植物组织培养考试复习题.docx

1、植物组织培养考试复习题植物组织培养绪论P1第一章 植物组织培养的基本原理P3第二章 植物组织培养的基本原理P6第三章 植物器官和组织培养P11第四章 胚胎培养及离体授粉P16第五章 花药和花粉培养P20第六章 植物细胞培养P24第八章 原生质体培养P27第九章 植物离体繁殖P30第十章 无病毒苗木培育P33植物组织培养基本操作P35绪论植物组织培养的概念植物组织培养是在无菌和人工控制的环境条件下，利用适当的培养基，对离体的植物器官、组织、细胞及原生质体进行培养，使其再生成细胞或完整植株的技术。由于培养的植物材料已脱离母体，又称为植物离体培养（Plant culture in vitro)。 广

2、义：对植物的器官、组织、细胞及原生质体进行离体培养技术植物组织培养 狭义：对植物的组织（分生组织、表皮组织、薄壁组织等）及培养产生的愈伤组织进行离体培养。1. 无菌：使培养器皿、器械、培养基和培养材料等处于无真菌、细菌、病毒等微生物的状态，以保证培养材料在培养器皿中正常生长和发育。2. 人工控制的环境条件：对光照、温度、湿度、气体等条件进行人工控制，以满足植物培养材料在离体条件下的正常生长和发育。3. 外植体：由活体（in vivo)植物体上提取下来的，接种在培养基上的无菌细胞、组织、器官等。（植物组织培养中，使用的各种器官、组织和细胞统称为外植体。）4. 愈伤组织：外植体因受伤或在离体培养时

3、，其未分化的细胞和已分化的细胞进行活跃的分裂增殖而形成的一种无特定结构和功能的组织。（在人工培养基上由外植体上形成的一团无序生长状态的薄壁细胞。）植物组织培养的特点植物组织培养的主要特点是采用微生物学的实验手段来操作植物离体的器官、组织和细胞。具体特点表现在： 1）组织培养的整个过程都是在无菌条件下进行的，外植体、培养基、接种环境都须经过无菌处理。 2）组织培养在多数情况下是利用成分完全确定的人工培养基进行的，除少数特殊情况（进行营养缺陷型突变细胞的筛选）外，培养基中包含了植物生长所需的水分和一切大量元素、微量元素、有机物和植物激素，培养基的PH和渗透压也是人为设定的。因此，在组织培养中的植物

4、材料不需依靠自身的光合作用制造养分，而是处于完全的异养状态。3）组织培养的起始材料可以是植物的器官、组织，也可以是单个的细胞（如小孢子）和三倍体细胞（如胚乳）水平上，即使是去掉了细胞壁的细胞（原生质体）在组织培养条件下也能再生完整植株。4）组织培养物通过连续继代培养可以不断增殖，形成克隆（clone,也称无性繁殖系），或通过改变培养基成分，特别是其中的植物激素的种类和配比，而达到不同的实验目的，如茎芽增殖或生根。5）组织培养是在封闭的容器中进行的，容器内气体和环境条件可通过瓶塞或其他封口材料进行交换。容器内的相对湿度在通常情况下几乎是100%。因此，组培苗叶片表面一般都无角质层或蜡质层，且气孔

5、保卫细胞功能缺乏，气孔始终都是张开的。 6）组织培养的环境温度、光照强度和时间等都是人为设定的，找出这些物理因素的最适参数对组培成功也很重要。植物组织培养的类型广义的组织培养依外植体不同，可分为：1、器官培养（organ culture）：对植物体各部分器官及器官原基进行离体培养的方法。 常用的植物器官有：根、茎、叶、花、果实、种子2、组织培养（tissue culture）：对植物体的各部分组织进行离体培养的方法。常用的组织有：分生组织、形成层组织、薄壁组织、韧皮部组织等。茎尖分生组织培养 愈伤组织培养3、细胞培养(cell culture)对植物单个细胞或较小细胞团进行离体培养的方法。 常

