高考复习生物学案 第一章微生物培养技术.docx
《高考复习生物学案 第一章微生物培养技术.docx》由会员分享，可在线阅读，更多相关《高考复习生物学案 第一章微生物培养技术.docx（116页珍藏版）》请在冰豆网上搜索。
高考复习生物学案第一章微生物培养技术
2019-2020年高考复习生物学案第一章微生物培养技术
【课标要求】
进行微生物的分离和培养
【知识梳理】
背景知识
原核类：
包括、、、
一、微生物的类群真核类:
包括、
非细胞类：
包括
二、微生物的培养
概念：
根据微生物和的需要，将各种混合在
1、培养基一起，配制成适合微生物生存的营养基质。
培养基的种类：
固体培养基（加）:
用于微生物的、
按物理性质分为、、等。
液体培养基：
用于。
2、接种：
在平板培养基上接种的方法有、、。
3、纯培养：
通过一定的方法，将从中分离出来，获得，这个过程称为纯培养。
4、培养：
:
大多数微生物适宜生长的温度在之间，实验室中常用
微生物的培养培养微生物。
需要适宜的:
一般细菌适合于环境生长，放线菌适合于环境，而酵母菌和霉菌适合于环境。
5、无菌技术：
泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。
对实验操作的空间、操作者的手进行。
用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行。
为避免周围环境中微生物的污染，实验操作的整个过程应在进行。
灭菌：
是指用杀死内外所有的，包括芽孢和孢子。
消毒：
是指用方法杀死上的和
的。
实践案例：
大肠杆菌的分离和纯培养
配制培养基：
此实验中所用培养基为。
接种：
此实验中的接种方法是。
划线的方法包括和。
培养：
接种完毕，将培养皿，放入培养24小时。
观察记录
纯化培养：
挑取单个大肠杆菌菌落接种，培养，可获得大肠杆菌的纯培养。
如有杂菌，进一步划线挑菌，直至纯化。
探究活动：
1、从豆科植物根瘤中分离和培养根瘤菌
选用比较完整，大而的新鲜作为材料。
2、从酒曲中分离和培养酵母菌：
酒曲中含有、、等大量微生物。
宜选用培养基培养，再用法在培养基上分离培养。
【复习指要】
1、学法指导：
本节课应初步学会用平板划线法分离微生物并得到某种微生物的纯培养。
学会微生物培养的具体操作，并运用所学知识和方法去分离相应的微生物。
本节课的微生物分离的方法和无菌技术的知识应引起重视，在高考选择题和实验题中都有可能体现。
2、疑难解析：
灭菌和消毒：
灭菌是指用强烈的理化因素杀死环境或物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。
消毒一般是用相对温和的理化方法杀死环境或物体上的病原微生物和有害微生物的营养细胞（不包括芽孢和孢子）。
常灼烧灭菌：
将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他金属工具，直接在酒精灯用火焰上灼烧。
（1）灭干热灭菌：
能耐高温的、需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培养皿）等放入
菌干热灭菌箱内在160—170℃加热1—2小时。
方高压蒸汽灭菌：
将培养微生物的培养基放入高压蒸汽灭菌锅内，在压力98~100Kpa,温法度121℃条件下，维持15—30min。
（2）常用的消毒方法有：
煮沸消毒法、射线消毒法和化学药剂消毒法。
纯培养：
既可以把通过一定的方法，将所需要的微生物从混杂的微生物群体中分离出来，获得纯种微生物的过程称为纯培养。
也可以把由一个单细胞繁殖得到的后代称为纯培养。
【典题解析】
1.细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理，这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌（）
A.接种环、手、培养基B.高压锅、手、接种环
