丁卡因与酰胺类局麻药单用及联合肌注的小鼠半数致死量观察.docx

1、丁卡因与酰胺类局麻药单用及联合肌注的小鼠半数致死量观察【摘要】 目的:测定酯类局麻药丁卡因与酰胺类局麻药单用及联合肌注小鼠半数致死量（ld50），并探讨两种类型局麻药合用时的毒性相互作用形式。方法:清洁级雄性小白鼠105只，随机分为丁卡因组、利多卡因组、罗哌卡因组、布比卡因组、丁卡因-利多卡因组（丁利组）、丁卡因-罗哌卡因组（丁罗组）、丁卡因-布比卡因组（丁布组），共7组，每组15只。采用序贯法测定各组局麻药小鼠肌肉注射的ld50，求出q值，并进行药物相似联合作用的q检验。结果:小鼠ld50在丁卡因组为21.2 mg/kg，利多卡因组为186.9 mg/kg，罗哌卡因组为39.1 mg/kg，

2、布比卡因组为25.7mg/kg；丁利组为丁卡因10.3 mg/kg，利多卡因82.2 mg/kg；丁罗组为丁卡因12.8 mg/kg，罗哌卡因19.1 mg/kg；丁布组为丁卡因14.2 mg/kg，布比卡因14.2 mg/kg。丁利组的q值1，丁罗组、丁布组的q值1，但p值均0.05，差异无显著性。结论:小鼠肌注局麻药全身毒性反应中，局麻药毒性丁卡因布比卡因罗哌卡因利多卡因，丁卡因与酰胺类局麻药联合应用时全身毒性表现为相加作用。 【关键词】 丁卡因 利多卡因 罗哌卡因 布比卡因 ld50 小鼠 abstract: objective: to detect lethal dose 50 (ld

3、50) of single or combination of tetracaine and amide anesthetic for mice and to investigate the fashion of interaction when combinating two local anesthetics. methods: one hundred and five healthy male mice weighing (202)g were randomly divided into 7 groups (n=15): tetracaine group, lidocaine group

4、, ropivacaine group, bupivacaine group, tetracaine-lidocaine group, tetracaine-ropivacaine group and tetracaine-bupivacaine group. single or combination of local anesthetics was intramuscularly injected into mice by up-and-down method to determine ld50 of the drugs. on the basis of these data, the q

5、 value could be acquired, and q-test was done to verify the combination effects of two similar drugs. results: ld50 of tetracaine, lidocaine, ropivacaine, bupivacaine was 21.2 mg/kg, 186.9 mg/kg, 39.1 mg/kg and 25.7 mg/kg, respectively. there were 10.3 mg/kg tetracaine and 82.2 mg/kg lidocaine in ld

6、50 of tetracaine-lidocaine group, 12.8 mg/kg tetracaine and 19.1 mg/kg ropivacaine in ld50 of tetracaine ropivacaine group, 14.2 mg/kg tetracaine and 14.2 mg/kg bupivacaine in ld50 of tetracaine-bupivacaine group. the q-value of tetracaine-ropivacaine group, tetracaine-bupivacaine group were more th

7、an 1, and it was less than 1 in tetracaine-lidocaine group, but there was no statistically significance. conclusion: the systemic toxic reactions of local anesthetics ranging from high to low are tracaine, bupivacaine, ropivacaine and lidocaine when intramuscularly administrated. the interaction of

8、tetracaine and amide anesthetic is additive. key words: tetracaine; lidocaine; ropivacaine; bupivacaine; lethal dose 50; mice 区域麻醉在控制患者围术期疼痛和应激反应方面有其独到之处。临床上为了获得更完善的阻滞、更快的起效时间和更持久的镇痛时间，常常采用两种局麻药联合应用1,2，但目前对两种局麻药联合应用时的全身毒性反应的评价尚不一致。我们对丁卡因和酰胺类局麻药单用及联合肌注小鼠半数致死量（ld50）进行观察，探讨两种类型局麻药合用时的毒性相互作用的形式。 1 材料和方法

9、 1.1 实验动物和分组 清洁级icr雄性小白鼠105只，由温州医学院实验动物中心提供，体重（202）g，随机分为丁卡因组、利多卡因组、罗哌卡因组、布比卡因组、丁卡因-利多卡因组（丁利组）、丁卡因-罗哌卡因组（丁罗组）、丁卡因-布比卡因组（丁布组），共7组，每组15只。小鼠体重：丁卡因组(19.01)g，利多卡因组(18.81)g，布比卡因组(19.41)g，罗哌卡因组(19.11)g，丁利组(19.11)g，丁罗组(18.71)g，丁布组(19.31)g，组间差异无显著性（p=0.655）。 1.2 方法 在动物预实验的基础上，采用序贯法测定小鼠肌注局麻药的半数致死量。选择小鼠大腿外侧股四头

