常用鉴定试剂的配制和应用.docx

1、常用鉴定试剂的配制和应用常用鉴定试剂的配制和应用一、通用试剂1、碘试剂检查一般有机化合物。（1）碘蒸气 预先将盛有碘结晶的小杯置于密闭的玻璃容器内，使容器空间被碘蒸气饱和，将薄层置于容器内数分钟即显棕色斑点。有时，于容器中加放一小杯水，增加容器内的湿度，可提高显色的灵敏度。（2）0.5碘的氯仿溶液 喷洒试剂，置空气中待过量的碘挥发后，喷1淀粉溶液，斑点由棕色转为蓝色。2、硫酸试剂检查一般有机化合物。5硫酸乙醇溶液作为色谱显色剂用。喷洒后，置空气中干燥15min，100烤至斑点呈色（不同化合物呈不同颜色）。3、重铬酸钾硫酸试剂检查一般有机化合物。5g重铬酸钾溶于l00ml40硫酸中。喷该试剂后，

2、150加热至斑点出现(不同化合物呈不同颜色)。4、磷钼酸试剂检查还原性成分。5磷钼酸乙醇溶液。喷洒后，120加热至呈蓝色斑点。5、磷钨酸试剂检查还原性成分20磷钨酸乙醇溶液。喷洒后，120烘烤，还原性物质呈蓝色斑点。6、硝酸银氢氧化铵试剂检查还原性成分。溶液I：0.1molL硝酸银溶液。溶液：10氢氧化铵溶液。临用前溶液I和以15混合。喷洒后105加热5l0min，至深黑色斑点出现。7、中性高锰酸钾试剂检查易还原性成分。0.05高锰酸钾溶液。喷洒后粉红色背景上显黄色斑点。8、碱性高锰酸钾试剂检查还原性成分。溶液I：1高锰酸钾溶液。溶液：5碳酸钠溶液。溶液I和等量混合使用，喷洒后，粉红背景上显黄

3、色斑点。9、四唑蓝试剂检查还原性成分。溶液I：05四唑蓝甲醇溶液。溶液：25氢氧化钠溶液。临用前两液等量混合。喷洒后，微热或室温放置显紫色斑点。10、荧光素溴试剂检查不饱和化合物。溶液I：0.1g荧光素溶于l00ml乙醇中。溶液：5g溴溶于l00ml四氯化碳中。先喷洒溶液I，然后将薄层板放入盛有溶液的缸内，黄色斑点出现后，于紫外光灯下检视，红色底板上显黄色荧光斑点。11荧光显色试剂检查一般有机化合物。（1）0.22，7-氯荧光素乙醇溶液。（2）0.01荧光素乙醇溶液。（3）0.1桑色素乙醇溶液。（4）0.05罗丹明B乙醇溶液。喷洒任一溶液，不同的化合物在荧光背景上可显黑色或其它荧光斑点。二、苷

4、类鉴定试剂1、糖鉴定试剂（1） 萘酚硫酸试剂检查还原糖。溶液I：10 萘酚乙醇溶液。溶液：硫酸。取lml样品的稀乙醇溶液或水溶液，加入溶液I 23滴，混匀，沿试管壁缓缓加入少量溶液，二液面交界处产生紫红色环为阳性反应。15 萘酚乙醇溶液21m1、硫酸13ml、乙醇87ml及水8ml混匀后使用。喷洒于薄层板上，100烤36min，多数糖显蓝色，鼠李糖显橙色，所显颜色于室温可稳定2天3天。（2）斐林试剂检查还原糖。 溶液I：6.93g结晶硫酸铜溶于l00ml水中。溶液：34.6g酒石酸钾钠、10g氢氧化钠溶于l00ml水中。取lml样品热水提取液，加入45滴用时配制的溶液、等量混合液，在沸水浴中加

