时100ugDNA能结合0.071ug的16SrRNA（分子量为5.3x105）,该细菌Cell含有2.6x105道儿顿DNA.试计算每个细菌基因组所含16SrRNA基因的拷贝数.
2.用琼脂糖凝胶电泳分离制备质粒,分出三条带。
请设计实验，判断何者是开环DNA，何者为线形DNA，何者为闭环环DNA。
参考答案：
一、
1.拼接体：
也叫剪接体，由mRNA前体及多种其他组分如细胞核小分子RNA（SnRNA）和多种蛋白因子组成。
真核mRNA前体的剪接是在剪接体形成之后进行的。
2.复制子：
也叫复制单位。
从一个复制起点到一个复制终点所包括的DNA序列。
3.反馈调节：
一种作用的结果或起因对这种作用的影响叫反馈，常见的反馈是作用结果对这一作用的抑制---负反馈。
4.别构效应：
也叫变构效应。
酶和蛋白质分子发挥生物活性时具有的一种构象变化，常见于寡聚酶或蛋白质。
由于一个或多个亚基受调节物作用构象改变，进而使其余亚基构象改变，别构效应是可逆的。
5.抗体酶：
具有酶活性的抗体。
二、
1.THF四氢叶酸；2.ddTPP2’,3’-双脱氧核苷三磷酸；3.ACTH促肾上腺激素
4.Hbs镰刀形血红蛋白；5.tRNAm蛋氨酸tRNA；6.micRNA干扰mRNA的互补RNA
7.ACP脂酰载体蛋白；8.NADPH还原态尼克酰胺二核苷酸磷酸9.ΔGo'标准自由能变化；
10.Cot1/2表示复性一半时，DNA单链初始浓度与时间的乘积
三、
1.340nm；2.溴化乙啶；3.改变；4.亚油酸、亚麻酸；5.信号肽、20个、疏水性、N；
6.O-糖苷键，N-糖苷键；7.Klenow；8.αββ’σ,σ,辨认起始点
9.D-环复制，θ，滚环复制，双向复制；10.ADP，呼吸控制；11.HMG-CoA还原酶，胆固醇
12.氨甲酰磷酸，天冬氨酸；13.产物抑制，核苷酸的反馈调节，可逆磷酸化的共价调节
14.色氨酸；15.草酰乙酸；16.其体内固氮酶系的作用将分子氮
四、
1.√；2.√；3.X；4.X；5.√；6.X；7.√；8.√；9.X；10.√
11.X；12.√；13.√；14.X；15.√
五、
1.15N出现在尿素中，14C出现在琥珀酸中。
2.CM-纤维素是阳离子交换层析树脂，所以A的顺序为2-4-3-1
当用SephadexG50凝胶时，为分子筛层析，分子量大的先下来，B的顺序是2-3-1-4
3.（4）1-甲基鸟嘌呤，鸟嘌呤的第一位引入甲基后，不能和胞嘧啶形成3个氢键了。
4.根据题意，转录模板是上面的那条链，所以RNA转录产物的序列是：
3’-UAAGCGAAUUCGUU-5’
5.
（1）5μl含活力单位：
5*10-3*42*12=2.52单位，初速度为2.52μmol/（ml.min）
（2）10min消耗的底物是10*2.52=25.2μmol/ml，为保证测定酶的初速度，底物消耗要低于5%，25.2*10-3/0.05=0.504，所以最低底物浓度为0.504mol/L.
6．
（1）由CNBr降解，可知C末端是Met；
（2）由Edman法可知N端是Pro；（3）由胰蛋白酶水解得知C端三肽是Lys-Arg-Met；（4）由胰凝乳蛋白酶可知cC端含有Glu，含有S的氨基酸是Cys，该四肽的顺序是Tyr-Arg-Glu-Met。
所以此肽的顺序是：
Pro-Phe-Ala-Cys-Phe-Lys-Arg-Glu-Met
六、第一组：
1.
（1）可以测定该溶液在260nm和280nm处的光吸收，纯DNA的OD260/OD280=1.8，
（2）可进行碱基含量分析，当为双链时A=T，C=G
2.
