临床检验仪器学习指导和习题集.docx

1、临床检验仪器学习指导和习题集-CAL-FENGHAI.-(YICAI)-Company One1临床检验仪器学习指导和习题集离心机1.离心机工作原理: 离心是利用旋转运动的离心力以及物质的沉降系数或浮力密度的差异进行分离。悬浮液在高速旋转下，由于巨大的离心力作用，使悬浮的微小颗粒（细胞器、生物大分子的沉淀等）以一定的速度沉降，从而使溶液得以分离，颗粒的沉降速度取决于离心机的转速、颗粒的质量、大小和密度。2.相对离心力和沉降速度:相对离心力：是指在离心场中，作用于颗粒的离心力相当于地球重力的倍数，单位是重力加速度“g”。沉降速度：在强大离心力作用下，单位时间内物质运动的距离。3常用的离心方法(1

2、)差速离心法(又称分步离心法)在同一离心条件下，采用不同的离心速度和离心时间,使沉降速度不同的颗粒分步离心的方法。差速离心主要用于分离大小和密度差异较大的颗粒。差速离心法的优点是：操作简单，离心后用倾倒法即可将上清液与沉淀分开，并可使用容量较大的角式转子；分离时间短、重复性高；样品处理量大。缺点是：分辨率有限、分离效果差，不能一次得到纯颗粒；壁效应严重等。(2)密度梯度离心法(又称区带离心法)分为速率区带离心法和等密度区带离心法。优点：具有很好的分辨率，分离效果好，可一次获得较纯颗粒；适用范围广并可防止已形成区带由于对流而引起混合。缺点是：离心时间较长；需要制备梯度液；操作严格，不宜掌握。4.

3、离心机的分类与结构（1）低速离心机10000r以内，RCF15000g以内，它主要用作血浆、血清的分离及脑脊液、胸腹水、尿液等有形成份的分离；高速离心机20000-25000r以内，RCF89000g以内，它主要用于临床实验室分子生物学中的DNA、RNA的分离和基础实验室对各种生物细胞、无机物溶液、悬浮液及胶体溶液的分离、浓缩、提纯样品等；超速离心机50000-80000r以内，RCF510000g以内：制备型超速离心机主要用于生物大分子、细胞器和病毒等的分离纯化，能使亚细胞器分级分离，并可用于测定蛋白质及核酸的分子量；（2）离心机的结构:离心机的结构由转动装置、速度控制系统、定时器、离心套管

4、、温度控制系统、真空系统等，高速和超速离心机一定有制冷系统。（3）离心机的主要技术参数及性能指标：主要参数包括：最大转速；最大离心力；最大容量等。离心机转头的常用标记及转头参数。转头参数有，Rmax、Rmin、RCFmax、RCFmin、RPMmax、等。巩固与练习一、选择题1、应用离心沉降进行物质的分析和分离的技术称为（C）A、向心现象B、离心现象C、离心技术D、向心技术2、在强大离心力作用下，单位时间内物质运动的距离称为（C）A、沉降运动B、重力沉降C、沉降速度D、离心技术3、下列属于低速离心机部件的是（C）A、真空系统B、冷凝器C、离心转盘D、水冷却系统4、单位离心力场下的沉降速度是指（

5、C）A、向心速度B、离心速度C、沉降系数D、上浮速度5、沉降系数与样品颗粒的质量或密度的关系，下列叙述中正确的是（A）A、质量和密度越大，沉降系数越大B、质量越小，沉降系数越大C、质量或密度与沉降系数无关D、密度越大，沉降系数越小6、差速离心法和速率区带离心法进行分离时，主要的根据是不同样品组份的（C）A、密度B、重力C、沉降系数D、体积7、根据样品组份的密度差别进行分离纯化的分离方法是（B）A、差速离心法B、密度梯度分析离心法C、速率区带离心法D、等密度区带离心法8、表示从转轴中心至试管最内缘或试管顶的距离的转头参数是（B）A、RPMmaxB、RmaxC、RminD、RCFmax9、利用不同