5、热数分钟，产生砖红色沉淀为阳性反应。如检查多糖和甙，取lml样品水提液，加入lmll0盐酸溶液，在沸水浴上加热l0min，过滤，再用10氢氧化钠溶液调至中性，按上述方法检查还原糖。（3）氨性硝酸银试剂检查还原糖。硝酸银1g，加水20ml溶解，小心滴加适量氨水，边加边搅拌，至开始产生的沉淀将近全部溶解为止，过滤。取lml样品的水溶液，加入lml试剂，混匀后，40微热数分钟，管壁析出银镜或产生黑色沉淀为阳性反应。本试剂也可作为色谱显色剂，喷洒后于110加热数分钟，显棕黑色斑点为阳性反应。还原性物质如醛类、邻二酚类等有干扰。（4）茴香醛硫酸试剂检查糖类化合物。硫酸lml加到含茴香醛0.5ml的乙酸溶

6、液50ml中，需临用前配制。喷洒于薄层板上，105加热至显示色斑，不同糖显不同颜色。（5）苯胺邻苯二甲酸试剂检查糖类化合物。苯胺0.93g和邻苯二甲酸1.66g溶于100ml水饱和的正丁醇中。作色谱显色剂用。喷后105烤5min，显红棕色斑点。（6）l,3二羟基萘酚磷酸试剂检查酮糖、醛糖。0.21，3-二羟基萘酚乙醇溶液50ml与85磷酸50ml混合均匀后使用。喷后105烤5min10min，酮糖呈红色，醛糖显淡蓝色。（7）苯胺二苯胺磷酸试剂检查糖类化合物。苯胺4ml、二苯胺4g及85磷酸20ml溶于丙酮200ml中。喷洒于薄层板上，85加热10min，不同糖显不同颜色。（8）2，3，5三苯基

7、氯化四氮唑(TTC)试剂检查还原糖。溶液：4TTC甲醇溶液。溶液：4氢氧化钠溶液。临用时将溶液和等体积混合。喷洒后，100加热510min，显红色斑点为阳性反应(醛类无干扰)。（9）三氯化铁冰醋酸(KK)试剂检查 去氧糖，常用于强心甙。溶液I：1三氯化铁溶液0.5ml，加冰醋酸至l00ml。溶液：硫酸。取样品乙醇提取液lml，置试管中，水浴上蒸去乙醇，残渣用0.5ml溶液I溶解，沿试管壁缓缓加入溶液lml，静置分层，上层渐显蓝色，下层显红色或棕色为阳性反应(其颜色随苷元羟基和双键的位置和个数不同而不同)。（10）占吨氢醇试剂检查 去氧糖(常用于强心甙)。10mg占吨氢醇溶于100ml冰醋酸中，

8、再加入lml硫酸混合。取lml样品，加入试剂lml，置水浴上加热30min，显红色为阳性反应。（11）Gregg-Gisvold试剂检查26去氧糖。溶液I：10三氯化铁溶液。溶液：1盐酸甲醇溶液(97.2ml甲醇中含28ml盐酸)。0.5ml溶液I与100ml溶液混合。将样品的乙醇溶液点于滤纸片上，晾干后，喷洒上述混合试剂，110加热5min，显蓝色为阳性反应。（12）3，5二氨基苯甲酸磷酸试剂检查2去氧糖。3，5二氨基苯甲酸二盐酸盐1g溶于80磷酸25ml，加水稀释至60ml。喷洒后，100加热15min，2去氧糖在日光下显棕色，在紫外光下显黄绿色荧光。（13）对硝基苯胺过碘酸试剂检查去氧糖

9、。溶液I：饱和偏高碘酸溶液1份加水2份混匀。溶液：1对硝基苯胺乙醇溶液4份与盐酸1份混合。先喷溶液I，放置10min，再喷溶液，去氧糖显黄色，紫外光下显强荧光，再喷5氢氧化钠甲醇溶液，颜色转绿，乙二醇同样显色。2、酚类鉴定试剂（1）三氯化铁试剂检查酚类化合物、鞣质。15三氯化铁水溶液或乙醇溶液，加盐酸酸化。取1m1样品的乙醇溶液，加入试剂12滴，显绿、蓝绿或暗紫色为阳性反应。作色谱显色剂用，喷洒后，显绿或蓝色斑点为阳性反应。 （2）4氨基安替匹林铁氰化钾(Emerson)试剂检查酚羟基对位无取代基的化合物。溶液I：24氨基安替匹林乙醇溶液。溶液：8铁氰化钾溶液。作色谱显色剂用，先喷洒溶液I，再