（1）完成复制所需的时间：
1280/32=40min，
（2）20/40=0.5,说明前一轮复制一半时，有开始新一轮的复制，第二轮的起始会有4个复制叉，所以染色体上有6个复制叉。
第二组：
1.0.071/100=X/（2.6*109）X=0.1846*107
16SrRNA拷贝数=0.1846*107/（503*105）=3048
2.一般情况下超螺旋DNA迁移率快，线性DNA其次，开环DNA最慢。
§北京大学1992年攻读硕士学位研究生入学试题生物化学
一.名词解释
1.ribozyme2.衰减子3.第二信使4.酮体5.钠钾离子泵
二.英译汉
1.DHU2.GHS3.cccDNA4.NADP5.GH6.MSH7.cGMP8.LTR9.ATCase10.PRPP
三填空
1.DNA的合成方向________,RNA的转录方向________,蛋白质合成方向________
2.hnRNA经过RNA拼接过程去掉________留下________
3.原核生物蛋白质合成的起始tRNA是________,它携带的氨基酸是________而真核生物蛋白质合成的起始tRNA是________,它携带的氨基酸是________
4.将重组DNA引入受体细胞这一过程称为________
5.tRNA的二级结构呈________形状,它的3'末端为________,5'末端为________
6.胰岛素受体蛋白存在于________
7.胰凝乳蛋白酶的亲和标记试剂为________,它作用于酶活性中心的________
8.维持蛋白质三级结构最主要的作用是________
9.高等动植物含有一个不饱和键的脂肪酸,其双键位置一般在第________碳原子之间
10性激素与靶细胞受体结合后,进入细胞核与________作用从而调节基因表达
11.维生素D3的活性形式是________
12.纤维素和淀粉分子结构的区别在于,纤维素的葡萄糖分子是以________连接而成,而淀粉是以________连接而成..
13.在脂肪酸生物合成中,酰基的载体为________,在脂肪酸氧化中酰基的载体为________
14.氨基酸代谢的一碳单位由______供给,核苷酸生物合成中的一碳单位由_______供给.
15.糖酵解过程在细胞的________部位进行,TCA循环在细胞的________部位进行,氧化磷酸化在细胞的________部位进行.
四是非题
1.激素鸟二醇的原初作用在细胞核（）
2.在细胞培养物由供氧条件转为厌氧条件时葡萄糖利用速度增加（）
3.氰化物引起缺氧是由于抑制底物磷酸化（）
4.细胞液中脂肪酸的合成是需要线粒体产生乙酸，而乙酸是由乙酰辅酶A将它带出线粒体膜（）
5.所有蛋白质的克分子消光系数都是一样的（）
6.促甲状腺激素是由垂体前叶分泌的,含糖基的单链蛋白质（）
7.抑制剂对酶的抑制作用是酶变性失活的结果.（）
8.糖苷键对碱稳定,而易被酸水解.（）
9.限制性内切酶的生物学作用是分解外源DNA（）
10别构酶的动力学曲线特点是都为S型（）
11.DNA是遗传物质,而RNA不是遗传物质（）
12.双螺旋DNA复制后,子代DNA不含亲代成分（）
13.在蛋白质合成中,起始合成时起始tRNA结合核糖体的A位（）
14.每个原核细胞染色体上只有一个复制起点,而每个真核细胞染色体是有多个复制起点.
15原核生物转录启动子有3个重要部位:
-10区,-35区,SD序列（）
五．分析计算
1．含有一个九肽，分别用
（1）胰蛋白酶
（2）胰凝乳蛋白酶（3）羧肽酶（4）溴化氰处理，试标出对肽链的作用部位LeuMetArgProAluLysTrySenTry
2.一个大肠杆菌中含有106个蛋白分子,假设每个蛋白分子,平均分子量为40000,并且所有分子都处于α螺旋,试计算大肠杆菌中蛋白质肽链的长度.
3.1ug纯酶（分子量为92000）.在最适条件下催化反应速度为0.5umol/min,计算
（1）酶的比活力（单位/蛋白质）
（2）转换数
4.请分别指出
（1）DNA复制
（2）RNA复制（3）蛋白质合成三个过程的忠实性如何保持的
5.用纯化的脂肪酸合成酶进行脂肪酸的合成
（1）假设底物乙酰辅酶A的甲基为3H所标记,那么形成的软脂酸（16:
0）中哪些H原子将被3H标记.
（2）假设用底物为丙二酰辅酶A,其两个H都被标记呢?
