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诊断学实验报告.docx

1、诊断学实验报告实验诊断学实验报告 红细胞计数试验 实验目的: 通过红细胞计数实验 1、掌握红细胞计数方原理、方法及注意事项。 2、掌握血细胞计数板的结构 试验器材: 血细胞计数板、显微镜、盖玻片、试管、血红蛋白吸管、 生理盐水 实验原理: 一定量的血液经一定量等渗性稀释液稀释后,充入血细胞计数池中显微镜下 计数一定容积内的细胞,再换算成每升标本的细胞数报告。 操作步骤: 1、取红细胞稀释液2.0ml毫升,放入一小试管内。 2、用血红蛋白吸管吸血至l0ul处。 3、擦去管尖外部余血将血液迅速轻轻吹入盛有红细胞稀释液的试管内, 上清液嗽洗吸管2-3次,立即摇匀。 4、将计数池与盖玻片用软布料擦净,

2、将盖玻片覆盖于计数池上。 5、用吸管吸取混匀的红细胞悬液,充入计数池中。 6、待23分钟,让红细胞完全下沉后,将计数板平放在显微镜台上,用低 倍镜观察,如红细胞分布均匀即可换高倍镜进行计数。 红细胞计数的区域: 中心大方格中的5个中方格(正中一个和四角各一个)。 计数原则: 数上不数下,数左不数右的计数原则即凡压在中方格边线(双线)上的红细胞,只计上侧与左侧线上的细胞,而压在下侧与右侧线上者不计入。 计算: 红细胞数/l=5个中方格内红细胞数510201106 或 红细胞数/l=5个中方格内红细胞数1001012 式中5 5个中方格换算成1个大方格 10 1个大方格容积为0.1ul,换算成1.

3、0 ul。 201 血液的稀释倍数 106 由u1换算成l 数据处理: rbc: l0/l 12参考值 男:(45.5)10/l 12 女:(3.55)10/l 12 新生儿:(67)10/l 12 答案不唯一,言之有理即可 注意事项: 1、吸管、试管要注意清洁、干燥以防溶血,操作迅速避免血液凝固,如有血 凝块应重新采血。 2充液前,红细胞复液要充分摇匀,红细胞悬液注入计数池内要求分布均匀, 不可有气泡,亦不可有多余液体外溢。 3、中方格内红细胞分布应均匀,健康成人每中方格红细胞数约为80100个, 各中方格内之红细胞相近,如悬殊过大(超过10个细胞以上的)应重混匀再充填。 实验诊断学实验报告

4、 血红蛋白测定 实验目的: 通过血红蛋白测定 1、氰化高铁血红蛋白比色法原理及技术。 2、掌握红血红蛋白测定的原理、方法及注意事项。 试验仪器: 试管、微量吸管、分光光度计 实验原理: 血红蛋白中的亚铁离子(fe2+)被高铁氰化钾氧化成高离子(fe3+),血红蛋 白转化成高铁血红蛋白,高铁血红蛋白与氰离子(cn-)结合,生成稳定的氰化高铁血红蛋白。用光电比色计在540nm波长比色。从hicn参考液制作的标准曲线上读取血红蛋白克数。 操作步骤: 1、取试剂5毫升加入血液20ul混匀置5分钟 2、用721光电比色仪,540nm波长,试剂为空白调0点比色,读取 光密度,查标准曲线得结果。 计算: 血

5、红蛋白(g/l)=测定管吸光度367.7 数据处理: 答案不唯一,言之有理即可 hb : gl 参考值 男0.400.54l/l 女: 0.370.48l/l 儿童:0.350.49l/l 新生儿:0.500.60l/l 注意事项: 1、做血红蛋白测定,白细胞计数和分类计数,在采血时应先做血膜再做红细胞,然后做白细胞,血红蛋白检验,避免红细胞破坏。篇二:实验诊断学实验报告(牡丹江医学院) 实验诊断学试验操作报告 目录 一、 红细胞计数试验 二、 血红蛋白测定 三、 白细胞计数 四、 白细胞分类计数 五、 尿比重 六、 尿沉渣定性检查 七、 尿蛋白检查磺基水杨酸法 八、 尿干化学分析 九、 尿葡