10、喷洒溶液，用氨气熏，显橙红或深红色斑点为阳性反应。（3）Gibbs试剂检查酚羟基对位无取代基的化合物。溶液I：0.52，6溴(氯)苯醌氯亚胺的乙醇溶液。溶液：1氢氧化钾乙醇溶液。取lml样品的乙醇溶液，滴加溶液，使pH910，再加入1滴2滴溶液I，显深蓝色为阳性反应。（4）铁氰化钾三氯化铁试剂检查酚类、芳香胺类及还原性物质。溶液I：1铁氰化钾溶液。溶液：2三氯化铁溶液。临用前等体积混合。喷洒后酚性成分呈蓝色斑点，再喷20盐酸，能使颜色加深。纸色谱可用稀盐酸洗去喷洒液。（5）重氮化(Pauly)试剂检查酚羟基对位无取代基化合物。溶液I：0.35g对硝基苯胺溶于5ml盐酸中，加水稀释至50ml。溶

11、液：5g亚硝酸钠溶于70ml水中。取1m1样品的乙醇溶液，加入1m13碳酸钠溶液，在沸水浴中加热3min，再在冰水浴中冷却后，加入12滴溶液与的混合液(临用时，在冰水浴中等量混合)，显红色为阳性反应。作色谱显色剂用，将溶液I与各l0ml混合，再加20ml 1碳酸钠溶液(均临用时在冰水浴中混合)，喷洒后，显黄、红、紫等色斑点为阳性反应。（6）牢固蓝B盐试剂检查酚类化合物。溶液I：新配的0.5牢固蓝B盐的溶液。溶液：0.5氢氧化钠溶液。先喷溶液I，再喷溶液，呈棕、紫、或绿色者为阳性反应。能偶合的芳香胺类有干扰。3黄酮类鉴定试剂（1）盐酸镁粉试剂检查黄酮（醇）、二氢黄酮（醇）类化合物。取lml样品的

12、乙醇溶液，加入数毫克镁粉，滴加数滴盐酸，必要时水浴上微热，显红紫色为阳性反应。（2）Shinoda试剂采用含2锌粉（WW）硅胶薄层板，展层后喷20盐酸溶液，黄酮（醇）类呈红紫色。（3）三氯化铝试剂检查具有邻二酚羟基或3羟基、4酮基或5羟基、4酮基的黄酮类化合物。1三氯化铝乙醇溶液或5三氯化铝乙醇溶液。喷洒前、后将薄层板置日光下和紫外光灯下观察，呈黄色或黄绿色荧光为阳性反应。也可在滤纸上和试管中进行。（4）中性醋酸铅或碱式醋酸铅试剂检查具邻二酚羟基或酚羟基的黄酮化合物。饱和中性醋酸铅或碱式醋酸铅溶液。取1ml样品的乙醇溶液，加12滴试剂，产生黄色沉淀。（5）锆柠檬酸试剂检查具3羟基或5羟基的黄酮

13、类化合物。溶液I：2二氯氧锆甲醇溶液。溶液：2柠檬酸甲醇溶液。取1mg样品，用甲醇溶解，加入溶液I lml，呈鲜黄色示有3羟基或5羟基；再加入溶液1m1，黄色不褪，示有3羟基；黄色褪去，加水稀释后变为无色，示无3羟基，但有5羟基。也可在滤纸上进行，得到的锆盐络合物多呈黄绿色，并具荧光。（6）氨性氯化锶试剂检查具有邻二酚羟基结构的黄酮类化合物。溶液I：1氯化锶甲醇溶液。溶液：氨蒸气饱和的甲醇溶液。取1mg样品的甲醇溶液，加入3滴溶液I，再加3滴溶液，产生绿棕黑色沉淀为阳性反应。（7）醋酸镁试剂检查黄酮类、二氢黄酮类化合物，及羟基蒽醌类衍生物。1醋酸镁甲醇溶液。在滤纸或薄层板上，点1滴样品醇溶液，

