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1、生物技术药物题目生物技术药物复习思考题1.生物技术药物的分类。 （一）生化药物 1、氨基酸类药物 5、多糖类药物 2、多肽和蛋白质类药物 6、脂类药物 3、酶与辅酶类药物 7、细胞生长因子与组织制剂 4、核酸及其降解物和衍生物 （二）生物制品 1、预防用制品 2、治疗用制品 3、诊断用制品2.生物技术药物的特征。 1、分子结构复杂 6、免疫原性2、具有种属特异性 7、体内的半衰期短3、治疗针对性强、疗效高 8、受体效应4、稳定性差 9、多效性和网络性效应5、基因稳定性 10、检验的特殊性3.目的基因的获得的几种方法。1、直接分离法：限制性酶切法、随机片段法、机械切割法。2、构建基因组文库或cD

2、NA文库。3、PCR合成法。 4、化学合成法。4.基因工程宿主菌应满足的要求。高浓度、高产量、高产率；能利用易得廉价原料；不致病，不产生内毒素；发热量低，需氧低，适当的发酵温度和细胞形态；容易进行代谢调控；容易进行重组DNA技术；产物容易提取纯化。5.原核细胞表达载体必须具备的条件。1、载体能够独立的复制。2、有灵活的克隆位点和方便的筛选标记，以利于外源基因的克隆、鉴定和筛选。3、有很强的启动子，能为大肠杆菌的RNA聚合酶所识别。4、有阻遏子，使启动子受到控制，只有当诱导时才能进行转录。5、有很强的终止子，以便使RNA聚合酶集中力量转录克隆的外源基因，而不转录其他无关的基因，同时很强的终止子所

3、产生的mRNA较为稳定。6、所产生的MRNA必须具有翻译的起始信号，即起始密码AUG和SD序列，以便转录后能顺利翻译。6.影响目的基因在大肠杆菌中表达的因素。1、启动子的结构：-35区和-10区之间的距离和碱基顺序等。2、转译起始序列：SD序列、起始密码子AUG等。3、启动子和外源基因之间的距离。4、转录终止区：保证载体不会转录非必须基因，不必浪费源量和能量、不会干扰正常的表达。5、载体拷贝数及稳定性。6、外源蛋白在菌体中的稳定性。7.真核基因在大肠杆菌中表达应注意的问题。1、外源基因不能带有内含子。2、必须用cDNA。3、不能直接用真核基因组DNA。4、必须利用原核细胞的调控原件（启动子等）

4、5、防止外源基因产物对宿主细胞的毒害。8.酵母表达载体的分类。1、整合型载体：由大肠杆菌质粒和酵母的DNA片断（选择标记）构成。2、复制型载体：由大肠杆菌质粒和酵母的DNA片断（选择标记和酵母DNA自主复制顺序）构成。3、着丝粒质粒：在复制型质粒中插入酵母染色体的着丝粒。4、附加体型载体：由大肠杆菌质粒、2m质粒和酵母的DNA片断（选择标记）构成。 9.影响目的基因在酵母菌中表达的因素1、外源基因的剂量2、外源基因的表达效率（启动子、分泌信号、终止序列）3、外源蛋白的糖基化4、宿主菌株的影响10.质粒的不稳定性是什么？质粒不稳定分为分裂不稳定和结构不稳定。质粒的分裂不稳定指工程菌分裂时出现一定

5、比例的不含质粒的子代菌的现象，主要与两个因素有关，一是含质粒菌产生不含质粒子代菌的频率，；二是这两种菌比生长速率差异的大小。质粒的结构不稳定是DNA从质粒上丢失或碱基重排、缺失所导致的工程菌性能的改变。基因工程菌的稳定性至少应维持23代以上。基因工程菌的质粒不稳定性常见的是分裂不稳定。11.提高质粒稳定性的方法。1、选择合适的宿主菌。 4、分阶段控制培养。2、选择合适的载体。 5、控制培养条件。3、选择压力，如抗生素。 6、固定化。12.影响基因工程菌高密度发酵的因素。1、培养基：需要对基质中营养物质的配比进行优化，以满足细菌大量繁殖和外源蛋白表达的需要。2、接种量：影响发酵产量和周期。3、溶

