05章 土壤中磷的测定.docx

1、05章 土壤中磷的测定第五章 土壤中磷的测定主要内容： 概述 土壤全磷的测定 土壤速效磷的测定 土壤无机磷形态的分级测定 土壤有机磷的分离测定要求： 了解土壤全磷测定的国家标准方法。 了解钼兰比色法和钼黄比色法测定土壤有效磷两种方法各自的优缺点。 掌握用0.5mol.L-1NaHCO3法测定土壤速效磷的测定条件、原理、操作步骤及注意事项。 了解土壤无机磷的分级测定方法 5-1 概述磷在植物大量营养元素中占有重要地位，然而，与其它大量营养元素相比，土壤磷的含量相对较低，分布变异也比较大。土壤中的含磷化合物有许多种，其中大部分磷的组分和确切形态还不十分清楚，而且，各种形态磷之间的转化过程错综复杂，

2、因此，尽管磷的研究工作很多，但仍有许多问题需要解决。一、土壤中磷的含量、形态1. 土壤中磷的含量我国土壤中全磷含量一般为：0.2 1.1 g kg-1（以P，g kg-1表示）。0.10 0.15 % （以P2O5，%表示）土壤全磷含量受土壤母质、成土作用、耕作施肥等的影响很大。我国南方酸性土全磷的含量较低，一般 0.56 g kg-1；北方石灰性土壤的全磷含量较高。黄土母质全磷含量较高。粘土中磷的含量高与砂土。有机质丰富的土壤含磷较多。磷在土壤剖面上的分布，耕作层含磷量高于底土层。2. 土壤中磷的形态土壤磷分为有机和无机磷两种形态。（1） 有机磷有机形态的磷含量较低，约占全磷的2050 %，

3、而且变幅比较大。土壤有机磷的组成和结构很复杂，大部分有机磷以高分子的形态存在，有效性不高。有机磷在土壤中的存在方式包括吸附态和以磷脂键结合态两种，分布于各有机质组分中。包括与土壤腐殖质部分结合的、动植物残体中的、以及活的土壤生物体内存在的磷（又称：生物磷或生物量磷）。其中，新鲜有机质中的磷和生物磷是易分解态磷，其它含磷有机化合物的生物有效性主要取决于其空间分布。（2） 无机磷在大多数土壤中，磷以无机形态为主，主要以正磷酸盐的形式存在，焦磷酸盐的数量很少。土壤无机磷可分为：水溶性磷，吸附态磷，钙、铁、铝等的磷酸盐，闭蓄态磷。矿物态磷（包括闭蓄态磷）无机磷吸附态磷（包括专性吸附和非专性吸附）水溶性

4、磷矿物态磷 包括含磷的原生矿物、次生矿物及其它含磷化合物。矿物态磷还包括闭蓄态磷，是指被更难溶解的非晶态的铁、铝、钙等胶膜包被的磷酸盐或者其他含磷化合物。酸性土壤特别是酸性红壤中，由于大量游离氧化铁的存在，很大一部分磷酸铁被氧化铁薄膜包裹成闭蓄态磷，使磷的有效性大大降低。吸附态磷 以专性吸附（配位吸附）为主，还有非专性吸附（阴离子交换吸附）。水溶性磷 土壤溶液中磷含量很低，主要以正磷酸盐的形式存在。由于正磷酸是三元酸，随着氢离子逐步解离形成三种不同形式的磷酸根：H2PO4-、HPO42-、PO43-。这三种磷酸根的浓度与土壤pH有关。在正常土壤pH值范围内，溶液中以H2PO4-和HPO42-为

5、主，在pH 3 7之间以H2PO4-为主，在pH 7 11之间以HPO42-为主，而H3PO4只在土壤pH4时出现，PO43-只在pH11时出现。土壤无机磷存在的形态受土壤pH的影响很大：酸性土壤以磷酸铁、铝盐为主；石灰性土壤以磷酸钙盐为主，（且随钙磷比的增加，磷的溶解度和有效性降低）；中性土壤中磷酸铁、铝、钙盐的比例相当（1 : 1 : 1）。二、土壤中磷的测定项目和测定方法1. 土壤全磷量土壤全磷量是指土壤中各种形态磷的总和。土壤全磷的测定要求把无机磷全部溶解，把有机磷氧化成无机磷，转化为适合于比色方法的可溶性物质。（一般用比色的方法测定溶液中的磷。）2. 土壤有效磷含量由于土壤中的磷大部