C.培养基、手、接种环D.接种环、手、高压锅
[解析]此题考查学生对无菌技术的掌握。
高压蒸汽灭菌锅是灭菌的一个设备，通常用于培养基的灭菌。
用酒精擦拭双手是消毒的一种方法。
火焰灼烧，可以迅速彻底地灭菌，适用于微生物的接种工具，如接种环。
[答案]C
2.不同物理形态的培养基其作用不一样，用于菌种分离、鉴定时可选用（）
A.液体培养基B.固体培养基C.半固体培养基D.以上都可以
[解析]固体培养基是不流动的，接种后的微生物在固体培养基上可以形成菌落，用于微生物的鉴定、纯化，在选种、育种、微生物计数上应用很广。
液体培养基用于大规模培养和工业生产。
半固体培养基用于观察微生物的运动、对微生物进行趋化性研究等。
[答案]B
【聚焦高考】
【自我测评】
一、选择题：
1.获得纯净培养物的关键是（）
A.将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌
B.接种纯种细菌
C.适宜条件下培养
D.防止外来杂菌的入侵
2.将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入37℃恒温箱的目的是（）
A.对比观察培养基有没有被微生物利用
B.对比分析培养基上是否生有杂菌
C.没必要放入未接种的培养基
D.为了下次接种时再使用
3.有关平板划线操作正确的是（）
A.使用已灭菌的接种环、培养皿，操作过程中不再灭菌
B.打开含菌种的试管需要通过火焰灭菌，取出菌种后需要马上塞上棉塞
C.将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线即可
D.最后将平板倒置，放入恒温箱中培养
4.高温灭菌的原理是（）
A.每种微生物生长的最适温度是一定的
B.微生物对高温环境不适应
C.高温破坏了细胞内的蛋白质、核酸，影响其生命活动
D.高温降低了环境中氧的浓度
5.将配制好的培养基进行灭菌应用（）
A.灼烧灭菌B.高压蒸汽灭菌C.干热灭菌D.煮沸灭菌
6.下列属于菌落特征的是（）
①菌落的形状②菌落的大小③菌落的多少④隆起程度⑤颜色⑥有无荚膜A.①②③④B.①②④⑤C.②③④⑥D.①②③④⑤⑥
7.灭菌的标准是（）
A.杀死所有的病原微生物B.杀死所有的微生物
C.杀死所有微生物的细胞、芽孢和孢子D.是病原菌不生长
8.对不同微生物的培养过程中正确的是（）
A.细菌培养时将PH调至酸性
B.霉菌培养时将PH调至中性或微酸性
C.培养厌氧微生物时则需要提供无氧环境条件
D.培养乳酸杆菌时在培养基中不需要添加维生素
9.平板划线操作中错误的是（）
A.将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环烧红
B.将烧红的接种环在火焰旁边冷却
C.接种环在平板上划线位置是随机的
D.在挑取菌种谦和接种完毕后均要将试管口通过火焰
10.平板冷凝后，要将平板倒置，其原因是（）
A.接种时再拿起来方便B.在皿底上标记日期等方便
C.正者放置容易破碎D.可以使培养基表面的水分更好地挥发
11.微生物分离和培养正确方法步骤是（）
A.灭菌、培养基的配制、搁置斜面、接种、培养
B.培养基的配制、灭菌、搁置斜面、接种、培养
C.接种、灭菌、培养基的配制、搁置斜面、培养
D.培养基的配制、接种、灭菌、搁置斜面、培养
12.实验测定链霉素对3种细菌的抗生素效应，用3种细菌在事先准备好的琼脂平板上划3条等长的平行线（3条线均与图中链霉素带接触），将平板置于37℃条件下恒温培养3天，结果如图所示。
从实验结果看，以下关于链霉素的哪一叙述是不正确的（）
A.它能阻止结核菌生长
B.它对结核菌比对霍乱菌更有效
C.它对结核菌比对伤寒菌更有效
D.它可以用于治疗伤寒病人
二、非选择题
13.无菌技术主要通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。
实验室中常用的消毒方法有消
毒法和消毒法。
常用的灭菌方法有灭菌、灭菌和灭菌。
