用血浆冷沉淀生产八因子生产操作步骤.docx
《用血浆冷沉淀生产八因子生产操作步骤.docx》由会员分享，可在线阅读，更多相关《用血浆冷沉淀生产八因子生产操作步骤.docx（45页珍藏版）》请在冰豆网上搜索。
用血浆冷沉淀生产八因子生产操作步骤
生产工作指令
题目：
从冷胶沉淀到凝血因子VIII非无菌半成品
批号：
DATE（日期）
PAGE（页数）1OF（共）35
PROCEDUREANDWORKRECORD
操作步骤与工作记录
OPERATOR
操作者
VERIFIER
核对者
1.ReweighCryo-precipitate
重新称重冷胶沉淀
A.Cryo-precipitateLotNo.
冷胶沉淀批号
GrossKgTareKgNetKg
毛重皮重净重
B.Cryo-precipitateLotNo.
冷胶沉淀批号
GrossKgTareKgNetKg
毛重皮重净重
C.Cryo-precipitateLotNo.
冷胶沉淀批号
GrossKgTareKgNetKg
毛重皮重净重
D.Cryo-precipitateLotNo.
冷胶沉淀批号
GrossKgTareKgNetKg
毛重皮重净重
E.ActualtotalNetWeightKg
实际总净重Line1E
DATE（日期）
PAGE（页数）2OF（共）35
PROCEDUREANDWORKRECORD
操作步骤与工作记录
OPERATOR
操作者
VERIFIER
核对者
2.PrepareTrisBufferForSuspension
准备悬浮用Tris缓冲液
A.Preparesuspensiontank.
准备悬浮坦克
TankNo.TareKg
坦克编号皮重
B.CalculatetheWFI（24-28℃）forsuspension.
计算悬浮所需的WFI（24-28℃）。
Kg=×2
Line2BLine1E
C.WeightheWFIaccordingtoLine2B.
根据Line2B称取WFI。
GrossKgTareKgNetKg
总重皮重净重Line2C（Line2C=Line2B）
Temp.ofWFITime
WFI温度24-28℃时间
D.CalculatetheTrisforsuspension.
计算悬浮所需的Tris。
g=Kg×2.5
Line2DLine2B
E.WeightheTrisaccordingtoLine2D.
根据Line2D称取Tris。
GrossgTaregNetg
总重皮重净重Line2E（Line2E=Line2D）
TrisLotNo.
Tris批号
F.AddtheTrisintotheWFIwithmixing.
搅拌下把Tris加入WFI中。
TimeAdded
加入时间
Timedissolved
溶解时间
DATE（日期）
PAGE（页数）3OF（共）35
PROCEDUREANDWORKRECORD
操作步骤与工作记录
OPERATOR
操作者
VERIFIER
核对者
3.pHAdjustTo6.8-7.0
pH调节到6.8-7.0
A.Titrate100mlsampletopH6.8-7.0with1.0MHCl.
用1.0MHCl滴定100ml样品到pH6.8-7.0。
InitialpH
起始pH
B.Volumeof1.0MHClfortitrationofsample.
样品滴定所需的1.0MHCl。
1.0MHClvolumeml
1.0MHCl体积Line3B
C.1.0MHClbatchNo.
1.0MHCl批号
D.pHresult
pH值6.8-7.0
E.Calculatetherequiredamountof1.0MHCltoadjustpHto6.8-7.0forTrisbuffer.
计算滴定Tris缓冲液到pH6.8-7.0所需的1.0MHCl。
L=Kg÷1.0Kg/L×10×ml÷1000
Line3ELine2BLine3B
F.Takeouttherequiredvolumeof1.0MHClaccordingtoLine3E.
根据Line3E称取所需的1.0MHCl。
1.0MHClvolumeL
1.0MHCl体积Line3F（Line3F=Line3E）
G.Add1.0MHCltoTrisbufferwithmixing.
搅拌下加入1.0MHCl到Tris缓冲液中。
Time
时间
H.Takeabout20mlsampleandmeasurepHafter5minutes.
5分钟后取出大约20ml样品测pH。
pHresultTemp.
pH值温度24-26℃
DATE（日期）
PAGE（页数）4OF（共）35
PROCEDUREANDWORKRECORD
操作步骤与工作记录
OPERATOR
操作者
VERIFIER
核对者
4.Cryo-precipiateSuspension
冷胶悬浮
A.Putthecryo-precipiateintotheTrisbufferandkeepmixinguntilcryp-precipitatedissolvedcompletely.
将冷胶放入Tris缓冲液中，搅拌至完全溶解。
Holdtemp.ofsuspensionat24-26℃whendoingsuspension.
悬浮时将温度控制在24-26℃。
TimestartedTemp.
开始时间温度
TimefinishedTemp.
结束时间温度24-26℃
B.Takeabout20mlsampleandmeasurethepH.
取样大约20ml测pH。
pHresult
pH值
C.Weighthesuspension.