6、分以难溶性的化合物存在，难以被作物吸收利用，所以，即使是全磷含量较高的土壤中，也不一定有足够的有效磷来满足当季作物的生长需要。所以，与全磷量相比，土壤有效磷量更能反映土壤的供磷能力。为了定量地确定土壤中对植物有效的那部分磷的数量，多年来有不少的研究者摸索了许多的方法，其本意是：模拟植物吸收，以定量估计化学形态上对植物有效的磷。常用的方法包括： OlsenP法（0.5 molL-1 NaHCO3, pH=8.5）BrayKurtzP法（0.03 molL-1 NH4F 0.025 molL-1 HCl）双酸法，即Mehlich1法（0.05 molL-1 HCl 0.025 molL-1 H2S

7、O4）阴离子交换树脂法同位素交换法在不同土壤上适用的方法不同。即使是目前使用广泛的适用于石灰性土壤、中性和微酸性土壤有效磷测定的OlsenP法，所测定土壤磷的组分也不十分清楚，一般认为，这一部分磷包括水溶态磷和易转化态的无机磷等，有人甚至认为还包括一部分易水解的有机磷和一小部分生物磷。3. 土壤无机磷的分级测定土壤无机磷的形态历来为土壤学者所注意，因为如果我们能确知土壤中磷的化学形态，则将可比较容易地知道土壤中磷的各种性质及其对植物营养的关系。虽然在这方面作了不少努力和研究，但难度很大。对无机磷如此，对有机磷尤其如此。由于鉴定土壤含磷矿物比较困难，人们通常采用化学方法将无机磷分组。土壤无机磷分

8、组的主要做法是：使用不同的浸提剂分步浸提，以区分不同组分的磷。（1）目前常用的土壤无机磷分组方法是根据张守敬和Jackson于1957年提出，后经多个研究者修改后的方法。根据这种方法，土壤磷分为磷酸钙镁化合物、磷酸铁铝化合物和闭蓄态的磷。实际上，各组分中或多或少都有一些其它组分的磷混杂在一起，包括有机磷化合物。该分组方法适用于酸性和中性土壤，以及水稻土，不适用于石灰性土壤。（2）我国学者蒋柏藩和顾益初于1990年提出了石灰性土壤无机磷分级的测定方法，将石灰性土壤上的CaP进一步分为三级：Ca2P、Ca8P和Ca10P，仍然保留闭蓄态磷的概念。4. 土壤有机磷含量及分组土壤有机磷含量的测定方法主

9、要有两类：灼烧后再用酸浸提；用酸和碱多次浸提。由于这两种方法都是间接的方法，不够准确，因此至今有机磷的测定仍然是研究土壤有机磷化合物转化过程的一个突出问题。随着核磁共振技术的应用，对土壤有机磷的研究将会有所突破。土壤有机磷的测定方法还不成熟，土壤有机磷的分组方法也不完善。Bowman and Cole提出有机磷的分级：活性有机磷、中度活性有机磷、中稳性有机磷、高稳性有机磷。 5-2 土壤全磷的测定土壤全磷的测定要求把土壤中各种形态的磷都转化成可溶性的无机磷，因此，土壤全磷的测定包括两个步骤：一、 土壤样品的分解1. 目的（方法选择的依据）：（1）使有机磷氧化成无机磷；（2）使矿物质分解，释放出

10、难溶性磷。2. 方法：碱熔融：Na2CO3熔融法、NaOH碱熔法强酸消煮：HClO4 H2SO4消煮法、HF HClO4消煮法干灰化法：高温灼烧后再用酸浸提（1）碱熔融法 原理：用NaOH熔融土壤样品与用Na2CO3熔融土壤样品的原理是一样的。即：增加盐基成分，促进硅酸盐的分解，以利于各种元素的溶解。NaOH熔点（321）比Na2CO3（853）低，可以在较低的温度下分解土样，缩短熔化所需要的时间。 方法评价：样品分解完全，一般作为标准方法。Na2CO3熔融法需要昂贵的铂金坩埚，操作较繁、费时，但样品分解完全，是全磷测定时分解土样的标准方法。NaOH碱熔法可在银或镍坩埚中分解土壤全磷或全钾，样