14.平板培养基上的接种方法有、、。
通过平板划线，聚集的多种微生物被到培养基的表面。
在数次划线后，可以分离得到。
【拓展提高】
某同学在做微生物实验时，不小心把圆褐固氮菌和酵母菌混合在一起。
请你完成分离得到纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌的设计实验。
1.主要步骤：
（1）。
（2）采用法进行。
（3）。
将培养皿放入恒温箱。
（4）分别挑取两种不同的菌落，重复步骤
（2）（3）。
2.回答问题：
在步骤
（1）
（2）中，为保证无杂菌感染，实验中应采取的主要措施有
、、。
第（4）个步骤的目的是。
第二节培养基对微生物的选择作用
[课标要求]
1．简述纤维素的种类及作用
2．从土壤中分离出分解纤维素的微生物，讨论这类微生物的应用价值。
[知识梳理]
背景知识：
一、选择培养基
1．定义：
能让微生物生长，抑制生长，从而将从
中出来的培养基。
根据或微生物的要求，某些物质或某些
（例如碳源、氮源等），抑制的生长，从而有利于
2．配制或生长。
原理根据某些微生物对一些、因素的，在培养基中添加某种
，以不需要的微生物生长繁殖，造成有利于微生物种类优先生长的条件。
3．应用：
对微生物进行和。
例如：
有些微生物可以分解纤维素作为生命活动所需要的，可以在固体培养基中加入作为唯一碳源，从而分离的微生物。
实践案例：
用唯一碳源培养基分离微生物
配制培养基：
此培养基为培养基（注：
该培养基不含有微生物生长所需的）
倒平板
接种：
采用进行接种（接种结束后用无菌镊子取覆盖于培养基上，目的是提供微生物生长的。
（注意2、3步操作时均需要注意操作）
培养
探究活动
1．分离苏云金芽孢杆菌未使用农药的田间，染病死亡的棉铃虫等幼虫大多是因为感染了
中毒所致。
可以利用棉铃虫、玉米螟、菜青虫为材料，配置，采用可分离的培养基，分离培养。
2．分离分解纤维素的细菌实践案例只是分离到能分解纤维素的。
可在此基础上选用相关的培养基，进一步的分离能分解纤维素的。
[复习指要]
1．学法指导：
本节课复习要掌握选择培养基及其配制方法，应用选择培养基分离微生物。
在上一节课的基础上进一步巩固微生物培养和无菌技术的具体操作，从土壤中分离分解纤维素的微生物。
总结分离纯化微生物的方法，根据条件需要选用相应的分离方法。
2．疑难解析：
从混合样品中获得某种微生物的方法通常有两种：
第一种是可利用该分离对象对某一营养物质有一“嗜好”的原理，专门在培养基中加入该营养物质，从而使它成为一种加富培养基。
第二种办法可利用该分离对象对某种抑菌物质的抗性，在混合培养物中加入该抑制物，经培养后，原来占优势的微生物生长受抑制，而分离对象却可乘机大大增殖，使之在数量上占优势。
[典题解析]
1．关于选择培养正确的叙述是（）
A．可以增加纤维素分解菌的浓度B．可以减少纤维素分解菌的浓度
C．所用培养基是固体培养基D．所用培养基是平板培养基
[解析]选择培养是增加纤维素分解菌的浓度，所用培养基是液体培养基，以便于下一步的稀释涂布操作。
因此选A。
[答案]A
2．纤维素酶可以将那些物质分解（）
A．牛肉片B．鱼片C．滤纸片D．塑料条
[解析]纤维素酶只能使纤维素分解，本题中只有C项滤纸条的主要成分是纤维素，所以选C。
[答案]C
[聚焦高考]
1．（xx年北京理综题20分）某化工厂的污水池中，含有一种有害的、难于降解的有机化合物A。
研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功地筛选到能高效降解化合物A的细菌（目的菌）。
实验的主要步骤如图所示。
请分析回答问题：
（1）培养基中加入化合物A的目的是筛选______________，这种培养基属于__________培养基。
（2）“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的_______________，实验需要振荡培养，由此推测“目的菌”的代谢类型是__________。
