各种培养基配方.docx

1、各种培养基配方146 种培养基配方1 、牛肉膏蛋白胨培养基（培养细菌用）牛肉膏3g蛋白胨5g氯化钠10g琼脂1520gpH7.07.2水1000mL2 、 2 、高氏（ Gause ） 1 号培养基（培养放线菌用）可溶性淀粉20g硝酸钾1g氯化钠0.5g磷酸氢二钾0.5g硫酸镁0.5g硫酸亚铁0.01g琼脂20g水1000mLpH7.2 7.4配制时，先用少量冷水将淀粉调成糊状， 倒入煮沸的水中，在火上加热，边搅拌边加入其他成分，溶化后，补足水分至 1000mL 。 121灭菌 20min 。查氏（ Czapek ）培养基（培养霉菌用）硝酸钠2g磷酸氢二钾1g氯化钾0.5g硫酸镁0.5g硫酸亚

2、铁0.01g蔗糖30g琼脂1520g水1000mLpH自然121 灭菌 20min。4 、马丁氏（ Martin）琼脂培养基（分离真菌用）葡萄糖10g蛋白胨5g磷酸二氢钾1g七水合硫酸镁0.5g1/3000 孟加拉红（ rose bengal，玫瑰100mL红水溶液）琼脂15 20gpH自然蒸馏水800mL112 灭菌 30min 。临用前加入 0.03% 链霉素稀释液 100mL ，使每毫升培养基中含链霉素 30 g 。5 、马铃薯培养基（简称PDA ）（培养真菌用）马铃薯200g蔗糖（或葡萄糖）20g琼脂15 20gpH自然培养基的配制：马铃薯去皮，切成块煮沸 30min ，然后用纱布过滤

3、，再加糖及琼脂，熔化后补足水至 1000mL 。 121 灭菌 30min 。6 、麦芽汁琼脂培养基培养基的配制：(1) 、取大麦或小麦若干，用水洗净，浸水 6 12 小时，至 15 阴暗处发芽，上面盖纱布一块，每日早、中、晚淋水一次，麦根伸长至麦粒的两倍时，即停止发芽，摊开晒干或烘干，贮存备用。(2) 、将干麦芽磨碎，一份麦芽加四份水，在 65 水浴中糖化 3 4 小时，糖化程度可用碘滴定之。加水约 20mL ，调匀至生泡沫时为止，然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。(3) 、将糖化液用 4 6 层纱布过滤，滤液如混浊不清，可用鸡蛋白澄清，方法是将一个鸡蛋白加水约 20mL ，调匀至生泡沫时为

4、止，然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。(4) 、将滤液稀释到 5 6 波美度， pH 约 6.4 ，加入 2% 琼脂即成。 121 灭菌 30min 。7 、无氮培养基（自生固氮菌、钾细菌）甘露醇（或葡萄糖）10g磷酸二氢钾0.2g七水合硫酸镁0.2g氯化钠0.2g二水合硫酸钙0.2g碳酸钙5g蒸馏水1000mLpH7.0 7.2113 灭菌 30min 。8 、半固体肉膏蛋白胨培养基肉膏蛋白胨液体培养基100mL0.35 0.4琼脂gpH7.6121 灭菌 20min 。9 、合成培养基偏磷酸铵1g氯化钾0.2g七水合硫酸镁0.2g豆芽汁10mL琼脂20g蒸馏水1000mLpH7.0加 12

5、 mL0.04% 的溴钾酚紫（ pH5.2 6.8 ，颜色由黄变紫，作指示剂） 。121 灭菌 20min 。10 、豆芽汁蔗糖（或葡萄糖）培养基黄豆芽100g蔗糖（或葡萄糖） 50g水1000mLpH自然培养基的配制：称新鲜豆芽 100g ，放入烧杯中，加入水 1000mL ，煮沸约 30min用纱布过滤。 用水补足原量， 再加入蔗糖 （或葡萄糖） 50g ，煮沸熔化。 121 灭菌 20min，。11 、油脂培养基蛋白胨10g牛肉膏5g氯化钠5g香油或花生油10g1.6% 中性红水溶液1mL琼脂15 20g蒸馏水1000mLpH7.2121 灭菌 20min注： (1) 、不能使用变质油。