6、解氧：菌体扩增及外源基因的表达都需要大量氧进行呼吸作用供能。4、pH：影响细胞的生长和基因产物的表达。5、温度：影响酶的反应速度，改变菌体代谢产物的反应方向，影响代谢调控机制。6、诱导时机：一般在对数生长后期升温诱导表达。7、代谢副产物：会抑制菌体的生长和蛋白的表达。13.实现高密度发酵的方法。1、发酵条件的改变：选择容易被工程菌利用、满足其生长所需要的营养物质，建立流加式培养方式，提高供氧能力。2、构建出产乙酸能力低的工程化宿主菌：3、构建蛋白水解酶活力低的工程化宿主菌。14.包含体形成的原因。包含体的形成主要是高水平表达的结果。在高水平表达时，新生肽链的聚集速率一旦超过蛋白正确折叠的速率就

7、会形成包含体。另一个原因是大肠杆菌缺乏一些重组蛋白折叠过程中需要的酶和辅因子。15.包含体的分离和溶解。第一步是对培养收集的重组菌进行破碎，可采用高压匀浆、超声破碎、溶解酶等。离心除去破碎上清液后的沉淀，用含有低浓度的变性剂、去垢剂、还原剂等的缓冲液进行洗涤，还可采取蔗糖密度梯度离心法对包含体进行纯化。16.包含体蛋白复性方法。1、稀释透析复性法 5、小分子添加剂促进的复性2、含二硫键的蛋白的复性 6、分子伴侣或折叠酶促进的复性3、封闭蛋白的疏水簇复性 7、人工分子伴侣促进的复性4、凝胶过滤层析复性17.动物细胞工程概念。1、贴壁细胞： 生长须有贴附的支持物表面、自身分泌或培养基中提供的贴附因

8、子才能在该表面上生长。有成纤维细胞型、上皮细胞型两种形态。 2、悬浮细胞：生长不依赖支持物表面，在培养液中呈悬浮状态生长。如淋巴细胞。 3、兼性贴壁细胞：生长不严格依赖支持物。如中国地鼠卵巢细胞，小鼠L929细胞。4、细胞代数：细胞分裂次数。 传代数：细胞培养分种传代次数。 细胞代数=传代数分种数/2 5、原代培养：当细胞离体培养开始，称为原代培养，以后经传代后，即成为有限细胞系。 当细胞经自然的或人为的因素转化为异倍体后，即可转变为无限细胞系，此时的细胞寿命将是无限的。 6、天然培养基：含有化学成分还不清楚或化学成分不恒定的天然有机物。 7、合成培养基：通过顺序加入准确称量的高纯度化学试剂与

9、蒸馏水配制而成的，其所含的成分（包括微量元素在内）以及他们的量都是确切可知的。 8、无血清培养基：体外细胞培养过程中不含有动物或人的血清的细胞培养基。18.离体培养的细胞分类。 1、贴壁细胞： 生长须有贴附的支持物表面，自身分泌或培养基中提供的贴附因子才能在该表面上生长。 2、悬浮细胞：生长不依赖支持物表面，在培养液中呈悬浮状态生长。如淋巴细胞。 3、兼性贴壁细胞：生长不严格依赖支持物。如中国地鼠卵巢细胞，小鼠L929细胞。19.动物细胞的生理特点。1、细胞的分裂周期长。2、细胞生长需贴附于基质,并有接触抑制现象。3、正常二倍体细胞的生长寿命是有限的。4、动物细胞对周围环境十分敏感;5、动物细

10、胞对培养基要求高。6、动物细胞蛋白质的合成途径和修饰功能与细菌不同。20.生产用动物细胞的要求。原代细胞：是直接取自动物组织器官，经过粉碎消化而获得的细胞悬液。二倍体细胞系：原代细胞经过传代筛选克隆，从多种细胞成分的组织中，挑选并纯化出某种具有一定特征的细胞株。 转化细胞系：通过某个转化过程形成的，常由于染色体断裂变成异倍体，失去正常细胞特点，而获得无限增殖能力。21.动物细胞培养的基本条件。无菌 营养充足，防止有害物质 氧气随时清除代谢有害物质 良好的生存外环境 及时分种22、 动物细胞培养基的种类和组成。 1、天然培养基：血清、羊水、腹水等，成分复杂、不稳定，来源有限。 2、合成培养基：氨

11、基酸、维生素、糖类、无机盐、其它成分。 3、无血清培养基：体外细胞培养过程中不含有动物或人的血清的细胞培养基。22.动物细胞培养基中添加血清的作用。 1、提供生长因子和激素。 4、提供必需脂肪酸和微量元素。 2、提供贴附因子和伸展因子。 5、提供良好的pH缓冲系统。 3、提供结合蛋白。23.为什么要发展无血清培养基？ 提高重复性 产品易纯化 减少微生物污染 避免血清因素对细胞的毒性 供应充足稳定 减少血清中蛋白对生物测定的干扰24.动物细胞工程反应器类型有那些？1、搅拌式生物反应器 4、透析袋或膜式生物反应器2、气升式生物反应器 5、固定床或流化床式生物反应器3、中空纤维式生物反应器25.抗体