11、品分解比较完全，操作简便，已列为国家标准。（2）HClO4 H2SO4消煮法 原理：高氯酸：分解样品；抑制硅和铁对磷的比色测定的干扰浓硫酸：提高消化温度；防止溶液蒸干用高氯酸（HClO4）分解样品，因为HClO4既是一种强酸，又是一种强氧化剂，能氧化有机质，分解矿物质，而且HClO4的脱水作用很强，有助于胶状硅的脱水，并能与Fe3+络合，在磷的比色测定中抑制了硅和铁的干扰。H2SO4除提高消化温度外，还可以防止溶液蒸干，以利于消化作用的顺利进行。HClO4H2SO4消煮法对一般的土壤样品的分解率达97%98%，但对红壤性土壤样品的分解率只有95%左右。 方法评价：是目前应用最普遍的方法，操作简

12、便，虽然不及熔融法样品分解完全，但分解率已达到了土壤全磷分析的要求。二、溶液中磷的测定1. 方法：（1）比色法：钼蓝比色法：适用于磷含量较低时，比钒钼黄比色法更灵敏。钒钼黄比色法：适用于磷含量中等时。（2）容量法：适用于磷含量较高时。（3）重量法：适用于磷含量较高时。2. 基本原理：首先： 正磷酸 + 钼酸 磷钼杂多酸然后： 过量铵（钼酸铵） 磷钼酸铵 (黄色沉淀) 容量法、重量法或：加入偏钒酸铵 磷钒钼杂多酸（黄色） 钼黄比色法或：加入还原剂 “钼蓝”（蓝色） 钼蓝比色法 一定酸度下，溶液中的正磷酸与钼酸络合生成磷钼杂多酸。在磷浓度较高，且有过量铵盐（钼酸铵）存在的条件下，磷钼杂多酸与铵盐作

13、用，生成黄色的沉淀，即磷钼酸铵。这就是重量法和容量法测定磷的基础。在含磷量中等时，加钼酸铵不产生沉淀，溶液略呈黄色，吸光度很低，加入偏钒酸铵，生成磷钒钼杂多酸，具有较高的吸光度，且黄色稳定，可在波长400490nm比色。这是钒钼黄比色法测定磷的依据。灵敏度与波长有关，浓度高，选较长的波长。用于肥料和植物分析。但在磷含量较低的情况下，一般都用更灵敏的钼蓝比色法，基本原理如下。3. 钼蓝比色法（1）原理：一定酸度下，溶液中的正磷酸与钼酸络合生成磷钼杂多酸。在还原剂的作用下，磷钼杂多酸中的一部分Mo6+离子被还原为Mo5+离子，生成一种叫做“钼蓝”的蓝色物质 Mo6+ (黄色)Mo5+ (蓝色)。蓝

14、色的深浅与溶液中磷酸溶液的浓度成正比，在700 nm处比色测定。（2）影响（蓝色产生的速度、强度、稳定性等的）因素，主要有： 还原剂种类（的选择）：最早常用的还原剂有：氯化亚锡（SnCl2）、亚硫酸氢钠等无机还原剂；后来人们在还原剂的选择上作了很多改进，采用了一些有机还原剂，例如：抗坏血酸（维生素C，Vc）、硫酸联氨、1, 2, 4-胺基萘酚磺酸。目前，使用最普遍的是钼锑抗混合指示剂，也就是：钼酸铵酒石酸氧锑钾抗坏血酸（其中，抗坏血酸作为还原剂）。几种还原剂的比较：还原剂中，氯化亚锡的灵敏度最高，显色快，但颜色不稳定。土壤速效磷的速测方法仍然多用氯化亚锡作还原剂。抗坏血酸还原剂是目前应用最广泛

15、的一种还原剂，它的主要优点是：生成的颜色稳定，干扰离子的影响小，适用范围较广，但显色慢，需要加温。三价锑的存在大大加速了抗坏血酸的还原反应，在室温下也能显色，这是因为：锑（Sb）与磷钼酸反应生成磷锑钼三元杂多酸，抗坏血酸在室温下就能迅速将磷锑钼三元杂多酸还原为蓝色的络合物。 适宜的试剂浓度（尤其是酸度）：钼蓝显色是在适宜的试剂浓度下进行的，不同方法所要求的适宜试剂浓度不同。钼酸铵浓度和还原剂的用量要适宜，使一定浓度的磷产生最深、最稳定的颜色；磷钼杂多酸是在一定的酸度下形成的，过酸或酸度不足都会影响结果，因而在用钼蓝比色法测定磷的时候，酸度的控制最为重要。教材PP.73表5-1列出了三种钼蓝法的

