1、实验动物学复习题实验动物学复习题(总5页)名词解释1.人类疾病动物模型:是指生物医学研究中建立的具有人类疾病模拟表现的动物实验对象和相关实验材料。2.实验性动物模型:是指研究者通过使用物理的、化学的和生物的致病因素作用于动物,造成动物组织、器官或全身一定的损害,出现某些类似人类疾病时的功能、代谢或结构形态方面的病变,即人工地诱发出特定的疾病,以供研究使用。3.实验动物:经人工饲育,对其携带的微生物进行控制,遗传背景明确或者来源清楚的,于科学研究、教学、生产、检定以及其他科学实验的动物。4.实验用动物:是泛指用于各类实验的所有动物,即用于实验的动物。广义的实验用动物包括实验动物、野生动物、经济动
2、物和其他动物。狭义的试验用动物,即国内通常所说的试验用动物,特指尚无国家标准、行业标准或地方标准但又用于各类实验的动物,以示与实验动物的区别,故不包含实验动物。5.近交系动物:根据遗传基因调控原理,采用近交方法,使动物基因纯化而获得的遗传基因高度均一的实验动物。原则:Reduction(减少)是指在科学研究中,用较少量的动物获取同样多的实验数据或使用一定数量的动物能获得更多实验数据的的科学方法。Replacement(替代)是指使用其他方法而不用动物所进行的试验或其他研究课题并达到研究目的的方法。或者是使用没有知觉的实验材料代替以往使用神志清醒地获得脊椎动物进行试验的一种科学方法。Refine
3、ment(优化)是指在符合科学原则的基础上,通过改进条件、善待动物、提高动物福利;或完善试验程序和改进实验技术,避免或减轻给动物造成的与实验目的无关的疼痛和紧张不安的科学方法。7.无菌动物:就是指动物身上不可检出一切生命体的动物。进一步说,是指用现有的检测技术在动物体内外的任何部位均检不出任何微生物和寄生虫的动物。级动物:无特殊病原体级动物。除清洁动物应排除的病原外,不携带主要潜在感染或条件致病和对科学实验干扰大的病原。9.隔离系统:设施采用无菌隔离装置以保持无菌或无外来污染的状态。工作人员通过隔离器上组装的无菌手套进行操作,不直接接触动物。隔离系统内的空气、饲料、垫料、水及实验用品要先进行灭
4、菌处理,动态传递须经过特殊的传递系统。该环境适用于饲育无特定病原体动物、悉生动物及无菌动物,可用于特殊动物的保护、动物的繁殖及实验、动物的检疫隔离等。10.清洁级动物:除普通级动物应排除的病原(不人兽共患病原和动物烈性传染病病原)外,不携带对动物危害大和对科学研究干扰大的病原。11.免疫缺陷动物:是指由于先天性遗传突变或用人工方法造成一种或多种免疫系统组成成分缺陷的动物。因其与人类在体内免疫系统缺陷的相似性,而广泛应用于免疫学、肿瘤学的研究。12.转基因动物:将外源重组基因转染并整合到动物受体细胞基因组中,从而形成在体表达外源基因的动物,称为转基因动物。简答题1.大鼠给药方法(给药途径、常用给
5、药量、注意事项) 注射:腹腔 1-3 肌肉 静脉 1-2 皮下 灌胃:1-4ml2.小鼠 注射:腹腔 肌肉 静脉 皮下 灌胃:.注意事项 灌胃:左手固定大鼠、小鼠,使动物呈垂直体位,右手持灌胃器。先大致测量一下从口角到最后肋骨之间的距离,作为灌胃针插入的长度。然后沿右口角插入口腔,与食管成一直线,再将灌胃针沿上颚壁缓慢插入食管,如动物无挣扎等症状,方可注入药液。若针头插入时遇到阻力或动物挣扎厉害,应抽出灌胃针重新插入,切记不可强行插入,否则易造成动物损伤,若误插入气管,动物会立刻死亡。有一种情况需特别注意,由于注射针插入时倾斜可能使灌胃针插入动物对侧腋下部,虽然注入药物后动物不会立刻死亡,但一
6、二天后动物会出现异常症状。 皮下注射:选择皮下组织比较疏松的部位,大小鼠常用注射部位有颈背、腋下、侧腹和后肢。先用酒精棉球消毒需注射部位的皮肤,再将皮肤提起,进针时,从头部方向刺入皮下,再沿体轴方向将注射针推进5-10mm,若针尖易左右摆动,表明已刺入皮下。然后轻轻抽吸,如无回流物可缓慢注射药液。注射完毕缓慢拔出注射针,用干棉球压针刺部位,以防止药液外漏。 皮内注射:常选择背部脊柱两侧皮肤。需先将动物注射部位脱毛,酒精棉球消毒局部,用左手将皮肤捏成皱襞,右手持注射针,将针头与皮肤大约呈30角刺入皮下,然后使针头向上挑起并稍刺入,即可注射。注射后,皮肤表面可见鼓起一小丘,停留片刻拔出针头。需注意
