1、家兔动脉血压的神经体液调节实验报告之欧阳家百创编目的与要求欧阳家百(2021.03.07)1 学习直接测定家兔动脉血压的急性实验的办法2观察神经,体液因素对心血管活动的影响基来源根基理在正常人体内,任何高等植物的动脉血压时相对稳定的.这种相对稳定是通过神经和体液调节来实现的,其中以静动脉窦主动脉弓压力感受性反射最为重要.此反射即可使升高的血压下降,又可使降低血压升高,故有血压缓冲反射之称.家兔的主动脉神经在解剖上独成一支,易于别离与观察起作用本实验是应用液导系统直接测定动脉血压,即由动脉插管与压力传感器连通,其内布满抗凝液体,构成液导系统,将动脉插管拔出动脉,动脉内的压力及其变更,可通过封闭的
2、液导系统传导压力感受器,由计算机收集系统记录下来植物与器材家兔 ,手术台, 经常使用手术器械, 止血钳,眼科剪,支架,双凹管, 气管插管,动脉插管,三道管, 动脉夹,计算机收集系统 ,压力传感器,呵护电极,照明灯,纱布,棉球,丝线,注射器(1ml,5ml,20ml),生理盐水,4%柠檬酸钠,20%25%氨基甲酸已酯,肝素(200U/ml),肾上腺素(1:5000),已酰胆碱(1:10000)【办法与步调】1、实验仪器的准备掀开计算机收集系统,接通压力传感器。从显示器的“实验项目”中找出“循环实验”的“家兔血压的调节”条,使显示器显示压力读数。2、连通液导系统并制压将压力传感器的下方支管,通过输
3、液管连接三通管,再连接动脉插管。上侧管供制压时排除管内空气使用。先用装有20ml 4%柠檬酸钠的注射器,通过三通管向连接动脉插管的输液管内推注,使之布满液体(不要使动脉插管高过压力传感器的上方支管)后,再用止血钳夹住动脉插管真个输液管。然后继续向三通管内推注,直至布满压力传感器的上方支管,并用塞子塞住(注意:液导系统内不成有气泡)。继续向三通管内推注,同时观察显示器上压力变更。当加压到120mmHg时既可关闭三通管。观察压力是否变更,如果压力下降,则需要检查液导系统的漏液原因,偏重新制压。调节血压显示器的灵敏度,使30130mmHg的变更都能在显示器上明显的反应出来。将动脉插管真个导管内布满肝
4、素溶液。3、植物的准备(1)依照实验49办法,麻醉家兔并进行颈部手术,拔出气管插管、别离主动脉神经。同时别离迷走神经并穿线备用。再将止血钳从颈总动脉下方穿过,轻轻张开止血钳,别离出23cm长的颈总动脉。别离出的颈总动脉外壁应该十分光洁,外面并没有结缔组织及脂肪等物。在动脉上穿两条备用棉线,辨别打上活结。将两线辨别拉至别离出的动脉两端备用。同样办法别离另一侧血管与神经(一侧动脉用于插管侧压,另侧动脉实验用)。由于家兔的品种不合,个体之间也有差别,常发明3条神经的解剖位置有些变异。主动脉神经的最后确认,蓄意对血压的影响为准。(2)动脉插管首先用5ml注射器从耳缘静脉注入肝素(200U?kg体重)以
5、防凝血。然后在一侧动脉行动脉插管术以记录血压。其办法如下:将动脉头真个备用线尽可能靠头端结扎(务必扎紧,以防渗血),然后在另一备用线的向心侧(尽可能近心端),用动脉夹夹闭。轻轻提起动脉头真个结扎线,用锐利的眼科剪在靠近扎线的稍后方,沿向心标的目的斜向剪开动脉上壁(注意:不成只剪开血管外膜,也切勿剪断整个动脉,剪口年夜小约为管径的一半)。一手持弯头眼科镊,将其一个弯头从剪口处插进动脉少许,轻轻挑起剪开的动脉上壁,另一手将准备好的动脉插管由开口处拔出动脉管内。如果拔出较浅,可用一手轻轻捏住进入插管的动脉管壁,另一手拿住动脉插管,顺势轻轻推进至68mm左右(如果手感滞涩,说明插管并未进入动脉,必须退