6、用的细胞有：性细胞、叶肉细胞、根尖细胞、韧皮部细胞等。4、胚胎培养：对植物成熟和未成熟胚以及具胚器官进行离体培养的方法。 常用的材料有：幼胚、成熟胚、胚乳、胚珠、子房等。5、原生质体培养(protoplast culture)：植物组织培养的研究任务植物组织培养的形成与发展植物组织培养的研究历史可以追溯到19世纪中期，其开拓和发展的理论基础是植物细胞的全能性，即植物的每个核细胞具有母体全部基因，在离体培养下，都有分化、发育成完整植株的潜在能力。该领域的发展历史可分为开创、奠基和建立三个阶段。植物组织培养的形成于发展开创1、 1838-1839年，德国科学家Schleide 和Schwann发表

7、了细胞学说，奠定了组织培养的理论基础。 该学说的基本内容是：一切生物都是由细胞构成的，细胞是生物体的基本单位，细胞只能是由细胞分裂而来。2、1902年，德国植物学家Haberlandt 根据细胞学说，提出单个细胞的植物细胞全能性（totipotency）理论。 他提出：高等植物的器官和组织，可以不断分割，直至单个细胞，这种单个细胞是具有潜在全能性的功能单位，即植物细胞具有全能性。他在论文中写道：虽然经常观察到细胞的明显生长，但从未观察到细胞分裂。这位先驱者失败的原因是：实验材料高度分化；培养基过于简单。3、1904年，Hanning 最先成功地培养了萝卜和辣根菜的胚。发现离体胚可以充分发育成熟

8、，并提早萌发形成小苗。 1922年，美国学者Knudson 采用胚培养法获得大量兰花幼苗。4、1922年，德国学者Kotte和美国学者Robbins进行了豌豆、玉米、棉花的茎尖和根尖离体培养，发现离体培养只能进行有限的生长，未发现培养细胞有形态发生能力。 5、1925年，Laibach培养亚麻种间杂交幼胚获得成功，证明了胚培养在植物远缘杂交中的可能性。植物组织培养的形成与发展奠基20世纪30-50年代，影响立体培养材料生长和发育的一些重要物质，如天然提取物、B族维生素、生长素(auxin)、细胞分裂素(cytokinin)的发现，促使植物组织培养的研究迅速发展，特别是分裂素与生长素的比例控制器

9、官分化（ differentiation)的激素模式的建立，使植物组织培养技术与理论体系得以形成。Gautheret (1937,1938)在他培养的柳树形成层的培养基中加入这些物质，使生长大大加快，随后，他用胡萝卜的小外植体培养也获得成功。1926年，植物生理学家Went首先发现了可以促进子叶鞘生长的物质，1930年证实了这种物质是生长素吲哚乙酸。1937年，White又发现了B族维生素和IAA对植物根离体生长的作用，并用3种B族维生素VB6、VB1及VB5，取代椰汁获得成功，建立了第一个由已知化合物组成的培养基。1933年，中国学者李继侗和沈同首次报道了利用天然提取物进行组织培养的研究。他

10、们利用加有银杏胚乳提取物的培养基，成功培养了银杏的胚。1934年，White 用番茄根尖经继代培养400余天(有的书上说，28年培养了1600代)，建立起第一个活跃生长的无性繁殖系，从而使非胚器官的培养首先获得成功。1941年，Van Overbeek等将椰乳加入到培养基中，使曼佗罗的心形期胚离体培养成熟，并推测椰乳中含有促进细胞分裂和生长的生理活性物质。法国的Nobecoort(1937,1938)培养胡萝卜根和马铃薯的块茎薄壁组织，细胞增殖获得成功。不久，White(1939)报到了烟草中间杂种(NicotianaglaucaN.longsdorffi)幼茎切段原形成层组织的培养，继代培养

11、也获得成功。在White和Gautheret工作中所确立的植物组织培养的基本方法，成为以后进行各种植物组织培养的基础技术，奠定了植物组织培养的基础。1943年White发表了植物组织培养手册(A Hand Book of Plant Tissue Culture)的专著，使植物组织培养开始形成一门新兴的学科。四十年代，Skoog和崔徵(1948)在烟草茎切段和髓培养以及器官形成的研究中，发现腺嘌呤或腺苷可以解除培养基中生长素对芽形成的抑制作用，而诱导形成芽，从而确定了腺嘌呤 /生长素的比例是控制芽和根形成的主要条件之一。这一比例高时产生芽，比例低时产生根，相等时则不分化。1956年Miller