12、制药中的概念：抗体：能与相应抗原特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。免疫球蛋白：具有抗体活性及化学结构与抗体相似的球蛋白。单克隆抗体：将抗体和具有无线增殖能力的骨髓瘤细胞相融合，通过有限稀释法及克隆化使杂交瘤细胞成为纯一的单克隆细胞系，此细胞系产生的结构和特异性完全相同的高纯度抗体。 抗体轻链：免疫球蛋白中分子量较小的、含214个氨基酸的肽链。 抗体重链：免疫球蛋白中分子量较大的、含440个氨基酸的肽链。 抗体可变区：免疫球蛋白轻链和重链靠近N端氨基酸序列变化较大的区域。 抗体恒定区：免疫球蛋白轻链和重链靠近C端氨基酸序列比较恒定的区域。 互补决定区：在V区中，某些特定位置的氨基酸残基显示更大的

13、变异性，构建了抗体分子和抗原分子发生特异性结合的关键部位，将其称为互补决定区。 人鼠嵌合抗体：将鼠源抗体的可变区与人源抗体的恒定区融合而制成的抗体。 小分子抗体：基因工程小分子抗体仅表达鼠源性McAb的V区（ CDR ）片段，其相对分子质量仅为原抗体的1/80-1/3。 抗原结合片段：Fab片段，木瓜蛋白酶水解IgG铰链区二硫键近N端所形成的两个结构相同的片段，由一条完整的轻链以及重链VH、CH1结构域组成，可与抗原结合，但不能发生凝集反应或沉淀反应。 抗原可变区片段：含有L链和Fd链一半的N端可变区，具有与完整抗体相似的结合能力。 双功能抗体：即双特异性单链抗体,是一种非天然抗体,其结合抗原

14、的两个臂具有不同的特异性。 抗体融合蛋白：酶-抗体型偶合蛋白（抗体酶）在药物治疗中应用前景广阔，它可在靶向位置上将前体药物转化成有效的药物。当抗体和酶的融合蛋白定位在肿瘤部位后再给予前体药物，药物经酶催化显示活性，提高肿瘤区域的药物浓度，降低对正常细胞的毒性。26.鼠源性单克隆抗体制备的基本步骤。1、抗原与免疫动物2、细胞融合与杂交瘤细胞的融合3、筛选阳性克隆与克隆化4、杂交瘤细胞抗体性状的鉴定5、单克隆抗体的大量制备6、单克隆抗体的纯化27.基因工程抗体：几种重要的基因工程抗体及其制备方法基因工程抗体：根据研究者的意图，采用基因工程方法，在基因水平，对免疫球蛋白基因进行切割、拼接或修饰后导入

15、受体细胞进行表达，产生新型抗体。主要包括嵌合抗体、小分子抗体、人源化抗体、双价抗体和双特异性抗体，单链抗体，修饰抗体。嵌合抗体：从杂交瘤细胞分离出功能性可变区基因，与人Ig恒定区基因连接，插入适当表达载体，转染宿主细胞，表达人-鼠嵌合抗体。减少了鼠源性抗体的免疫原性，同时保留了亲本抗体特异性结合抗原的能力。小分子抗体：仅表达鼠源性McAb的V区（ CDR ）片段，相对分子质量仅为原抗体的1/80-1/3。人源化抗体：运用基因工程的方法将鼠McAb除重链、轻链的互补决定区（CDR）以外的基因全部置换成人抗体的基因。最大限度地降低了鼠McAb的免疫原性,在人体内的生物半衰期基本上与人抗体类似。双价

16、抗体和双特异性抗体：将识别肿瘤抗原的抗体和识别细胞毒性免疫效应细胞表面分子的抗体连结在一起。可使效应细胞更容易与肿瘤细胞结合识别，取得杀伤肿瘤细胞的作用。单链抗体：采用从杂交瘤细胞提取mRNA,反转录成cDNA，通过PCR扩增抗体VH和VL基因，人工合成一条寡核苷酸序列（ Linker 序列），将VL与VH连接构建单链抗体基因。保持了抗体亲和力，相对分子质量小、穿透力强、免疫原性小，且易与效应效应分子相连接，构建出多种新功能的抗体分子。修饰抗体：将放射性核素、生物毒素或毒性极强的合成药物及抗生素等共价结合到抗体分子上，形象地称之为生物导弹。28.抗体工程：噬菌体抗体库技术。 噬菌体抗体库技术：

