粗脂肪过氧化值TBA酸价皂化值测定方法.docx

1、粗脂肪过氧化值TBA酸价皂化值测定方法粗脂肪1原理索氏脂肪提取器中乙醚提取试样，称试样的减重，提取物中除脂肪外还有有机酸、磷脂、脂溶性维生素、叶绿素等，因而测定结果称粗脂肪或乙醚提取物。2测定方法2.1 仪器和试剂2.1.1 索氏脂肪提取器；2.1.2 恒温烘箱；2.1.3 电热恒温水浴锅；2.1.4 无水乙醚。2.2 操作步骤准确称取试样1.02.0g，用滤纸包好，放入105烘箱中烘干2h，干燥器中冷却30min，称重，滤纸包长度应以全部浸泡于乙醚中为准。将滤纸包放入抽提管，在抽提瓶中加无水乙醚60100ml，在6075水浴上加热，使乙醚回流，控制乙醚回流次数为每小时约10次，共回流约50次

2、（含油高的试样约70次）或检查抽提管流出的乙醚挥发后不留下油迹为抽提终点。取出试样，放入105烘箱中烘干2h，干燥器中冷却30min，称重。用原抽提器回收乙醚直至抽提瓶几乎全部收完。2.3 结果计算粗脂肪含量按下式计算：100%式中： m 1提取前试样与滤纸包之总质量，g；m 2提取后试样与滤纸包之总质量，g；m 试样之质量，g； 粗脂肪含量在10%以上（含10%）允许相对偏差为5%。粗脂肪含量在10%以下时，允许相对偏差为3%。过氧化值的测定1 原理（碘量法）油脂氧化过程中产生过氧化物，在酸性条件下与碘化钾作用，生成游离碘，以硫代硫酸钠溶液滴定，计算含量。CH3COOH（冰醋酸）KI CH3

3、COOKHI ROOH2HI ROHH2OI2 I22Na2S2O3 2 NaI2Na2S4O6 相当于： ROOH2KI - ROHK2OI2其大小反映了油脂的酸败程度（变值），即新鲜度。由于ROOH为油脂自动氧化的主要初始产物。油脂氧化初期，POV值随氧化程度加深而增高，而当油脂深度氧化时，ROOH的分解速度超过其生成速度，导致POV值下降。所以，POV值仅适合氧化初期的测定。POV值指1kg油脂所含氢过氧化物ROOH的毫摩尔数（mmol O2/kg）。2 过氧化值的测定2.1 试剂和溶液2.1.1饱和碘化钾溶液：称取14g碘化钾，加10ml水溶解，必要时微热使其溶解，冷却后贮于棕色瓶中（

4、最好现配现用，放冰箱贮存，溶液变黄不能使用）；2.1.2 三氯甲烷冰乙酸混合液：量取40ml三氯甲烷，加60ml冰乙酸，混匀；（配制前检查三氯甲烷氧化性） 2.1.3 0.01mol/L硫代硫酸钠标准溶液（用0.1mol/L硫代硫酸钠标准溶液稀释，现用现配）； 2.1.4 1%淀粉试剂：将淀粉0.5g用少许冷水调成糊状，倒入50ml沸水中调匀，煮沸，临时用现配；2.2 测定方法称取23g样品（称准至0.0002g）于碘量瓶中，加30ml三氯甲烷冰乙酸混合液，使样品完全溶解。加入1ml饱和碘化钾溶液，紧密塞好瓶盖，并轻轻振摇0.5min，然后在暗处放置3min，取出加100ml水，摇匀，立即以淀

5、粉试液为指示剂，用0.01mol/L硫代硫酸钠标准溶液滴定至蓝色消失为终点。同时做空白试验。2.3 结果计算过氧化值按下式计算：POV(meq/kg)=式中： 硫代硫酸钠标准溶液的浓度，mol/L； 试样消耗硫代硫酸钠标准溶液之体积，ml；0空白消耗硫代硫酸钠标准溶液之体积，ml；m 样品质量，g；0.1269换算系数；指标：鱼粉过氧化值建议指标为8 meq/kg 粗脂肪豆粕过氧化值建议指标2 meq/kg 粗脂肪油脂TBA值的测定方法1.原理油脂受到光、热、空气中氧的作用，发生酸败反应，分解出醛、酮之类的化合物。丙二醛就是后期分解产物的一种，它能与TBA（硫代巴比妥酸）作用生成粉红色化合物，