6、的粒子在离心场中沉降的差别，在同一离心条件下，通过不断增加相对离心力，使一个非均匀混合液内大小、形状不同的粒子分布沉淀的离心方法是（A ）A、差速离心法B、速率区带离心法C、等密度区带离心法D、高速离心法10、下列转头标识代表固定角转头的是（A ）A、FAB、VC、SWD、CF11、低速离心机可达到的最大转速是（A ）A、10000B、8000C、6000D、1200012、高速离心机由于运转速度高，一般都带有（C）A、自动控制装置B、平衡控制装置C、低温控制装置D、室温控制装置二、简答题1离心机的工作原理是什么？2差速离心法的优、缺点是什么？3低速离心机、高速离心机、超速离心机的应用范围是什

7、么？生物安全柜一选择题1、生物安全柜根据生物安全防护水平的差异，分为( C )A. 1级 B. 2级 C. 3级 D. 4级2、下列有关1级生物安全柜功能特点的叙述中，正确的是（B）A. 用于保护操作人员合样品的安全，而不保护环境安全B. 用于保护操作人员和环境安全，而不保护样品安全C. 用于保护操作人员安全，而不保护样品和环境安全D. 用于保护样品和环境安全，而不保护操作人员安全3、生物安全柜内保持负压状态的主要目的是（B）A. 保护试验样品 B. 保护工作人员C. 保护环境 D. 保护试验安全和环境4、下列有关级生物安全柜性能特点的叙述中，不正确的是（D）A. 为临床生物防护中应用最普遍的

8、一类生物安全柜B. 可同时保护操作人员、处理样品安全和环境安全C. 进入和排出安全柜的气体均须经HEPA过滤器过滤D. 空气的流动为单向、非循环式5、下列有关生物安全柜的实验操作中，不正确的是（D）A. 手臂缓慢移动，避免影响正常的气流B. 尽量避免江离心机、漩涡振荡器安装在柜内C. 柜内尽量不要使用明火D. 处理不同标本时，因柜内有垂直洁净气流，故不用担心标本之间相互污染二简答题1. 生物安全柜的工作原理是什么？答：生物安全柜是防止操作处理过程中某些含有危险性或未知性生物微粒发生气溶胶散逸的箱形空气净化负压安全装置。其工作原理主要是将柜内空气向外抽吸，使柜内保持负压状态，通过垂直气流来保护工

9、作人员；外界空气经高效空气过滤器过滤后进入安全柜内，以避免处理样品被污染；柜内的空气也需经过HEPA过滤器过滤后再排放到大气中，以保护环境。临床分析化学仪器1.光谱分析技术的基础理论吸收光谱是由于物质对光的选择性吸收产生的，物质的吸收光谱取决于物质的结构，包括分子吸收光谱和原子吸收光谱。分子吸收光谱包括电子、振动和转动这三种光谱。利用被测定组分中的分子所产生的吸收光谱进行测定的分析方法，即分子吸收法，包括可见与紫外分光光度法、红外光谱法；利用被测定组分中的原子吸收光谱进行测定的分析方法，即原子吸收法。原子吸收光谱通常是线状光谱，只包括外层电子跃迁吸收的能量，所以原子吸收光谱仪器采用的是锐线光源

10、。发射光谱是物质的分子、原子或离子接受能量辐射跃迁到激发态，由激发态返回基态时以辐射的方式释放能量而产生的光谱。如荧光光谱仪。2.紫外-可见分光光度计2.1紫外-可见分光光度计的基本结构紫外-可见分光光度计的基本结构由光源、单色器、样品池、检测器和放大显示系统等五部分组成。光源是提供入射光的装置，包括热辐射灯（钨灯、卤钨灯等），气体放电灯（氢灯、氘灯及氙灯等）多种。单色器是将来自光源的复合光分解为单色光并分离出所需波段光束的装置，其性能直接影响射出光的纯度，从而影响测定的灵敏度、选择性及校正曲线的线性范围。吸收池是用来盛放被测溶液的器件，同时也决定着透光液层厚度，可用玻璃、石英。检测器是把光信