17、将体外克隆的抗体基因片段插入噬菌体载体，转染工程细菌进行表达，然后用抗原筛选即可获得特异的单克隆噬菌体抗体。利用这一技术可以得到完全人源性的抗体，在HIV等病毒感染和肿瘤的诊断与治疗方面有其独特的优越性。 噬菌体抗体库技术的原理：简言之就是用PCR技术从人免疫细胞中扩增出整套的抗体重链可变区（VH）和轻链可变区（VL）基因，克隆到噬菌体载体上并以融合蛋白的形式表达在其外壳表面。这样一来噬菌体DNA中有抗体基因的存在，同时在其表面又有抗体分子的表达，就可以方便地利用抗原抗体特异性结合而筛选出所需要的抗体，并进行克隆扩增。使抗体基因以分泌的方式表达，则可获得可溶性的抗体片段。在建库过程中如果将VH

18、和VI。随机组合，则可建成组合抗体文库；如果抗体mRNA来源于未经免疫的正常人，则可以在不需要细胞融合的情况下建立起人天然抗体库。 噬菌体抗体库技术的特点： 1模拟天然全套抗体库。2避免使用人工免疫和杂交瘤技术。 3可获得高亲和力的人源化抗体。29.植物细胞工程中的概念：植物细胞的全能性：植物体中任何一个具有完整细胞核（完整染色体组）的细胞，在一定条件下都可以重新再分化形成原来的个体。植物的分化：分为胚胎发生和器官发生两个阶段。前者是从精子与卵细胞结合开始，分化为幼胚，进而发育为成熟胚和种子。种子在适宜的条件下萌发，通过器官分化过程，形成根、茎、叶、花和果实。脱分化：已经分化的细胞、组织和器官

19、在人工培养的条件下又变成未分化的细胞和组织的过程。再分化：愈伤组织在适宜的培养条件下可再分化成为胚状体或直接分化出器官的过程。分生组织培养：在人工培养基上培养茎端分生组织细胞。外植体：用于植物组织（细胞）培养的器官或组织（的切段）。无性繁殖系：使用母体培养物反复进行继代培养时，通过同一外植体获得越来越多的无性繁殖后代。 次级代谢作用和次级代谢产物：核酸、核苷、核苷酸、氨基酸、蛋白质及糖类等合成需在一定的条件下才能发生的产物。次级代谢作用是由特异蛋白质调控产生的内源化合物的合成、代谢及分解的综合过程。 两步培养法：在生长培养基中培养细胞；在生产培养基中积累产物。 诱导子：植物抗病生理过程中，诱发

20、植物产生植物抗毒素和引起植物过敏反应的因子。前体饲喂：增加次级代谢产物的重要方法。能够增加相应次级代谢产物的增加。两相法培养：指在植物细胞培养体系中加入水溶性或脂溶性的有机化合物，或者是具有吸附作用的多聚化合物，使培养体系由于分配系数不同而形成上、下两相，细胞在其中一相中生长并合成次生代谢物，这些次生代谢物又通过主动或被动运输的方式释放到胞外，并被另一相所吸附。30.植物细胞的形态及生理特性。植物细胞的形状多种多样，随植物种类、存在部位和机能的不同而异，细胞的大小差别也很大。植物细胞由细胞壁和原生质体组成。原生质体包括细胞膜、细胞核、细胞质等。植物细胞的基本特点是含有刚性的细胞壁和大的液泡。植

21、物细胞内主要的生理活性物质包括酶、维生素、植物激素抗生素等。其他成分还有生物碱、糖苷类、挥发油、有机酸等。植物培养细胞可悬浮生长，对营养要求很复杂，只能进行有限分化，对环境影响很敏感。31. 植物组织和细胞培养所用培养基含有哪些基本成分？植物组织和细胞培养所用培养基种类较多，但通常都含有无机盐、碳源、有机氮源、植物生长激素、维生素等化学成分。31.影响植物次级代谢产物累积的因素。1、生物条件：如外植体、季节、休眠、分化等。2、物理条件：如温度、光、通气、PH和渗透压等。3、化学条件：如无机盐、碳源、植物生长调节剂、维生素、氨基酸、核酸、抗生素、天然物质、前体等。4、工业培养条件，如培养罐类型、