14、挥去醇后，点l滴试剂于样品斑点边缘，加热干燥，于紫外灯下观察，黄酮类显黄色荧光，二氢黄酮类呈天蓝色荧光。显橙红色为大黄素型蒽醌，显紫色为茜草型蒽醌。（8）硼氢化钾试剂检查二氢黄酮类化合物。2四氢硼钾的甲醇溶液。取样品12mg溶于甲醇中，加等量试剂lml后，加数滴盐酸，呈红-紫红色为阳性反应。薄层色谱上喷试剂，5min后放人盐酸蒸气槽内呈色。4醌类化合物鉴定试剂（1）Borntrager试剂检查羟基蒽醌衍生物。2氢氧化钠或2碳酸钠溶液(或甲醇溶液)。取lml样品的乙醇溶液，加lml试剂，呈红色为阳性反应。在薄层色谱上喷洒试剂，显橙黄或红色斑点。黄酮类化合物遇碱也能反应生成黄、橙、红色等。（2）菲

15、格尔(Feigl)试剂检查醌类衍生物。溶液I：25碳酸钠溶液。溶液：4甲醛的苯溶液。溶液：5邻二硝基苯的苯溶液，取1滴样品的苯溶液，加入上述3种试液各1滴，混匀，置水浴上加热l4min，呈显著的紫色为阳性反应。（3）硼氢化钠二甲基甲酰胺试剂检查蒽醌及其衍生物。20g硼氢化钠溶于100ml二甲基甲酰胺中。作色谱显色剂用。喷洒试剂后，于紫外光灯下观察，显强的黄、绿或蓝色荧光为阳性反应。（4）硼酸试剂检查羟基蒽醌类化合物。1硼酸溶液。作色谱显色剂用，喷洒后，置紫外光灯下观察，呈黄、橙、红色荧光为阳性反应。（5）对亚硝基二甲基苯胺试剂检查蒽酮类衍生物。0.1对亚硝基二甲基苯胺的吡啶溶液。取1m1样品的

16、乙醇溶液，置水浴上蒸干，残渣用吡啶溶解，再滴试剂数滴，显紫色或绿色为阳性反应。（6）活性次甲基试剂检查苯醌及萘醌类衍生物。lg活性次甲基试剂(例如丙二酸酯、乙酰乙酸酯等)溶于30ml氨与乙醇的等体积混合溶液中。取5ml样品的乙醇溶液，加入3ml试剂，显蓝、紫或红色为阳性反应，萘醌分子中具羟基，可使反应减慢或不起反应。5内酯、香豆素类鉴定试剂（1）开环闭环试剂检查内酯环。溶液I：1氢氧化钠溶液。溶液：2盐酸溶液。取lml样品的乙醇溶液，加2ml溶液I，置沸水浴上加热34min，溶液比未加热时澄清。再加溶液酸化(pH2)，放置，溶液又变为混浊。酚性化合物和有机酸有干扰，但可用下法予以区别，取样品乙

17、醇溶液数毫升，置水浴上蒸干溶剂，用乙酸乙酯溶解后置分液漏斗内，用5氢氧化钠溶液萃取酚性及有机酸成分，乙酸乙酯溶液用水洗至中性后按上法检测。（2）异羟肟酸铁试剂检查内酯环。溶液I：7盐酸羟胺甲醇溶液(新鲜配制)。溶液：10氢氧化钾甲醇溶液。溶液：1三氯化铁甲醇溶液。取1m1样品的甲醇溶液，加入溶液I、各5滴，置沸水浴上加热3min4min，冷却后，用稀盐酸调至pH34，再加入溶液1滴2滴，显橙红或紫红色为阳性反应。作色谱显色用，将溶液I，等量混合，喷洒后空气中干燥10min，再喷溶于1盐酸中的三氯化铁溶液，显橙红或紫红色斑点。（3）稀氢氧化钠溶液 将检样点于滤纸片或薄层上，试样边缘点上碱液，晾干

