3.生理条件下(pH7.0左右),蛋白质分子中的________侧链和________侧链几乎完全带正电荷,但_______侧链带部分正电荷。
4.测定蛋白质紫外吸收的波长,一般在_____,主要由于蛋白质中存在着______、_、______氨基酸残基侧链基团。
5.皮肤遇茚三酮试剂变成色,是因为皮肤中含有所致。
6.Lys的pk1(
)=2.18,pk2(
)=8.95,pk3(
)=10.53,其pI为。
在pH=5.0的溶液中电泳,Lys向极移动。
7.实验室常用的甲醛滴定是利用氨基酸的氨基与中性甲醛反应,然后用碱(NaOH)来滴定
上放出的。
8.一个带负电荷的氨基酸可牢固地结合到阴离子交换树脂上,因此需要一种比原来缓冲液pH值和离子强度的缓冲液,才能将此氨基酸洗脱下来。
9.决定多肽或蛋白质分子空间构像能否稳定存在,以及以什么形式存在的主要因素是由
________来决定的。
10.测定蛋白质中二硫键位置的经典方法是___________。
11.从混合蛋白质中分离特定组分蛋白质的主要原理是根据它们之间的、、、、。
12.蛋白质多肽链主链构象的结构单元包括________、________、________等,维系蛋白质二级结构的主要作用力是_____键。
13.蛋白质的
—螺旋结构中,个氨基酸残基旋转一周,每个氨基酸沿纵轴上升的高度为nm,旋转度。
14.交换层析分离蛋白质是利用了蛋白质的性质。
阴离子交换层析在层析柱内填充的交换剂上带电荷,可吸引带电荷的蛋白质,然后用带电荷的溶液洗柱将蛋白质洗脱下来。
二、选择题
1.区分极性氨基酸和非极性氨基酸是根据()
A.所含的羧基和氨基的极性 B.所含氨基和羧基的数目
C.所含的R基团为极性或非极性 D.脂肪族氨基酸为极性氨基
2.下列哪一种氨基酸不属于人体必需氨基酸()
A.亮氨酸 B.异亮氨酸C.苯丙氨酸 D.酪氨酸
3.下列哪一组氨基酸为酸性氨基酸:
()
A.精氨酸,赖氨酸 B.谷氨酸,谷氨酰胺
C.组氨酸,精氨酸 D.谷氨酸,天冬氨酸
4.含硫的必需氨基酸是()
A.半胱氨酸B.蛋氨酸C.苏氨酸D.亮氨酸
5.芳香族必需氨基酸包括()
A.蛋氨酸B.酪氨酸C.亮氨酸D.苯丙氨酸
6.含四个氮原子的氨基酸是()
A.赖氨酸B.精氨酸C.酪氨酸D.色氨酸
7.蛋白质中不存在的氨基酸是下列中的哪一种?
()
A.赖氨酸B.羟赖氨酸C.酪氨酸D.鸟氨酸
8.在蛋白质中不是L-氨基酸的是()
A.苏氨酸B.甘氨酸C.半胱氨酸D.谷氨酰胺
9.谷氨酸的PK值为2.19,4.25,9.76;赖氨酸的PK值为2.18,8.95,10.53;则它们的PI值分别为()
A.2.19和10.53B.3.22和9.74C.6.96和5.56D.5.93和6.36
10.从赖氨酸中分离出谷氨酸的可能性最小的方法是()
A.纸层析B.阳离子交换层析C.电泳D.葡萄糖凝胶过滤
11.用于确定多肽中N-末端氨基酸的是()
A.Sanger试剂B.Edman试剂C.两者均可D.两者均不可
12.有一蛋白质水解物,在PH6时,用阳离子交换柱层析,第一个被洗脱的氨基酸是()
A.Val(PI5.96)B.Lys(PI9.74)C.Asp(PI2.77)D.Arg(PI10.76)
13.下列关于离子交换树脂的叙述哪一个是不正确的?