6、萄糖定性检查(班氏法) 十、 abo血型测定 红细胞计数试验 实验目的: 通过红细胞计数实验 1、掌握红细胞计数方原理、方法及注意事项。 2、掌握血细胞计数板的结构 试验器材: 血细胞计数板、显微镜、盖玻片、试管、血红蛋白吸管、 生理盐水 实验原理: 一定量的血液经一定量等渗性稀释液稀释后,充入血细胞计数池中显微镜下 计数一定容积内的细胞,再换算成每升标本的细胞数报告。 操作步骤: 1、取红细胞稀释液2.0ml毫升,放入一小试管内。 2、用血红蛋白吸管吸血至l0ul处。 3、擦去管尖外部余血将血液迅速轻轻吹入盛有红细胞稀释液的试管内, 上清液嗽洗吸管2-3次,立即摇匀。 4、将计数池与盖玻片用

7、软布料擦净,将盖玻片覆盖于计数池上。 5、用吸管吸取混匀的红细胞悬液,充入计数池中。 6、待23分钟,让红细胞完全下沉后,将计数板平放在显微镜台上,用低 倍镜观察,如红细胞分布均匀即可换高倍镜进行计数。 红细胞计数的区域: 中心大方格中的5个中方格(正中一个和四角各一个)。 计数原则: 数上不数下,数左不数右的计数原则即凡压在中方格边线(双线)上的红细胞,只计上侧与左侧线上的细胞,而压在下侧与右侧线上者不计入。 计算: 红细胞数/l=5个中方格内红细胞数510201106 或 红细胞数/l=5个中方格内红细胞数1001012 式中5 5个中方格换算成1个大方格 10 1个大方格容积为0.1ul

8、,换算成1.0 ul。 201 血液的稀释倍数 106 由u1换算成l 数据处理: rbc: l0/l 12参考值 男:(45.5)10/l 12 女:(3.55)10/l 12 新生儿:(67)10/l 12 答案不唯一,言之有理即可 注意事项: 1、吸管、试管要注意清洁、干燥以防溶血,操作迅速避免血液凝固,如有血 凝块应重新采血。 2充液前,红细胞复液要充分摇匀,红细胞悬液注入计数池内要求分布均匀, 不可有气泡,亦不可有多余液体外溢。 3、中方格内红细胞分布应均匀,健康成人每中方格红细胞数约为80100个, 各中方格内之红细胞相近,如悬殊过大(超过10个细胞以上的)应重混匀再充填。 血红蛋

9、白测定 实验目的: 通过血红蛋白测定 1、氰化高铁血红蛋白比色法原理及技术。 2、掌握红血红蛋白测定的原理、方法及注意事项。 试验仪器: 试管、微量吸管、分光光度计 实验原理: 血红蛋白中的亚铁离子(fe2+)被高铁氰化钾氧化成高离子(fe3+),血红蛋 白转化成高铁血红蛋白,高铁血红蛋白与氰离子(cn-)结合,生成稳定的氰化高铁血红蛋白。用光电比色计在540nm波长比色。从hicn参考液制作的标准曲线上读取血红蛋白克数。 操作步骤: 1、取试剂5毫升加入血液20ul混匀置5分钟 2、用721光电比色仪,540nm波长,试剂为空白调0点比色,读取 光密度,查标准曲线得结果。 计算: 血红蛋白(

10、g/l)=测定管吸光度367.7 数据处理: 答案不唯一,言之有理即可 hb : gl 参考值 男0.400.54l/l 女: 0.370.48l/l 儿童:0.350.49l/l 新生儿:0.500.60l/l 注意事项: 1、做血红蛋白测定,白细胞计数和分类计数,在采血时应先做血膜再做红细胞,然后做白细胞,血红蛋白检验,避免红细胞破坏。 白细胞计数 实验目的: 掌握白细胞计数显微镜计数法原理及技术。 实验器材: 显微镜、微量吸管、计数板、盖玻片、白细胞稀释液。 实验原理: 用稀醋酸液将血液稀释并破坏红细胞,混匀后充入计数池中,于显微镜下计 数一定体积内的白细胞数,经过换算求得每升血液内的白