12、等发现了激动素，知道激动素可以代替腺嘌呤促进成芽，并且效果约可增加3万倍。确立了控制器官分化的激素模式为激动素/生长素的比例关系。这种器官发生的激素调空模式的建立为植物组织培养中完整植株的再生奠定了理论基础。1953年，Muir利用往复式摇床的振荡，在液体培养基中进行了万寿菊和烟草愈伤组织的培养，获得了单细胞或密集细胞的悬浮液，并可继代增殖。这既是培养方法上的突破，也是Haberlandt培养单细胞设想的实现。1958年，英国学者Steward和Reinert几乎同时在胡萝卜根组织的韧皮部单细胞悬浮培养中发现，体细胞在形态上可转变为与合子胚相似的结构，其发育过程也与合子胚类似。由于它是从体细胞

13、分化而来，因而称为体细胞胚或胚状体。这一实验证实了Haberlandt的细胞全能性理论。植物组织培养的形成于发展建立1958年，Wickson和Thimann发现，应用外源细胞分裂素可以打破顶端优势，促使休眠的侧芽启动生长，从而形成微型的多枝多芽小灌木丛状结构。1960年，Morel提出了利用茎尖离体快速无性繁殖兰花属的方法，该方法繁殖系数极高，并能脱毒，国际上相继形成了“兰花工业”，并实现了试管苗产业化。1962年，Murashinge 和Skoog 在烟草培养中筛选出至今仍被广泛使用的MS培养基。 1960年，英国学者Cocking用真菌纤维素酶酶解分离番茄根和烟草叶片，获得了原生质体，开

14、创了原生质体的培养。1971年，日本学者Nagata和Takebe首次将烟草叶肉原生质体培养的再生植株。1985年，Fujimura获得了第一例禾谷类作物水稻原生质体培养的再生植株。1986年，Spangenberg获得了甘蓝型油菜单个原生质体培养的再生植株。1972年，Carlson 通过两个种的烟草原生质体融合培养，获得了第一个体细胞杂交的杂种植株。1974年，Kao利用聚乙二醇进行了大豆和烟草科间原生质体的融合。1953年，Tulecke首先培养银杏成熟花粉获得了愈伤组织。1964-1966年，印度科学家Guha 和Maheswari 在曼陀罗花药培养中首次由花粉诱导得到了单倍体植株。1

15、969年，Kaul发现三角叶薯蓣悬浮培养物可以生产薯蓣皂苷配基，其量为干重的1.5%。 目前，利用组织培养途径生产的次生产物有皂苷类、生物碱、甾醇类、醌类、氨基酸和蛋白质等。植物组织培养的形成与发展应用及展望1、植物离体快繁 运用组织培养的途径，一个单株一年可以繁殖几万到几百万个植株。例如一株葡萄一年繁殖到3万多株，一株兰花一年繁殖到400万株。2、无病毒苗木培育 针对病毒对农作物造成的严重危害，通过组织培养可以有效地培育出大量的无病毒种苗。已经取得成功的有马铃薯、草莓、香蕉、葡萄等等。3、次生代谢物的产生 有些极其昂贵的生物制品，如抗癌首选药物-紫杉醇等，可以用大规模培养植物细胞来直接生产。

16、 4、培育新品种或创制新品种 1）培育远缘品种：利用组织培养可以使难度很大的远缘杂交取得成功，从而育成一些罕见的新物种。比如辽宁果树研究所利用这种方法获得苹果与梨的杂交种。 2）离体选择突变体：采用组织培养可以直接诱变和筛选出具抗病、抗盐、高赖氨酸、高蛋白等优良性状的品种。中国林科院用逐步加大培养基中盐的浓度，直接获得耐盐的杨树株系。 3）单倍体育种5、植物种质资源的离体保存6、人工种子 意义： 1）结构完整、体积小、便于贮藏与运输，可直接播种和机械化操作。2）不受季节和环境限制，利于工厂化生产。3）利于繁殖周期长、自交不亲和、珍贵稀有的植物，也可大量繁殖无病毒材料4）可在人工种子中加入抗生素

17、、菌肥、农药等成分，提高种子品质 5）体细胞胚由无性繁殖体系产生，可固定杂种优势。7、 基因工程的应用 （1）培育的优质、高产的转基因大豆新品种，蛋白质含量比标准品种提高45%48%，产量提高10%20%。（2）将鱼的抗冻基因导入番茄，获得了耐寒、高产的转基因番茄。转基因抗盐马铃薯也获得成功.第一章 植物组织培养的基本原理第一节：植物组织培养实验室一、实验室要求 环境要求：理想的植物组织培养实验室应该建立在安静、清洁、远离污染源的地方，最好在常年主风向的上风方向，尽量减少污染。规模化生产的实验室最好建在交通方便的地方，便于产品的运送。 需考虑两个方面：一、所从事实验的性质 二、实验室规模实验室