()
A.是人工合成的不溶于水的高分子聚合物B.阴离子交换树脂可交换的离子是阴离子C.有阳离子交换树脂和阴离子交换树脂两类D.阳离子交换树脂可交换的离子是阴离子
14.可使二硫键氧化断裂的试剂是()
A.尿素B.巯基乙醇C.过甲酸D.SDS
15.Sanger试剂是()
A.苯异硫氰酸酯B.2,4—二硝基氟苯C.丹磺酰氯D.β—巯基乙醇
16.下列哪种氨基酸可使肽链之间形成共价交联结构()
A.MetB.SerC.GluD.Cys
17.以下氨基酸中哪一种可能会改变多肽链的方向和阻断a-螺旋()
A.PheB.CysC.TrpD.Pro
18.蛋白质分子中α螺旋的特点是()
A.肽键平面完全伸展B.靠盐键维持稳定C.多为右手螺旋D.螺旋方向与长轴垂直
19.为从组织提取液中沉淀出活性蛋白最有可能的方法是加入()
A.硫酸铵B.三氯乙酸C.NH4ClD.氯化汞
20.有一个肽用胰蛋白酶水解得:
①H-Met-Glu-Leu-Lys-OH②H-Ser-Ala-Arg-OH③H-Gly-Tyr-OH三组片段,用BrCN处理得:
④H-Ser-Ala-Arg-Met-OH⑤H-Glu-Leu-Lys-Gly-Tyr-OH两组片段,按肽谱重叠法推导出该九肽的序列应为()
A.3+2+1B.5+4C.2+1+3D.2+3+1E.1+2+3
21.蛋白质变性后,不发生下列哪种改变()
A.生物活性丧失 B.易被降解 C.一级结构改变 D.空间结构改变E.次级键断裂
22.关于蛋白质三级结构的描述,下列哪项是正确的()
A.疏水基团位于分子内部B.亲水基团位于分子内部
C.羧基多位于分子内部D.二硫键位于分子表面
23.下列蛋白质通过凝胶过滤层析柱时,最先被洗脱的是()
A.牛胰岛素(分子量5700)B.肌红蛋白(分子量16900)
C.牛β乳球蛋白(分子量35000)D.马肝过氧化物酶(分子量247500)
24.镰刀型贫血病患者,Hb分子中氨基酸的替换及位置是()
A.α链第六位Val换成GluB.β链第六位Val换成Glu
C.α链第六位Glu换成ValD.β链第六位Glu换成Val
三、名词解释
1.α-氨基酸2.氨基酸的等电点3.层析4.蛋白质的沉淀5.蛋白质的变性6.结构域
四、问答题
某八肽的氨基酸组成是2Lys,Asp,Tyr,Phe,Gly,Ser和Ala。
此八肽与FDNB反应、酸水解后释放出DNP—Ala。
用胰蛋白酶水解该八肽,得到两个三肽及一个二肽,其三肽的氨基酸组成分别为Lys,Ala,Ser和Gly,Phe,Lys。
用胰凝乳蛋白酶(糜蛋白酶)水解该八肽,释放出游离的Asp及一个四肽和一个三肽,四肽的氨基酸组成是Lys,Ser,Phe,Ala,三肽与FDNB反应后,经酸水解释放出DNP—Gly。
根据上述结果分析,写出该八肽的氨基酸排列顺序,并简述分析过程。
生化测试二:
酶化学
一、填空题
1.酶的活性中心有__________和_________两个功能部位,其中________直接与底物结合,决定酶的专一性,__________是发生化学变化的部位,决定催化反应的性质。
2.温度对酶活性的影响有以下两个方面,一方面,另一方面。
3.酶活力是指_________________,一般用________________________表示。
4.全酶有________和_________组成,在催化反应时,二者所起的作用不同,其中________决定专一性和效率,__________起传递电子、原子或化学基团的作用。