悬浮液称重。
GrossKgTareKgNetKg
毛重皮重净重Line4C
DATE（日期）
PAGE（页数）5OF（共）35
PROCEDUREANDWORKRECORD
操作步骤与工作记录
OPERATOR
操作者
VERIFIER
核对者
5.AddSodiumHeparinsolutionintothesuspension
往悬浮液中加入肝素钠溶液
A.Prepareonebarrelforsodiumheparinsolution.
准备1个桶配制肝素钠溶液。
BarrelNo.TareKg
桶编号皮重
B.CalculatetheWFI（20-26℃）needed.
计算所需的WFI（20-26℃）。
Kg=Kg×0.0108
Line5BLine4C
C.WeightheWFIaccordingtoLine5B.
根据Line5B称取WFI。
GrossKgTareKgNetKg
毛重皮重净重Line5C
Temp.ofWFITime
WFI温度（10-26℃）时间
D.Calculatethesodiumheparinneeded.
计算所需的肝素钠。
g=Kg×0.26
Line5DLine4C
E.WeighthesodiumheparinaccordingtoLine5D.
根据Line5D称取肝素钠。
SodiumHeparinLotNo.
肝素钠批号
GrossKgTareKgNetg
毛重皮重净重Line5E
F.AddthesodiumheparinintotheWFIwithmixing.
边搅拌，边将肝素钠加到WFI中。
Timeadded
加入时间
Timedissolved
溶解时间
G.AddsodiumheparinsolutionintosuspensionNMT0.2L/minwithmixing.
边搅拌边将肝素钠加入悬浮液中，流速不超过0.2L/min。
Timeadded
加入时间
Timefinished
结束时间
DATE（日期）
PAGE（页数）6OF（共）35
PROCEDUREANDWORKRECORD
操作步骤与工作记录
OPERATOR
操作者
VERIFIER
核对者
H.Continuemixingfor15minutes.
继续搅拌15分钟。
TimestartedTimefinished
开始时间结束时间
Temp.ofsuspension
悬浮液温度
Takeabout20mlsampletomeasurepH.
取样约20ml测pH。
pHresult
pH
I.Weighthesuspension.
称重悬浮液。
GrossKgTareKgNetKg
毛重皮重净重Line5I
DATE（日期）
PAGE（页数）7OF（共）35
PROCEDUREANDWORKRECORD
操作步骤与工作记录
OPERATOR
操作者
VERIFIER
核对者
6.Add31.56%PEGIntoSuspensionto3.5%
加31.56%PEG到3.5%
A.Prepareone80Gallontankfor11.56%PEG.
准备1个80Gallon坦克配制11.56%。
TankNo.TareKg
坦克编号皮重
B.CalculatetheWFI（30-40℃）needed.
计算所需的WFI（30-40℃）。
Kg=Kg×1.144
Line6BLine1E
C.WeightheWFIaccordingtoLine6B.
根据Line6B称取WFI。
GrossKgTareKgNetKg
毛重皮重净重Line6C
Temp.ofWFITime
WFI温度时间
D.CalculatethePEGneeded.
计算所需的PEG。
Kg=Kg×0.227
Line6DLine1E
E.WeighthePEGaccordingtoLine6C.
根据Line6D称取PEG。
PEGLotNo.
PEG批号
GrossKgTareKgNetKg
毛重皮重净重Line6E
F.CalculatetheNa-citrateneeded.
计算所需的柠檬酸钠。
g=Kg×5.4321
Line6FLine1E
G.WeightheNa-citrateaccordingLine6D.
根据Line6F称取柠檬酸钠。
Na-citrateLotNo.
柠檬酸钠批号
GrossKgTareKgNetKg
毛重皮重净重Line6G
H.AddthePEGandNa-citrateintoWFIwithmixing.Continuemixinguntiltheydissolved.
边搅拌边，将PEG和Na-citrate加入WFI中。
搅拌到完全溶解。
Timeadded
加入时间
Timedissolved
溶解时间
DATE（日期）
PAGE（页数）8OF（共）35
PROCEDUREANDWORKRECORD
操作步骤与工作记录
OPERATOR
操作者
VERIFIER
核对者
I.Titrate100mlsamplewith1.0MHCl.
用1.0MHCl滴定100ml样品。
InitialpHTemp.ofsample
起始pH样品温度
J.Volumeof1.0MHClfortitrationofsample.
滴定样品所需的1.0MHCl体积。
1.0MHClLotNo.
1.0MHCl批号
Volumeof1.0MHClml
1.0MHCl体积Line6J
I.pHresult
pH值6.2-6.4
M.Calculatetherequiredamountof1.0MHCltoadjustpHofPEGsolutionto6.2-6.4.
计算调节PEG液pH到6.2-6.4所需的1.0MHCl。
L=×16.7×ml÷1000
Line6MLine1ELine6J
N.Takeouttherequired1.0MHClaccordingtoLine6M.
根据Line6M量取所需的1.0MHCl。
Volumeof1.0MHClL
1.0MHCl体积Line6N（Line6N=Line6M）
O.Add1.0MHClto31.56%PEGsolutionwithmixing.