6、在532nm波长处有吸收高峰，利用此性质即能测出丙二醛含量，从而推导出油脂酸败的程度。丙二醛与TBA的反应式：2.试剂(1) TBA水溶液：准确称取TBA0.288g溶于水中，并稀释至100ml（如TBA不易溶解，可加热至全溶澄清，然后稀释至100ml），相当于0.02M；（现配现用）(2) 三氯乙酸混合液：准确称取三氯乙酸（分析纯）7.5g及0.1gEDTA，用水溶解，稀释至100ml；(3) 氯仿（分析纯）；(4) 丙二醛标准溶液：称取0.315g1，1，3，3-四乙氧基丙烷，溶解后稀释至1000ml，此溶液每ml相当于丙二醛100g，置于冰箱内保存。准确吸取10ml，稀释至100ml，此

7、溶液每ml相当于丙二醛10g，备用。3. 操作步骤（1）标准曲线的绘制准确吸取每ml相当于丙二醛10g的标准溶液0.0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6ml置于纳氏比色管中，加水至总体积为5ml，加入5mlTBA溶液，然后按样品测定步骤进行，测得光密度绘制标准曲线。（2）样品制备与检测准确称取均匀的豆油15g，置于100ml有盖三角瓶内，加入25ml三氯乙酸混合液，振摇半小时（保持油脂融溶状态，如冷结即在70水浴上略微加热使之融化后继续振摇）用双层滤纸过滤，除去油脂。滤液重复用双层滤纸过滤一次。准确移取上述滤液10ml置于25ml比色管内，加入10mlTBA溶液，混匀，加塞，置于

8、90水浴内保温40min，取出，冷却1h，移入小试管内，离心5min，上清液倾入25ml纳氏比色管中，加入5ml氯仿，摇匀，静置，分层，吸出上清液于532nm波长处，用2cm比色皿比色（亦根据具体情况选用1cm至5cm的比色皿颜色浅用5cm，颜色深显粉红色的用1cm），同时作空白试验（用10.00ml水，其他步骤与样品的一致）。4. 计算 光密度 (A532/kg)= 丙二醛含量（mg/Kg）= 式中C从标准曲线查得丙二醛的相应浓度(ug/ml) m样品质量（g） V1滤液体积（ml） V2TBA（硫代巴比妥酸水溶液体积ml） V三氯乙酸混合液体积（ml）5. 备注 1 根据不同种类的油脂称取

9、质量稍有不同：固体样的测定首先应按照粗脂肪的提出办法提出样品中的油脂，提到的油脂用来测定过氧化值，TBA值等。固体样称样量10g左右：用1-5cm比色皿检测2如果没有丙二醛标准溶液，测定方法不变，结果表示为1kg油脂在波长532nm下1cm石英比色杯所测得的吸光度表示，A/kg 鱼粉TBA建议指标为8 mg/Kg以下，A532大约在15000以下*豆粕TBA建议指标6 mg/Kg以下，A532大约在8000以下。3. 乙醚提纯（提取油脂前乙醚先提纯，还原剂-硫酸亚铁，当天提当天用）油脂酸价（AV）的测定1 定义和原理用标准的碱溶液中和试样中的游离酸。酸价（酸值）是指中和1g油脂所含游离脂肪酸所

10、需氢氧化钾的毫克数。同一种植物油如酸价高，则表明油脂因水解而产生更多的游离脂肪酸。新鲜油脂中的游离脂肪酸少，酸价低；但贮藏中则上升（变值）。因此可用酸价来衡量油脂的新鲜度（或质量）。2测定方法2.1 试剂和溶液2.1.1 0.1mol/L的氢氧化钾标准溶液；2.1.2 1%酚酞指示剂：称取1.0g酚酞，溶于乙醇，用乙醇稀释至100ml；2.1.3 中性醇醚混合液或中性苯醇混合液：取化学纯95%乙醇和乙醚按2:1体混合，或苯和95%乙醇等体积混合，然后加入酚酞指示剂数滴，用0.1 mol/L的氢氧化钾溶液中和至微红色；2.2 操作步骤 准确称取油样5.010.0g，置于250ml锥形瓶中，加入混

11、合溶剂50ml，振摇溶解（必要时温热），加入酚酞指示剂34滴，用0.1mol/L的氢氧化钾标准溶液滴定至淡红色于1min内不褪色为终点。2.3 结果计算酸价按下式计算：式中：0.1mol/L的氢氧化钾标准溶液的浓度，mol/L；试样耗用氢氧化钾标准溶液之体积，ml；m试样之质量，g；56.1 氢氧化钾的相对分子质量；油脂皂化价（SV）的测定皂化价（皂化值）系指中和1g油脂中所含全部游离脂肪酸和结合脂肪酸（甘油脂）所需氢氧化钾的毫克数。皂化值的大小与油脂的平均分子量成反比，也即与脂肪酸的分子量成反比。一般油脂的SV在200左右。油脂在碱性条件下可以发生水解生成甘油和脂肪酸盐，称为皂化。如果油脂中