18、，置紫外灯光下观察，多数羟基香豆素有强的荧光。配合酚类鉴定试剂的检查，以确定游离酚羟基的存在及取代位置。6，强心甙鉴定试剂（1）碱性3，5二硝基苯甲酸(Kedde)试剂检查强心甙的 、 不饱和内酯环。23，5二硝基苯甲酸甲醇溶液与5氢氧化钾溶液，用前按1l混合。取1m1样品的甲醇溶液，加入34滴试剂，显紫红色为阳性反应，几分钟后褪色。也适用于薄层色谱。（2）碱性苦味酸(Baljet)试剂检查强心甙的 、 不饱和内酯环。9ml 1苦味酸乙醇溶液与1ml l0氢氧化钠溶液用前配制混合。用1m1样品的乙醇溶液，加入1滴试剂，放置15min左右，显橙红色或红色为阳性反应。（3）碱性亚硝酰铁氰化钠（Le

19、gal）试剂检查不饱和内酯、甲基酮或活性亚甲基（常用于强心甙）。溶液I：0.5亚硝酰铁氰化钠乙醇溶液。溶液：10氢氧化钠溶液。取1 m1样品的甲醇溶液，置水浴上蒸干，冷却后加lml吡啶溶解残渣，加入45滴溶液I和12滴溶液，溶液显红色并逐渐消失为阳性反应。用于薄层色谱检查，将1g亚硝酰铁氰化钠溶于10氢氧化钠乙醇（11）的溶液中，喷洒后，显红色或紫色斑点。（4）磷酸溴试剂检查强心甙。溶液I：10磷酸乙醇溶液。溶液：溴化钾饱和溶液溴酸钾饱和溶液25盐酸溶液(1l1)。用于薄层色谱检查，取溶液I喷洒后，125加热12min，紫外光灯下观察。再将薄层板烤热，趁热喷溶液，不同的强心苷显示不同的颜色斑点

20、。（5）醋苷硫酸（Liebermann-Burchard）试剂检查甾体、甾体皂苷、三萜类及强心苷。取0.10.2mg样品，置于白瓷反应板上，加入0.3ml醋酐，使样品溶解，沿边缘滴入硫酸，出现红紫蓝绿色，最后褪色为甾体皂甙，三萜皂甙只能呈黄红紫等。（6）三氯醋酸氯胺T试剂检查洋地黄毒甙元衍生物和2，6去氧糖苷。25三氯醋酸乙醇（氯仿）溶液4ml与3氯胺T溶液1ml混匀。喷洒后，100加热数分钟，于紫外光灯下观察。洋地黄毒甙元的苷类显黄色荧光，羟基洋地黄毒苷元的甙类显亮蓝色荧光，异羟基洋地黄毒苷元的苷类呈灰蓝色荧光。洋地黄毒糖的苷（2，6去氧糖苷）在可见光下呈暗蓝色。强心苷的鉴定应由苷元（甾体母

21、核和不饱和五元内酯）和2去氧糖两部分共同证实。7、甾体、三萜及其苷的鉴定试剂（1）三氯化锑试剂检查甾体、萜类、皂苷。25g三氯化锑溶于75ml氯仿中。喷后100加热5min，不同的皂苷元在可见光或紫外光灯下显不同颜色。（2）三氯醋酸试剂检查皂甙。3.3g三氯醋酸溶于10ml氯仿，再加入12滴30过氧化氢溶液。将样品的氯仿溶液滴在滤纸上，加试剂l滴，加热至60，生成红色紫色为甾体皂甙；加热到100始见显色为三萜皂甙o（3）硫酸：甲醇（11）试剂 喷后加热，不同皂苷元可显红褐色、紫色、黄色或黑色。所显颜色与温度无关。（4）氯磺酸：乙酸（11）试剂 喷后130加热5min，各种皂苷元可显天蓝色、紫色