22、通气、搅拌和培养方法等。32.已发现植物组织中5种植物激素是哪些？常用的生长素和分裂素有哪些？5种植物激素：生长素、分裂素、赤霉素、脱落酸、乙烯。生长素：吲哚乙酸、萘乙酸、2、4-二氯苯氧乙酸。分裂素：6-呋喃甲基腺嘌呤、6-苄基腺嘌呤、玉米素、异戊烯基腺嘌呤33.诱导子的分类。根据在细胞内或细胞外形成：内源性诱导子和外源性诱导子。 根据来源：生物诱导子和非生物诱导子。内源性诱导子主要来自植物细胞的分子，多为植物细胞壁在微生物作用下的降解产物及沉积在细胞壁上的木质素。外源性诱导子是指病源微生物在入侵植物时自身被降解的产物及其代谢产物。分四类：多糖类、糖蛋白类、蛋白质类、不饱和脂肪酸。生物诱导子

23、是指植物在防御过程中对抗微生物感染而产生的物质，主要包括分生孢子，降解细胞壁的酶类，有机体的细胞壁碎片，有机体产生的代谢物以及培养物滤液中的成分。非生物诱导子包括所有不是植物细胞中天然成分但又能触发形成植物抗毒素信号的因子。34.一个好的悬浮细胞系有哪些特征？用于建立悬浮细胞系的愈伤组织有何要求？1、悬浮培养物分散性良好，细胞团较小，一般在3050个细胞以下。2、均一性好，细胞形状和细胞团大小大致相同。3、细胞生长迅速，一般23天甚至更短时间便可增加一倍。 起始愈伤组织的质量要求：松散性好、增殖快、再生能力强。35.建立悬浮细胞系的关键技术有哪些？。悬浮细胞的同步化：同一悬浮培养体系的所有细胞

24、都同时通过细胞周期的某一特定时期，保持相对一致的细胞学和生理学状态。36.悬浮细胞系在继代培养中其群体生长规律。 滞后期（延迟期）：细胞很少分裂，其长短与接种量大小和继代时原种细胞所处的生长期有关。 对数生长期：细胞分裂活跃，细胞数目增加，增长速率保持不变。 直线生长期：细胞生长和发育最明显的时期。 缓慢期：生长逐渐缓慢,培养液消耗将尽，有毒代谢物质增多，氧气减少。 静止期：生长几乎处于停止状态，细胞数目增加极少，甚至开始死亡。37.细胞大规模培养有哪些培养系统？1、悬浮培养系统：机械搅拌式培养系统、气压搅拌式培养系统、旋转式培养系统。 2、固定化培养法：包埋式固定化培养系统、附着式固定化培养

25、系统。38.植物细胞规模培养与次生产物生产前景及需要研究解决的问题。 在植物生物技术中，应用培养细胞系统合成有用的天然产物，很可能发展成为一个广义的化学工业的组成部分。长期以来，植物一直是许多化学品的主要资源，特别在制药和食品加工业中更是不可缺少。据不完全统计，至少有20左右的药物是由植物衍生而来的，而且每年都可发现许多植物来源的新化合物。植物次生代谢产物在医药、食品、轻化工业等领域具有重要意义。规模化细胞培养是生产植物次生产物的理想途径。需要解决的问题：1悬浮培养系统必须适应植物细胞特性 4. 泡沫和表面粘附性2植物细胞培养液的流变特性 5. 剪切力对植物细胞的影响3植物细胞培养过程中的气体

26、调节39.酶工程中的概念：固定化酶：限制或固定于特定空间位置的酶，即经物理或化学方法处理，使酶变成不易随水流失即运动受到限制，而又能发挥催化作用的酶制剂。模拟酶：根据酶的作用原理，用各种方法人为制造的具有酶性质的催化剂。主客体酶：来源于酶和底物的相互作用，体现为主体和客体在结合部位的空间及电子排列的互补。最具代表性的是环糊精。 胶束模拟酶：胶束在水溶液中提供了疏水微环境（类似于酶的结合部位），可以对底物束缚，如果将催化基团和一些辅酶共价或非共价地连接或吸附在胶束上，就有可能提供“活性中心”部位，使胶束成为具有酶活力或部分酶活力的胶束模拟酶。 肽酶：模拟天然酶活性部位而人工合成的具有催化活性的多