6、(2) 、油和琼脂及水先加热。(3) 、调好 pH 值后，再加入中性红。(4) 、分装时，需不断搅拌，使油均匀分布于培养基中。12 、淀粉培养基蛋白胨10g牛肉膏5g氯化钠5g可溶性淀粉2g蒸馏水1000mL琼脂15 20g121 灭菌 20min13 、明胶培养基牛肉膏蛋白胨液 100mL明胶12 18gpH7.6在水浴锅中将上述成分溶化，不断搅拌。溶化后调 pH7.2 7.4 。121 灭菌 30min 。14 、蛋白胨水培养基蛋白胨10g氯化钠5g蒸馏水1000mLpH7.6121 灭菌 20min 。15 、糖发酵培养基蛋白胨水培养基1000mL1.6% 溴钾酚紫乙醇溶液1 2mLpH

7、7.6另配制 20% 糖溶液（葡萄糖、乳糖、蔗糖等）各 10mL 。培养基的配制：(1) 、将上述含指示剂的蛋白胨水培养基（pH7.6 ）分装于试管中，在每管内放一倒置的小玻璃管（ Durham tube ），使之充满培养液。(2) 、将已分装好的蛋白胨水和 20% 的各种糖溶液分别灭菌，蛋白胨水121 灭菌20min ；糖溶液 112 灭菌 30min 。(3) 、灭菌后，每管以无菌操作分别加入 20% 无菌糖溶液 0.5 mL （按每 10mL 培养基中加入 20% 的糖液 0.5mL ，则成 1% 的浓度）。配制用的试管必须洗干净， 避免结果混乱。16 、葡萄糖蛋白胨水培养基蛋白胨5g葡

8、糖糖5g磷酸氢二钾2g蒸馏水1000mL将上述各成分溶于 1000mL 水中，调 pH7.0 7.2 ，过滤。分装试管，每管 10mL ， 112 灭菌 30min 。17 、麦氏（ Meclary ）琼脂（酵母菌）葡萄糖1g氯化钾1.8g酵母浸膏2.5g醋酸钠8.2g琼脂15 20g蒸馏水1000mL113 灭菌 20min 。18 、柠檬酸盐培养基磷酸二氢铵1g磷酸氢二钾1g氯化钠5g硫酸镁0.2g柠檬酸钠2g琼脂15 20g蒸馏水1000 mL1% 溴麝香草酚蓝乙醇液10 mL培养基的配制：将上述各成分加热溶解后，调 pH6.8 ，然后加入指示剂，摇匀，用脱脂棉过滤。制成后为黄绿色，分装

9、试管， 121 灭菌 20min 后制成斜面，注意配制时控制好 pH ，不要过碱，以黄绿色为准。19 、醋酸铅培养基pH7.4 的牛肉膏蛋白胨琼脂100 mL硫代硫酸钠 0.25g10% 醋酸铅水溶液 1 mL培养基的配制：将牛肉膏蛋白胨琼脂 100 mL 加热溶解，待冷却至 60 时加入硫代硫酸钠 0.25g ，调至 pH7.2 ，分装于三角瓶中， 115 灭菌 15min 。取出后待冷却至55 60 ，加入 10% 醋酸铅水溶液（无菌的） 1mL ，混匀后倒入灭菌试管或平板中。20 、血琼脂培养基pH7.6 的牛肉膏蛋白胨琼脂100 mL脱纤维羊血（或兔血）10 mL培养基的配制： 将牛肉

10、膏蛋白胨琼脂加热熔化， 待冷却至 50 时， 加入无菌脱纤维羊血（或兔血）摇匀后倒平板或制成斜面。 37 过夜检查无菌生长即可使用。21 、玉米粉蔗糖培养基玉米粉60g磷酸二氢钾3g维生素 B1100mg蔗糖10g七水合硫酸镁1.5g水1000 mL121 灭菌 30min ，维生素 B1 单独灭菌 15min 后另加。22 、酵母膏麦芽汁琼脂麦芽粉3g酵母浸膏 0.1g水1000 mL121 灭菌 30min 。24 、棉籽壳培养基培养基的配制：棉籽壳 50% ，石灰粉 1% ，过磷酸钙 1% ，水 65% 70% ，按比例称好料，充分搅拌均匀后装瓶，较薄地平摊盘上。25 、复红亚硫酸钠培养