六.附加题
1.E.Coli的一种体外蛋白合成系统中,由多聚核苷酸AUGUUUUUUUUUUUU指导fMETPhePhePhePhe合成,在某种抗生素存在下,这个多聚物只能指导合成fMETPhe,试问1,这种抗生素抑制了多肽合成的那一步.2,设有受抑制的寡肽或二肽，在合成终止时与什么tRNA相连？
2.假定有一只体重为250克的大白鼠,其呼吸强度为500vlO2/g体重/小时，请计算24小时能产生多少克ATP（ATP分子量为507）
参考答案
一、
1.核酶：
具有酶活性的RNA。
2.衰减子：
大肠杆菌色氨酸操纵子中一段DNA序列，既是终止信号，也是调节信号，只有当缺少色氨酸时，该操纵子中的结构基因才能通过衰减子而进行转录。
3.第二信使：
激素和细胞膜受体结合，受体将激素信号通过细胞内的物质如cAMP、cGMP等传递到细胞内部，信号逐渐放大，引起细胞内反应。
这些传递激素信号的物质如cAMP、cGMP称为第二信使。
4.酮体：
乙酰乙酸、β-羟基丁酸和丙酮3种物质的总称，酮体过多会导致中毒。
5.钠钾离子泵：
是跨膜转运钠钾离子的膜蛋白，需要ATP，是四聚体蛋白质。
二、
1.DHU二氢尿嘧啶；2.GHS还原型谷胱甘肽；3.cccDNA共价闭合环状DNA
4.NADP尼克酰胺二核苷酸磷酸；5.GH生长激素；6.MSH促黑素细胞激素
7.cGMP环鸟苷酸；8.LTR长末端重复序列
9.ATCase天冬氨酸转氨甲酰酶10.PRPP1’焦磷酸-5’磷酸核糖
三、
1.5’-3’5’-3’N-C；2.内含子，外显子；3.fMet，fMet，tRNAMet，Met
4.转化/转染；5.三叶草，CCA，多数为G；6.细胞质膜；
7.DFP（二异丙基氟磷酸），Ser残基；8.疏水作用力；9.9～10；10.染色体
11.1，25-二羟D3；12.β-1，4-糖苷键，α-1，4-糖苷键；13.ACP，CoA-SH；
14.S-腺苷蛋氨酸，四氢叶酸；15.细胞浆，线粒体，线粒体内膜，叶绿体内膜
四、
1.X；2.X；3.X；4.√；5.X；6.X；7.X；8.√；9.√；10.X；
11.X；12.X；13.X；14.√；15.X
五、
1.LeuMet——Arg————ProAlaLys————Tyr————Ser————--Arg
溴化氰胰蛋白酶胰蛋白酶胰凝乳蛋白酶羧肽酶B
2.此蛋白质残基数为：
4000/110=363.6，以螺旋存在时的长度为：
363.6*0.15=54.54nm，106个蛋白质的总长度为：
54.54nm*106=5.5cm
3.已知此酶1μg催化反应速度0.5μmol/分，活力单位是0.5U，比活力是0.5U/1μg,
0.5*103U/mg，转换数是0.5/60=0.0083μmol/秒。
4.
（1）DNA复制的忠实性保持机制是：
以母链为模板，通过碱基互补配对合成新的DNA，修复机制有光修复、切除修复、重组修复等。
（2）RNA合成的忠实性保持机制是：
以DNA的一条链为模板，按照碱基互补配对进行转录，顺式作用元件的作用，转录后加工中酶的作用。
（3）蛋白质合成的忠实性保持机制是：
mRNA自身序列的稳定性（mG帽子、poly-A结构等），密码子和反密码子通过氢键配对，氨酰-tRNA合成酶的选择性，副密码子的作用，翻译后运输、分泌、加工中信号肽、导肽及各种酶的作用。
5.
（1）脂肪酸从左侧开始，奇数位上的碳原子带有3H.
（2）标记物为OOC-C3H2-COSCoA，合成的软脂酸有14个3H，3H在奇数位上。
第一组
1.
