可溶性糖测定.docx

1、可溶性糖测定引言 可溶性糖包括葡萄糖、 果糖、蔗糖等单糖和双糖， 是植物品质的重要构成性状之一， 尤其是以果实为目的产品的植物， 可溶性糖与酸的含量及其配比是影响果实风味品质的 重要因素。对于鲜食品种，一般来讲，高糖中酸，风味浓，品质优；低糖中酸，风味淡， 品质差。因此，可溶性糖的定量研究对植物的品质育种、储藏、加工特性等具有重要意 义。而且可溶性糖广泛存在于植物的根、茎块和种子中，是人体热量的最最主要来源， 具有较高的营养价值。本文重点介绍蒽酮比色法、铜还原碘量法、费林试剂法、原子吸 收法、气相色谱法、液相色谱 -蒸发光散射法，及连续流动法这几种实验如何定量测定 可溶性糖含量。1蒽酮比色法1

2、.1原理 糖在硫酸作用下生成糠醛，糠醛再与蒽酮作用形成绿色络合物，颜色的深浅与糖含 量有关。在 625 nm 波长下的 OD 值与糖含量成正比。由于蒽酮试剂与糖反应的呈色强 度随时间变化，故必须在反应后立即在同一时间内比色。1.2仪器与材料1.2.1实验仪器 分光光度计，电炉，铝锅，电子天平， 20ml 刻度试管，刻度吸管 5ml 1支、 1ml 2 支，漏斗。1.2.2实验试剂（1）蒽酮乙酸乙酯试剂：取分析纯蒽酮 1g，溶于 50ml 乙酸乙酯中，贮于棕色瓶中，在黑暗中可保存数星期，如有结晶析出，可微热溶解。（2）浓硫酸（比重 1.84）。1.2.3实验材料 植物叶片。1.3实验方法1.3.

3、1标准曲线的制作 取 20ml 刻度试管 11支，从 010分别编号，按表 24-1 加入溶液和水。表 1 各试管加溶液和水的量管号01 、23 、 45 、 67 、89 、 10100 g/ml 蔗 糖 液 (ml)00.20.40.60.81.0水(ml)2.01.81.61.41.21.0蔗糖量 （ g）020406080100然后按顺序向试管内加入 1ml 9%苯酚溶液，摇匀，再从管液正面快速加入 5ml 浓硫酸， 摇匀。比色液总体积为 8ml，在恒温下放置 30min，显色。然后以空白为参比， 在 485nm 波长下比色测定，以糖含量为横坐标，光密为纵坐标，绘制标准曲线，求出标准直

4、线方 程。按表 1 加入标准的蔗糖溶液，然后按顺序向试管中加入 0.5ml 蒽酮乙酸乙酯试剂和 5ml 浓硫酸，充分振荡，立即将试管放入沸水浴中，逐管均准确保温 1min，取出后自然冷却至室温，以空白作参比，在 630nm 波长下测其光密度，以光密度为纵坐标， 以糖含 量为横坐标，绘制标准曲线，并求出标准线性方程。1.3.2可溶性糖的提取取新鲜植物叶片， 擦净表面污物， 剪碎混匀，称取 0.100.30g，共 3 份，或干材料。 分别放入 3 支刻度试管中，加入 510ml 蒸馏水，塑料薄膜封口，于沸水中提取 30min （提取 2次），提取液过滤入 25ml 容量瓶中，反复冲洗试管及残渣，定

5、容至刻度。 1.3.3显色测定吸取样品提取液 0.5ml 于 20ml 刻度试管中（重复 2 次），加蒸馏水 1.5ml，以下步 骤与标准曲线测定相同，测定样品的光密度。1.3.4结果计算可溶性糖含量 （mg/g） = （从回归方程求得糖量 /吸取样品液的体积） 提取液量 稀释倍数样品干重 10-62铜还原碘量法2.1原理试剂中的 Cu2+与还原糖作用，生成氧化亚铜 （Cu2O）沉淀。加入 H2SO4 后，氧化亚铜 溶解生成 Cu+,试剂中的 KIO 3与KI 在酸化的同是生成 I2。KIO 3+5KI+3H 2SO43K2SO4+3H2O+3I2，然后 Cu+被 I2氧化，2Cu+I2 2C