6、出插管,重新剪口再插),用备用线将动脉连同进入的插管扎紧(插管不成因扎线松动而滑出,亦不成漏液),并将余线系在插管的固定侧支上,以免滑脱。注意:插管应与动脉血管的标的目的一致,以防插管尖端扎破动脉管壁。轻轻取下向心端动脉夹,可见动脉血与插管内液体混合。再取下通向压力传感器的止血钳,此时显示器上呈现血压的摆荡曲线。4、实验观察(1)观察正常血压曲线调节扫描速度与增益,可以明显地观察到心室射血与主动脉回缩形成的压力变更与收缩压、舒张压的读数。有时可以观察到血压曲线随呼吸变更,心搏为一级波,呼吸波为二级波。然后将扫描速度调慢,观察正常血压曲线。(2)轻轻提起对侧完好颈总动脉上的备用线,用动脉夹夹闭3
7、0s(于夹闭前记录动脉通畅时的血压曲线),观察并记录血压变更。呈现变更后即取下动脉夹,记录血压的恢复过程。(3)记录对比血压曲线后,用手指按压颈动脉窦(下颌下方内侧),观察并记录血压变更。当血压明显下降时,则停止按压,待血压恢复(如果血压反而升高,说明按压的是血管,需重新寻找按压位置)。(4)安慰主动脉神经使安慰输出端连接呵护电极,轻轻提起主动脉神经上的备用线,小心地将神经置于呵护电极之上。记录对比血压曲线后,再用中等强度的连续电脉冲信号,通过呵护电极,安慰神经1020s。血压呈现明显下降后即可停止安慰,并待血压恢复。如果血压其实不下降,可调整安慰强度或安慰频率再行安慰。任何安慰都无效时,则暗
8、示此神经并不是主动脉神经。需要重新识别神经后再行实验。(5)辨别安慰主动脉神经中枢端和外周端双结扎主动脉神经后(务必结扎),从两扎线结之间剪断神经。记录对比血压后,同法辨别安慰神经的中枢端和外周端,观察并记录血压变更。(6)安慰迷走神经记录对比血压后,用同样的办法安慰迷走神经,观察血压下降曲线与(4)有何不合(如果血压下降很快、很低,应立即停止安慰)。(7)结扎并剪断迷走神经同时结扎双侧迷走神经后剪断,观察血压有何变更。(8)安慰迷走神经外周端辨别安慰两侧迷走神经外周端,观察并记录血压变更有何不合。(9)肾上腺素对血压的影响记录对比血压曲线后,用1ml注射器,从耳缘静脉注入0.10.3ml肾上
9、腺素溶液,观察并记录血压变更及恢复曲线。(10)乙酰胆碱对血压的影响同法注入0.10.2ml乙酰胆碱溶液,观察并记录注射前后血压变更。(11)失血对血压的影响从另一侧动脉插管后慢慢放血,观察放血量对血压的影响。5、整理实验结果,并将实验结果填入下表家兔血压实验记录表实验前血压对比实验时血压变更极值恢复稳定值夹闭另一侧颈总动脉按压颈动脉窦安慰主动脉神经安慰主动脉神经中枢端安慰主动脉神经外周端剪断双侧迷走神经安慰左侧迷走神经外周端安慰右侧迷走神经外周端注入肾上腺素溶液注入乙酰胆碱溶液失血1( ml)失血2( ml)失血3( ml)【思考题】1、讨论各项实验结果,说明血压正常及产生变更的机理。2、如
10、何证明主动脉神经是传入神经?3、如何证明迷走神经外周端对心脏有调节作用?4、试阐发主动脉神经放电与血压变更的关系。5、根据实验结果,说明神经、药物对心率与呼吸的影响。三、参数设置:(一)RM6240系统:点击“实验”菜单,选择“循环”或“自界说实验项目”菜单中的“兔动脉血压调节”。系统进入该实验信号记录状态。仪器参数:4通道时间常数为直流,滤波频率100Hz,灵敏度12Kpa,采样频率800Hz,扫描速度 500ms/div。连续单安慰方法,安慰强度510V,安慰波宽2ms,安慰频率30 Hz。(二)实验内容1.正常血压曲线。2.夹闭右侧颈总动脉。3.安慰减压神经:(1)安慰完整减压神经(2)