18、设置的基本原则：科学、高效、经济和实用。二、实验室组成（一）基本实验室 基本实验室包括准备室、无菌操作室、培养室、缓冲间，是植物组织培养实验所必须具备的基本条件。如进行工厂化生产，年产4万-20万，需3-4间实验用房，总面积60平方米。 实验室必须满足3个基本需要：实验准备（培养基制备、器皿洗涤、培养基和培养器皿灭菌）、无菌操作和控制培养。1、准备室 功能：进行一切与实验有关的准备工作：器皿洗涤、培养基配制与分装、培养基和培养器皿的灭菌、培养材料的预处理等。 要求：20平方米左右。要求宽敞明亮、以便于放置多个实验台和相关设备，方便多人同时工作；同时要求通风条件好，便于气体交换；实验室地面应便于

19、清洁，并应进行防滑处理。 设备：准备室应具备工作台、柜橱、水池、仪器、药品等。 分类：分体式-研究性质实验室，可将准备室分解为药品贮藏室、培养基配制与洗涤室和灭菌室等，功能明确，便于管理，不适于大规模生产。通间式-规模化实验室，设计成大的通间，试验操作的各个环节在同一房间内按程序完成。便于程序化操作与管理，减少各环节间的衔接时间，提高工作效率。还便于培养基配制、分装和灭菌的自动化操作程序设计，减少规模化生产的人工劳动，更便于无菌条件的控制和标准化操作体系的建立。2、无菌操作室 功能：也叫接种室，进行材料的离体无菌操作，是植物离体培养研究或生产中最关键的一步。 要求：房间一般不宜过大，10-20

20、平方米即可。要求封闭性好，干燥清洁，能较长时间保持无菌，因此不宜设在容易受潮的地方；为便于消毒处理，地面及内墙壁都应采用防水和耐腐蚀材料；地面要求平坦无缝，便于清洁；为了保持清洁，无菌室应防止空气对流。 一般新建实验室的无菌室在使用之前应进行灭菌处理，处理方法是甲醛和高锰酸钾熏蒸，并需定期灭菌处理，还可用紫外线照射1-2h/周，或每次使用前照射10-30min。 设备：无菌操作室安装有紫外灯和空调，工作台和搁架，还有超净工作台和整套灭菌接种仪器、药品等。3、培养室 功能：对接种到培养瓶等器皿中的植物离体材料进行控制条件下的培养，实验材料进行培养的场所。 要求：10-20平方米左右。要求能够控制

21、光照和温度，并保持相对的无菌环境。因此，培养室应保持清洁和适度干燥；为满足植物培养材料生长对气体的需要，还应安装排风窗和换气扇等换气装置；为节省能源和空间，应配置适宜的培养架，并应安装日光灯照明。 研究用实验室，通常可根据光照时间设置成长日照、中日照、短日照培养室，也可以根据温度设置成高温和低温培养室，每一个培养室的空间不宜过大，便于对条件的均匀控制。进行精细培养类型如细胞培养和原生质体培养，可采用光照培养箱或人工气候箱代替培养室。 设备：培养架、光照培养箱或人工气候箱、边台用于拍摄培养物生长状况，除湿机、显微镜、温湿度计、空调等。 4、缓冲间 功能：进入无菌室前的缓冲场地，减少人体从外界带入

22、的尘埃等污染物。人员在此换上工作服、拖鞋、口罩，才能进入无菌室和培养室。 要求：3-5平方米，在准备室外或无菌操作室外，应保持清洁无菌；备有鞋架和衣帽挂钩。 设备：1-2盏紫外灯对衣物进行灭菌、灭菌工作服、拖鞋、口罩。（二）辅助实验室 根据研究或生产的需要而配套设置的专门实验室，主要用于细胞学观察和生理生化分析等。1、细胞学实验室 功能：对培养材料进行细胞学鉴定和研究， 分为制片室和显微观察室。 制片是获取显微观察数据的基础，制片室配备有切片机、磨刀机、温箱及样品处理和切片染色设备，通风橱和废液处理设施。 显微观察室主要有显微镜和图像拍摄、处理设备。 要求：明亮、清洁、干燥、防止潮湿和灰尘污染