6、u+ + 2I- 溶液中剩余的碘以淀粉为指示剂，用 Na2S2O3 标准溶液滴定： Na2S2O3+ I2 Na2S2O6 + 2NaI同时以水代替样试液做空白滴定， 将空白与样品的滴定差值带入由滴定标准系列糖 液计算的回归方程中，即可求得所求试样中还原糖的含量。2.2仪器与试剂2.2.1实验试剂除非另有说明，在分析中仅使用分析纯试剂和 GBT 6682 规定的至少三级水。 氢氧化钠溶液碱性铜试剂， 盐酸溶液 c（HCl）=1molL ，亚铁氰化钾溶液 wK4Fe （CN）6H2O=15，硫酸锌溶液 w（ZnSO47H2O）6H2O=30，硫酸+草酸混 合液，硫代硫酸钠溶液，硫代硫酸钠工作溶液

7、 c（Na2S2O3）=0.005molL ，淀粉指示 剂，酚酞指示剂，氢氧化钠溶液 c（NaOH）=0.5molL ，葡萄糖标准液。 2.2.2仪器和设备分析天平，高速组织捣碎机，电磁炉、可调温电炉或恒温水浴锅， 25mL 滴定管， （酸式、减式皆可），鼓风干燥箱。2.3实验方法2.3.1样品制备（1）新鲜样品：取有代表性的样品，洗净，把水吸干，用四分法取样，切碎，混 匀，用组织捣碎机匀浆。黄瓜，番茄等多汁蔬菜可直接制成匀浆。其他样品蔬菜可称取 切碎混匀的样品 100.0g，加入 100mL 水制成匀浆，韭菜等水分较少的蔬菜可称取切碎 混匀的样品 100.0g，加入 200mL 水制成匀浆。

8、去相当于 10g样品的匀浆， 精确到 0.01g， 用水洗入 100mL 容量瓶（ V1 ）中，加入亚铁氰化钾溶液和硫酸锌溶液各 1mL（如菜豆 累高蛋白蔬菜可加入 2mL ）。摇匀后定容，放置片刻，等沉淀分离后过滤备用。（2）干制品：将样品至于 6367鼓风干燥后，用粉碎机粉碎，过 0.5mm 筛。 去 1.00g2.00g 粉碎的样品防雨烧杯中，加入少量水湿润，用水洗入 100mL 容量瓶中，用沸水浴加热 10min，冷却后， 加入亚铁氰化钾溶液和硫酸锌溶液各 1mL，摇匀后定容， 过滤后备用。（3） 制品各种酱腌菜：去切碎混匀的样品 100.0g，加入 100mL 水制成匀浆。蔬 菜罐头

9、可直接制取匀浆， 操作步骤同 5.1。番茄酱混匀后， 可直接制取 5.00g 样品用水洗 入 100mL 容量瓶同 5.1操作。蔬菜汁称取混匀的样品 20.00g用水洗入 100mL 容量瓶同5.1操作。2.3.2还原糖的鉴定（1） 标准曲线的制作：用移液管吸取 0、 1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL 的葡萄糖标 准液与 100mL 锥形瓶中，或 200mm25mm 的试管中，各加水至 5.0mL，加入 5mL 的 铜试剂，锥形瓶或试管口上加小漏斗，用相应的架子固定，置于沸水浴中加热 15min。取出后立即置于冷水中， 冷却至 25到 30。将加盖小漏斗更换为表面皿 （不可摇动）。

10、加入 2mL 硫酸 +草酸的混合液，立即摇动，使氢氧化亚铜完全溶解。用硫代硫酸钠工作 溶液滴定至浅黄绿色时，加入约 0.5mL 的淀粉指示剂，滴定至蓝色消失为终点。以糖的 含量（ mg）为 y，空白与糖液滴定差值为 x，计算回归方程 y=bx+a并计算出 a和 b的值。 标准曲线于没新配一次铜试剂和硫代硫酸钠储备液制备一次即可。（2）试样还原糖的测定： 根据不同样品中糖的含量， 用移液管吸取 5mL10mL（V2） 与 50mL 或 100mL（V3）于容量瓶中 .用水定容 （含糖量低的样品不作次稀释处理 ）。从容量 瓶中吸取 5.00mL（V5）与锥形瓶或试管中，加入 5.00mL 的铜试剂