5.酶活性的快速调节方式包括_________和_________。
6.酶作为生物催化剂的特点为___________、____________、___________、____________。
二、选择题
1.竞争性可逆抑制剂的抑制程度与下列哪种因素无关()
A.作用时间B.抑制剂浓度C.底物浓度D.酶与抑制剂亲和力的大小
E.酶与底物亲和力的大小
2.关于变构酶下列哪一种说法是错的()
A.变构效应剂多为酶的底物或产物B.存在催化与调节两个活性部位
C.反应符合米-曼氏方程式D.反应曲线呈S形E.一般由多个亚基组成
3.酶的竞争性可逆抑制剂可以使()
A.Vmax减小,Km减小B.Vmax增加,Km增加C.Vmax不变,Km增加
D.Vmax不变,Km减小E.Vmax减小,Km增加
4.有关全酶的描述下列哪一项不正确()
A.全酶由酶蛋白和辅助因子组成B.酶促反应的高效率取决于酶蛋白
C.一种辅助因子可与不同的酶蛋白结合D.酶促反应的特异性取决于辅助因子
5.酶的抑制剂()
A.由于引起酶蛋白变性而使酶活性下降B.使酶活性下降而不引起酶蛋白变性
C.只引起酶蛋白变性而可能对酶活性无影响D.一般为强酸,强碱E.都和底物结构相似
6.同工酶的叙述,正确的是()
A.结构相同来源不同B.由不同亚基组成
C.电泳迁移率往往不同D.对同一底物具有不同专一性
7.丙二酸对琥珀酸脱氢酶的影响属于()
A.不可逆抑制B.反竞争性可逆抑制C.竞争性可逆抑制D.非竞争性可逆抑制
8.关于酶的必需基团的错误描述是()
A.可催化底物发生化学反应B.可与底物结合C.可维持酶活性中心的结构
D.可存在于酶的活性中心以外E.只存在于酶的活性中心
9.某一符合米曼氏方程的酶,当[S]=2Km时,其反应速度V等于()
A.VmaxB.2/3VmaxC.3/2VmaxD.2VmaxE.1/2Vmax
10.酶的非竞争性抑制作用的特点是()
A.抑制剂与酶的活性中心结构相似B.抑制剂与酶作用的底物结构相似
C.抑制作用强弱与抑制剂浓度无关D.抑制作用不受底物浓度的影响
E.动力学曲线中Vmax不变,Km值变小
11.关于修饰酶的错误描述是()
A.酶分子可发生可逆的共价修饰B.这种修饰可引起其活性改变
C.修饰反应可在各种催化剂催化下进行D.磷酸化和脱磷酸是常见的修饰反应
E.绝大多数修饰酶都具有无活性和有活性两种形式
三、是非题
1.Km是酶的特征常数,只与酶的性质有关,与酶的底物无关。
()
2.酶的最适PH值是一个常数,每一个酶只有一个确定的最适PH值。
()
3.金属离子作为酶的激活剂,有的可以相互取代,有的可以相互拮抗。
()
4.判断一个纯化酶的方法优劣的主要依据是酶的比活力和总活力。
()
5.从鼠脑分离的己糖激酶可作用于葡萄糖(Km=6X10-6mol/l)或果糖(Km=2X10-3mol/l),则该酶对果糖的亲和力更高。
()
四、名词解释
1.酶的变构调节2.酶的活性中心3.酶的活力单位4.酶的比活力
五、计算题
焦磷酸酶可以催化焦磷酸水解成磷酸,它的分子量为120000,由6个相同的亚基组成,纯酶的Vmax为2800单位/毫克酶。
一个活力单位规定为:
在标准的测定条件下,37℃,15分钟内水解10微摩尔焦磷酸所需的酶量。
问:
1)毫克酶在每秒钟内水解了多少摩尔底物?
2)每毫克酶中有多少摩尔的活性中心?