10、肌，用微量注射器抽取局麻药注射。每侧不超过0.1 ml，可两侧股四头肌注射，最大注射量不超过0.01 ml/g。肌注剂量按等比级数排列，剂量倍数选择1.1倍，具体级数根据实验调整。每组的第一只小鼠所用的剂量由预实验得出实验者认为最接近ld50开始，若前一小鼠存活，后一只小鼠就用高一等比级数的剂量；若死亡，用低一级的剂量，如此序贯进行，直至实验至预先已决定好的动物数为止。丁卡因组采用50 mg丁卡因粉剂（浙江九旭药业，批号），用生理盐水配制成0.5%的浓度，初始剂量采用4.8l/g，预设剂量等级分别是（3.3、3.6、4.0、4.4、4.8、5.3、5.9）l/g。利多卡因组采用2%盐酸利多卡因

11、（双湖制药厂，批号0606004），初始剂量采用9.1l/g，预设剂量等级分别是（6.8、7.5、8.3、9.1、10.0、11.0、12.1、13.3）l/g。罗哌卡因组采用0.75%罗哌卡因（瑞士阿斯利康制药有限公司，批号e3 1078），初始剂量采用4.4l/g，预设剂量等级分别是（3.3、3.6、4.0、4.4、4.8、5.3、5.9、6.4、7.1、7.8）l/g。布比卡因组采用0.5%布比卡因（上海第一制药厂，批号6h04003），初始剂量采用3.6l/g，预设剂量等级分别是(3.0、3.3、3.6、4.0、4.4、4.8、5.3、5.9、6.4、7.1)l/g。计算出丁卡因、利多

12、卡因、罗哌卡因和布比卡因的ld503。联合组从两种局麻药ld50质量比基础上，换算出两种局麻药的体积比进行混合。通过小鼠预实验，确定丁利组初始剂量为5.0l/g，预设剂量等级分别是（4.1、4.6、5.0、5.5、6.1、6.7、7.4）l/g。丁罗组初始剂量为5.0l/g，预设剂量等级分别是（4.1、4.6、5.0、5.5、6.1、7.4）l/g。丁布组初始剂量为5.0l/g，预设剂量等级分别是（4.1、4.6、5.0、5.5、6.1、6.7、7.4）l/g。在注射完成后立即用计时器开始计时，记录小鼠死亡时间，超过1 h记为存活。计算出7组小鼠的ld50及95%可信区间。计算丁利组、丁罗组和

13、丁布组的毒性作用的q值3。 ld50的计算公式：ld50=lg-1m； m=0i(a/n-1/2)（n项抄录“+”时）； 或m=0i(a/n+1/2)（n项抄录“-”时）。 1.3 统计学处理方法 求出两种药物相似联合作用的q值，并进行药物联合作用的q检验3。 2 结果 2.1 丁卡因组的小鼠ld50为21.2 mg/kg，95%可信区间为19.924.5 mg/kg；利多卡因组的小鼠ld50为186.9 mg/kg，95%可信区间为157.7221.8 mg/kg；罗哌卡因组的小鼠ld50为39.1 mg/kg，95%可信区间为34.844 mg/kg；布比卡因组的小鼠ld50为25.7 m

14、g/kg，95%可信区间为21.730.5 mg/kg。丁利组的质量比约为1:9，体积比约为1:2，实际实验中采用体积比近似值1:2；丁罗组的质量比为1:2，体积比约为1:1，实际实验中体积比采用1:1；丁布组的质量比为1:1，体积比是1:1，实际实验中体积比采用1:1。两种局麻药联合应用时小鼠的ld50（表中分别显示两种局麻药所占的量）、95%可信区间及q检验见表1。由表1可见，丁利组的q值1，丁罗组、丁布组的q值1，但p值均0.05，差异无显著性。 2.2 7组小鼠注射局麻药后全部出现了不同程度的共济失调、翻正反射消失和惊厥发作，对局麻药致死的序贯反应曲线见图12。 3 讨论 尽管近年来新

