2300份成年人脑脊液培育及菌株耐药分析.docx

1、2300份成年人脑脊液培育及菌株耐药分析2300份成年人脑脊液培育及菌株耐药分析【摘要】 目的 总结我院2002年1月至2005年6月送检的2300份成年人脑脊液的培育及药敏情形，供临床诊断和医治参考。方式 采纳美国DADE公司的Microscan Walkaway 40全自动细菌鉴定及药敏分析系统进行细菌鉴定及药敏测定。结果 在2300份脑脊液标本中，检出阳性数180份%)，其中细菌144株(革兰阳性菌98株，革兰阴性菌46株)，真菌26株，结核分枝杆菌10株。链球菌和肠球菌对青霉素灵敏，万古霉素对革兰阳性球菌均有较高的抗菌活性；革兰阴性菌对经常使用药物头孢噻肟和头孢曲松的灵敏性较差，碳青霉

2、烯类、氨曲南对革兰阴性菌有较好的抗菌活性；部份脑膜炎由结核杆菌及真菌所致。结论 本组脑膜炎以院内感染为主，提示临床医生应依照脑膜炎患者的特点，个体化用药，合理利用抗生素。 【关键词】 脑脊液报 病原菌 耐药性 Analyses on the pathogens and their resistance to antibiotics ABSTRACT Objective To analyze the pathogenic results and drug resistance of bacteria isolated from 2300 cerebrospinal fluild specimen

3、s of adults from 2002 to 2005 so as to provide evidence for clinical diagnosis and therapy of meningitis. Methods The bacteria identification and the antimicrobial susceptibility were assayed by automatic bacteria culture device Microscan Walkaway 40 from DADE Co. Results The positive rate of pathog

4、ens was % (180/2300) from 2300 cerebrospinal fluild were 144 strains of bacteria which include 98 Gram positive bacteria and 46 Gram negative bacteria, 26 fungi, and 10 Mycobacterium tuberculosis. Streptococcus spp. and Enterococcus spp. were sensitive to penicillin, all the Gram positive cocci were

5、 sensitive to vancomycin; the Gram negative bacteria were resistant to routine antibiotics such as cefotaxime and ceftriaxone, while they have high percentage of susceptibility to aztreonam and carbapenems and some cases were infected with Mycobacterium tuberculosis and fungi. Conclusion It suggests

6、 that clinicians should pay more attention to personalized therapy based on the characteristic of meningitis so as to attain rational use of antibiotics. KEY WORDS Cerebrospinal fluild; Pathogen; Drug resistance 病原菌性脑膜炎通常包括化脓性细菌所引发的急性化脓性脑膜炎和结核分枝杆菌、深部真菌所引发的慢性脑膜炎，对人类危害极大，位居世界感染性疾病病死率的前十位1。病原菌性脑膜炎的诊断依托

7、脑脊液的检查，脑脊液的细菌培育及药敏结果对临床医生的诊断、用药、疗效判定有着重要的作用2。随着社会环境、医疗手腕的不断改变，病原菌性脑膜炎的病原体组成、药敏情形值得探讨。本文对四川大学华西医院2002年1月至2005年6月2300份脑脊液培育结果分析报导如下。 1 材料与方式 研究对象 四川大学华西医院2002年1月至2005年6月送检的2300份脑脊液标本。 标本搜集 以无菌技术搜集脑脊液35ml，置无菌容器中当即送检。 分离培育 将送检的脑脊液当即接种于已预温的兔血琼脂和不含万古霉素的巧克力平板和葡萄糖肉汤增菌液中，置5%10% CO2孵箱，培育24h后观看结果，假设肉汤增菌液中呈混浊或有

8、菌膜产生，再挑取培育液或菌膜转种于血平板中，进行细菌分离培育，鉴定步骤按全国临床查验操作规程进行。实验所用的兔血琼脂、不含万古霉素的巧克力平板和葡萄糖肉汤增菌液均为华西医院临床微生物实验室制作，经质量检查合格后利用。 细菌的鉴定与药敏 实验利用的仪器为美国DADE公司的Microscan Walkaway 40全自动细菌鉴定及药敏分析系统(Dade MicroScan Inc., West Sacramento,CA, USA)，依照美国临床实验室标准化研究所(CLSI/NCCLS)(2004年)文件标准，微量稀释法测得的MIC值判读细菌药敏结果为灵敏(S)、中介(I)、耐药(R)。头孢他啶(

9、30g)与头孢他啶/克拉维酸(30g/10g)和头孢噻肟(30g)与头孢噻肟/克拉维酸(30g/10g)抑菌圈直径之差大于5mm判定为产ESBLs株。 质控菌株 大肠埃希菌ATCC25922，金葡菌ATCC25923和铜绿假单胞菌ATCC27853均由卫生部临床查验中心提供。 2 结果 一样情形 在2300份成年人脑脊液标本中，检出阳性数180份%)，其中细菌144株(革兰阳性菌98株，革兰阴性菌46株)，真菌26株，新型隐球菌22株，似酵母样菌4株，结核分枝杆菌10株。神经外科、感染科、神经内科等科室阳性分离率较高、。 脑脊液分离菌的药敏分析 用微量稀释法测得的MIC值将结果判定为灵敏、中介

10、、耐药三类，Microscan Walkaway 40系统的药敏结果判定标准与美国临床实验室标准化研究所(CLSI/NCCLS)文件标准相一致。结果显示，从脑脊液中分离出的鲍曼/溶血不动杆菌对亚胺培南、氨曲南的灵敏性较好，耐药率别离为0和%；对阿米卡星(耐药率%)、复方磺胺甲口恶唑%)、环丙沙星%)、庆大霉素%)、头孢曲松%)、 头孢噻肟%)和妥布霉素%)的灵敏性较差。所分离的7株大肠埃希菌中3株产ESBLs，对亚胺培南和哌拉西林/三唑巴坦的灵敏性好，耐药率均为0，对阿米卡星、头孢西丁、妥布霉素的灵敏性也较好。 在180份阳性培育中革兰阳性菌98株，占%。显示万古霉素仍然维持对革兰阳性球菌较高