（3）培养若干天后，应选择培养瓶中化合物A含量_________的培养液，接入新的培养液中连续培养，使“目的菌”的数量______________。
（4）转为固体培养时，常采用_____________的方法接种，获得单菌落后继续筛选。
（5）若研究“目的菌”的生长规律，将单个菌落进行液体培养，可采用_____________的方法进行计数，以时间为横坐标，以_____________________为纵坐标，绘制生长曲线。
（6）实验结束后，使用过的培养基应该进行_____________处理后，才能倒掉。
[自我测评]
一、选择题：
1．不能消化分解纤维素的是（）
A．人B．牛C．羊D．兔
2．用来判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置的对照是（）
A．未接种的选择培养基
B．未接种的牛肉膏蛋白胨培养基
C．接种了的牛肉膏蛋白胨培养基
D．接种了的选择培养基
3．要将能分解纤维素的细菌从土壤中分离出来，应将它们接种在（）
A．加入指示剂的鉴别培养基上
B．含有蛋白胨的固体培养基上
C．只含纤维素粉而无其他碳源的选择培养基上
D．含四大营养要素的培养基上
4．寻找纤维素分解菌应到（）
A．湿润的环境中B．富含纤维素的环境中C．富含无机盐的环境中D．池塘中
5．在将样品稀释涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基之前一般先进行选择培养，其主要目的是（）
A．完全除去其它微生物
B．没有意义，去掉这一步更好
C．增加纤维素分解菌的浓度
D．使纤维素分解菌充分长大
6．鉴别培养基是根据微生物的代谢特点在培养基中加入一些物质配制而成的，这些物质是（）
A．指示剂或化学药品
B．青霉素或琼脂
C．高浓度食盐
D．维生素或指示剂
7．生活在反刍动物胃内的纤维素分解菌，其新陈代谢类型是（）
A．自养需氧型B．异养厌氧型C．异养需氧型D．自养厌氧型
8．使用选择培养基的目的是（）
A．培养细菌
B．培养真菌
C．使需要的微生物大量繁殖
D．表现某微生物的特殊形状，与其它微生物加以区别
9．筛选出纤维素分解菌后还需要用下列哪一实验来确定（）
A．发酵产纤维素酶
B．发酵产纤维素
C．纤维素酶分解滤纸
D．纤维素分解产生葡萄糖
10．纤维素酶能够分解（）
A．纤维素的微生物B．淀粉的微生物C．纤维素D．淀粉
11．选择培养的结果：
培养液变（）
A．清澈B．浑浊C．红色D．产生透明圈
12．某混合样品中微生物R含量极少，要得到大量的R比较理想的方法是采用（）
A．天然培养基
B．稀释涂布平板法
C．利用适合R生长但同时抑制或阻止其他种类微生物生长的选择培养基
D．用显微镜直接观察、寻找，再培养
二、非选择题
13．培养基是人工配制的适合不同微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养物质。
先用完全培养基培养混合菌种，然后分别放在A、B、C三种特殊培养基上培养，分别得到菌落①、②、③；其中A培养基以蛋白质为唯一碳源；B培养基中缺氮源；C培养基中成分如下表：
成分
粉状硫
MgSO4·7H2O
（NH4）2SO4
FeSO4
KH2PO4
CaCl2
H2O
剂量
10g
0.5g
0.4g
0.01g
4g
25g
100ml
请分析回答：
⑴菌落③同化作用类型最可能的是（）
A．光能自养型B．化能自养型C．异养型D．A或B
⑵如果要获得具有固氮能力的菌株，应选用菌落；如果要培育获得大量蛋白酶的菌株，应选用菌落。
⑶从题中分析可见，生物进化的内在因素是，对生物生存起决定作用的因素是。
⑷在细菌种群进化过程中，其主要作用的变异来源是（）
A．环境条件B．基因重组C．基因突变D．染色体变异
14．下表是一种培养基的配方。
请回答：
成分
牛肉膏
蛋白胨
琼脂
NaCl
水
重量
0.5g
1g
2g
0.5g
100ml
⑴此培养基的营养要素有类，其中蛋白胨主要提供的是。