11、号转换为电信号的装置，常用的有光电管、光电倍增管、光电二极管阵列、等。信号显示系统是把放大的信号以适当的方式显示或记录下来的装置。3荧光光谱仪3.1荧光发生的机理分子吸收了照射光的高能量后，处于基态最低能级的分子，到达激发态，到达激发态的各个振动能级的分子，和周围的分子碰撞，并把部分能量以热能的形式传给周围的分子，自己降落到单激发态的最低振动能级。然后，由此最低振动能级向基态的各个振动能级跃迁，同时以发光的形式释放出其能量。简单的说，物质经高能量射线激发后，所发出的比原激发光波较长的可见光称为荧光。3.2激发光谱和荧光光谱任何发射荧光的物质都具有激发光谱和荧光光谱两个特征光谱，它们是荧光分析中

12、定性和定量的基础。3.3荧光光谱仪的工作原理和主要结构荧光分析法和紫外、原子吸收分析方法有本质的不同。它所测量的是待测物质所发射的荧光强弱，而不是物质对光谱的吸收强弱，属于发射光谱分析。荧光分光光度计的结构包括五个基本部分：激光光源：用来激发样品中荧光分子产生荧光。常用汞灯、氙灯等单色器：用来分离出所需要的单色光。仪器中具有两个单色器，一是激发单色器，用于选择激发光波长；二是发射单色器，用于选择发射到检测器上的荧光波长。样品池：放置测试样品，用石英做成。检测器：作用是接受光信号，并将其转变为电信号。4原子吸收光谱仪4.1原子吸收光谱仪基本工作原理是测定气态的自由原子对某种特定光谱的吸收。其结构

13、原理与普通的分光光度计是相似的，只是用锐线光源代替了连续光源，用原子化器代替吸收池。空心阴极灯发出相应待测元素特征波长的射线，它穿过火焰，把试样的溶液以细粒子流的形式喷射到火焰上，部分射线被吸收。这一部分正比于试样的浓度，测量吸收量将其与标准溶液进行对比，从而确定浓度。4.2原子吸收光谱仪基本结构由光源、原子化器、分光系统及检测系统四个主要部件组成。光源的作用是发射被测元素的特征共振辐射。应用较多的有空心阴极灯。原子化器作用是提供能量将液态试样中的待测元素干燥蒸发使之转变成原子态的蒸气。常用的有火焰原子化器和石墨炉原子化器两种。分光系统作用是将所需要的共振吸收线分离出来。分光系统的关键部件是色

14、散元件，可以是棱镜或衍射光栅。检测系统是将接收到的光信号转变成电信号，然后再经同步检波放大器放大，同时把接收到的非被测信号滤掉。练习与巩固一、选择题1紫外-可见分光光度法是基于被测物质对（D）A光的发射 B 光的衍射 C 光的散射 D 光的吸收2.辐射能作用于粒子（原子、分子或离子）后,粒子选择性地吸收某些频率的辐射能,并从低能态（基态）跃迁至高能态（激发态）,这种现象称为（C）A.折射B.发射C.吸收D.散射3.棱镜或光栅可作为（B）A.滤光元件B.聚焦元件C.分光元件D感光元件4.原子吸收分光光度计的主要部件有光源、单色器、检测器和（C）A.电感耦合等离子体B.空心阴极灯C.原子化器D.辐

15、射源5下述中不是石墨炉原子化器特点的是（C）A电极插入样品触点时好时坏B重复性差C原子化效率较低D设备复杂6.下述属于发射光谱的是（D）A紫外吸收光谱B原子吸收光谱C红外光谱D荧光光谱7在原子吸收分析法中,被测定元素的灵敏度、准确度在很大程度上取决（C）A空心阴极灯B火焰C原子化系统D分光系统8分光光度计出现不能调零故障时，可能的原因包括（A）A光门不能完全关闭B比色器架没落位C光能量不够D光源损坏二、简答题1简述光吸收定律的物理意义及使用范围。2紫外-可见分光光度计的基本结构及各部分功能是什么？3简述原子吸收光谱仪的主要结构、性能及特点。4简述荧光光谱仪的主要结构及特点。自动生化分析相关仪器