11、细胞数。 操作步骤: 1、取试管1支,加白细胞稀释液0.38ml。 2、用清洁干燥的微量吸管准确吸取末梢血20微升或抗凝血20微升。 3、擦去管尖外部余血、轻轻注入稀释液底部,再吸取上清液清洗3次,摇匀。 4、将计数板与盖玻片用软布擦净,将盖玻片覆盖于计数池上,再 用微量吸管吸取悬液,充入计数池与盖玻片间的细缝隙中,静止2-3分钟,待白细胞下沉。 5、用低倍镜计数四角的四个大方格内的白细胞数。 计算: (四个大方格内wbc数/4)1020 106 =wbc数/20109/升 数据处理:答案不唯一,言之有理即可 正常参考值: 成 人:(4-10)109/升 新生儿:(15-20)109/升 6月

12、-2岁:(11-12)109/升 白细胞分类计数 实验目的: 掌握白细胞分类计数、原理及技术。 实验器材: 显微镜、染色缸和架,载玻片、瑞氏染液、香柏油、二甲苯。 实验原理: 把血液制成细胞分布均匀的薄膜涂片,经wright染色后,显微镜下观察,根 据白细胞形态特点逐个分类计数。得出各种白细胞的相对比值,并注意观察其形态和质量的变化。 操作步骤: 1、取末梢血1滴。置于载玻片的一端,以边缘平滑的推片制成血涂片,空 气干燥。 2、用蜡笔在血膜两端划线,以防染液溢出,然后将血片放于染色架上。 3、先加瑞氏染液数滴,使其覆盖整个血膜,固定染色细胞0.5-1分钟。 4、按1:1或1:2加缓冲液与染料混

13、匀,染色10分钟左右。 5、在血膜染10分钟后,用缓冲液或接近中性的水冲去洗液,待自然 干燥或滤纸吸干后,用镜油观察。 计算: 1、先用低倍镜观察血片染色情况,白细胞多少和细胞分布情况。 2、选择血涂片的体尾交界处,染色良好的区域,在油镜下计数 100-200个白细胞,按其形态特征进行分类计数,求出各自白细胞所占数值(百分率)。 3、白细胞分类计数方法很多,常用的有,完全记录法、半记录法、 分类计数器计数法。 4、每个病人应分类白细胞数,视白细胞总数多少而定。 5、各类细胞所占的百分率乘以白细胞总数/升,既得每升血液中各类白细胞的度。 数据处理: 答案不唯一,言之有理即可 篇三:诊断学实验总结

14、(官方版) 实验诊断学总结 第一章 总论 概念 1 临床检验:以离体的血液、体液、排泄物等为标本,通过试剂、仪器等进行检测,并对检测的过 程进行全面的质量控制,最终得到可靠的检测结果或数据。 2 实验诊断:通过临床检验得到的信息为预防、诊断、治疗和预后评价所作的临床医学活动。 3 床边检验:在病人医疗现场进行的临床检验。 4 参考值或参考范围:参考值是指对抽样的个体进行某项目检测所得的值;参考范围是指所有抽样 组测得值的平均值加减其标准差。 5 质量控制:为保证临床检验结果质量(满足医生/客户要求)而采取的一系列检查、控制手段 第二章 血液检查examination of blood 一、血液

15、:不断地流动于人体的循环系统中,直接或间接参与全身各个组织器官的新陈代谢、功能调节及维持人体内、外环境间的平衡,完成各项生理功能活动。 二、1. 血液有形成分的组成 血细胞 占全血4050%,称之有形成分 1.白细胞 中性粒细胞、 淋巴细胞、单核细胞、 嗜酸性粒细胞、 嗜碱性粒细胞 2.红细胞 (主要成分是血红蛋白) 3.血小板 三血液一般检查general examination of blood(血常规) 1、一些缩写 erythrocyte count (rbc) 红细胞计数 hemoglobin determination (hb) 血红蛋白测定 leukocyte count (wb