⑵各成分重量确定的原则。
⑶在各种成分溶化后分装前，需进行的是。
⑷该培养基按物理性质划分属于培养基，能培养的细菌代谢类型是。
⑸如要鉴别自来水中的大肠杆菌是否超标，需加入，观察它的特征。
⑹此培养基能否用于培养产生人的生长激素的工程菌？
。
原因是。
⑺若有几种杂菌混合在一起，可采用什么方法将它们分离？
；如细菌中混杂有酵母菌，要将酵母菌分离出来，可采用。
[拓展提高]
大肠杆菌在人体肠道内一般不致病，能合成维生素B和维生素K，对人体有益，但某些菌型能引起婴儿腹泻，侵入人体其它部位可引起感染，大肠杆菌在粪便中数量极多，请据此回答：
⑴在人的消化道内，大肠杆菌利用的碳源主要是，其利用的氮源主要是。
其代谢类型属于。
⑵检查水源是否被粪便污染的标志是。
检查的方法是：
在培养基中加入
和，取水样，如果有其代谢产物就与之结合使菌落呈，并带有。
德州一中赵俊霞
第三节测定微生物的数量
[课标要求]
1．研究培养基对微生物的选择作用。
2．进行微生物数量的测定。
[知识梳理]
背景知识
一、测定微生物数量的方法：
1．：
常用的是，该方法的优点是：
所需
，可得到结果，而且在计数的同时能，缺点是：
死细胞与活细胞不能区分；细胞密度低于106/ml便不能保证视野中能见到所有细胞；难以计数的细菌。
2．：
常用的是，这种方法在样品中含菌数的情况下，也可以完成计数，注意该方法需要将待测样品制成均匀的，尽量使样品中的，应用该种方法可以推算出检测样品中的。
实践案例：
土壤中好气性细菌的计数
制备土壤稀释液取的土样；制备系列稀释液
取样及倒平板该实验的接种方法是。
培养
观察记录
（实验用到的实验设计原则：
平行重复原则、对照实验原则理解实验原则选取的目的）
结果：
每克土壤样品菌数=
探究活动：
测定样品中的微生物数量
1．检测天然水源中细菌总数和大肠菌群数
细菌总数通常是指检测样品中所含的总数。
大肠菌群数通常是指检测样品中所含的实际数值。
2．检测某种食品中的菌落总数和大肠菌群数
一般说来，总数越多，说明食品的卫生质量。
3．土壤中分解尿素细菌的计数
某些细菌中含有，能将培养基中的分解成，该物质的水溶液会使
指示剂呈现。
[复习指要]
1、学法指导：
本节课应学会微生物数量测定的方法，学会各种方法的具体操作。
间接计数法中的最常用的是稀释涂布平板法，注意该种方法中系列稀释液的制备，掌握间接计数法计数微生物数量的计算方法。
2、疑难解析：
以本节实验为例着重复习制备系列稀释液的方法是：
将1g土样放入99ml无菌水中，制成102倍的稀释液，用1ml无菌移液管吸取上述浓度的溶液0.5ml，移入装有4.5ml无菌水的试管中，即配制成103倍的稀释液，用同样的方法可以配制成104、105、106倍的稀释液。
将待测样品进行稀释的目的是使微生物细胞分散开，使实验结果更接近真实值。
[典题解析]
1．分析下面培养基的配方：
KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、尿素、琼脂。
请回答：
⑴在该培养基的配方中，为微生物的生长提供碳源和氮源的分别是和。
⑵想一想这种培养基对微生物是否具有选择作用？
如果具有，又是如何进行选择的？
[解析]碳源是提供碳元素的物质，氮源是提供氮元素的物质。
所以碳源是葡萄糖，氮源是尿素。
绝大多数生物都能利用葡萄糖，但是，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，所以这种培养基对微生物有选择作用。
选择的原则是只有能够利用尿素的微生物才能够生长。
[答案]⑴葡萄糖尿素⑵有选择作用。
因为此配方中尿素是唯一的氮源，所以只有能够利用尿素的微生物才能够生长。
2．产生标准菌落的细菌的最初数目和培养基分别是（）
A．一个细菌，液体培养基B．许多细菌，液体培养基
C．一个细菌，固体培养基D．许多细菌，固体培养基
[解析]菌落是一个或几个细菌的子细胞群体，在固体培养基上肉眼看见，是作为菌落鉴定的重要依据，若是多种细菌形成的菌落则不是标准菌落。