16、1自动生化分析仪根据仪器反应装置结构不同，可分为连续流动式、离心式、分立式和干化学式；根据自动化程度不同，可分为全自动化和半自动化。分立式自动生化分析仪是目前国内外应用最多的一类自动生化分析仪，工作原理与手工操作相似，按手工操作的方式编排程序，用加样探针将样品加入各自的反应杯中，试剂探针按一定时间自动定量加入试剂，经搅拌器充分混匀后，在一定条件下反应。反应杯同时作为比色杯进行比色测定。各环节用传送带连接，按顺序依次操作，故称为“顺序式”分析。2.自动生化分析仪的重要的结构单元样品处理系统（1）样品架：有圆盘状和传送条带状等类型，用以放置样品杯或原始样品管。（2）试剂仓：用来放置实验试剂，一般都

17、有冷藏装置，可同时放置几十种试剂。（3）样品和试剂取样单元：由机械臂、样品针或试剂针、吸量器、步进马达等组成。机械臂根据计算机的指令携带样品针或试剂针移动至指定位置，由吸量器准确吸量，转移至反应杯中。（4）搅拌器：使反应液和样品充分混匀，由电机和搅拌棒组成。检测系统（1）光源：大多采用卤素灯，工作波长为325800nm，少数采用氙灯，工作波长为285750nm。（2）分光装置：分光元件一般采用干涉滤光片或光栅。干涉滤光片价格便宜，使用方便，但易受潮霉变。光栅分光有前分光和后分光两种，目前自动生化分析仪多采用后分光，即光源光线直接透过样品，通过光栅，再进行吸光度的检测。使用后分光技术，可以在同一

18、体系中测定多种成分。（3）比色杯：通常采用石英或者优质塑料。仪器的检测速度与比色杯的数量也有关，数量更多，速度更快。光径一般为0.5cm1cm，小孔径比色杯更节省试剂，一般都校正光径到1cm。（4）恒温装置：通过温度控制系统保证反应在恒温环境下进行，反应温度通常为25、30、37。（5）清洗装置：一般包括吸液针、吐液针和擦拭块。计算机系统具有样品识别、自动吸加样品和试剂、混匀、恒温调控、结果计算和打印、数据管理等功能。3自动生化分析仪的参数设置与操作（1）波长的选择：当测定体系中只有一种组分或混合溶液中待测组分的吸收峰与其他共存物质的吸收峰无重叠时，可用单波长检测。一般情况下自动生化分析仪常用

19、双波长或多波长。（2）温度的选择：自动生化分析仪通常设有25、30、37三种温度。（3）分析方法的选择：主要有终点分析法、连续监测法、比浊测定法等。（4）分析时间的选择：一点终点法的分析时间应设在待测物质反应将完成时，过早会由于反应未达到终点而影响结果的准确性，过迟易受其他反应物质干扰。二点终点法应选择合适的第一试剂和第二试剂加入时间，以消除标本空白和内源性物质干扰。连续监测法的分析时间选择在零级反应期，以保证检测结果的准确性。（5）线性范围的选择：主要是设定吸光度的最大值和最小值。（6）校正方法：自动生化分析仪有多种校正方法，常用的有一点校正、两点校正、多点校正等。练习与巩固一、选择题1自动

20、生化仪比色杯的材料多用（D）A.普通玻璃B.隔热玻璃C.石英和玻璃D.石英和优质塑料2大多数生化分析仪的校正后光径是（B）A. 0.5cmB. 1 cmC. 1.5cmD. 2 cm3.为消除内源性干扰自动生化分析仪利用下列哪种方法：（C）A.采用双试剂B.采用单试剂C.采用双波长D.采用单波长4.卤素灯可以提供的光源波长（A）A. 325800nmB. 400600nmC. 200400nmD. 400700nm5.（A）自动生化分析仪的样品和试剂在各自的试管中反应。A.分立式B.离心式C.干化学式D.连续流动式6.主波长一般选择待测组分的（D)波长。A.较大B.最小C.峰谷处D.最大7.自