11、。以下按 6.1.1标准 曲线的制作步骤操作。记录滴定值（ V4 ）。同时以水代替试样作空白（可不加热） 。将试 样与空白滴定差值带入回归方程即可算出试样中还原糖的含量。 如试样与铜试剂加热反 应后，砖红色氧化亚铜的含量较多看不到蓝色，则样品含糖量偏高， 可酌情吸取 1mL 4mL 样液，加水至 5.00mL 测定。滴定值应不少于标准曲线的最高点。（3）试样可溶性总糖测定：用移液管吸取 5mL 10mL 与 50mL 或 100mL 于容量 瓶中，加入 1mL 的盐酸溶液，置于沸水浴中加热 10min，冷却，加入酚酞试剂 12 滴， 用约 0.5molL 氢氧化钠溶液中和至红色，再用稀盐酸调定

12、红色刚刚消失，定容。以下 按还原糖步骤操作 1。2.3.3结果计算试样中可溶性总糖的的含量以质量分数 w1 计，单位以百分率（）表示，计算式 如下：W1=a+b（V0-V4） V1 V3/V2 V5 m10003费林试剂法3.1原理在沸热条件下 ,用还原糖溶液滴定一定量的费林试剂时将费林试剂中的二价铜还原 为一价铜 ,以亚甲基蓝为指示剂 ,稍过量的还原糖立即使蓝色的氧化型亚甲基蓝还原为无 色的还原型亚甲基蓝。3.2仪器与试剂3.2.1仪器设备 高速组织捣碎机，电热恒温水浴， 1000W 调温电炉， 200ml,250ml 容量瓶， 250ml 锥形瓶， 50ml 碱式滴定管。3.2.2实验试剂

13、（1）费林试剂甲：称取硫酸铜（CuSO45H2O，分析纯）34.6g溶于水中，稀释至 500ml， 过滤，贮于棕色瓶内。（2）费林试剂乙：称取氢氧化钠 50g 和酒石酸钾钠 （KNaC4O6H44H2O，分析纯 ）138g 溶于水中，稀释至 500ml,用石棉垫漏斗抽滤。（3）转化糖标准溶液：称取 9.5g 蔗糖（分析纯 ）用水溶解后转入 1000ml 容量瓶中，加 入 6MHCl（ 分析纯 ）10ml, 加水至 100ml。在 2025下放置三天或在 25保温 24h，然 后用水定容 （此为酸化的 1%转化糖液 ,可保存 34 个月 ）。测定时，取 1%转化糖液 25.00ml 放入 250

14、ml 容量瓶中 ,加入甲基红指示剂一滴，用 1MNaOH 溶液中和后用水定 容，即为 1mg/ml 转化糖标准溶液。（4）亚甲基蓝溶液：称取 0.5g亚甲基蓝（分析纯）溶于 100ml水中。（5）乙酸锌溶液：称取 21.9g 乙酸锌 Zn（OAC）22H2O，分析纯溶于水中，加冰 乙酸 3ml ，稀释至 100ml。（6）亚铁氰化钾溶液：称取 10.6g 亚铁氰化钾 K4Fe（CN）63H2O,分析纯溶于水， 稀释至 100ml。3.3实验方法3.3.1样品提取液制备 取待测样品适量，洗净，用不锈钢刀将可食部分切成适当小块充分混匀后，按四分 法取样。称取 100g 鲜样加入等重量的水，放入组织

15、捣碎机中捣成 1:1 匀浆，有些材料 匀浆比例可适当调整， 多汁果蔬类可直接捣浆。 称取匀浆 25.0或 50.0g（相当于样品 12.5 或 25.0g）放入 150ml 烧杯中，含有机酸较多的材料加 0.52.0g粉状 CaCO3调至中性 （广 范试纸检试 ）。用水将样液全部转入 250ml 容量瓶中，并调整体积约为 200ml。置 80 2 水浴保温 30min，其间摇动数次，取出加入乙酸锌溶液及亚铁氰化钾溶液各 25ml,冷却至室温后，用水定容，过滤备用。3.3.2可溶性糖测定（1）费林试剂的标定：取费林试剂甲、乙各 5.00ml 或在测定前先等体积混合后取 10.00ml 混合液于

16、250ml 锥形瓶中 ,放入玻璃珠 45 粒,先加入比预测 （按 6.2 进行预测 ） 仅少 0.5ml 的 1mg/ml 转化糖标准液。将此混合液置 1000W 电炉上加热 ,使其在 2min 左右沸腾 ,准确煮沸 2min,此时不离开电炉 ,立即加入 0.5%亚甲基蓝指示剂 6 滴,并继续 以每 45s 的滴速滴加标准糖液 ,直至二价铜离子完全被还原生成砖红色氧化亚铜沉淀 , 溶液蓝色褪尽为终点。用准确滴定标准糖液的毫升数 V1,乘以标准糖液浓度 mg/ml, 即得 10ml 费林试剂所相当的糖的毫克数。 取已经制备的待测液 100ml 于 200ml 容量 瓶中,加 6MHCl10ml