15、的局麻药不断在临床上得以应用，但至今仍没有一种局麻药能符合临床的所有要求。因此，临床麻醉常常将两种局麻药联合使用1,2，发挥各自的优势，以缩短神经阻滞的起效时间和延长阻滞持续时间，两种局麻药的联合使用可能使局麻药的毒性发生变化。本实验测定酯类局麻药丁卡因与酰胺类局麻药单用及联合肌注小鼠半数致死量，结果发现两种类型局麻药合用时全身毒性表现为相加作用。 两个同源性药物合并应用可表现为相似联合作用，包括副作用。丁卡因与利多卡因、罗哌卡因和布比卡因分别属于脂类和酰胺类局麻药，是芳香基-中间链-胺基结构的化合物。由于中间链不同，它们的代谢途径是不同的，丁卡因被血浆胆解脂酶分解，而酰胺类局麻药肝内被细胞色

16、素p450酶，特别是同功酶cyp1a2和cyp3a4所分解4,5。两种局麻药同时进入体内，分别被不同部位的酶所代谢，在代谢上两种局麻药并不相互抑制，但在生物学分类上，两种药物均属于d类，药物均作用于神经膜，又作用于钠通道的轴浆侧。局麻药的各种分类中，生物学分类对两药联合应用时是否改变原来药物的毒性作用影响较大。由于丁卡因与利多卡因、罗哌卡因和布比卡因的生物学作用位点相同，我们观察到的丁卡因与酰胺类局麻药合用产生的联合全身毒性作用表现为相加，符合生物学分类特点，联合应用并没有增加局麻药的全身毒性。这与spieqel等6报道的小鼠局麻药致惊厥的毒性反应为相加的报道相符合。 以往的局麻药毒性动物实验

17、以静脉或腹腔注射为主或采用离体心脏为观察对象，而我们采用肌肉注射比静脉或腹腔注射则更接近临床。金小高等7报道腹腔注射局麻药，测定利多卡因、罗哌卡因、布比卡因小鼠半数致死量，其结果与我们的结果相比，利多卡因的ld50较低，而罗哌卡因和布比卡因的ld50较高，原因可能为局麻药的给药途径不同所致。在离体心脏为模型的研究中，丁卡因与布比卡因具有类似的心肌吸收与分布特性，但布比卡因导致qrs波增宽更明显，这可能与布比卡因与钠通道结合得更牢固有关8。以离体心脏为模型的研究文献9也认为布比卡因比罗哌卡因心脏毒性大。我们在活体小鼠上实验得出的结论是：局麻药毒性丁卡因布比卡因罗哌卡因利多卡因。 尽管本实验为动物

18、实验，尚不能代表人体研究的结果，但其结论可为临床两种局麻药联合应用提供参考。局麻药混合的比例不同对两种局麻药联合作用毒性的影响仍有待进一步研究。 【参考文献】 1 sarvela pj, paloheimo mp, nikki ph. comparison of ph-adjusted bupivacaine 0.75% and a mixture of bupivacaine 0.75% and lidocaine 2%, both with hyaluronidase, in day-case cata-ract surgery under regional anesthesiaj.ane

19、sth analg,1994,79(1):35-39. 2 ribotsky bm,berkowitz kd,montague jr,et al. local anesthetics. is there an advantage to mixing solutions?j.j am podiatr med assoc,1996,86(10):487-491.3 徐端正.生物统计在实验和临床药理学中的应用m.北京:科学出版社,2004:302-307.4 wang js,backman jt,taavitsainen p,et al. involvement of cyp1a2 and cyp3

20、a4 in lidocaine n-deethylation and 3-hy-droxylation in humans j.drug metab dispos,2000,28(8):959-965.5 jokinen mj, ahonen j, neuvonen pj,et al. the effect of erythromycin, fluvoxamine, and their combination on the pharmacokinetics of ropivacainej. anesth analg, 2000,91(5):1207-1212.6 spieqel da, dex

21、ter f, warner ds, et al. central nervous sys-tem toxicity of local anesthetic mixtures in the rat j. anesth analg, 1992, 75(6):922-928.7 金小高,罗爱林.罗哌卡因、布比卡因和利多卡因的中枢神经系统毒性作用及其对脑c-fos蛋白表达的影响j.中华麻醉学杂志,2003,23(12):915-916.8 mazoit jx, orhant ee, boico o, et al. myocardial uptake of bupivacaine: i. pharmacokinetics and pharmacodynamics of lidocaine and bupivacaine in the isolated perfused rabbit heart j. anesth analg, 1993, 77(3):469-476.