11、基（远藤氏培养基）蛋白胨10g乳糖10g磷酸氢二钾3.5g琼脂20 30g蒸馏水1000 mL5% 碱性复红乙醇溶液20 mL培养基的配制： 先将琼脂加入 900 mL 蒸馏水中， 加热溶解， 再加入磷酸氢二钾及蛋白胨，使溶解，补足蒸馏水至 1000 mL ，调 pH 至 7.2 7.4 。加入乳糖， 混匀溶解后， 115 灭菌 20min 。称取亚硫酸钠置一无菌空试管中，加入无菌水少许使溶解，再在水浴中煮沸 10min 后。立刻滴加于 20 mL 5% 碱性复红乙醇溶液中，直至深红色褪成淡粉红色为止。将此亚硫酸钠与碱性复红的混合液全部加至上述已灭菌的并仍保持熔化状态的培养基中， 充分混匀，倒

12、平板，放冰箱中备用，贮存时间不宜超过 2 周。26 、伊红美蓝培养基（ EMB 培养基）蛋白胨水培养基 100 mL20% 乳糖溶液 2 mL2% 伊红水溶液 2 mL0.5% 美蓝水溶液 1 mL培养基的配制：将已灭菌的蛋白胨水培养基（ pH7.6 ）加热熔化，冷却至 60 左右时，再把已灭菌的乳糖溶液，伊红水溶液及美蓝水溶液按上述量以无菌操作加入。摇匀后，立即倒平板。乳糖在高温灭菌易被破坏必须严格控制灭菌温度， 115 灭菌 20min 。27 、乳糖蛋白胨培养液（“水的细菌学检查 ”用）蛋白胨10g牛肉膏3g乳糖5g氯化钠5g1.6% 溴甲酚紫乙醇溶液1 mL蒸馏水1000 mL培养基的

13、配制：将蛋白胨、牛肉膏、乳糖及氯化钠加热溶解于 1000 mL 蒸馏水中，调 pH 至 7.2 7.4 。加入 1.6% 溴甲酚紫乙醇溶液 1 mL ，充分混匀，分装于有小倒管的试管中。 115 灭菌 20min 。28 、石蕊牛奶培养基牛奶粉100g石蕊0.075g水1000 mLpH6.8121 灭菌 15min。29 、 LB （ Luria-Bertani）培养基蛋白胨10g酵母膏5g氯化钠10g蒸馏水1000 mLpH7.0121 灭菌 20min。30 、基本培养基磷酸氢二钾10.5g磷酸二氢钾4.5硫酸铵1g二水合柠檬酸钠0.5g蒸馏水1000 mL121 灭菌 20min。需要

14、时灭菌后加入：糖（ 20% ）10 mL维生素 B1 （硫胺素）（ 1%）0.5 mL七水合硫酸镁（ 20%）1 mL链霉素（ 50mg/ mL ） 4 mL ，终浓度 200 g/ mL氨基酸（ 10mg/ mL ） 4 mL ，终浓度 40 g/ mLpH 自然（ 7.0 ）31 、庖肉培养基培养基的配制：(1) 、取已去肌膜、脂肪之牛肉 500g ，切成小方块，置 1000 mL 蒸馏水中，以弱火煮 1 小时，用纱布过滤，挤干肉汁，将肉汁保留备用。将肉渣用绞肉机绞碎，或用刀切成细粒。(2) 、将保留的肉汁加蒸馏水，使总体积为 2000 mL ，加入蛋白胨 20g ，葡萄糖 2g ，氯化钠

15、 5g ，及绞碎的肉渣，置烧瓶摇匀，加热使蛋白胨溶化。(3) 、取上层溶液测量 pH ，并调整其达到 8.0 ，在烧瓶壁上用记号笔标示瓶内液体高度，121 灭菌 15min 后补足蒸发的水分， 重新调整水量后调整 pH7.4 。pH 值 8.0 ，再煮沸 10 20min ，补足(4) 、将烧瓶内容物摇匀，将溶液和肉渣分装于试管中，肉渣约占培养基的 1/4左右。经121 灭菌 15min 后备用，如当日不用，应以无菌操作加入已灭菌的石蜡凡士林，以隔绝氧气。32 、乳糖牛肉膏蛋白胨培养基乳糖牛肉膏酵母膏蛋白胨葡萄糖氯化钠琼脂粉pH水33 、马铃薯牛乳培养基培养基的配制： 200g粉 15g ，加