16、工作范围和各种试剂在比色液中的最终浓度。这三种方法中，SnCl2H2SO4体系最灵敏。特别关注一下钼锑抗体系：显色酸度0.35 0.55 molL-1，H+；钼酸铵浓度1.0 gL-1；还原剂的用量：抗坏血酸浓度0.81.5 gL-1；酒石酸氧锑钾浓度0.0240.05 gL-1。钼锑抗体系是目前使用最普遍的，原因是：灵敏度较高，接近SnCl2H2SO4体系；显色最稳定，显色的温度范围最宽；受干扰离子的影响也小。（更重要的是，）还原剂与钼酸铵配成了一种钼锑抗混合溶液，也就是：钼酸铵酒石酸氧锑钾抗坏血酸硫酸混合溶液，一次加入，简单方便。 干扰离子：A. Si的干扰与磷酸(H3PO4)一样，砷酸(

17、H3AsO4)和硅酸(H4SiO4)都能与钼酸结合生成杂多酸。干扰的避免：硅（Si）的干扰可以用调节酸度的办法来消除，因为磷钼酸在较高的酸度下形成（0.40.6 molL-1，H+），而硅钼酸在较低的酸度下形成（0.10.24 molL-1，H+）。B. As的干扰干扰的避免：砷（As）在土壤中的含量通常情况下非常低，而且砷钼酸的还原速度比磷钼酸要低得多，所以，虽然砷的干扰比较难克服，但一般不会影响土壤磷的测定结果。如果土壤中含有较多的砷，（比如在使用了农药砒霜的情况下），可在加钼酸铵试剂之前先将砷还原成亚砷酸，从而消除砷的干扰。C. Fe3+的干扰影响溶液的氧化还原势，抑制蓝色的生成。在用氯

18、化锡（SnCl2）作还原剂时，溶液中的Fe3+含量不能超过20mgkg-1。干扰的避免：选用抗坏血酸作为还原剂，因为抗坏血酸能与Fe3+络合，保持溶液的氧化还原势，溶液中的Fe3+含量即使超过了400mgkg-1，也仍然不会对磷的测定产生干扰。三、土壤全磷的测定方法之一 HClO4 H2SO4消煮钼锑抗比色法1. 原理在浓硫酸（H2SO4）存在的条件下，用高氯酸（HClO4）分解样品，使土壤中的磷转化成可溶性的磷酸盐，溶液中磷的测定采用钼锑抗比色法。溶液中磷与钼酸铵作用，生成磷钼杂多酸，在一定酸度下，被抗坏血酸还原成钼蓝，蓝色深浅与磷的浓度成正比，锑（Sb）的存在加速了还原过程。2. 试剂（1

19、）2, 6-二硝基酚（或2, 4-二硝基酚）指示剂：变色点约为pH=3；pH 3无色；pH3 黄色。（2）钼锑抗试剂：含有： 钼酸铵 (NH4)6Mo7O244H2O 10 gL-1；酒石酸氧锑钾 K(SbO)C4H4O6 0.5 gL-1;抗坏血酸 C6H8O5，Vc 15 gL-1;硫酸 5.5 molL-1, H+作用： 钼酸铵 与磷酸反应； 酒石酸氧锑钾 加快了反应（三价锑）；抗坏血酸 还原剂； 硫酸 提供所需的酸度。注意：先配置钼锑混合液，临用前再加入抗坏血酸。现配现用，有效期24小时；贮存于棕色试剂瓶中，最好放在冰箱中保存。3. 操作步骤（1） 消化：称样（过100目筛）0.500

20、0 g 加少量水润湿 加浓硫酸8 ml 摇匀 加7072%高氯酸10滴 摇匀 管口加一个小漏斗,加热消煮至溶液开始转白后,继续消煮20min 定容50 ml 静置过夜取上清液或干燥的定量滤纸过滤。（同时做空白试验）（2） 溶液中磷的测定： 移取滤液210 ml 加水至约30 ml 加二硝基酚指示剂2滴 调节溶液酸碱度至pH3 加钼锑抗试剂5 ml 定容50 ml 半小时后880nm比色。（3） 绘制标准曲线 0、0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mgPL-14. 注意事项（1）溶液酸碱度的调节：滴加4 molL-1 NaOH直至溶液刚刚变成黄色，再滴加2 molL-1 (1/2

