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做好工作表态性发言.docx

1、做好工作表态性发言做好工作表态性发言做好工作表态性发言做好工作表态性发言认真履行工商职能促进民营经济发展为促进xx民营经济持续、快速、健康发展,加快推进我市“一主三化”战略的实施,我局将以“三个代表”重要思想为指导,认真贯彻落实国务院关于鼓励支持和引导个体私营等非公有制经济发展的若干意见和国家工商总局关于发挥工商行政管理职能作用,促进个体私营等非公有制经济发展的通知精神,把促进民营经济发展作为第一要务来抓。一、放宽准入条件,营造高效服务环境以“便民、高效”为宗旨,切实转变观念与作风,着力提升服务水平和服务质量。一是推行事前顾问服务。认真贯彻行政许可法的要求,在过去一站式办公,一条龙服务的基础上

2、,对企业改制、招商引资项目其他民营企业的登记实行同步介入,进一步放宽市场准入条件,使企业的市场准入变为“直通车”。对在x都投资兴办企业的业主,只要基本条件具备,其它手续一时难以提供的,可先登记,后补齐相关手续。对民营科技企业和从事农业种、养、加、储、运的企业以及下岗失业人员创办的个体私营企业,允许注册资本分期注入,在首次注入资本不低于总额百分三十的情况下,可先办理营业执照,其不足部分在一年内补齐。除特种行业和专营行业外,非公有制企业原则上按行业大类核定经营范围,可不规定具体的经营项目,经营方式由企业自主选择。同时,凡法律法规未规定禁入的行业和领域,都允许民营资本进入。二是推行事后规范服务。建立

3、重点企业联系制度,坚持一月上一次门,一月办一件事,为企业分忧解难。同时,根据企业自身发展的需要,通过照后回访、网上咨询、专题办公等形式,按照建立现代企业制度要求,完善企业法人治理结构,同时对企业经营行为进行规范,做到“四清”,即:企业名称、住所清;企业生产、经营及财务状况清;企业产权关系清;企业存在的问题清,以实现对企业全方位服务。三是认真落实各项政策,对下岗职工、农村流动个体工商户以及农村经济合作组织,实行零收费制度。同时在企业中推行联络员制度,定期对工商联络员进行工商法规知识的培训,收集企业对工商部门的意见或建议,在企业与工商部门之间建立沟通的纽带,形成部门与企业良好互动的关系。二、深化职

4、能创新,营造良好发展环境我局将充分发挥职能作用,大力实施精品名牌战略,积极培育企业商标品牌和广告形象,为全市民营经济发展营造良好环境。原创文章,尽在网。一是引导企业树立品牌意识。通过深入宣传商标法及知识产权保护方面的法律法规,引导企业树立品牌意识,及时邦扶符合条件的企业注册商标,并采取有力措施,保护企业知识产权,促进企业做大做强二是全面实施商标战略,推动xx民营品牌的发展。建立和完善商标品牌联系人、商标品牌信息通报、商标品牌推介等三项制度,开展品牌注册、驰名商标争创、商标使用管理、品牌宣传、专用权保护等工作。重点扶持有市场潜力的注册商标,争创全省著名商标,并力争在三年内实现全国驰名商标零的突破

5、。同时,按照加强农产品商标注册与地理标志保护推动宜都品牌发展的工作方案的要求,围绕xx蜜桔、清江鲟鱼、宜红功夫茶、天然富锌茶、农副产品加工系列等优势产业发展,将商标注册领域向农副土特产品和特色产业、服务产业延伸,着力培育农业产业化龙头企业,发展有特色、有市场前景的农副产品商标,促进品牌农业的发展。三是正确引导企业利用广告进行企业和产品形象宣传,积极向上争取政策,大力培育本土广告企业的发展,不断提高我市企业及产品的知名度和美誉度三、改革监管方式,营造和-谐经营环境按照“遵立法宗旨,创和-谐监管”的指导思想,牢固树立“和-谐管理,执法为民”的意识,建立工商部门与市场主体和消费者之间的和-谐关系,努

6、力为建设和-谐社会发挥积极作用。一是推行企业监督检查分类管理制度。按照企业守法经营情况,对连续三年以上守法经营的企业免于日常的监督检查;对守法经营情况一般的企业,除年检、新办企业回查、专项检查、涉案检查外,对同一企业的日常监督检查每年不超过一次;对有严重违法问题的企业,经领导批准,可以视具体情况,实施定期检查。二是推行行政提示“两书”制度。对无明显违法故意、没有造成社会危害的轻微违法违章行为,属于首次违犯的,不予行政处罚,下发预警通知书予以提示,增强企业自觉守法意识。推行工商行政管理建议书制度,对企业经营管理中存在的问题,以工商建议书的形式提出整改建议,其建议内容包括:企业投资导向、内部管理机