16、水 1000mLpH7.0合。34 、尿素琼脂培养基尿素琼脂氯化钠磷酸二氢钾蛋白胨酚红蒸馏水pH5g5g5g10g10g5g15g6.81000mL马铃薯（去皮）煮出汁，脱脂鲜乳 100mL ，酵母膏 5g ，琼脂。制平板培养基时，牛乳与其他成分分开灭菌，倒平板前再混20g15g5g2g1g0.012g1000mL6.8 0.2培养基的配制：在蒸馏水或去离子水 100mL 中，加入上述所有成分（除琼脂外） 。混合均匀。 过滤灭菌。 将琼脂加入 900mL 蒸馏水或去离子水中， 加热煮沸腾。 在 15 磅 121 灭菌 15min 。冷却至 50 ，加入灭菌好的基本培养基，混匀后，分装于灭菌的试

17、管中，放在倾斜位置上使其凝固培养基及成分1. Acetobacter Medium ( 醋酸菌培养基 )Glucose (葡萄糖 ) 100g Yeasst extract (酵母膏 ) 10gCaCO3 20g Agar ( 琼脂 ) 15gDistilled water ( 蒸馏水 ) 1000ml Adjust ( 调 ) pH to 6.8适用范围：恶臭醋酸杆菌混浊变种2. Nutrient Agar ( 营养肉汁琼脂 )Pepton (蛋白胨 ) 5g Beef extract ( 牛肉膏 ) 30gNaCl 5g Agar ( 琼脂 ) 15gDistilled water ( 蒸

18、馏水 ) Adjust ( 调 ) pH to 7.0-7.2Note ： When cultivation of Bacillus ， 5mg of to MnSO4.H2O may be added .It is favorable to promote spore formation .适用范围：产气气杆菌、粪产碱杆菌、蜡状芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌蕈状变种、地衣形芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、多粘芽孢杆菌、尘埃芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、嗜热脂肪芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、 枯草芽孢杆菌深黑变种、 苏云金芽孢杆菌、 苏云金芽孢杆菌蜡螟亚种 （青虫菌）、苏云金芽孢杆菌戈尔斯德变种、苏云金芽孢杆菌猝倒亚种、

19、产氨短杆菌、黄色短杆菌、谷氨酸棒状杆菌、 北京棒杆菌、 大肠埃希氏菌 （大肠杆菌）、铜绿假单胞菌 （绿脓杆菌）、凸形假单胞杆菌、荧光假单胞菌、弯曲假单胞菌、恶臭假单胞菌、假单胞杆菌、藤黄八叠球菌、亚黄八叠球菌、尿素八叠球菌、金黄色葡萄球菌、运动发酵单孢菌3. Azotobacter Medium ( 固氮菌培养基 ) KH2PO4 0.2g K2HPO4 0.8gMgSO4.7H2O 0.2g CaSO4.2H2O0.1 a2MoO4.2H2O Trace( 微量 ) Yeast axtract(酵母膏 ) 0.5g Mannitol( 甘露醇 ) 20g FeCl3 Tract( 微量 )D

20、istilled water ( 蒸馏水 ) 1000ml Agar ( 琼脂 ) 15gAdjust ( 调 ) pH to 7.2适用范围：固氮菌、胶质芽孢杆菌4. Corn Meal Medium ( 玉米粉培养基 )Maize flour ( 玉米粉 ) 5g Peptone (蛋白胨 ) 0.1gGlucose (葡萄糖 ) 1g Tap water ( 自来水 ) 1000mlNote:Boil the mixture in autoclave at 121 for 1 hr. distribute the medium into 18 18 mm tubes , each con

21、tains 10 ml of the liquid , then autoclave at 121 for 1 hr . again (15 磅蒸煮 1 小时 ,分装入 18 18 毫米试管 ,每管深度达 6 厘米。 15 磅再次灭菌 15 小时。 )5. Lactic-bacteria Medium I ( 乳酸菌培养基 I )Yeast extract (酵母膏 ) 7.5g Peptone (蛋白胨 ) 7.5gGlucose (葡萄糖 ) 10g KH2PO4 2gTomato juice ( 西红柿汁 ) 100ml Tween ( 吐温 ) 80 0.5mlDistilled wa