21、H2SO4)1滴，使溶液的黄色恰好褪去，此时，pH 3，因为消煮液的酸度很大，需要比较多的碱去中和溶液的酸度，这里不用NH4OH调节酸度，因为溶液中NH4OH浓度如果超过10gL-1，就会使钼蓝色迅速消退。（2）过滤时应该用无磷滤纸，国产标有蓝色带（定量滤纸）。四、土壤全磷的测定之二NaOH熔融钼锑抗比色法(GB893788)1. 原理土壤样品与氢氧化钠熔融，使土壤中含磷矿物及有机磷化合物全部转化为可溶性的正磷酸盐，用水和稀硫酸溶解熔块，在规定条件下样品溶液与钼锑抗显色剂反应，生成磷钼蓝，用分光光度法定量测定。2. 操作步骤 （参考课本PP.77，略） 5-3 土壤速效磷的测定一、 概述土壤有

22、效磷：土壤中能被当季作物吸收利用磷量。土壤磷的有效性：土壤磷能被植物吸收利用的程度。涉及到土壤磷供应的强度因素（土壤溶液中磷的浓度）、容量因素（土壤固相中磷的量）、供应速度等方面。磷位：= 1/2pCa + pH2PO4，表示土壤吸持磷的能力，或固相磷进入溶液的难易。它是用能量的观点来表示土壤的供磷强度。磷位越高，土壤吸持磷的能力越高，磷对植物的有效性越低。到目前为止，还无法真正测定土壤有效磷的数量。通常所谓的土壤有效磷只是指用某一特定方法所测出的土壤中的磷量。只有当测出的磷量与植物生长状况具有显著相关的情况下，这种测定才具有实际意义。因此，土壤有效磷并不是指土壤中某一特定形态的磷，也不是指土

23、壤中“真正”有效磷的“绝对含量”，它只是一个相对指标，应用不同方法在同一土壤上可以得到不同的有效磷数量。它可以相对地说明土壤的供磷水平，可以作为判断是否需要施用磷肥一个指标。土壤有效磷的测定方法：（1） 生物方法：最可靠。（2） 化学（速测）方法：应用最普遍，快速简便。也就是，用提取剂提取土壤中的有效磷。（3） 同位素方法：标准方法。（4） 阴离子交换树脂方法：类似植物吸收磷方法选择的依据：现有的测定土壤有效磷的方法虽然有一定的理论依据，但仍带有很大的“经验性”。因此，选择方法的基本依据是各种方法在实践中的表现，即：测定结果和植物生长状况的相关性。二、土壤有效磷的化学浸提方法：1. 根据浸提剂

24、的种类不同，主要有以下方法：（1）水作为浸提剂理论根据：植物从土壤中吸收的磷（主要是H2PO4-）主要来自于土壤溶液，水溶性磷是土壤磷的强度因素，因而测定土壤水溶性盐，可基本反映有效磷的状况。缺点： 不易获得澄清的滤液； 缓冲能力弱，提取液pH容易改变，影响测定结果； 提取能力弱，对于有效磷低的土壤，测定有困难。因此，用水作浸提剂的方法一般较少使用。适用范围：仅适用于砂性土壤，因为砂性土壤中的磷以水溶性磷为主。（2）饱和以CO2的水作为提取剂理论根据：植物根分泌CO2，根部周围溶液的pH约为5。适用范围：石灰性土壤，因为石灰性土壤中磷的溶解度随着水溶液中CO2浓度的增加而增加。（3）有机酸溶液

25、作为提取剂理论根据：与饱和以CO2的水相似，植物根系分泌有机酸，其溶解能力相当于饱和以CO2的水。西欧国家使用较多，常用的有：柠檬酸、乳酸、醋酸等。（4）无机酸溶液作为提取剂理论根据：采用无机酸溶液作为提取剂，主要是从分析方法的方便来考虑的。当然，它需要经过检验，证明与植物吸收磷有一定的相关性后，才可以使用。一般采用缓冲溶液，常用的有：HOAc NaOAc溶液，pH4.80.001 molL-1 H2SO4 (NH4)2SO4，pH 30.025 molL-1 HCl 0.03 molL-1 NH4F0.05 molL-1 HCl 0.025 molL-1 (1/2 H2SO4)适用范围：不适