(假定每个亚基上有一个活性中心)
生化测试三:
核酸化学
一、填空题
1.和构成核苷,核苷和构成核苷酸,核苷酸残基之间以键相连。
2.tRNA的二级结构呈型,三级结构呈型。
3.DNA的稀盐溶液加热至某个特定温度,可使其物化性质发生很大改变,如和
,这种现象叫做。
其原因是由于。
4.Watson-Crick提出的双螺旋结构中,__________处于分子外边,___________处于分子中央,螺旋每上升一圈bp数为______________。
5.RNA分子指导蛋白质合成,RNA分子用作蛋白质合成中活化氨基酸的载体。
6.双链DNA中若_____________含量多,则Tm值高。
7.核酸在260nm附近有强吸收,这是由于_____________。
二、选择题
1.DNA和RNA两类核酸分类的主要化学依据是()
A.空间结构不同B.所含碱基不同C.核苷酸之间连接方式不同
D.所含戊糖不同E.在细胞存在的部位不同
2.DNA受热变性,下列叙述正确的是()
A.在260nm波长处的吸光度下降B.多核苷酸键断裂成寡核苷酸键
C.碱基对可形成共价连接D.加入互补RNA链并复性,可形成DNA-RNA杂交分子
3.在一个DNA分子中,若A占摩尔比为32.8%,则G摩尔比为()
A.67.2%B.32.8%C.17.2%D.65.6%E.16.4%
4.对DNA片段作物理图谱分析,需要用()
A.核酸外切酶B.DnaseIC.DNA连接酶
D.DNA聚合酶IE.限制性内切酶
5.单链DNA:
5’—pCpGpGpTpA—3’,能与下列哪一种RNA单链分子进行杂交?
()
A.5’—pGpCpCpTpA—3’B.5’—pGpCpCpApU—3’C.5’—pUpApCpCpG—3’D.5’—pTpApGpGpC—3’E.5’—pTpUpCpCpG—3’
6.核酶(ribozgme)的底物是()
A.DNA B.RNA C.核糖体 D.细胞核膜 E.核蛋白
三、是非题
1.生物信息的流向只能由DNA→RNA,而决不能由RNA→DNA。
()
2.在生物体内存在的DNA分子多为负超螺旋。
()
3.若双链DNA中的一条链碱基顺序为pCpTpGpGpApC,则另一条链的顺序为pGpApCpCpTpG。
()
4.核酸内切酶是指能切断磷酸二酯键的核酸酶。
()
5.核苷中碱基和戊糖的连接一般为C-C糖苷键。
()
6.限制性内切酶是特异核酸碱基序列专一性水解酶。
()
7.DNA中碱基摩尔比规律(A=T;G=C)仅适用于双链DNA,而不适用于单链DNA。
()
8.RNA的局部螺旋区中,两条链之间的方向也是反向平行的。
()
9.DNA是生物界中唯一的遗传物质。
()
10.在一个生物体不同组织中的DNA,其碱基组成不同。
()
11.DNA双螺旋中A、T之间有3个氢键,G、C之间有2个氢键。
()
四、名词解释
1.分子杂交
2.增色效应
3.Tm值
4.DNA的变性与复性
5.超螺旋:
生化测试四:
生物氧化
一、填空题
1.真核细胞的呼吸链主要存在于,而原核细胞的呼吸链存在于。
2.呼吸链上流动的电子载体包括和。
3.内膜上能够产生跨膜的质子梯度的复合体是、和。
4.氰化物使人中毒的机理是。
5.典型的呼吸链包括和两种,这是根据接受代谢物脱下的氢的不同而区别的。
6.填写电子传递链中阻断电子流的特异性抑制剂:
NAD→FMN→CoQ→Cytb→Cytc1→Cytc→Cytaa3→O2、
7.化学渗透学说主要论点认为:
呼吸链组分定位于内膜上。
其递氢体有作用,因而造成内膜两侧的差,同时被膜上所利用,促使ADP+Pi→ATP。
8.呼吸链中氧化磷酸化生成ATP的偶联部位是、和。
二、选择题
1.关于有氧条件下,NADH从胞液进入线粒体氧化的机制,下列哪项描述是正确的?
()
A.NADH直接穿过线粒体膜而进入
B.磷酸二羟丙酮被NADH还原成3-磷酸甘油进入线粒体,在内膜上又被氧化成磷酸二羟丙酮同时生成NADH
C.草酰乙酸被还原成苹果酸,进入线粒体后再被氧化成草酰乙酸,停留在线粒体内
D.草酰乙酸被还原成苹果酸进入线粒体,然后再被氧化成草酰乙酸,再通过转氨基作用生成天冬氨酸,最后转移到线粒体外
E.通过肉毒碱进行转运进入线粒体
2.寡霉素通过什么方式干扰了ATP的合成?