22、ter ( 蒸馏水 ) 900ml pH 7.0适用范围：植物乳杆菌（胚芽乳杆菌） 、嗜热乳酸链球菌6. Lactic-bacteria Midium (乳酸菌培养基 )Lacto-casein peptone (乳酪蛋白胨 ) 10gBeef extract ( 蛋白胨 ) 10gYeast extract (酵母膏 ) 5g Glucose (葡萄糖 ) 5gTween (吐温 ) 80 1g K2HPO4 2gNa-acetate (醋酸钠 ) 5g Diamine citrate ( 柠檬酸二胺 ) 2gMgSO4.7H2O 0.2g MnSO4.H2O 0.05gDistilled

23、water ( 蒸馏水 ) 1000m pH 6.5-6.8适用范围：植物乳杆菌（胚芽乳杆菌）7. Peotone Glucose Yeast extract Medium PGY （蛋白胨、酵母膏、葡萄糖培养基）Peptone（蛋白胨）10gYeast extract （酵母膏）5gGlucose （葡萄糖）1gDistilled water （蒸馏水）1L8. Glycerol Agar （甘油琼脂）Peptone （蛋白胨）5g Beef extract （酵母膏） 3gGlycerol （甘油）20g Top water （自来水）1000mlAgar （琼脂） 15g pH 7.0-

24、7.29. Rhizobium medium （根瘤菌培养基） AS 9Yeast eztract （酵母膏） 1g Soil eztract（土壤浸提液） 200mlMannitol （甘露醇） 10g Agar （琼脂）15gDistilled water（蒸馏水） 800ml pH 7.2Note ： Soilextract： Suspend 50g finelyanddried gardon soil in 200ml of tap water.Autoclave at 121 for 1 hr. Decant through cotton-cloth, filler though p

25、aper, make up volume to 200ml. Resterilize for 20 minutes at 121 , then mixed with othringredients and distributed. ( 土壤浸提液的制法：取土壤 50 克，加水 200 毫升， 15 磅蒸煮 1 小时，经滤纸过滤后加水补足到 200 毫升。 )适用范围：大豆根瘤菌（慢生型） 、豇豆慢生根瘤菌、花生根瘤菌、紫云英根瘤菌、大豆根瘤菌（快生型） 、大豆根瘤菌、豌豆根瘤菌、苜蓿根瘤菌、田菁根瘤菌10. Mannitol Agar ( 甘露醇琼脂 )Yeast extract (酵母膏 )

26、 5g Peptone (蛋白胨 ) 3gMannitol ( 甘露醇 ) 25g Agar ( 琼脂 ) 15gDistilled water ( 蒸馏水 ) 1000ml11. Glucose Asparagine （葡萄糖、天门冬素琼脂）Glucose （葡萄糖） 10g Asparagine （天门冬素） 0.5gK2HPO4 0.5g Water （水） 1000mlpH 7.2-7.4适用范围：刺孢小单孢菌绛红变种、紫色小单孢菌（绛红小单孢菌）12. Gause s Synthetic Agar （高氏合成一号琼脂）KNO3 1g Soluble starch （可溶性淀粉） 20

27、gK2HPO4 0.5g MgSO4.7H2O 0.5gNaCl 0.5g FeSO4 0.01gAgar （琼脂） 20g water （水） 1000mlpH 7.2-7.4适用范围：刺孢小单孢菌绛红变种、紫色小单孢菌（绛红小单孢菌） 、白黄链霉菌、白色链霉菌、抗生链霉菌、双重轮丝链霉菌、产色链霉菌、烬灰链霉菌、天蓝色链霉菌、灭蚊链霉菌、 红霉素链霉菌、 青色链霉菌、 球孢链霉菌、 浅灰链霉菌、 灰色链霉菌、 吸水链霉菌、淡紫灰链霉菌、 黄色长孢链霉菌、 藤黄色链霉菌、 细黄链霉菌、 黑化链霉菌、 玫瑰色链霉菌、华美链霉菌、嗜热链霉菌、委内瑞拉链霉菌、紫色直丝链霉菌、紫色链霉菌、绿色链霉菌13. Wort Agar （麦芽汁琼脂）Dilute the world (witho