11、的抗菌活性，灵敏率达100%；利福平、庆大霉素、复方磺胺甲口恶唑、克林霉素对革兰阳性球菌也有较好的抗菌活性，革兰阳性球菌对青霉素高度耐药。在98株阳性菌中凝固酶阴性葡萄球菌有70株，占革兰阳性菌的%，均对苯唑西林高度耐药，这与Huang等对14株细菌性脑膜炎患者脑脊液中分离出的凝固酶阴性葡萄球菌的药敏结果大体相同3。70株凝固酶阴性葡萄球菌中表葡菌30株，25株表葡菌中有23株为MRSE，高达%。另外在98株阳性菌中，链球菌属为12株%)， 肠球菌属6株 %)，青霉素和万古霉素对链球菌和肠球菌均有较好的抗菌活性4。 脑脊液标本所分离的结核分枝杆菌 在2300份脑脊液标本中共分离出结核分枝杆菌1

12、0株，占阳性培育的%。 脑脊液标本所分离的真菌 在2300份脑脊液标本中共分离出真菌26株，其中新型隐球菌22株、热带念珠菌1株、还有4株似酵母样真菌。 3 讨论 细菌性脑膜炎对人类危害极大，因此初期诊断、初期及合理的医治超级重要，应力争在给予抗菌药物前进行脑脊液的涂片革兰染色检查、脑脊液培育和血培育；有皮肤瘀斑者取局部瘀斑作涂片检查细菌。培育获阳性结果后做药敏实验。及早开始抗菌药物的体会医治对抢救患者生命相当重要。医师在获知细菌培育和药敏实验结果后，依照体会医治疗效和药敏实验结果调整用药。如病原诊断明确，应酌情调整抗生素品种，其剂量、疗程要足够，选用能透过血脑屏障的杀菌药如青霉素、第二、三代

13、头孢菌素等2。由于脑脊液细菌数量少，某些细菌如脑膜炎双球菌对外界环境抗击力低，标本搜集和送检进程中难以保证细菌存活。因此为提高脑脊液细菌的阳性检出率应做到搜集标本尽可能在利用抗菌药物之前，及时送检并接种，并避免干燥和幸免日光直射，天气严寒时做好保温工作，如有可能最好在病床旁接种标本5，6。 本研究中引发社区取得性脑膜炎的病原菌中脑膜炎奈瑟菌仅2株，肺炎链球菌2株，金葡菌4株，未分离出流感嗜血菌；在常引发院内取得性感染的病原菌中，凝固酶阴性葡萄球菌有70株，肠杆菌科细菌14株，不动杆菌属细菌20株，与Hussein7和Celal8等的结果有所不同，这与患者来源有专门大关系。本院患者多由基层医院转

14、送，大多有较严峻阻碍机体防御功能的基础疾病，加上免疫抑制剂和肾上腺皮质激素的利用，抗感染免疫功能受损而使致病菌更易入侵，还有占送检数%的神经外科患者多有颅脑侵入性操作，故本研究细菌培育阳性脑膜炎患者多为院内感染，多数菌株有不同程度的耐药性9，10。2300份标本中革兰阳性球菌98株，其中以表葡菌为代表的凝固酶阴性葡萄球菌对青霉素灵敏性很差，链球菌和肠球菌对青霉素灵敏，万古霉素对革兰阳性球菌均有较高的抗菌活性，利福平、庆大霉素、复方磺胺甲口恶唑对革兰阳性球菌也有较好的抗菌活性，提示当葡萄球菌对苯唑西林耐药时宜选用万古霉素或去甲万古霉素，酌情联合利福平2，11；链球菌引发的细菌性脑膜炎常规利用青霉

15、素或氨苄西林，当对青霉素耐药时，可选用第三代头孢菌素或万古霉素2；肠球菌引发的细菌性脑膜炎常规大剂量利用青霉素或氨苄西林，当对青霉素耐药或患者对其过敏时可选用万古霉素等糖肽类抗生素4。革兰阴性菌46株，对头孢噻肟和头孢曲松的灵敏性较差，常为多重耐药菌株，亚胺培南、氨曲南对革兰阴性菌那么有较好的抗菌活性，由于细菌性脑膜炎患者利用亚胺培南易诱发抽搐等中枢神经系统不良反映，不推荐用于细菌性脑膜炎患者，如临床上确需利用，可选择美罗培南2。脑脊液的细菌培育和药敏实验结果是临床医师诊断和医治细菌性脑膜炎，合理选用抗生素，提高疗效，幸免抗生素滥用的重要依据。为降低医院内感染化脓性脑膜炎的发生率，应踊跃医治患

16、者原发疾病，尽可能缩短住院时刻，不滥用抗生素，增强医院消毒治理，操纵颅脑手术和腰穿的感染，改善患者的免疫功能，操纵局部感染，对老年人和儿童等免疫能力低下的患者应该重点监测，以减少感染的机遇。【参考文献】 1 贺斌，赵忠新，等. 急性细菌性脑膜炎和病毒性脑膜炎的辨别诊断J. 临床神经病学杂志，2002，15(1)：292 汪复，吴永佩，张洪元，等. 抗菌药物临床应用指导原那么M. 北京，2004：383 Huang C R, Lu C H, Wu J J, et al. Coagulase negative staphylococcal meningitis in adults: clinical characteristics and therapeutic outcomes J. Infection,2005,33(2):564 Pintado