11、安慰减压神经中枢端(3)安慰减压神经外周端。4.安慰迷走神经外周端。5.静脉注射NE 0.5ml。(三)注意事项:1.别离减压神经注意:减压神经要从向心端开始往头端别离,避免损伤神经,别离时不使神经上带有结缔组织膜,别离后滴加生理盐水以防干燥,穿2根线备用。2.连接仪器:注意避免动脉插管滑出。3.夹闭颈总动脉时勿牵拉动脉(夹闭,血压增高;牵拉,血压下降)。4.安慰减压神经,如神经损伤,向头端移动(与减压神经放电移动标的目的相反)。5.安慰右侧迷走神经末梢端,血压.心率变更更为明显。三、实验陈述要求:(10分)1.实验结果:各种影响因素引起动脉血压变更曲线图。(不要求观察定量变更)2.实验讨论:
12、(各1分)1)夹闭颈总动脉,血压升高:夹闭颈总动脉颈动脉窦血压下降颈动脉窦压力感受器受到安慰减弱窦神经传入感动心迷走中枢(抑制)迷走神经传出感动减少心跳加快.加强心输出量增多减少心交感中枢(兴奋)小静脉收缩回心血量增多 血压升高交感神经传出感动增多交感缩血管中枢(兴奋)小动脉收缩外周阻力增年夜 2)安慰完整减压神经及其中枢端均可引起血压下降,而安慰该神经外周端基本不变:兔减压神经是传入神经,其作用是将主动脉弓感受器收回的感动传入延髓心血管中枢,反射性引起血压降低。因此,安慰完整的减压神经或其中枢端,使传入中枢的感动增加,致血压明显下降,而安慰其外周端虽又感动传向外周,但不会引起血压变更3)安慰
13、迷走神经末梢外周端,引起血压下降在实验中,多用安慰右迷走神经外周端,其中的副交感神经纤维兴奋,释放乙酰胆碱,乙酰胆碱与心肌细胞膜上的M受体结合,产生负性变时,变力,变传导作用,呈现心率减慢,心输出量下降,血压下降。4)静脉注射去甲肾上腺素后血压升高:实验结果 各种影响因素引起动脉血压变更曲线图结果阐发 1.夹闭一侧颈总动脉15s后,观察到兔动脉血压升高的现象: 这是由于颈动脉窦管壁的外膜下散布有丰富的感觉神经末梢,是动脉张力感受器。这个感受器位于兔颈总动脉的远心端,颈内动脉与颈外动脉的分叉交界处。夹闭颈动脉后,远心真个颈动脉窦张力感受器感受到血压下降,传入迷经感动的频率减慢。信息沿窦神经上传至
14、延髓孤束核心血管中枢。使心迷走紧张减弱,心交感和心缩血管紧张加强,作用于心脏,使心率加快,心输出量增加,血管收缩,血管外周阻力增加。从而血压恢复性升高。若血压下降过年夜,交感缩血管紧张还会扩展到静脉系统,是静脉收缩,增进血液回心,使每博输出量增加。 2.安慰完整减压神经及其中枢端均可引起血压下降,而安慰该神经外周端基本不变: 兔减压神经是传入神经,其作用是将主动脉弓感受器收回的感动传入延髓心血管中枢,反射性引起血压降低。因此,安慰完整的减压神经或其中枢端,使传入中枢的感动增加,致血压明显下降,而安慰其外周端虽又感动传向外周,但不会引起血压变更。 3.安慰迷走神经后观察到,安慰迷走神经和迷走神经