23、。 2、生化分析实验室 培养细胞产物为主要目的实验室，应建立相应的分析化验实验室，随时对培养物成分进行取样检查。大型次生代谢物生产，还需有效分离实验室。 第二节 仪器设备和器皿用具 一、基本设备配置（一）常规设备1、天平 植物组织培养实验室需要不同精度的天平。 感量0.001g的天平（分析天平）和感量0.0001g的天平（电子天平）用于称量微量元素和一些较高精确度的实验用品。 感量0.01g和0.1g的天平，用于大量元素母液配制和一些用量较大的药品的称量。 2、冰箱 各种维生素和激素类药品以及培养基母液均需低温报存，某些试验还需植物材料进行低温处理，普通冰箱即可。3、酸度计 用于测定培养基及其

24、它溶液的pH，一般要求可测定pH范围1-14之间，精度0.01即可。4、离心机 用于细胞、原生质体等活细胞分离，亦用于培养细胞的细胞器、核酸以及蛋白质的分离提取。根据分离物质不同配置不同类型的离心机。 细胞、原生质体等活细胞的分离用低速离心机；核酸、蛋白质分离用高速冷冻离心机；规模化生产次生产物，还需选择大型离心分离系统。5、加热器 用于培养基的配制。研究性实验室一般选用带磁力搅拌功能的加热器，规模化大型实验室用大功率加热和电动搅拌系统。6、其它 纯水器、分装设备 （二）灭菌设备 维持相对的无菌环境是植物组织培养实验室的基本要求。1、高压灭菌锅 用于培养基、玻璃器皿以及其它可高温灭菌用品的灭菌

25、，根据规模大小有手提式、立式、卧式等不同规格。2、干热消毒柜 用于金属工具如镊子、剪刀、解剖刀，以及玻璃器皿的灭菌。一般选用200左右的普通或远红外消毒柜。3、过滤灭菌器 用于一些酶制剂、激素以及某些维生素等不能高压灭菌试剂的灭菌，主要有真空抽滤式和注射器式。4、紫外灯 方便经济的控制无菌环境的装置，缓冲间、接种室和培养室必备。 （三）无菌操作设备1、接种箱 使用较早的最简单的无菌装置，主体为玻璃箱罩、入口有袖罩，内装紫外灯和日光灯，使用时对无菌室要求较高。2、净化工作台 其操作台面是半开放区，具方便、操作舒适优点，通过过滤的空气连续不断吹出，大于0.03um直径的微生物很难在工作台的操作空间

26、停留，保持了较好的无菌环境。由于过滤器吸附微生物，使用一段时间后过滤网易堵塞，因此应定期更换。（四）培养设备 指根据需要所选用的不同规格和控制精度的用于植物细胞、组织和器官培养的设施和设备。1、培养架 目前植物组织培养实验室植株繁殖培养的通用设施。成本低、设计灵活、充分利用培养空间。一般有4-5层，层间间隔40-50cm，光照强度可根据培养植物特性来确定，一般每架上配备2-4盏日光灯。 2、培养箱 细胞培养、原生质体培养等要求精确培养的实验，可用光照培养箱、CO2培养箱、湿度控制培养箱等培养。3、摇床：进行液体培养时，为改善通气状况，可用振荡培养箱或摇床。4、生物反应器：进行植物细胞生产次生产

27、物的实验室，还需生物反应器。 （五）其他设备 时间程序控制器、温度控制系统或空调、实体显微镜、倒置式生物显微镜及配套的摄影、录像和图像处理设备、电泳仪、萃取和层析设备、紫外分光光度计、高效液相色谱仪、气相色谱仪、酶联免疫测定系统。二、培养容器与用具（一）培养容器：包括各种规格的培养皿、三角瓶、试管、培养瓶。一般分为： 玻璃容器一般用无色并不产生颜色折射的硼硅酸盐玻璃材质。塑料容器材质轻、不易破碎、制作方便，广泛使用。一般为聚丙烯、聚碳酸酯材料的培养容器（二）金属用具1、镊子：植物组织解剖用小的尖头镊子，分株转移繁殖转接用枪型镊子，16-22cm长。2、剪刀：不锈钢医用弯头剪，做取材和切段转移繁