边搅拌，边将1.0MHCl加入到31.56%PEG溶液中。
TimeaddedTimefinished
加入时间结束时间
P.Takeabout20mlsampleandmeasurepHaftermixing5minutes.
搅拌5分钟后，取约20ml样品测pH。
pHresultTemp.ofsampleTimemeasured
pH值样品温度（20-25℃）测量时间
Q.Calculatethe31.56%PEGrequiredtoadjustsuspensionto3.5%PEGconcentration.
计算调节悬浮液的PEG浓度到3.5%所需的31.56%PEG。
Kg=×0.1248
Line6QLine5I
R.Weighouttherequired31.56%PEGaccordingtoLine6Q.
根据Line6Q称取所需的31.56%PEG。
GrossKgTareKgNetKg
毛重皮重净重Line6R
S.Addthe31.56%PEGintosuspensionNMT0.5Kg/minwithmixing.
边搅拌，边将31.56%PEG加到悬浮液中，流速不超过0.5Kg/min。
Timeadded
加入时间
Timefinished
结束时间
DATE（日期）
PAGE（页数）9OF（共）35
PROCEDUREANDWORKRECORD
操作步骤与工作记录
OPERATOR
操作者
VERIFIER
核对者
T.Continuemixingfor15minutesafterPEGadded.
PEG加完后继续搅拌15分钟。
Timestarted
开始时间
Timefinished
结束时间
U.Weighthesuspension.
称重悬浮液。
GrossKgTareKgNetKg
毛重皮重净重Line6U
DATE（日期）
PAGE（页数）10OF（共）35
PROCEDUREANDWORKRECORD
步骤与工作记录
OPERATOR
操作者
VERIFIER
核对者
7.pHAdjustto6.50-6.60
调节pH到6.50-6.60
A.Titrate100mlsampleusing1.0NHAc.
用1.0NHAc滴定100ml样品。
InitialpHTemp.℃
起始pH温度
B.Volumeof1.0NHAcusedforsampletitration.
滴定样品所用的1.0NHAc。
Volumeml
体积Line7B
C.1.0NHAcBatchNo.
1.0NHAc批号
D.pHresult
pH值6.50-6.60
E.Calculatetherequiredamountof1.0NHActoadjustpHofsuspensionto6.50-6.60.
计算调节悬浮液pH到6.50-6.60所需的1.0NHAc。
L=Kg÷1.05Kg/L×10×ml÷1000
Line7ELine6ULine7B
F.Takeouttherequiredvolumeof1.0NHAcaccordingtoLine7E.
根据Line7E取所需的1.0NHAc。
VolumeL
Line7F（Line7F=Line7E）
G.Add1.0NHActosuspensionwithmixingatNMT0.2L/min.
边搅拌，边将1.0NHAc加到悬浮液中，流速不大于0.2L/min。
Timestarted
开始时间
Timefinished
结束时间
H.TakeasampleandmeasurethepHaftermixing5minutes.
搅拌5分钟后，取样测pH。
pHresultTemp.℃
pH值6.50-6.60温度
I.Continuemixingfor30minutesafterpHadjustment.
pH调节完后，继续搅拌30分钟。
Timestarted
开始时间
Timefinished
结束时间
DATE（日期）
PAGE（页数）11OF（共）35
PROCEDUREANDWORKRECORD
步骤与工作记录
OPERATOR
操作者
VERIFIER
核对者
J.Settlefor30minutes.
静置30分钟。
Timestarted
开始时间
Timefinished
结束时间
DATE（日期）
PAGE（页数）12OF（共）35
PROCEDUREANDWORKRECORD
步骤与工作记录
OPERATOR
操作者
VERIFIER
核对者
8.2.5%PEGCentrifugation
2.5%PEG离心
A.SendingTankNo.
送料坦克编号
B.ReceivingTankNo.Tare
接收坦克编号皮重
C.Checkallcentrifugationequipmentforcleanlinesspriortoset-up.
安装前检查所有离心设备的清洁。
D.Setupcentrifugationequipmentproperly.
正确安装离心装置。
Timestarted
开始时间
Timefinished
结束时间
E.Startcentrifugation.Flowrate:
≤1.5L/min,Temp.:
24-26℃,Pressure:
20-22psi.
开始离心，流速≤1.5L/min，温度24-26℃，压力20-22psi。
Recordcentrifugationdataon“CentrifugationLog”every20minutes.
每隔20分钟在“离心记录”上记录数据。
Timestarted
开始时间
Timefinished
结束时间
F.Weightheprecipitateanddiscardit.
沉淀称重后丢弃。
GrossKgTareKgNetKg
皮重毛重净重
G.Weighthesupernatant.
称重上清液。
GrossKgTareKgNetKg
皮重毛重净重Line8G
DATE（日期）
PAGE（页数）13OF（共）35
CENTRIFUGATIONLOG（RECORDEVERY20MINUTES）
离心记录（每隔20分钟记录）
ActualTime
实际时间
Temperature
温度
Flowrate
流速
（≤1.5L/min）
Pressure
压力
（20-22psi）
Operator
操作者
Verifier
核对
升级会员 