15、外周端都能引起明显的减压反响,而安慰迷走中枢端则没有减压反响,只是稍有轻微抬升变更: 迷走神经中含从延髓下行的传出纤维,通向心脏。节前纤维末端释放Ach,节后纤维末端释放Ach,属于副交感神经纤维,能使cAMP浓度降低,心率减慢,心房收缩力减弱,传导性减弱。从而使心输出量变小,平均动脉压降低。另外,还有主动脉体化学感受器的上行纤维在迷走神经中并行,化学感受器受安慰的效应是血压升高。所以,安慰迷走中枢不克不及引起减压反响,却可以使血压轻微抬高。另外,若切断两侧迷走神经,迷走紧张消失,迷走吸气兴奋反射通路也断了,植物的吸气变深,周期变长,二级曲线周期性变得不明显。4.加入0.2ml0.01%去甲肾
16、上腺素后,观察到平均动脉压抬高。 这是由于去甲肾上腺素与血管平滑肌上的和2甲肾上腺素能受体结合,使血管收缩,管径变小,外周阻力增加,从而使平均动脉压升高。另外,去甲肾上腺素还可以使心率增加,心收缩力变年夜。只是缩血管效应更明显。5.加入0.2ml0.01%乙酰胆碱后,观察到一级曲线周期变慢,平均动脉压下降。 Ach能使cAMP浓度降低,心率减慢,心房收缩力减弱,传导性减弱。心率变慢则流向外周的血量变多,舒张压更低。心房收缩力减弱则收缩压也有下降。平均动脉压降低。可是因为血回心时间变长,因此,回心血量较多,脉压增加。而年夜大都血管没有Ach受体,Ach对外周阻力影响不年夜。兔动脉血压调节(ZT)
17、0729 17:53:27 兔动脉血压调节 【实验目的】观察神经和体液因素对血压和心率的影响;学习哺乳植物动脉血压(blood pressure)的直接描记办法。【实验原理】心血管活动主要受神经、体液和自身调节。神经调节一般是通过反射(reflex)的形式实现的,包含压力感受性反射 (baroreceptor reflex)、心肺容量感受性( cardiopulmonary receptor) 反射、化学感受性 (chemoreceptor) 反射等,通过修改交感及副交感传入迷经的紧张性活动,调节心血管机能;体液调节则涉及肾素血管紧张素系统(RAS)、肾上腺素和去甲肾上腺素、加压素、内皮缩血管
18、因子(EDCF)、内皮舒血管因子(EDRF)、激肽、前列腺素(PGs)等多个方面。本实验将通过观察血压和心率来反应心血管活动的变更。血液充盈、心脏射血和外周阻力是形成血压的基本因素,上述调节机制可通过作用于上述3个方面,调节动脉血压。【实验植物】家兔 【实验器材和药品】BL420E生物机能实验系统,血压换能器,兔手术台,哺乳植物手术器械1套,注射器数支,小烧杯1个,丝线(黑色、白色粗线)若干。3戊巴比妥钠,生理盐水,0.3肝素,1:10,000去甲肾上腺素, 5:100,000肾上腺素, 1:100,000乙酰胆碱。【实验办法和步调】1.植物称重、耳缘静脉注射3%戊巴比妥钠1ml/kg麻醉,固
19、定。 2.手术: (1)别离右侧减压神经、迷走神经和颈总动脉 作颈部正中切口67cm,别离皮下组织及肌肉,将颈部气管旁软组织外翻,可见与气管平行的一侧血管神经丛, 即为颈总动脉鞘,包含了颈总动脉和伴行的三条神经最粗的迷走神经、最细的减压神经、交感神经。用玻璃分针别离出右侧减压神经、迷走神经和颈总动脉,各穿两根不合颜色的丝线备用。 (2)左侧颈总动脉别离、插管: 在气管左侧用玻璃分针别离出一段至少长34cm的颈总动脉,穿两根线备用。结扎远心端,在近心端夹上动脉夹(两者距23cm)。在近远心端稍下方用眼科剪剪一“V”字形小口,拔出预先灌满肝素的动脉插管,用丝线固定。 3仪器连接:将连接动脉插管的血