28、殖，14-22cm长。 3、解剖刀：进行组织切段，多用短柄可换刀片的医用不锈钢解剖刀。4、其他用具：接种铲、接种针在花药培养、花粉培养中有用。 三）塑料用具：各种封口膜、盖、塑料盘及其它实验用具。 第三节：基本操作一、洗涤（一）重铬酸钾洗涤法饱和重铬酸钾洗液的配制方法是：将43g重铬酸钾溶与1000ml蒸馏水（20可以达到饱和状态），制成重铬酸钾饱和水溶液。然后缓慢加入浓硫酸，最后使重铬酸钾饱和水溶液以浓硫酸比例达到1：1。在配制过程中，只能把浓硫酸缓慢加入进去，决不可把重铬酸钾水溶液加入浓硫酸中，因会产生大量热量而来不及扩散，从而引起浓硫酸溅出。洗涤方法：一般用具：用水洗净玻璃器皿，晾干后放

29、入重铬酸钾洗涤液中，浸泡1夜，第二天取出，用自来水冲洗，然后用蒸馏水洗两次。干燥后备用。小的玻璃制品法：吸管：先用自来水冲洗，放在特制的防腐不锈钢网筒内，用重铬酸钾浸泡一夜，再将网筒放入虹吸式自动冲洗装置中，用自来水冲洗数十次，最后用蒸馏水冲洗，干燥后备用。（二）洗涤剂洗净法重铬酸钾洗液的最大缺点是铬离子会造成环境污染，因此，应尽量避免使用。普通无磷中性洗涤剂，是理想的选择。（三）超声波洗净法这是一种物理的洗净法，对环境无任何污染，而且对比较顽固的污垢也十分有效，但超声波发生器容量有限，因此，常用来清洗较小的玻璃仪器和器械。方法：将玻璃制品放入超声波洗净器中，注入自来水，设定时间，然后进行处理

30、，拿出用自来水冲净，蒸馏水冲洗。（四）玻璃器皿的清洗新购置的玻璃器皿：带有游离的碱性物质，先用1%的稀盐酸浸泡1夜，再用肥皂水洗净，清水冲洗，蒸馏水冲淋，烘干。已用过的培养器皿：去掉培养基，洗涤剂溶液浸泡，刷子刷洗，自来水冲洗，蒸馏水冲洗。较脏的玻璃器皿：洗衣粉或洗洁精刷洗，冲净，浸入洗涤液中，按 上面方法洗涤，浸泡时间根据脏的程度定。被污染的玻璃器皿：121高压蒸汽灭菌后，用洗涤剂刷掉污染物，冲洗，重铬酸钾洗涤液浸泡，2h后取出，自来水冲洗，蒸馏水冲淋。用过的吸管或滴管：在洗涤液中浸泡2h以上，取出冲洗干净。洗净后的玻璃器皿应透明发亮，内外壁水膜均匀，不挂水珠。第二章 植物组织培养的基本原理

31、植物细胞全能性理论是植物组织培养的核心理论。离体细胞具有生命的特征属性，在全能性的基础上，提供合适的营养和环境条件，离体细胞经历脱分化和再分化过程第一节：植物细胞全能性和细胞分化植物细胞的全能性（totipotent)：植物细胞具有该植物体全部遗传的可能性，在一定条件下具有发育成完整植物体的潜在能力。原理：生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质，都有发育成为完整个体所必需的全部基因，从理论上讲，生物体的每一个活细胞都应该具有全能性。差异：（1） 受精卵的全能性最高 （2） 受精卵分化后的细胞中，体细胞的全能性比生殖细胞的低。潜在全能性的原因：基因表达的选择性 科学研究表明，处于离体状态的植物活细胞，在一定的营养物质、激素和其他外界条件的作用下，就可能表现出全能性，发育成完整的植株。人工条件下实现的这一过程，就是植物组织培养。 分化：植物体各个部分出现异质性的现象，可以在细胞水平、组织水平或器官水平上表现出来。细胞分化：导致细胞形成不同结构，引起功能改变或潜在的发育方式改变的过程。细胞分化是组织分化和器官分化的基础，是离体培养再分化和植株再生得以实现的基础。第二节：离体条件下植物器官的发生脱分化