22、、粉红色、淡棕色等，在紫外光灯下也显不同的荧光。（5）香草醛硫酸试剂检查高级醇类、酚类、甾体、萜类、芳香油。1g香草醛溶于100ml硫酸中，或0.5g香草醛溶于100ml硫酸乙醇(41)中。喷洒后，室温、120加热观察，显示红、蓝、紫等各种颜色斑点。8氰苷鉴定试剂（1）苦味酸试纸 取适当大小的滤纸，浸入苦味酸饱和溶液中，浸透后取出，晾干。再浸入10碳酸钠溶液内，迅速取出，晾干即得。取样品粉末0.5g置试管中，加水混合均匀，加入稀硫酸数滴。在试管口夹放一条苦味酸试纸（试纸不能接触到药液），塞紧。将试管在沸水浴中加热数分钟，试纸变成红色，表明含氰苷。（2）普鲁士蓝试验溶液I：10硫酸亚铁溶液（用前

23、配制）。溶液：5三氯化铁溶液。取样品粉末0.5g置试管中，加水湿润，立即用经10氢氧化钾溶液湿润的滤纸将试管口包紧，于热水浴上加热10min后，在滤纸上加溶液I、稀盐酸和溶液各1滴，滤纸显蓝色为阳性。三、挥发油鉴定试剂1、茴香醛硫酸试剂硫酸1m1加至50ml冰醋酸中，冷却后加入茴香醛05ml(必须临用时配制)。喷洒后,105加热，挥发油中各成分显不同颜色。2、碘化钾冰醋酸淀粉试剂检查过氧化物。溶液I：4碘化钾溶液10ml与冰醋酸40ml混和，再加锌粉一小勺过滤。溶液：新制的1%淀粉溶液。先喷溶液I，5min后大量喷溶液，直至薄层透明为止。显蓝色斑点为过氧化物。3、2，4-二硝基苯肼试剂lg 2

24、，4-二硝基苯肼、36盐酸l0ml溶于1000ml乙醇中。喷洒后，显黄红色斑点为阳性反应。4、硝酸铈试剂检查醇类化合物。硝酸铈6g溶于2.5100 ml硝酸溶液中，喷洒后，黄色背景上显棕色斑点为阳性反应。5、钒酸铵（钠）8羟基喹啉试剂检查醇类化合物1钒酸铵（钠）溶液1ml和8羟基喹啉的6乙醇溶液1ml混和，用30ml苯萃取，分取灰蓝色的苯溶液为试剂。喷洒后，微加热，灰蓝色背景上显淡红色斑点为阳性反应。挥发油组成复杂，需依据结构特征如醇、醛、酮、酚、醚、酯、内酯等选择鉴定试剂。四、生物碱鉴定试剂1、改良碘化铋钾试剂为生物碱通用显色剂。溶液I：0.85g次硝酸铋溶于10ml冰醋酸，加水40ml。溶

25、液：8g碘化钾溶于20ml水中。溶液I和溶液等量混和，于棕色瓶中可以保存较长时间。目前市场上有碘化铋钾试剂可供直接配置：7.3g碘化铋钾、10ml冰醋酸加水60ml。取lml样品的稀酸溶液，加1滴2滴试剂，产生桔红色浑浊或沉淀为阳性反应。作为薄层色谱显色剂，取混和液1ml、醋酸2ml、水10ml混和即得。喷洒后呈桔红色斑点为阳性反应。2、碘化汞钾为生物碱通用沉淀试剂。1.36g氯化汞和5g碘化钾各溶于20 ml水中，将氯化汞溶液慢慢加入碘化钾溶液，混合后，加水至100ml。取lml样品的稀酸溶液，加12滴试剂，产生类白色沉淀为阳性反应。3、硅钨酸试剂为生物碱通用沉淀试剂。1g硅钨酸溶于20 m

26、l水中，加10盐酸使成pH2左右。取1 ml样品的稀酸溶液，加入12滴试剂，产生白色至褐色沉淀为阳性反应。4、碘化铂钾（碘铂酸）试剂为生物碱通用沉淀试剂。10六氯铂酸3ml和97ml水混合，加6碘化钾溶液100ml，混合均匀（临用前配制）。取1 ml样品稀酸溶液，加l2滴试剂，不同生物碱显不同颜色沉淀。5、碘碘化钾试剂为生物碱沉淀剂。1g碘及10g碘化钾溶于50ml水中，加2ml醋酸，再用水稀释至100ml。取1 ml样品稀酸溶液，加入试剂12滴，产生棕色或褐色沉淀为正反应。6、苦味酸试剂为生物碱通用沉淀试剂。苦味酸1g溶于100ml水中。取1 ml样品中性溶液，加入试剂12滴，产生黄色晶形沉