17、。在 802水浴加热 10min,放入冷水槽中冷却后 ,加甲基红指示剂 二滴用 6M 及 1MNaOH 溶液中和 ,用水定容。（2）预测：取费林试剂甲、乙各 5.00ml或 10.00ml混合液于 250ml锥形瓶中 ,，滴定 管加入待测糖液约 15ml,在电炉上加热至沸， 约沸 15s后迅速滴加待测糖液 ,至呈现极轻 微的蓝色为止，此时加入 0.5%亚甲基蓝指示剂 6 滴，继续滴加待测糖液，直至溶液蓝 色褪尽为止，记下待测糖液的用量 V2（毫升数 ）。（3）准确测定：取费林试剂甲、乙各 5.00ml 或 10.00ml 混合液加入锥形瓶中，由滴 定管加入比预测仅少 0.5ml 的待测糖液，并

18、补加 V1V2 毫升水 （标定费林试剂所消耗 的标准糖液毫升数 V1 减去预测消耗的待测糖液毫升数 V2,即为应补加水的毫升数 ），使 其与标定费林试剂时的反应体积一致。以下按费林试剂标定同样操作，继续滴至终点。 前后沸热时间须在 3min 左右。待测糖液消耗量应控制在 1550ml 范围内，不能大于 标定费林试剂所用标准糖液体积 V1。否则应增减称样量重新制备待测液 2 。 3.3.3结果计算待测液可溶性糖含量 （%）=滴定标准糖液的毫升数 /待测液滴定的毫升数4原子吸收法4.1原理 将样液与过量的碱性铜盐反应，使产生沉淀，然后取上层清液用原子吸收分光光谱 仪测定剩余铜含量，通过标准曲线计算

19、水果蔬菜中可溶性糖含量 3 。4.2仪器与试剂4.2.1实验仪器 原子吸收分光光谱仪，电热恒温水浴锅，高效自动阻止捣碎机，电子天平。4.2.2实验试剂（1）葡萄糖标准贮备液， 5g/L（2）碱性铜盐溶液（3）10%中性醋酸铅溶液（4）6mol/L 氢氧化钠溶液（5）6mol/L 盐酸溶液（6）6mol/L 硫酸钠溶液4.3实验方法4.3.1工作曲线绘制分别吸取糖标准贮备液 1.0，2.0，3.0，4.0，5.0，6.0ml 于 50 ml 容量瓶中，加入碱 性铜盐溶液 5.0ml，于沸水浴中反应 15min，取出后立即用冷水冷却，定容。静置澄清 后，吸取清液再稀释 50 倍，用原子吸收分光光谱

20、仪，铜空心阴极灯于 324.8nm 测吸光 度，用吸光度和糖浓度值绘制工作曲线。4.3.2样品测定 取待测样品适量，洗净，用不锈钢刀将可食部分切成适当小块充分混匀后，按四分 法取样，放入高效自动阻止捣碎机捣成匀浆。称取匀浆 25g，用约 100ml 水洗入 250ml容量瓶中，摇匀，放入 80 摄氏度水浴保温浸提 30min，期间摇动数次，取出冷却后滴 加中性醋酸铅溶液至不再产生沉淀为止，再加入 1-2g 硫酸钠溶液以除去溶液中的过剩 铅盐，定容，过滤。吸取清液 50ml 放入 100ml 容量瓶中。加入 6mol/L 盐酸溶液 5.0ml， 于 90 摄氏度中水解 10min 。取出冷却后，

21、用 6mol/L 氢氧化钠溶液中和，用水定容即为 待测液。吸取待测液 5.0ml，按与工作曲线相同程序测定。4.3.3结果计算X=CVF100式中：X 为样品中可溶性糖含量 %；C 为查标准曲线获得的糖浓度值；V 为定容体积；F 为稀释倍数。5气相色谱法5.1原理用糖醇衍生化成乙酸酯， 用石英毛细管色谱柱对稻子、 小麦麸皮样品进行分析测定， 得到样品中可溶性 NSP 各组成单糖的色谱峰，并依据色谱图提供的数据计算样品中可 溶性非淀粉各组成单糖的含量及其总含量 4。5.2仪器和试剂5.2.1实验仪器气相色谱仪，检测器 FID ，恒温振荡器。5.2.2实验试剂（1）无水乙醇， NaBH4，冰醋酸，