16、c) 白细胞计数 differential leukocyte count白细胞分类 platelet count ( plt) 血小板计数 新生儿特点:红、白细胞都比成人高,红细胞呈生理性巨幼红细胞贫血的表现,白细胞呈感染的表现(粒细胞增高并左移) 2、红细胞计数 erythrocyte count 方法:显微镜计数法;全自动血细胞分析仪计数法 操作:用等渗稀释液将血液作 200 倍稀释,滴入血细胞计数板中静止 1-2 min,于高倍镜下计数 5 个中方格红细胞总数,经换算即得每升血液中血红细胞数。 公式:rbc/l= 5个中方格总数510200106 报告格式: .1012/l 3.811

17、012 /l 参 考 值 (男)4.05.51012/l (女)3.55.01012/l (新生儿)6.07.01012/l 各种红细胞的形态 3相关检测 1平均红细胞容积(mcv):mcv=红细胞比容/红细胞数 红细胞数参考值: 80-94fl 2 红细胞比容测定(hct):抗凝全血经离心沉淀后,测得下沉的红细胞在全血中所占容积的百分比值。 参考值 男性42-49% 女性 37-48% 3平均红细胞血红蛋白量(mch): 指平均每个红细胞内所含血红蛋白的量。 4平均红细胞血红蛋白浓度(mchc): 指平均每升红细胞中所含血红蛋白浓度 参考值: 310-350g/l mchc=血红蛋白(g/l

18、)/ 红细胞比容(%)100g/l 5红细胞容积分布宽度 (rdw):rdw=s.d./ 平均红细胞体积 平均红细胞体积参考值:11.5-14.5% rdw 的统计学实质是红细胞大小的变异系数 cv rdw<14% 类型 mcv mch mchc 临床类型 大细胞贫血 >100 >32 310-350 巨幼细胞贫血 正常细胞贫血 80-94 26-32 310-350 aa急性失血性贫血,溶血性贫血,骨髓病性贫血 单纯小细胞贫血 <80 <26 310-350 慢性炎症性贫血肾性贫血 小细胞低色素贫血 <80 <26 <300 缺铁性贫血,铁粒幼

19、细胞性贫血,珠蛋白生成障碍性 贫血,慢性失血性贫血 4临床意义: ( 红细胞增加 ) 相对性增高:各种原因导致的血浆容量减少,使红细胞相对增多。剧烈呕吐、严重腹泻、大面积烧伤、多汗、多尿。 绝对性增高:由于缺氧而致红细胞代偿性增多,红细胞增多的程度与缺氧程度成正比 生理性:胎儿、新生儿、高原地区居民、剧烈体力劳动、情绪激动时,红细胞可一过性增多 病理性:严重慢性心、肺疾患,如阻塞性肺气肿、肺源性心脏病、紫绀型先天性心脏病,真性红细胞增多症 ( 红细胞减少 ) 生理性:妊娠中、后期,血容量增加约 25 %,引起血液稀释;6个月2岁的儿童由于生长发育迅速,血容量急剧增加而致造血原料相对不足;老年人

20、造血功能明显减低致红细胞减少;月经期暂时引起下降。 病理性:各种类型贫血:如缺铁性贫血、巨幼红细胞性贫血、溶血性贫血、再生障碍性贫血、继发性贫血等。 5网织红细胞计数及正常参考值: 1网织红细胞是晚幼红细胞脱核后,在完全成熟之前的过渡型红细胞。由于胞浆中尚存核糖体、核糖核酸等嗜碱物质,用煌焦油兰等染料进行活体染色后,胞浆中可见蓝绿或蓝色的网状结构,故名网织红细胞。 成人:0.5%-1.5%新生儿(<3月):2%-6% 2网织红细胞计数的意义 增多:骨髓增生旺盛。常见于溶血性贫血,尤其是急性溶血性贫血(可达20%以上)、急性大失血。贫血治疗有效。如缺铁性贫血、巨幼细胞性贫血,经相应治疗后1