()
A.使细胞色素C与线粒体内膜分离B.使电子再NADH与黄素酶之间的传递被阻断
C.阻止线粒体膜上的肉毒碱穿梭D.抑制线粒体膜上的ATP酶
E.使线粒体内膜不能生成有效的氢离子梯度
3.肌肉或神经组织细胞内NADH进入线粒体的主要是()
A.磷酸甘油穿梭机制B.柠檬酸穿梭机制C.肉毒碱穿梭机制
D.丙酮酸穿梭机制E.苹果酸-天冬氨酸穿梭机制
4.下列化合物中,除了哪一种以外都含有高能磷酸键?
()
A.NAD+B.ADPC.NADPHD.FMNE.PEP
三、名词解释
1.呼吸链
2.氧化磷酸化
3.高能化合物
4.解偶联作用
生化测试五:
糖代谢
一.填空题
1.糖酵解途径的反应全部在细胞进行。
2.糖酵解途径唯一的脱氢反应是,脱下的氢由递氢体接受。
3.糖酵解途径中最重要的关键酶是。
4.一次三羧酸循环有次脱氢过程和次底物水平磷酸化过程。
5.磷酸戊糖途径的生理意义是生成。
6.肌肉不能直接补充血糖的主要原因是缺乏。
7.酶催化的反应是EMP途径中的第一个氧化反应。
分子中的磷酸基团转移给ADP生成ATP,是EMP途径中的第一个产生ATP的反应。
8.葡萄糖的无氧分解只能产生分子ATP,而有氧分解可以产生分子ATP。
9.丙酮酸脱氢酶系位于上,它所催化的反应是葡萄糖代谢中第一次产生的反应。
10.TCA循环的第一个产物是。
由,和所催化的反应是该循环的主要限速反应。
11.TCA循环中有两次脱羧反应,分别是由和催化。
12.TCA循环中大多数酶位于,只有位于线粒体内膜。
13.EMP途径产生的NADH•H+必须依靠系统或系统才能进入线粒体,分别转变为线粒体中的和。
14.糖异生主要在中进行。
二.选择题
1.丙酮酸羧化酶催化生成的产物是:
()
A.乳酸 B.丙酮酸 C.苹果酸D.丙二酸单酰CoA E.草酰乙酸
2.糖有氧氧化、糖酵解和糖原合成的交叉点是在:
()
A.1-磷酸葡萄糖 B.6-磷酸果糖 C.3-磷酸甘油醛D.6-磷酸葡萄糖 E.5-磷酸核糖
3.对于三羧酸循环,下列哪项是错误的:
()
A.它是糖、脂肪和蛋白质在体内彻底氧化的共同代谢途径B.反应不可逆
C.催化反应的酶都在线粒体内D.一分子乙酰CoA进入该循环可产生12分子ATP
E.四次脱氢的受氢体均为NAD+
4.有关葡萄糖酵解的描述,下列哪项错误:
()
A.1分子葡萄糖净生成2分子ATPB.ATP的生成部位在胞浆
C.ATP是通过底物水平磷酸化生成的D.ATP是通过H在呼吸链传递生成的
E.ATP的生成不耗氧
5.催化檬酸转变成α-酮戊二酸的酶是:
()
A.异檬酸脱氢酶和α-酮戊二酸脱氢酶 B.琥珀酸脱氢酶与乌头酸酶
C.乌头酸酶和异柠檬酸脱氢酶D.乌头酸酶E.柠檬酸合成酶和苹果酸酶
6.在糖原合成时,葡萄糖单位的供体是:
()
A.1-磷酸葡萄糖 B.6-磷酸葡萄糖C.1-磷酸麦芽糖 D.GDPG E.UDPG
三、名词解释
1.糖酵解
2.三羧酸循环
3.糖异生
生化测试六:
脂代谢、氨基酸代谢、核苷酸代谢
一、填空题