7、制、企业信用的提升、商标广告战略、客户权益保护、资本运作以及违章违法行为的纠正或控制等各个方面,同时将不定期编发投资注册指南,为各级领导和民营业主决策提供参考和建议,从而促进区域经济良性发展。三是规范执法行为,严格把握行政处罚自由裁量权的运用。坚持“三先三后”的执法理念和“三重三轻”的行政原则,即对涉及人民生命财产安全,涉及农业和农民消费者利益,涉及名优企业和名优商品保护的违法行为重点整治、从重处理,对企业改革改制中出现的、下岗失业人员再就业中发生的、外来客商的一般违法违章行为,从轻或免于处罚。四、加强信用建设,营造诚信的竞争环境我局将充分发挥职能优势,加快企业信用体系建设,整合资源,为民营企

8、业的发展服务。一是开展争先创优活动,引导经营者诚信守法经营。通过开展创建“文明市潮、“文明诚信街”、“文明经营区”和评比“守合同、重信用”企业、“文明诚信经营户”、“消费者满意单位”等活动,增强企业诚信经营意识,促进企业自律,不断提升我市企业的信用水平。二是进一步推进企业信用监管体系建设。建立和完善以经济户口为平台,以网络互联为保障,综合反映企业信用信息,横向互通、上下联动的企业信用信息管理体系,实现与相关部门信用信息资源共享,为全面打造信用宜都创造条件。三是充分发挥企业信用信息的作用,通过有关媒体推介我市民营企业,吸引外地客商来宜都投资。引导扶持民营企业加快制度创新、科技创新和管理创新,提高

9、竞争力;引导扶持民营企业参与国有集体企业改革改制,提高产业层次;引导扶持民营企多向投资,提高外向发展水平;引导扶持民营企业参与市场的培育,走工贸一体化的路子;引导扶持民营企业树立诚信为本,质量第一的理念,提高可持续发展水平。各位领导,我市民营经济发展方兴未艾,我们相信,在市委、政府的正确领导下,又一个大发展的春天定将到来!谢谢大家!附送:做好毛细管电泳的意义做好毛细管电泳的意义随着生物化学与分子生物学及生物医学研究的日益深入,研究人员对与生命现象有关的分子的分离分析技术提出了愈来愈高的要求。本文就近年来发展的毛细管电泳及其在生命科学中的应用作些介绍。1.毛细管电泳仪简介毛细管电泳仪商品虽然外型

10、各异,但不外乎由下列几个部分构成:1.毛细管;2.高压电源;3.电极及电极液;4.在线检测器;5.恒温装置;6.样品盘;7.数据收集和处理系统。毛细管是由熔融石英加工制得,为克服石英极脆易断的缺点,在其外壁涂抹了一层聚亚胺酷以增加毛细管的柔性。检测器位于距样品盘约毛细管总长的三分之二至五分之四处,对毛细管壁内部分进行光学聚焦。在线检测器有紫外、荧光和激光等多种检测方式,目前较为常见的是紫外检测。此外,将毛细管电泳仪和质谱仪联用也已见报道。毛细管中充满具有一定离子强度的缓冲液后,在其两端加上高电压,被分析物除受电场力的作用外,还受电渗流作用。毛细管内壁的石英分子在一般水性环境中因HZSIO3分子

11、的解离,其表面形成一层负电荷,吸引缓冲液中的正离子,这一层正离子在电场的作用下趋向阴极,从而带动毛细管内整个溶液向阴极移动。此电渗现象在毛细管电泳中起着举足轻重的作用。虽然被分离的混合物中各分子在特定的电泳缓冲液中带有不同的净电荷,但在电渗作用下均向阴极方向泳动。其最终的迁移力由电渗、缓冲液条件及分子本身的泳动力决定。其中泳动力和分子的荷质比有关。内壁石英分子除能造成电渗流外,还具有吸附溶质中带正电荷分子的能力,从而会影响分离效果。为避免分析物被管壁吸附,可选用缓冲液的pH大于样品混合物中蛋白质和多肤的等电点,此时被分析物与管壁带同种电荷;或者选用pH接近pHZ.o,此时毛细管内壁无解离的负电