22、乙酸酐，氢氧化钾，乙酸乙酯氨水均为分析纯。（2）标准单糖：木糖，阿拉伯糖，甘露糖，葡萄糖，岩藻糖，半乳糖，鼠李糖，均为 AR 级。（3）实验样品：稻子、小麦麸皮。5.2.3气相色谱条件（1）石英毛细管柱，规格为 25m 0.3mm；（2）起始温度 195，升温速度 8 min，最后温度升至 225；（3）检测器温度为 250；（4）汽化室温度为 210；（5）分流比为 1:20；（6）载气 N2；（7）进气量为 0.8ul。5.3试验方法5.3.1样品的前处理将麦子小麦和麸皮分别粉碎后通入 0.5mm 的筛子，磨细的粉末加入硅胶保干器中 24个小时，保持湿度，准称样品 100mg分别放入 8m

23、L 带螺帽玻璃试管中，加入 80的 乙醇 5ml，并加至 80 10min，离心分离，吸出上清液，可除去游离糖，并使内源酶失 活。5.3.2淀粉与 NSP 的分离在 40时用 N2 吹干样品，加 20ml 醋酸缓冲液（ pH0.5），加热至 100 30min，搅 拌使淀粉凝胶， 冷却至 95，加入 0.05ml-淀粉酶，恒温震荡，冷却至 55，加入 0.2ml -葡萄糖苷酶，使样品酶解。将可溶性 NSP 与淀粉分离，离心，取上层清夜做可溶性 NSP鉴定。5.3.3可溶性 NSP 的测定取上层清夜 1ml 放入 8ml 带螺帽试管中，加 4ml 无水乙醇，充分振荡，离心去 掉上层清夜，剩余物用

24、 N2 吹干，加入 1ml 2mol/L 三氟乙酸，加热到 125，使样品全 部水解，冷却室温，加入 0.1ml 内标物（阿洛糖 500mg/L）。并在混合液中加入 0.2ml 的 无水乙醇，和一滴 3mol/L 的 NH4OH,再加入新配置的 NaBH4,放置于 40的水浴中，加 冰醋酸分解过量的 NaBH4，加入 0.5ml 的 1-甲基咪唑和 5ml 乙酸酐反应 10min，然后加 入 1ml 无水乙醇静置 10min ，分两次加入 10ml7.5mol/L KOH ，溶液分为两层， 用少量乙 酸乙酯提取有基层 2-3 次且合并。有机层用 N2 吹干，所得糖醇乙酸脂可直接进行气相 分析。

25、5.3.4结果计算X= （样品峰面积内标物重量 1000相应因子 /内标物峰面积样品重量）聚 合因子6液相色谱 - 蒸发光散射法6.1原理不挥发样品颗粒对光的散射程度与其质量成正比。6.2仪器与试剂6.2.1实验仪器 高效液相色谱仪；低温型蒸发光散射检测器；高速冷冻离心机；匀浆机；电子分析 天平。6.2.2实验试剂（1）D-果糖， D-葡萄糖，蔗糖，各种糖标样的纯度均大于 99%。（2）乙腈为色谱纯试剂。（3）实验用水为二次蒸馏水。（4）苹果样品。6.3实验方法6.3.1标准溶液的配制精确称取果糖，葡萄糖，蔗糖各 25.0mg置于 25ml容量瓶中，用蒸馏水稀释、定容， 配制成 5mg/ml

26、混合糖标准液。使用前用蒸馏水稀释成所需浓度的标准工作溶液。 6.3.2样品处理准确称取 10g果肉，研磨后加入 50ml 蒸馏水，于 80恒温水浴中保温 20min，不 时搅拌，使可溶性糖充分浸出， 然后离心和过滤， 将滤液全部收集在 100ml 的容量瓶中， 用蒸馏水定容至刻度。待测液用 0.45 m的微孔滤膜过滤，滤液供 HPLC 分析。 6.3.3绘制色谱图（1）色谱柱：规格为 4.6mmID250mm，5m；柱温为室温；流动相为 V（ 乙醇）： V（水） =80:20；流速 0.8ml/min；进样量 5L。（2）蒸发光散射检测器 （ELSD）的漂移管温度 40，氮气作载气，流速 1.