1.脂肪酸合成过程中,乙酰COA主要来源于,NADPH主要来源于途径。
2.脂肪酸合成中酰基化合物的主要载体是,脂肪酸分解中酰基化合物的主要载体是。
3.脂肪的β-氧化包括,,,四个步骤。
4.乙酰COA和CO2反应生成,需要消耗高能磷酸键,并需要辅酶参加。
5.脂肪酸的合成部位是,分解部位是。
6.在脂肪酸的合成中,乙酰COA通过转运体系从(部位)进入(部位)。
7.人体内转运氨的形式有和。
8.联合脱氨基作用包括和两种方式。
9.嘧啶核苷酸的嘧啶环是由和合成的
二、选择题
1.线粒体外脂肪酸合成的限速酶是()
A.酰基转移酶B.乙酰COA羧化酶C.肉毒碱脂酰COA转移酶Ⅰ
D.肉毒碱脂酰COA转移酶Ⅱ
2.奇数碳原子脂肪酰COA经β-氧化后除生成乙酰COA外还有()
A.丙二酰COAB.丙酰COAC.乙酰COAD.乙酰乙酰COA
3.不饱和脂肪酸的氧化比饱和脂肪酸的氧化多了一种酶,是()
A.硫解酶B.脂酰COA脱氢酶C.烯酰COA水合酶D.烯酰COA异构酶
4.下列哪一种物质的生物合成不需要PRPP()
A.嘧啶核苷酸B.嘌呤核苷酸C.HisD.NAD(P)E.FAD
5.转氨酶的辅酶为()
A.NAD+B.NADP+C.FADD.FMNE.磷酸吡哆醛
6.骨骼肌主要以嘌呤核苷酸循环脱氨基的原因是骨骼肌内()
A.细胞没有线粒体B.L-谷氨酸脱氢酶活性低C.谷丙转氨酶活性低
D.氨基酸脱羧酶活性低E.氨基甲酰磷酸合成酶活性低
7.下列哪种氨基酸是尿素合成过程的中间产物()
A.甘氨酸B.色氨酸C.赖氨酸D.瓜氨酸E.缬氨酸
8.下列哪一种氨基酸与尿素循环无关()
A.赖氨酸B.精氨酸C.天冬氨酸D.鸟氨酸E.瓜氨酸
9.肝细胞内合成尿素部位是()
A.胞浆B.线粒体C.内质网D.胞浆和线粒体
10.下列既参与嘌呤核苷酸合成又参与嘧啶核苷酸合成的物质是()
A.谷氨酰胺B.谷氨酸C.甘氨酸D.丙氨酸E.天冬酰胺
11.脱氧核糖核苷酸生成的方式是()
A.在一磷酸核苷水平上还原B.在二磷酸核苷水平上还原
C.在三磷酸核苷水平上还原D.在核苷水平上还原E.直接由核糖还原
12.dTMP合成的直接前体是:
()
A.dUMPB.TMPC.TDPD.dUDP
13.生成甘油的前体是()
A.丙酮酸B.乙醛C.磷酸二羟丙酮D.乙酰CoA
三、名词解释
1.限制性内切酶
2.核苷酸的从头合成和补救途径
3.联合脱氨基作用
4.β-氧化
四、是非题
1.参与尿素循环的酶都位于线粒体内。
()
2.氨基酸经脱氨基作用后留下的碳骨架进行氧化分解需要先能够进入TCA循环的中间产物。
()
3.脂肪酸活化为脂肪酰COA时,需消耗两个高能磷酸键。
()
4.嘧啶合成所需要的氨甲酰磷酸合成酶与尿素循环所需要的氨甲酰磷酸合成酶是同一个酶。
()
5.人体内若缺乏维生素B6和维生素PP,均会引起氨基酸代谢障碍。
()
五、问答题
1.请计算1mol14碳原子的饱和脂肪酸完全氧化为CO2和H2O时可产生多少摩尔ATP?
2.糖代谢和脂肪代谢是通过哪些反应联系起来的?
生化测