12、荷,但此酸性环境易造成蛋白质变性失活,一般仅用于多肤分析。也可对毛细管内壁进行涂层,如中性共价涂层以消除电渗,或采用改变内壁电荷的极性的可逆涂层方法,适于等电点偏高的蛋白质的分离分析。与平板凝胶电泳手工上样方式不同,毛细管电泳采用两种自动进样方式:流体静力进样和电动进样。每次进样量为几纳升,一般仅可用于分析鉴定。如要收集分离产物并进行进一步研究,则需重复多次分析以富集分离到的产物。1992年Huang和Mathies等报道毛细管束电泳的实验结果,数十乃至上百根毛细管平行排列,分离得到的产品产量能提高二个数量级。2.毛细管电泳的几种分离模式毛细管电泳根据分离机理等不同,类似于液相色谱的归类,分成

13、几种分离模式,主要为以下几种:2.1.自由溶液毛细管电泳或称毛细管区带电泳毛细管中只充有电泳缓冲液,根据被分析物的荷质比差异进行分离。应用最广泛、已见报道的例子有多肤、蛋白质和核酸等生物大分子的分离以及无机离子、氨基酸、药类等小分子的分析。2.2.毛细管等电聚燕根据蛋白质和多肤的等电点进行分离。需选用内壁中性共价涂层的毛细管,阳极端至检测器有效分离部分充满两性电解质溶液,样品溶液夹在其中以避免直接接触阳极液。毛细管其余部分为阴极液。毛细管两端分别插入阳极和阴极液中,其中毛细管中的溶液和H3PO 溶液中均含一定浓度的可溶性甲基纤维素作为支持介质。两性电解质载体和样品在电场中聚焦至电流趋于零,通过

14、压力或在正负极加盐等方式,不同等电点的样品逐一经过检测窗口。此方法除了能测定蛋白质和多肤的等电点外,还可鉴定蛋白质的纯度及分析不同变异体。毛细管等电聚焦具有比凝胶等电聚焦更高的分辨力,即使选用广范围的两性电解质,也可分辨相差一个净电荷的天然蛋白质和其突变体。由于是直接在线检测,可分析多肤的等电点,而在传统凝胶等电聚焦中的固定、染色、脱色等步骤中小分子多肤易丢失。整个分析过程可自动化,通常仅需45分钟左右。2.3毛细管凝胶电泳根据被分析物的荷质比分离,当凝胶中含有SDS等去垢剂时,则根据它们的分子大小进行分离。主要用于蛋白质、部分多肤和DNA分离。毛细管内的分离介质可以如平板电泳一样呈凝胶状,也

15、可以是甲基纤维素溶液,后者便于清洗,可实现毛细管一管多用。溶液中的甲基纤维素分子在电子显微镜中呈现缠绕状,其作用机理类似于凝胶的筛网作用。2.4.微团电动毛细管色谱在电泳缓冲液中加人一定浓度的去垢剂,如SDS及其类似物,这些分子一端为亲水基团,其余部分为疏水结构,在溶液中聚集成一个个微团,称为假固相,被分析的样品根据其在假固相和溶液相中的分配进行分离。此方式主要用于小分子和多肤的分离。3.毛细管电泳在生命科学中的应用3.1.在多肤研究中的应用毛细管电泳可以分辨多肤的细微结构差异,如C一端的酞胺化与去酞胺化,单个氨基酸残基的替换,氨基酸组成相同而序列不同的多肤也能区别开,甚至表面电荷不同而一级结

16、构相同的多肤也有可能分离开。另外用FSCE有时能帮助确定多肤内是否存在二硫键。3.2.在蛋白质研究中的应用毛细管电泳采用温和非变性条件,有利于分析蛋白质的细微结构差异并鉴定蛋白质的纯度。例如核糖核酸酶A、Bl和BZ一级结构相同,差别在于第34位天冬酞胺残基上糖基化程度不同。选择一定的电泳条件可将这三种异构体分开。已知不少遗传工程重组蛋白需含有与其天然蛋白一样的特定多糖,毛细管电泳可监控它们所结合多糖的均一性。毛细管电泳最近被用来研究细胞色素C的结构与功能。Albin等报道了用毛细管电泳研究其表面修饰的位点。他们监测了修饰反应过程,比较了修饰前后的胰蛋白酶酶解肤谱,并收集了含有被修饰残基的肤段,