21、-2日即开始,1周左右达最高峰 减少:骨髓增生低下,如再生障碍性贫血、溶血性贫血有再生障碍危象时 6白细胞测定 mch=血红蛋白(g/l)/ 红细胞百万数/l 参考值: 26-32pg 1白细胞计数leukocyte count 方法:显微镜计数法 、全自动血细胞分析仪法 计数法:以 2% 冰醋酸对血液作定量稀释,同时破坏红细胞。然后将悬液充入细胞计数池内,低倍镜计数 4 个大方格内白细胞总数。计算原则同红细胞。 原理(显微镜计数原理):用 2 % 乙酸对血液作定量稀释,同时破坏红细胞。混匀并滴入计数室中,低倍显微镜下计数 4 大方格内的白细胞数,经换算得每升血液中白细胞总数。 公式:wbc/

22、l = 4 格白细胞总数 ? 41020106 报告格式:.109/l 参考值:成人4.010.0 109/l;新生儿15.020.0 109/l 临床意义 (白细胞增高) 生理性增高:见于妊娠期、分娩时、新生儿;剧烈运动、淋浴;严寒、高温;午后高于清晨;饮食后高于饮食前等; 病理性增高:急性感染如肺炎、扁桃体炎、急性阑尾炎。严重组织损伤、大量细胞破坏。如术后1276h,wbc常 >10.0109/l;急性心肌梗死后12d,常见wbc明显增高;急性溶血亦见wbc增多,增多成分以中性分叶核粒细胞为主。急性大出血:如脾脏破裂或宫外孕输卵管破裂后,wbc迅速增多常达20.0109/l。这可能是

23、应激状态、或内出血一过性缺氧。急性中毒:如安眠药、滴滴畏中毒, wbc可高达20109/l以上,代谢性酸中毒。如糖尿病、酮体症、酸中毒及慢性肾炎尿毒症时,也常见wbc增多,均以中性粒细胞为主。 白血病及恶性肿瘤:急、慢性白血病、肝癌、胃癌等肿瘤细胞可产生促粒细胞生成素,并能吸引骨髓储备池wbc释放。 (白细胞减少) 某些革兰氏阴性杆菌感染如伤寒、副伤寒杆菌感染时,白细胞总数可低至2.0109/l;病毒感染。某些血液病如再生障碍性贫血;巨幼红细胞性贫血;恶性网状细胞病 (恶组);急性非白血性白血病。脾功能亢进破坏过多、脾素抑制骨髓生成;慢性理化损伤;电离辐射,如x线、放射性核素等;服氯霉素。自身

24、免疫性疾病如系统性红斑狼疮。 2白细胞分类计数与临床意义 中性粒细胞(neutrophil):游走、吞噬 50 70% 嗜酸性粒细胞(eosinophil):致敏反应0.5 5% 嗜碱性粒细胞(basophil):释放组织胺、肝素0 1%单核细胞(monocyte):吞噬、清除死亡细胞及异物3 8% 淋巴细胞(lymphocyte):参与体液、细胞免疫20 40% 中性粒细胞neutrophil 生理特性:渗出性、变形性、趋化性、吞噬性 骨髓 血液 分裂池 成熟池 储备池 边缘池循环池 4-5d 1-3d 2-3d 核左移:原粒早幼粒中幼粒/晚幼粒杆状核/杆状核分叶核/分叶核细胞核左移:周围血

25、中杆状核粒细胞增多甚至出现晚幼粒、中幼粒、早幼粒等细胞时均称为核左移 杆状核粒细胞增多:6%:轻度左移;10%:中度左移;25%:重度左移或称为类白血病反应 类白血病反应 :患儿男, 2.5岁,日本籍,于10天前因受冷而发热,自测体温38(腋下),无畏寒、头痛、呕吐、腹泻,就诊于当地医院,血常规 wbc 28.9109/l,阿莫西林0.125g 3/日治疗,无明显好转,4天后患儿面、背及双上肢皮肤反复出现散在红色丘疹,停药否无区别。1999年7月5日急诊住我院。实验室检查,血象:hb110g/l, wbc 23109/l,血小板 121109/l,幼稚型异常淋巴 56%,成熟淋巴 21%,嗜酸