21、动生化仪利用物质对光的（C），一般采用（）形式。A.吸收前分光B.发射后分光C.吸收后分光D.发射前分光二、填空题1自动生化分析仪按照反应装置分为（分立式）、（干化学式）、（管式）和（离心式）四类。2自动生化分析仪的分析方法（终点分析法）、（连续检测法）和（比浊测定法）。3.自动生化仪通常设有（25）、（30）和（37度）三种温度。4.自动生化仪中的校准品是为了校准（系统）误差，质控品是为了控制（随机）误差。5.仪器的管理系统一般选用5%的（次氯酸钠）溶液清洗，蠕动泵（6）月更换一次。三、简答题1.何为后分光光路系统，有何特点？2.自动生化分析仪的工作原理和基本结构？免疫分析相关仪器1酶免疫分

22、析仪 酶免疫分析是目前临床应用最多的。免疫分析技术，可分为非均相(或异相)酶免疫测定和均相酶免疫测定两种方法。均相酶免疫分析法测定对象是激素、药物等小分子抗原或者是半抗原。非均相酶免疫分析法与均相酶免疫分析法最大的区别是前者需要将游离的和结合的酶标记物分离。酶免疫分析仪基本工作原理就是分光光度法，在光电比色计或分光光度计的基础上根据ELISA技术的特点而设计。与普通光电比色计的不同之处在于：比色液的容器不是比色皿，而是用塑料微孔板；酶标仪以垂直光束通过微孔板中的待测液；酶标仪通常使用光密度OD来表示吸光度。现在大部分的酶标仪还加上了判读系统和软件操作分析系统等。酶免疫分析仪大多采用96孔的微孔

23、板。酶免疫分析仪维护的重点是在光学部分，防止滤光片霉变。2.发光免疫分析仪全自动化学发光免疫分析系统采用化学发光技术和磁性微粒子分离技术相结合的免疫分析系统。小分子抗原物质测定采用的是竞争法，而大分子抗原物质测定采用的是夹心法。全自动微粒子化学发光免疫分析系统采用磁性微粒作为固相载体，以碱性磷酸酶作为发光剂，固相载体的应用扩大了测定的范围。全自动电化学发光免疫分析仪发生在电极的表面，应用了免疫学、链酶亲合素生物包被技术及电化学发光标记技术。3免疫比浊分析仪免疫比浊法根据检测原理的不同又分为透射比浊法和散射比浊法。前者是在180角测定透射光的强度，后者是在5-96方向上（折射）测定散射光强度免疫

24、透射比浊测定原理：抗原抗体在缓冲液中快速形成抗原抗体复合物，使反应液出现浊度。当反应液中保持抗体过剩时，形成的复合物随抗原增加而增加，反应液的浊度亦随之增加。速率散射比浊法原理：抗体过量的前提下，抗原抗体在缓冲液中快速形成抗原抗体复合物使反应液出现浊度。在抗原与抗体反应的最高峰测定其复合物形成的量，信号的强度与抗原浓度成正比。4.时间分辨荧光免疫分析仪基本原理：用镧系三价稀土离子及其螯合物(如Eu3+螯合物)作为示踪物标记抗原、抗体、核酸探针等物质；当免疫反应发生后，将结合部分和游离的部分分离，根据稀土离子螯合物的荧光光谱的特点用时间分辨荧光分析仪延缓测量时间，等到背景荧光降低到零以后再测定。

25、排除标本中非特异性荧光的干扰，所得信号完全是稀土元素螯合物发射的特异荧光。根据荧光强度判断反应体系中分析物的浓度，达到定量分析的目的。5放射免疫分析以放射性核素作为标记物。最理想且临床最常用的放射性核素是125 I练习与巩固一、选择题1酶免疫分析技术用于样品中抗原或抗体的定量测定是基于（C）A酶标记物参与免疫反应B固相化技术的应用，使结合和游离的酶标记物能有效地分离C含酶标记物的免疫复合物中酶可催化底物显色，其颜色深浅与待测物含量相关D酶催化免疫反应，复合物中酶的活性与样品测值呈正比2均相酶免疫分析法的测定对象主要是（A）A小分子抗原或半抗原B不完全抗体C免疫复合物D补体3微孔板固相酶免疫测定