17、测定其序列,确定了修饰试剂钉复合物所结合的残基。由于毛细管电泳分析快速,可用来监测蛋白质化学反应的动力学过程。如分析RNase蛋白酶解产物中含糖肤段去糖昔化的动力学过程。我们实验室建立了用毛细管电泳测定蛋白激酶A活性的方法,其灵敏度、精确性和线性范围均不亚于经典的同位素法。除了自由溶液毛细管电泳外,毛细管等电聚焦和毛细管凝胶电泳在蛋白质研究方的应用例子也很多。Chen等报道了应用毛细管等电聚焦测定RNase几种变异体的等电点,它们都接近pH梯度的极端值,如RNaseA,Pl9.5;RNaseBa,pl9.0;RNaseTl,pl3.0,以往用凝胶IEF较难测准。图1为我们实验室应用CIEF测定

18、重组人表皮生长因子的等电点,经分析其pl为5.0。应用毛细管SDS凝胶电泳可以比较方便地分析糖蛋白的分子量。由于多糖基团不结合SDS,糖蛋白的荷质比相对于同样大小的蛋白质低,用经典的SDS一聚丙烯酞胺凝胶电泳估计的分子量偏大,通常必须在不同浓度的凝胶上进行分析,得到糖蛋白迁移率对数值相对于凝胶浓度的线性关系图,该直线的斜率称为此蛋白的排组系数Kr。Kr和蛋白质的半径的平方成正比,而蛋白质半径与其分子量的对数成线性,因此得到标准蛋白分子量的fog值相对于Kr平方根的线性关系图,测得糖蛋白的Kr值即可推测其分子量。运用传统的平板凝胶电泳需多次灌胶多次电泳,而毛细管凝胶电泳应用溶液状的分离介质只需对

19、浓的含甲基纤维素的分离溶液进行一系列的稀释,按照设定的程序自动分析即可得到Ferguson图。3.3在核酸研究中的应用核酸分离主要是将不同大小片段分开,由于含有不同个数碱基对的DNA分子其荷质比相同,因而用自由溶液毛细管电泳不能将它们分离。应用毛细管凝胶电泳模式可解决这一问题。目前作为核酸分离介质的分子筛填充料有两种:一种如同平板凝胶,呈共价交联固定状;另一种为可流动的、无交联的多聚物。应用第一种填料,可进行快速、高分辨力、有效、灵敏的DNA序列测定。Smith等在1990年报道了用毛细管电泳进行快速DNA测序的方法。它们在目前商品化的DNA序列仪的基础上进行改建,用灌注凝胶的毛细管代替平板凝

20、胶,改进了光学部分,可同时检测四种波长的荧光,光束聚焦在毛细管5即m内径上。四种反应产物混合在一起上样至聚丙烯酸胺变性凝胶;通过测定不同荧光基团标记的DNA片段,通过检测窗口的次序决定DNA序列。平板凝胶电泳每天可分析lokb,毛细管凝胶电泳可达600kb,分析速度快了数十倍。用甲基纤维素衍生物作为分离介质适用于分离单碱基差异的DNA片段,因而可分析引物的纯度,以及鉴定分离基因的探针和用于克隆的连接片段。应用嗅乙锭染料结合紫外检测或荧光染料花青素结合激光诱导的荧光检测,灵敏度可提高上千倍,因而可以诊断遗传疾病,分析特殊染色体的基因谱图乃至法医学鉴定。但这一方法用来分离含几千以上碱基的DNA片段

21、尚有困难。3.4.用于其它分子分析应用毛细管凝胶电泳结合激光诱导荧光检测分离经荧光标记的多聚糖混合物,具有较高的分辨力,可分离多聚半乳糖醛酸部分水解产生的含不同个数单糖的一系列聚合物。应用MECC可进行兴奋剂分析,在一次电泳中能将以下几种兴奋剂分离:苯丙醇胺、麻黄碱、安非他命、Mephentermine、可卡因、脱氧麻黄碱。1994年美国世界杯足球赛中著名球星马拉多纳被查出服用的兴奋剂即为麻黄碱及其类似物。感冒药康泰克中则含有苯丙醇胺。4.前景毛细管电泳今后发展的方向仍是提高分辨力和速度,以满足生命科学研究日新月异发展的要求,另外将它与质谱仪更好地结合,可对生物分子特性作出更快、更准的分析,并能拓宽毛细管电泳的应用领域。

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