26、性粒细胞2%,中性粒细胞 21%,骨髓穿刺二次,骨髓细胞分类象同血涂片象。 细胞核右移:正常人周围血中性粒细胞以三叶核者为主,若五叶者超过5% 时为核右移,此时常伴有白细胞总数减少。一过性地出现核右移是正常现象。如在疾病进行期突然出现核右移的变化,则表示预后不良 中性粒细胞临床意义 生理性增高:见于妊娠期、分娩时、新生儿期;剧烈运动、热水浴;严寒、高温;午后高于清晨;饮食后高于饮食前等 病理性增高:急性感染;严重组织损伤;急性大出血;急性中毒;白血病及恶性肿瘤 病例:患者朱全妹,女性,47岁,因砖墙砸伤腰骶臀部致左下肢活动受限伴腰骶臀部皮肤发紫5天于20011204由急诊收治入院。 1创伤性失

27、血性休克 2腰骶部、髂后部、右臀后部皮肤严重挫擦伤伴皮下积血 3骨盆严重骨折 4会阴部、肛门严重挫裂伤 血常规检查结果:hb:92g/l rbc:3.01012/l plt:271109/l wbc:32.7109/l:中幼粒细胞: 2% ;晚幼粒细胞:5% 杆状核粒细胞:35% ;多核粒细胞:45% ;淋巴细胞:9% 单核细胞: 4% 中性粒细胞减少:某些革兰氏阴性杆菌感染;某些血液病;脾功能亢进;慢性理化损伤;自身免疫性疾病 淋巴细胞lymphocyte 病理性增多见于:病毒性感染;某些慢性感染;各类淋巴细胞性白血病 淋巴细胞减少见于:接触放射线;应用肾上腺皮质激素及肾移植术后、aids

28、单核细胞monocyte 单核细胞病理性增多见于:心内膜炎、疟疾、黑热病;急性感染的恢复期;活动性肺结核及粟粒性结核;慢性单核细胞白血病 嗜酸性粒细胞eosinophil 增高见于:过敏性疾病;寄生虫病;皮肤病;慢性嗜酸性白血病及淋巴瘤 7血小板计数platelet 是由骨髓中成熟巨核细胞生成;在止血过程中起着重要的作用 计数方法:显微镜计数法;全自动血细胞分析仪法 参考值100300109/l 临床意义 血小板增多 > 400109/l;见于血小板增多症、慢性粒细胞增多症、真性红细胞增多症、骨髓纤维化、脾切除等。 血小板减少 < 100109/l;见于血小板减少紫癜(itp)、再

29、生障碍性贫血、急性白血病、x射线照射。 病例 患者:女32岁 已婚 ,有一8岁女儿,无业 主述:经常头痛、疲乏、失眠。右肋骨下疼痛,胸骨疼痛。患者长期服用减肥药,无间断 血液检验结果: ?wbc:15.4109/l rbc:5.531012/l ?nc: 85.2% hb: 150g/l ?lc: 11.6% plt: 1321 109/l ?mo: 1.8% rdw: 17.8 % ?eos: 0.9% bas: 0.5% 8血红蛋白测定 方法:氰化高铁血红蛋白法全自动血细胞分析仪 原理:除hbs外,多种血红蛋白(hb)均可被高铁氢化钾氧化成高铁血红蛋白(hi),再与cn- 结合生成稳定的棕红色氧化高铁血红蛋白(hicn),在540nm处有一吸收峰 9、全自动血细胞分析仪 多项参数测定 仪器组成:1.主机 2 终端机 3 打印机 阅读报告:1.18、23 项参数中英文报告2.图解3. 警告标志4. 含义报告 库尔特原理:孔径阻抗细胞计数原理 白细胞自动化分类 二项式分类 粒细胞和非粒细胞 三项式分类 淋巴、中性粒细胞和中间细胞 五项式分类 嗜中、嗜碱、嗜酸、淋巴、单核细胞 第三章 贫血 一、贫血总论 1贫血a

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