26、用于石灰性土壤，主要用于酸性土壤。（5）碱溶液作为提取剂目前使用得最多最广的是：0.5 molL-1 NaHCO3（pH8.5）溶液。理论根据： pH8.5时，Ca2+、Al3+、 Fe3+等离子的活度低，有利于磷的提取；溶液中的OH-、HCO3-、CO32-等阴离子都能够置换H2PO4-。适用范围：主要用于中性和石灰性土壤，也可以用于酸性土壤。2. 影响有效磷提取的因素，主要有：（1）提取剂的种类（选择）各种提取剂中的阴离子从土壤颗粒上置换磷酸根的能力不同：F-柠檬酸HCO3-CH3COO-SO42-Cl-。提取液的浓度、pH等都会影响到提取的磷的多少。（2）水土比常用：5 : 1，7 :

27、1，20 : 1水土比越大，提取的磷越多，因为增加了磷的溶解，减少了磷的再固定。但不是越大越好，因为：水土比越大，土壤中的部分非有效的有机磷会溶解，提取出的磷与植物吸收之间的相关性越差。（3）振荡时间常用：1，5，30分钟。震荡时间越长，提取的磷越多。但不是时间越长越好。（4）温度提取和显色过程受温度的影响比较大，一般要控制在室温2025。冬天测得的土壤有效磷含量与夏天测得的结果不同。所以，在比较多个样品间的有效磷含量时，要特别注意控制提取和测定条件的一致。总之，提取液的浓度越高，水土比越大，振荡时间越长，浸提出来的磷越多。但是，并不是提取液的浓度越高，水土比越大，振荡时间越长，就越好，因为：

28、化学速测方法提取的磷只是土壤有效磷的一部分，并不要求能够提取出全部的有效磷，只要求提取出来的那部分磷与植物吸收的磷之间有很好的相关性。另一方面，提取过程当中，要控制土壤中非有效磷的溶解，这也要求提取液的水土比不能太大，振荡时间不能太长。所以，有效磷含量只是一个相对指标，应用不同方法在同一土壤上可以得到不同的有效磷数量，只有用同一方法在相同条件下测得的结果，才具有可比性。在报告有效磷的测定结果时，要注明所用的测定方法。教材PP.81表5-2列出了测定土壤有效磷的三种常用方法的浸提剂、水土比、振荡时间等。可供参考：中性和石灰性土壤 0.5molL-1 NaHCO3(pH8.5) 风化程度中等的酸性

29、土壤 0.025 molL-1HCl0.03molL-1NH4F 高度风化的酸性土壤 0.05 molL-1 HCl 0.025 molL-1 (1/2 H2SO4)三、中性和石灰性土壤速效磷的测定0.5 molL-1 pH 8.5 NaHCO3法（Olsen法）石灰性土壤中的磷主要以CaP的形式存在，由于存在大量的游离的碳酸钙，因而不能用酸溶液来提取，一般用碱性的碳酸盐溶液来提取。1. 方法原理：游离CaCO3溶解度降低，溶液中Ca2+浓度降低（CO32-的同离子效应）；降低溶液中Ca2+、Fe3+和Al3+的活性（pH8.5）；置换吸附态磷（由于存在OH-、HCO3-、CO32-等阴离子）

30、。由于碳酸根的同离子效应，碱性的碳酸盐溶液降低了碳酸盐的溶解，也就降低了溶液中钙离子的浓度，这样就有利于CaP的提取。中性土壤中CaP、AlP、FeP都占有一定的比例。由于碳酸盐溶液降低了铝离子和铁离子的活性，这样就有利于AlP和FeP的提取。此外，碳酸氢钠碱溶液中存在着OH-、HCO3-、CO32-等阴离子，这样就有利于吸附态磷的置换。因此，0.5 molL-1 pH 8.5 NaHCO3法不仅适用于石灰性土壤，也适用于中性和酸性土壤速效磷的提取，是目前使用最多最广的一种方法。溶液中磷用钼锑抗比色法测定。2. 操作步骤：（1）浸提称样（过20目筛）2.500 g 加入提取剂0.5 molL-1NaHCO3（pH 8.5）溶液50 ml 加一勺无磷活性炭 恒温（2025）振荡30 min 无磷滤纸过滤（同时做空白试验）（2）比色测定：移取滤液x ml 于150 ml三角瓶中 补加提取剂 (10-x) ml 加水35ml 加钼锑抗试剂5ml （此时溶液总体积为10+35+5 = 50 ml，不需定容） 摇匀至无气泡 显色30 min 波长700 nm比色（3）绘制标准曲线： 0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mgPL-13. 注意事项：（1）有关无磷活性炭的几个问题：