[答案]C
[聚焦高考]
[自我测评]
1．要从多种细菌中分离某种细菌，培养基要用（）
A．加入青霉素的培养基
B．固体培养基
C．加入高浓度食盐的培养基
D．液体培养基
2．用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数，在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下几种统计结果，正确的是（）
A．涂布了一个平板，统计的菌落数是230
B．涂布了两个平板，统计的菌落数是215和260，取平均值238
C．涂布了三个平板，统计的菌落数分别是21、240和250，取平均值163
D．涂布了一个平板，统计的菌落数分别是210、240和250，取平均值233
3．在做分离分解尿素的细菌实验时，A同学从对应106培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。
A同学的结果产生原因可能有（）
①由于土样不同②由于培养基污染③由于操作失误④没有设置对照
A．①②③B．②③④C．①③④D．①②④
4．请选出下列正确的操作步骤（）
①土壤取样②称取10g土壤取出加入盛有90ml无菌水的锥形瓶中③吸取0.1ml进行平板涂布④依次稀释至101、102、103、104、105、106、107稀释度
Ａ．① ② ③ ④Ｂ.① ③ ② ④
Ｃ.① ② ④ ③Ｄ.① ④ ② ③
5．关于测定土壤中细菌的数量，正确叙述是（）
A．一般选用103-107倍的稀释液分别涂布
B．测定放线菌的数量，一般选用103、104和105倍稀释
C．测定真菌的数量，一般选用103、104和105倍稀释
D．当第一次测定某种细菌的数量，可以将102-107倍的稀释液分别涂布到平板上培养
6．某同学在稀释倍数为106的培养基中测得平板上菌落数的平均值为234，那么每克样品中的菌落数是（涂布平板时所用稀释液的体积为0.1ml）（）
A．2.34×108B．2.34×109C．234D．23.4
7．可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是（）
A．以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂
B．以尿素为唯一氮源的培养基中加入二苯胺试剂
C．以尿素为唯一氮源的培养基中加入苏丹Ⅲ试剂
D．以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩脲试剂
8．用稀释涂布混合平板法来统计样品中活细菌的数目，其结果与实际值相比（）
A．比实际值高
B．比实际值低
C．和实际值一致
D．比实际值可能高也可能低
9．测定土壤中细菌的数量一般选104、105和106倍的稀释液进行平板培养；而真菌的数量，一般选用102、103和104倍稀释，其原因是（）
A．细菌个体小，真菌个体大
B．细菌易稀释真菌不易稀释
C．细菌在土壤中含量比真菌高
D．随机的，没有原因
10．进行系列稀释时，按怎样的顺序进行（）
A．稀释度递增
B．稀释度递减
C．不论稀释度大小
D．A、B两项均可
二、非选择题
11．统计菌落数目一般用稀释涂布平板法，当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个，来源于样品稀释液中的一个。
统计的菌落数往往比活菌的实际数目，原因是当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是个菌落数。
12．在微生物数量测定时，选取具有菌落数的稀释倍数并计数。
选择的原则是：
细菌、放线菌、酵母菌以每个培养皿内有个菌落数为宜，霉菌以每个培养皿内有个菌落数为宜，另外同一稀释倍数各个重复的菌落数。
13．将10ml酵母菌培养液在适宜温度下培养，并于不同时间等量均匀取样4次，分别测定样品中酵母菌的数量和PH值，结果如下。
请分析回答：
样
升级会员 