27、5mL/min。 6.3.4结果计算将配好的混合糖标准贮备液依次稀释为 0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、4.0、5.0mg/mL 的不同浓度混合糖标准溶液，在测定条件下进样 5L，根据测得的峰面积与相应糖的浓 度进行线性回归，得到曲线方程。再将最小浓度的标准溶液逐级稀释，依次进样 5L ，计算当信噪比 S/N=5 时所对应的糖标准溶液的质量浓度以确定检测限 5 。7连续流动法7.1原理用盐酸直接水解样品中的可溶性糖， 然后用连续流动分析仪测定样品中可溶性糖的 含量。7.2仪器与试剂7.2.1实验仪器连续流动分析仪。7.2.2实验试剂（1）试验用水为二级水，其它所用试剂均为分析纯

28、；（2）盐酸溶液： 42.4 mL HC1 37（GR）用水稀释至 1 000 mL，加入 1 mL Brij35 ；（3）碳酸钠溶液： 26.5 g Na2CO （GR）用水稀释至 1 000 mL，加入 1 mL Brij35 。（4）盐酸新亚铜溶液： 0.4 g盐酸新亚铜（C14H 3C1N2；GR），加 0.2 g CuSO 4 5H20用水稀释至 1 000 mL，加入 05 mL Brij35 。（5）葡萄糖标准储备液 50mg/mL：称取 50 g葡萄糖，用水稀至 1 000 mL。用水稀 释配制葡萄糖标准曲线系列： 005、02、 0 6、10、20mg/mL。7.3实验方法7

29、.3.1样品中可溶性糖的测定称取试样 2.5 g10 g（m2），置于 250 mL 容量瓶中，加入约 200mL 水充分摇匀，然 后加 5 mL 乙酸锌溶液 （200 g/L）摇匀，加 5 mL 亚铁氰化钾溶液 （100 g/L），加水稀释至刻 度摇匀过滤，滤液上机测定。7.3.2上机测定将标准系列及 7.3.1 的样品滤液放人自动进样器，用试剂盐酸溶液（ 2）、碳酸钠溶 液（ 3）、盐酸新亚铜溶液（ 4）引入流动仪测定。具体的实验参数为：第一热池温度： 92 ，第一热池温度： 88。进样率： 30个样/h，寻峰时段 15 s80 s。标准曲线类型：线性 6。7.3.3结果计算X=c250/

30、m1000式中：X 为样品中可溶性糖含量；c 为由回归曲线查得葡萄糖浓度， （ mg/ml）；m 为称样量， g ；250 为定容体积， mL。8研究进展 费林试剂法虽然处理操作简单，需要的仪器设备少，但滴定条件要求苛刻，由于各 种内外因素的影响，即使是熟练的技术人员，在实际的操作过程中，也很难保证一个试 样的两次平行测定结果在方法规定的允许误差范围之内。 但是原子吸收法弥补了这一不 足，该法在处理获得样液之后， 不采用滴定法， 而是将样液直接与过量的碱性铜盐反应， 使产生沉淀，然后取上层清液用原子吸收分光光谱仪测定剩余铜含量，通过标准曲线计 算水果蔬菜中可溶性糖含量，该方法简单易行。随着科学

31、技术的不断进步，人们开始采用气相色谱，液相色谱等精密仪器来定性及 定量测定可溶性糖。一般的化学方法只能测定糖的含量，不能测定糖的组分。气相色谱 法虽可测定糖的组成，但必须进行对糖进行衍生化才可测定，从而使检测步骤繁琐，且 不可避免地引入误差。而使用高效液相色谱法是由于糖本身在紫外区无吸收，通常使用 RID 进行检测，但RID 检测器灵敏度较低， 而且受外界影响因素大。 蒸发光散射检测器 作为一种新型的通用型质量检测器， 稳定性好，灵敏度高，无溶剂峰影响，弥补了 HPLC 传统检测器的不足。铜还原碘量法、费林试剂法、色谱法、蒽酮比色法 7-8 等这些方法的前处理耗时 耗材，且逐个滴定，耗用很大人工物力，分析操作繁琐冗长，极大地限制了分析速度， 批量检测尤其困难。连续流动仪作为新一代的分析仪器提供了较低的检出限，较宽的动 态线性范围，进样、检测和数据处理全部自动化 9-10，具有实验方法简单，耗材少，准 确性高，重现性好，速度快，适于大批量检测等优点。