（1）抑制多肽合成移位这一步骤。
（2）和Phe-tRNA相连，在肽链合成终止前，肽链和最后一个加入的tRNA相连，当tRNA和肽链分离后才能离开核糖体。
2.500*250*24*3/（22.4*106）=0.402mol,507*0.402=203.71
§北京大学1998年攻读硕士学位研究生入学试题生物化学
一，填空题（应该是选择题，但是原题没有收录选择项，只有正确答案）。
1，用茚三酮试剂确定氨基酸是靠它与下面（）功能集团起作用。
2，影响酶催化效率的因素是（）。
3，在适当条件下，盐酸胍变性球蛋白的可逆性，可证明（）。
4，蛋白质中形成肽键平面的原因是（）。
5，三个氨基酸（Asp,Leu,Lys）的混合物，经过一个sulphonotedpolysturene阳离子交换树脂粒，用PH5的缓冲液洗脱，洗脱液中氨基酸出现的顺序是（）。
6，溶液A的PH为7.0，溶液B的PH为6.0的两个溶液的体积相等，则其H+的含量（）。
7，0.01N醋酸的PH为3.4，0.01NHCl的PH是2，用0.01NNaOH分别去中和15mL的以上醋酸和盐酸，试问需用（）NaOH。
8,酶活性的国际单位（I.U.）定义为在30。
C下，将底物转化为产物，在（）速度时的酶量。
9，在pH5.0的经DEAE-纤维素柱纯化酶，此酶的比活从2.2U/mg提高到303U/mg，表明（）
10，10-5毫克分子的乳酸脱氢酶，每秒催化10微克分子丙酮酸的生成，此酶的turnovernumber是（）。
11，胰凝乳蛋白酶中电荷延迟系统是指（）。
12，在整体代谢的调节环节调节中，别构效应可调节（）。
13，A因子存在时，一个酶的初速度对底物浓度曲线为S形，而当A因子浓度增高时，此线左移，说明A因子是（）。
14，一个酶的Km为3X10-5M，Vmax为转化8000克分子底物/分/克分子酶，底物浓度为3X10-5M时，初速度是（）
15，在一个2底物-2产物酶反应系统中，对其中一个底物的Km值是（）。
16，一氧化碳有毒是因为（）。
17，胶原蛋白的特性是（）。
18，α螺旋与β折叠的区别（）。
19，促进酶分子催化反应的机制是（）。
20，酶可以改变（）。
21，转化丁二酸根为反丁二烯酸根所需要的酶是（）。
22，激素17β-雌二醇发挥效应的位置在（）。
23，3'-5'cAMP的性质是（）。
24，谷氨酸+丙酮酸=α酮戊二酸+丙氨酸，需要的辅酶为（）。
25，细胞液中脂肪酸的合成需要线粒体产生乙酸，乙酸是由（）带出线粒体膜。
26，氨对哺乳类细胞有害是因为（）。
27，U第一位上N原子来源是（）。
28，嘌呤生物合成关键步骤是（）。
29，当一个蛋白质样品不纯时，要测定它的性质，可用的方法有（）。
30，在同一细胞中，RNA和DNA杂交性质是（）。
31，DNA的Maxam-Gilbert化学法序列分析对底物的要求是（）。
32，单链DNA分子溶液形成双链的复性过程是（）级反应。
33，真核细胞中的RNA聚合酶III负责（）的合成。
34，DNA和RNA的差别在于（）。
35，一个操纵子的启动区产生一个降低的突变后会（）。
36，一个β珠蛋白mRNA的cDNA克隆可以在大肠杆菌中正确的进行肽的生物合成，而染色体基因的克隆不能，这是因为（）。
37，分析了一个细胞中的蛋白质发现其Ile少于正常的情况，这是因为有好多Ile为Val所代替，这可能发生了（）突变。
38，大肠杆菌核糖体的性质（）。
39，许多细胞含有一种酶，可以使DNA上少数C甲基化，产生5'-甲基-C，这种甲基化部位成为CG转变成AG的突变热点，这是因为（）。
40，限制性内切酶的性质（）。
41，DNA生物合成的过程（）。
42，如由5'-脱氧尿嘧啶所引起的突变使一种嘧啶为另一种嘧啶所替换，这种转变叫做（）。
43，假如一个mRNA样品，其G占29%，则C为（）。
44，在大肠杆菌中合成蛋白启始过程（）反应是必需的。
45，遗传密码的兼并性是指（）。
二，填空
1，蛋白质的最低自由能构型经常为________残基之间的共价交连而加强。
2，非极性环境中，例如膜的内部，蛋白质可以折叠成________侧链向外________侧链彼此相互作用。
3，糖原异生受________抑制，被________激活。
4，由于________调控________酶而加速脂肪合成。
5，维生素B12是________，它是________酶的辅基，其作用是________。
6，尿素循环中的调控酶是________，存在于________中，________是此酶的正调节物。
7，由于________酶的遗传缺陷使________在尿中积累，加FeCl3使尿变成橄榄色。
8，由于________酶的遗传缺陷使________在尿中积累，见氧气变成黑色。
9，膳食中________抑制________酶从而影响胆固醇酯的合成。
三，问题
1，一个激素多肽链有29个氨基酸，顺序为Glu,Val,Lys,Asn,Cys,Phe,Arg,Trp,Asp,Leu,
Gly,Ser,Leu,Glu,Ala,Thr,Cys,Arg,His,Met,Asp,Gln,Cys,Tyr,Pro,Gly,Glu,Glu,Lys,
a,若没有二硫键存在，胰蛋白酶水解可有几个肽。
b,在pH7.5时激素净电荷是多少，若pKa值已知。
c,提出一个设计方案证明上述激素有二硫键。
2，为什么SDS电泳中小分子迁移得最快？
3，如何解释酶活性与PH的变化关系，假如其最大活性在pH=4或pH=11时，酶活性可能涉及那些侧链
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