20、压换能器及安慰电极通过相应插孔连接在BL420E系统的前面板上。掀开BL420E系统,选择项目“循环实验兔动脉血压调节”,记录血压。 4观察项目 (1)正常血压曲线描计: 罕见的正常血压波型有:一级波,为心搏波,陪伴心脏收缩、舒张呈现的血压摆荡,频率与心率一致;二级波,为呼吸波,陪伴呼吸运动的血压摆荡,频率与呼吸频率一致。另外,偶尔还可见到三级波,为一种低频、缓慢摆荡,可能与血管运动中枢周期性的紧张性变更有关。 (2)神经体液因素对血压、心率的影响 牵拉颈总动脉: 手持左侧颈总动脉远心端结扎线,向心脏标的目的以25次/秒有节奏的往复牵拉,继续510秒,观察血压、心率变更。 夹闭颈总动脉: 用动
21、脉夹夹闭右侧颈总动脉510秒,观察血压、心率变更。 安慰减压神经: 用双极呵护电极安慰右侧减压神经,观察血压、心率的变更。再用双线结扎减压神经,在结扎线中间剪断神经,以相同安慰参数辨别安慰其中枢端和外周端,观察血压、心率的变更。 安慰迷走神经: 结扎并剪断右侧的迷走神经,辨别安慰其外周端和中枢端,观察血压、心率变更。 去甲肾上腺素 由耳缘静脉注射110,000去甲肾上腺素0.20.3ml,观察血压、心率变更。 肾上腺素 由耳缘静脉注射5100,000肾上腺素0.20.4ml,观察血压、心率变更。 乙酰胆碱 由耳缘静脉注射1100,000去甲肾上腺素0.20.3ml,观察血压、心率变更。【结果与
22、阐发】1.正常血压2.夹闭颈总动脉 血压升高3. 安慰减压神经 血压下降4.安慰迷走神经 血压下降安慰迷走神经的外周端,迷走神经的兴奋传导至心脏,抑制了心脏的搏动,心脏搏动减慢,血压下降。5.静脉注射0.1g/L去甲肾上腺素0.3ml,血压升高6.静脉注射102g/L乙酰胆碱(0.1ml/kg体重),血压下降 】【乙酰胆碱与M受体结合心率、心缩力血管舒张血压下降减压神经为传人神经,感动在神经纤维中单向传导,故只有 安慰减压神经, 安慰减压神经中枢端会影起血压下降.迷走神经为复合神经.故安慰迷走神经,迷走神经外周端,迷走神经中枢端城市影起血压下降.【实验结论】1.支配心脏的传入迷经为心交感神经和
23、心迷走神经(1)心交感神经及其作用:心交感神经的节前神经元位于脊髓第15胸段的中间外侧柱,其轴突末梢释放的递质为乙酰胆碱,后者能激活节后神经元膜上的N型胆碱能受体。心交感节后神经元末梢释放的递质为去甲肾上腺素,与心肌细胞膜上的型肾上腺素能受体结合,可招致心率加快,房室交界的传导加快,心房肌和心室肌的收缩能力加强。这些效应辨别称为正性变时作用、正性变传导作用和正性变力作用。 (2)心迷走神经及其作用 支配心脏的副交感神经节前纤维行走于脑神经干中。心迷走神经节后纤维末梢释放的乙酰胆碱作用于心肌细胞膜的M型胆碱能受体,可招致心率减慢,心房肌收缩能力减弱,心房肌不该期缩短,房室传导速度减慢,即具有负性
24、变时、变力和变传导作用一般说来,心迷走神经和心交感神经对心脏的作用是相佶抗的。但当两者同时对心脏产生作用时,在大都情况下,心迷走神经的作用比交感神经的作用占有较年夜的优势。在植物实验中如安慰心迷走交感神经干,常呈现心率减慢效应。其机制比较庞杂。(3)动脉压力感受器:压力感受性反射的感受装置是位于颈动脉窦和主动脉弓血管外膜下的感觉神经末梢,称为动脉压力感受器。动脉压力感觉器其实不是直接感觉血压的变更,而是感觉血管壁的机械牵张水平。当动脉血压升高时,动脉管壁被牵张的的水平就升高,压力感觉器发放的神经感动也就增多。在一定规模内,压力感觉器的传入感动频率与动脉管壁扩张水平成正比。在一个心动周期内,随着