27、淀。7、鞣酸试剂为生物碱通用沉淀试剂。鞣酸1g用1ml乙醇溶解后，加水至10 ml 。取lml样品稀酸溶液，加入试剂12滴产生白色至棕黄色沉淀。8、硫酸铈硫酸试剂检查生物碱及含碘化合物。0.1g硫酸铈悬浮于4ml水中，加三氯醋酸1g，加热至沸，放冷，逐滴加入硫酸直到浑浊消失为止。喷洒试剂后，110加热数分钟，呈色（不同生物碱显不同的颜色）。9、钒酸钠硫酸试剂检查生物碱。1g钒酸钠溶于100ml硫酸中。喷洒试剂后，不同生物碱产生不同颜色，如莨菪碱显红色，马钱子碱显血红色，士的宁显蓝紫色，奎宁显淡橙色，吗啡显棕色等。10、雷氏铵盐试剂检查水溶性生物碱。2硫氰化铬铵溶液（临用时配制）。取1ml样品的

28、弱酸性水溶液（pH56），加入12滴试剂，产生暗红色沉淀为阳性反应。11、Ehrlich试剂检查吡咯、吲哚类生物碱。1g对二甲氨基苯甲醛溶于25ml 36盐酸和75ml甲醇混合溶液中。取1ml样品的稀酸溶液，加人数滴试剂，加热，显紫红或青紫色为阳性反应。五、鞣质类鉴定试剂1、氯化钠明胶试剂检查鞣质。1g明胶溶于50ml水中（60水浴中加热），加入10g氯化钠，使完全溶解后，用水稀释到100ml。取1m1样品的60水浸液，加入12滴试剂，产生白色浑浊或沉淀2、对甲苯磺酸试剂。检查鞣质、甾体、黄酮类。20对甲苯磺酸氯仿溶液。薄层色谱上喷洒试剂后，100加热5min显出不同颜色的斑点。3、新鲜石灰水

29、试剂检查鞣质。取1ml样品的热水提取溶液，加新鲜石灰水上清溶液数滴，产生青灰色沉淀为可水解鞣质，产生棕或棕红色沉淀为缩合鞣质。六、氨基酸、多肽、蛋白质鉴定试剂1、茚三酮试剂检查2氨基酸及含有2-氨基酸的肽类、氨基糖和蛋白质。0.2g茚三酮溶于l00ml正丁醇中，加冰醋酸3ml。或者，0.2g茚三酮溶于l00ml乙醇或丙酮中。取1ml样品的冷水浸液，加入23滴试剂，沸水浴上加热5min放冷，显蓝色或蓝紫色。2、吲哚醌试剂检查氨基酸、多肽。吲哚醌1g溶于100ml丙酮中，加入10ml醋酸。作薄层色谱显色剂，喷洒试剂后，100110加热l0min，显蓝、红、桃红或棕色斑点。3、1，2-萘醌4磺酸钠试剂检查氨基酸。0.02g l，2萘醌4磺酸钠溶于l00ml5碳酸钠溶液中，新鲜配制。喷洒试剂后，室温晾干，不同氨基酸出现不同的颜色。4、双缩脲试剂检查多肽、蛋白质。七、有机酸鉴定试剂1、溴酚蓝试剂检查有机酸。0.1溴酚蓝的乙醇溶液。作薄层色谱显色剂，喷洒后，蓝色背景上呈黄色斑点。如不明显，可再喷氨水，然后暴露在盐酸气体中，则为黄色背景上呈蓝色斑点。2、芳香胺还原糖试剂检查有机酸。5g苯胺和5g木糖溶于100ml 50乙醇中。作薄层色谱显色剂，喷洒试剂后，125130加热至出现棕色斑点。3、吖啶试剂检查有机酸。0.005的吖啶乙醇溶液。喷洒试剂后，于紫外光灯下观察，显黄色荧光