26、仪器(酶标仪)的固相支持是（D）A玻璃试管B磁性小珠C磁微粒DPVC微孔板4电化学发光免疫分析中，电化学反应进行在（C）A液相中B固相中C电极表面上D气相中5速率散射比浊法之所以能比传统的沉淀反应试验大大地缩短时间，主要是因为（A）A在抗原抗体反应的第一阶段判定结果B不需复杂的仪器设备C使用低浓度的琼脂或琼脂糖D反应的敏感度高6透射免疫比浊法检测的原理是（D）A测定光线通过反应混合液时，被其中免疫复合物反射的光的强度B测定光线通过反应混合液时，被其中免疫复合物折射的光的强度C测定光线通过反应混合液时，被其中免疫复合物吸收的光的强度D测定光线通过反应混合液时，透过的光的强度7散射免疫比浊法检测的

27、原理是（B）A测定光线通过反应混合液时，被其中免疫复合物反射的光的强度B测定光线通过反应混合液时，被其中免疫复合物折射的光的强度C测定光线通过反应混合液时，被其中免疫复合物吸收的光的强度D测定光线通过反应混合液时，透过的光的强度8最适合于时间分辨荧光免疫测定的荧光物质（C）A异硫氰酸荧光素B四乙基罗丹明C镧系稀土元素（Eu 3+）D藻红蛋白9酶免疫分析仪的维护重点是（B）A计算机B光学部分，防止滤光片霉变C传动装置D电倍增管二、简答题1速率散射免疫比浊法的基本原理是什么？2.酶免疫分析仪测定法基本工作原理？3.临床电化学分析技术相关仪器1.pH值测定常用的指示电极是pH玻璃膜电极。2.离子选择

28、性电极是一种用特殊敏感膜制成的，对溶液中特定离子具有选择性响应的电极。3.电解质分析仪多采用离子选择性电极法，将离子选择性电极和参比电极插入被测样品中组成电池，然后通过测量原电池电动势进行测试分析。湿式电解质分析仪由离子选择性电极、参比电极、分析箱、测量电路、控制电路、驱动电机和显示器等组成。最重要的是电极系统，电极系统包括指示电极和参比电极。指示电极包括pH、Na+、K+、Li+、Cl-、Ca2+、Mg2+等离子选择性电极。参比电极一般是银/氯化银电极。干式电解质分析仪干化学测定法目前主要有两类：反射光度法，离子选择性电极（ISE）方法。4.血气分析仪结构和工作原理血气分析仪：仪器结构包括：

29、电极系统、管路系统和电路系统三部分。被测血液样品在管路系统的抽吸下，进入样品室内的测量毛细管中。毛细管的管壁上开有四个孔，孔内分别插有pH、PCO2和PO2三支测量电极和一支参比电极。pH和pH参比电极共同组成对pH值的测量系统。血液样品进入样品室的测量管后，管路系统停止抽吸，样品同时被四个电极所感测。电极产生对应于pH、PCO2和PO2三项参数的电信号。这些电信号分别经放大、模数转换后送到微处理机。经微机处理系统处理、运算后，再分别被送到各自的显示单元显示或打印机打印出测量结果。测定后的样本被冲洗液排入废液瓶。5.血气分析仪电极主要包括两大类，即离子极（主要有K+、Na+、Li+、Ca2+、Cl-、pH和PCO2）和伏安型传感器（主要是PO2）。一般使用四支电极，分别是pH、PCO2、PO2电极和pH参比电极。管路系统完成自动定标、自动测量、自动冲洗等，在工作过程中，该系统出现的故障最多。气路系统提供PCO2和PO2两种电极定标时所用的两种气体。液路系统提供pH值电极系统定标用的缓冲液，并用于测量和冲洗。血气分析仪具有真空泵、蠕动泵两个泵。练习和巩固一、选择题1.血气分析仪的电化学传感器中，属于伏安型传感器的是（）A. pH玻璃电极B. PO2