25、动脉血压的摆荡,窦神经的传入感动频率也产生相应的变更。 (4)传入神经和中枢联系:颈动脉窦压力感受器的传入神经纤维组成颈动脉窦神经。窦神经加入舌咽神经,进入延髓,和孤束核的神经元产生突触联系。主动脉弓压力感受器的传入神经纤维行走于迷走神经干内,然后进入延髓,达到孤束核。兔的主动脉弓压力感受器传入纤维自成一束,与迷走神经伴行,称为主动脉神经。压力感受器的传入神经感动达到孤束核后,可通过延髓内的神经通路使延髓端腹外侧部的血管运动神经元抑制从而使交感神经紧张性活动减弱。 (5)反射效应(作用机制如下图):动脉血压升高时,压力感受器传入感动增多,通过中枢机制,使心迷走紧张加强,心交感紧张和交感缩血管紧
26、张减弱,其效应为心率减慢,心输出量减少,外周血管阻力降低,故动脉血压下降。反之,当动脉血压降低时,压力感受器传入感动减少,使迷走紧张减弱,交感紧张加强,于是心率加快,心输出量增加,外周血管阻力增高,血压回升。压力感受性反射在心输出量、外周血管阻力、血量等产生突然变更的情况下,对动脉血压进行快速调节的过程中起重要的作用,使动脉血压不致产生过分的摆荡,因此在生理学中将动脉压力感受器的传入神经称为缓冲神经。在切除两侧缓冲神经的狗,血压经常呈现很年夜的摆荡,其变动规模可超出平均动脉压上下各6.7kPa(50mmHg)。可是,在切除缓冲神经的植物,一天中血压的平均值其实不明显高于正常,因此认为压力感受性
27、反射在动脉血压的长期调节中其实不起重要作用。 3. 心血管活动的体液调节是指血液和组织液中一些化学物质对心肌和血管平滑肌的活动产生影响,从而起调节作用。这些体液因素中,有些是通过血液携带的,可广泛作用于心血管系统;有些则在组织中形成,主要作用于局部的血管,对局部组织的血流起调节作用。(1) 肾上腺素和去甲肾上腺素的作用:在化学结构上都属于儿茶酚胺。循环血液中的肾上腺素和去甲肾上腺素主要来自肾上腺髓质的排泄。肾上腺素能神经末梢释放的递质去甲肾上腺素也有一小部分进入血液循环。肾上腺髓质释放的儿茶酚胺中,肾上腺素约占80%,去甲肾上腺素约占20%血液中的肾上腺素和去甲肾上腺素对心脏和血管的作用有许多
28、共同点,但其实不完全相同,因为两者对不合的肾上腺素能受体的结合能力不合。肾上腺素可与和两类肾上腺素能受体结合。在心脏,肾上腺素与肾上腺素能受体结合,产生正性变时和变力作用,使心输出量增加。在血管,肾上腺素的作用取决于血管平滑肌上和肾上腺素能受体散布的情况。在皮肤、肾、胃肠、血管平滑肌上肾上腺素能受体在数量上占优势,肾上腺素的作用是使这些器官的血管收缩;在骨骼肌和肝的血管,肾上腺素能受体占优势,小剂量的肾上腺素常以兴奋肾上腺素能受体的效应为主,引起血管舒张,年夜剂量时也兴奋肾上腺素能受体,引起血管收缩。去甲肾上腺素主要与肾上腺素能受体结合,也可与心肌的1肾上腺素能受体结合,但和血管平滑肌的2肾上腺素能受体结合的能力较弱。静脉注射去甲肾上腺素,可使全身血管广泛收缩,动脉血压升高;血压升高又使压力感受性反射活动加强,压力感受性反射对心脏的效应超出去甲肾上腺素对心脏的直接效应,故心率减慢。 去甲肾上腺素与肾上腺素的比较见下表:
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