27、肽。半合成酶：以天然酶为母体，用化学方法或基因工程方法引进适当的活性部位或催化基团，从而形成一种新的人工酶。印迹酶：如果以一种分子充当模板，其周围用聚合物交联，当模板分子除去后，此聚合物就留下了与此分子相匹配的空穴。如果构建合适，这种聚合物就像“锁”一样对“钥匙”具有选择性识别作用，这种技术被称为分子印迹。通过分子印迹技术可以产生类似于酶的活性中心的空腔，对底物产生有效的结合作用，更重要的是利用此技术可以在结合部位的空腔内诱导产生催化基团，并与底物定向排列。酶化学修饰：通过主链的切割、剪接和侧链基团的化学修饰对酶蛋白进行分子改造，以改变其理化性质及生物活性。有机相酶：具有有机溶剂存在的介质中的

28、酶。核酶和脱氧核酶：具有催化活性的RNA。具有催化活性的DNA。抗体酶: 抗体的高度选择性和酶的高效催化能力结合的产物，本质上是一类具有催化活力的免疫球蛋白。40.酶的生产菌对菌种的要求有哪些？1、繁殖快、产酶量高，酶的性质应符合使用要求，而且最好是产生胞外酶的菌。2、不是致病菌，在系统发育上与病原体无关，也不产生有毒物质。3、产酶性能稳定，不易变异退化，不易感染噬菌体。4、能利用廉价的原料，发酵周期短，易于培养。41.目前常用的产酶微生物有哪些？1、大肠杆菌：遗传背景清楚，可被广泛用于遗传工程外来基因的宿主，而成为优良性状的“工程菌”。2、枯草杆菌：工业上应用最广泛的产酶菌之一，主要用于生产

29、淀粉酶、葡萄糖氧化酶等。3、啤酒酵母：生产转化酶、丙酮酸脱羧酶、乙醇脱氢酶等。4、曲霉（黑曲霉和黄曲霉）： 生产糖化酶、蛋白酶、淀粉酶、果胶酶、葡萄糖氧化酶、脂肪酶等。42.固定化酶有哪些特点？可多次使用。 酶底物产物易分开，产物中无残留酶，易纯化，产品质量高。反应条件易控制。 酶的利用效率高。比水溶性酶更适合于多酶反应。43.常用的固定化酶有哪些方法？1、载体结合法：物理吸附法、离子结合法、共价结合法。2、交联法3、包埋法：网格型、微囊型。4、选择性热变性法：专用于细胞固定化。44.常用的固定化酶反应器的有哪些类型？1、间歇式搅拌罐反应器 5、循环反应器2、连续流动搅拌罐反应器 6、连续流动

30、搅拌罐-超滤膜反应器3、添充床反应器 7、其它反应器 4、流化床反应器45.酶分子经过化学修饰的目的是什么？1、提高生物活性。2、增强在不良环境中的稳定性。3、针对异体反应，降低生物识别能力。46.干细胞与治疗性克隆概念：干细胞：一类具有自我更新和分化潜能的细胞。对称分裂：形成两个相同的干细胞。非对称分裂：由于细胞质中的调节分化蛋白不均匀地分配，使得一个子细胞不可逆的走向分化的终端成为功能专一的分化细胞；另一个保持亲代的特征，仍作为干细胞保留下来。全能性干细胞：具有形成完整个体的分化潜能。多能性干细胞：具有分化出多种细胞组织的潜能，但失去了发育成完整个体的能力。单能干细胞：只能向一种类型或密切

31、相关的两种类型的细胞分化。治疗性克隆：从病人身上取下体细胞并进行体细胞克隆，使形成的囊胚发育57天，然后从中提取胚胎干细胞，在体外进行诱导分化培育出遗传特征与病人完全吻合的细胞、组织或器官，再向提供体细胞的病人移植这些组织或器官。47.干细胞的分类。按细胞来源：胚胎干细胞、胎儿组织干细胞、脐带血干细胞、骨髓干细胞、成体组织干细胞等。按发育阶段：胚胎干细胞、成体组织干细胞。按分化潜能：全能性干细胞、多能性干细胞、单能干细胞。48.胚胎干细胞的鉴定方法。1、生长特性初步鉴定 4、核型的检测2、碱性磷酸酶活性：可以鉴定ES细胞是否分化 5、体外分化能力的检测。3、细胞表面特异性抗原的检测49.胚胎干细胞有哪些典型应用领域？1、生产克隆动物和转基因动物 4、药学研究 2、作为有利的研究工具 5、组织工程3、用作细胞替代治疗和基因治疗的载体50.治疗性克隆目前存在技术难关