12、存在游离的脂肪酸，SV值实际上不仅是指皂化反应的结果，也包括酸价。1 原理油脂与氢氧化钾乙醇溶液共热时，发生皂化反应，剩余的碱可用标准酸液进行滴定，从而可计算出中和油脂所需的氢氧化钾毫克数。反应式如下：RCOOH + KOH RCOOK + H2OC3H5(COOR)3 + 3KOH 3RCOOK + C3H5(OH)3KOH（过剩的）+HCl KCl + H2O2测定方法2.1 试剂和溶液2.1.1 0.5mol/L的盐酸标准溶液；2.1.2 1%酚酞指示剂：称取1.0g酚酞，溶于乙醇，用乙醇稀释至100ml；2.1.3 无水乙醚；2.1.4 0.5mol/L氢氧化钾乙醇溶液：称取化学纯氢氧

13、化钾30g，溶于95%乙醇中使成1L，摇匀，静置24h，倾出上层清液，贮于装有苏打石灰球管的玻璃瓶中。2.2 操作步骤称取2.0g样品（称准至0.0002g），准确加入0.5mol/L氢氧化钾乙醇溶液25ml，在水浴上加热回流30min，不时摇动。取下冷凝管，冷却后加入数滴酚酞指示剂，用0.5mol/L的盐酸标准溶液滴定至红色消失。同时做空白试验。2.3 结果计算皂化价按下式计算： 皂化值(mg KOH/g)=式中： 0.5mol/L的盐酸标准溶液的浓度，mol/L； 试样耗用盐酸标准溶液之体积，ml；0空白试验消耗盐酸标准溶液之总体积，ml；m试样之质量，g；56.11mol/L盐酸标准液1

14、ml相当于氢氧化钾的克数；一般植物油的皂化价如下：棉子油189198，花生油188195，大豆油190195，菜子油170180，芝麻油188195，葵子油188194，茶子油188196。 皂化率=鱼油酸值一般为： 0.7mgKOH/g 理论皂化值一般为：200-210mgKOH/g豆油酸值一般为： 0.7mgKOH/g 理论皂化值一般为：190-195 mgKOH/g花生油酸值一般为：3.5mgKOH/g 理论皂化值一般为：188195mgKOH/g油脂的质量评价指标，多数表示油脂的氧化程度。 实际的油脂品质分析中，常用某种“特征值”表示油脂的品质。这些值可以直接反映出油脂的组成、氧化程度

15、等性质等。“特征值”主要有皂化值、碘值、酸价、过氧化值等。根据油品贮放中“值”的变化与否，又有恒值和变值之分，恒值主要显示油脂的组成，如皂化值；变值则可显出油品性质的变化，如过氧化值、酸价。部分含脂肪原料的质量要求：表1指标名称过氧化值（%）TBA值（A532/kg样品）皂化率（%）鱼粉0.05100085乌贼内脏0.05100090虾壳粉0.05200080鱼油0.05100095猪油0.05100090混合油0.05100085肉粉0.05100085肉骨粉0.05100085油渣粉0.05100085玉米0.05100090麦麸0.05100090花生粕0.051000 85磷脂类0.1

16、200080米糠0.1100080芝麻粕0.1100080谷壳粉0.051000豆油0.05200095菜油0.05200095椰子油0.02100095文献报导鱼粉的脂肪氧化情况：表2 项目 名称粗脂肪（%）酸价（AV）（unit）过氧化价(pov)(unit)TBA(unit)智利红鱼粉8.0129.309.4013.10日本红鱼粉8.9835.6011.4020.40台湾红鱼粉11.9852.1018.4048.50秘鲁红鱼粉6.8538.705.5024.10泰国红鱼粉9.421.5010.108.8美国红鱼粉9.1248.308.1028.9丹麦红鱼粉8.2140.7011.1010.00南朝鲜红鱼粉4.2023.7025.907.50挪威红鱼粉4.6040.7011.206.80日本白鱼粉8.0626.3011.9013.30南朝鲜白鱼粉6.4310.3314.986.90加拿大白鱼粉4.3135.5111.578.76德国白鱼粉6.9043.477.386.00南非白鱼粉5.3539.6176.299.45美国白鱼粉4.5425.418.4010.00丹麦白鱼粉5.7169.49.705.20台湾白鱼粉11.9944.8029.80118.60