7、针头号的选择,针头过小不易注射,针头过大药液易漏出。 肌肉注射:一般选择肌肉丰满而无大血管通过的臀部或大腿外侧或内侧肌肉。注射部位先用酒精棉球消毒,持注射针刺入肌肉,回抽无血方可进行注射。大小鼠一般选5号针头,应避开坐骨神经位置,否则会导致后肢瘫痪。 腹腔注射:部位为下腹部腹中线左右两侧1cm处,为避免伤及内脏,抓取固定动物时应使头稍向后低,使内脏移向上腹。注射部位消毒,右手持注射器在注射位置将针头刺入皮肤,针头到达皮下后,再稍向前进针,后以约45角刺入腹腔,针尖通过腹腔后抵抗力消失,回抽针栓,如无回血或液体方可注入药液。 尾静脉注射:大小鼠尾部有四根明显的血管,其中腹侧的一根为动脉,背部和侧
8、部为静脉,两侧的静脉较易固定,常作为静脉注射部位。操作时先将动物固定在固定器中,动物身体被固定住,尾部充分暴露。尾部用45-50温水浸泡半分钟或用酒精棉球反复擦拭使血管扩张,并可使表皮角质软化,用左手无名指从下面托起尾巴,以拇指和小指夹住尾巴的末梢,右手持4号或4号半注射器,沿与静脉平行方向,从尾下1/4处进针,针头刺入后,轻推药液,若无阻力表示针头已在静脉中,可继续缓慢推入药液;若轻推药液阻力较大,且有白色隆起,说明注射到皮下,需拔出针重新刺入。注射完毕后以干棉球按压止血或把尾巴向注射侧弯曲以止血。如需反复注射,应从尾末端开始进针,逐渐向尾根部移动。3.实验动物和实验用动物的主要区别是什么
9、(1)实验动物是指经人工繁育,对其携带微生物实行控制,遗传背景明确或者来源清楚的用于科学研究、教学、生产、检定以及其他科学实验的动物.(2)实验用动物是指一切用于各种实验的动物,其中除了符合严格要求的实验动物外,还包括经济动物、野生动物和观赏动物,统称为实验用动物。(3)实验动物可包括在实验用动物中。由于野生动物和经济动物及观赏动物与实验动物相比其生物学特性、遗传背景、微生物控制状态等都有一定的不确定性,应用这些动物进行科学实验其结果往往出现较大差异,从而降低了实验结果的可靠程度,因此,应严格区分实验动物和实验用动物。4.试举3例说明实验动物编号的方法主要有哪些(1)染色法:使用化学药品在动物
10、明显体位被毛上进行涂染识别的方法,一般用于短期实验经常应用的涂染化学药品有:涂染红色:%中性红或品红溶液。涂染黄色:3-5%苦味酸溶液。涂染咖啡色:2%硝酸银溶液。标记时用棉签或卷着纱布的玻璃棒故取上述溶液,在动物体的相应部位逆毛流方向涂上有色斑点,编号的原则是:“先左后右,先上后下”一般把涂在左前腿部记为I号,左侧腰部记为2号,左后腿为3号,头部为4号.腰背部为5号,尾部为6号.右前腿为7号,右侧腰部为8,右后腿9号,不涂色的为10号,用单一颜色可标记1-10号。如果动物数量超过10只可用两种颜色同时标记,即一种颜色代表十位.另一种颜色代表个位,这样可以标记到99;(2)穿耳孔法:用动物专用
11、打耳器在动物耳朵的不同部位打一小孔或打成缺口来表示一定号码的方法。打孔原则:左耳代表十位,右耳代表个位,这种方法可标记100只左右的动物。(3)标牌法:用金属制作的标牌固定在实验动物的颈部、耳朵或脚上,将分组编号写在卡片上,挂在动物饲养笼外。方法简单易识别、数量不限。5.小鼠和大鼠的最大安全采血量及最小致死采血量分别是多少最大安全采血量指一次采血不会引起动物死亡或者严重威胁其健康的采血量上限。通常为血容量的10-15%,成者体重的1%;最小致死量:一次采血可引起动物死亡的最小采血量,通常为血容量的20%以上。小鼠最大安全采血量为,最小致死采血量;大鼠最大安全采血量为1ml,最小致死采血量2ml
12、。6.实验动物麻醉过量时,可以采取什么对策 应根据过量的程度,采用不同的方式处理。如动物呼吸极慢而不规则,但血压和心搏仍照常时,可施行人工呼吸,并给苏醒剂。若动物呼吸停止,血压下降,但仍有心搏时,应迅速施行人工呼吸,同时注射50%的温热葡萄糖溶液、1:10,000肾上腺素及苏醒剂。若动物呼吸停止,而且心搏极弱或刚停止时,应用5%CO2和95%O2的混合气体人工呼吸,进行心脏按摩,注射温热的生理盐水和心脏按摩。心搏恢复后,注射50%葡萄糖及苏醒剂。常用苏醒剂有咖啡因、可拉明和山梗菜等。7.家兔消化系统的组成如何有何结构为家兔独有 (1)消化系统包括消化道和消化腺。消化道由口腔、咽喉、食道、胃、小
13、肠(十二脂肠、空肠、回肠)、大肠(盲肠、结肠、直肠)、肛门组成;消化腺包括唾液腺、耳下腺(腮腺)、颌下腺、舌下腺、眶下腺、肝脏、胰脏、脾脏。 (2)胸腔内构造与其它动物不同,胸腔中央由纵隔连于顶壁、底壁及后壁之间将胸腔分为左右两部,互不相通,纵隔由膈胸膜和纵隔胸膜两层纵隔膜组成。肺被肋胸膜和肺胸膜隔开,心脏又被心包膜隔开。因此,开胸后打开心包胸膜暴露心脏进行实验操作时,只要不弄破纵膈膜,动物不需要作人工呼吸。家兔回肠与盲肠相接处膨大形成一厚壁的圆囊,称圆小囊,这是兔独有的。8.简述动物术后的注意事项:(1)麻醉期未过时,注意动物保暖,术后观察与手术完全一致,恒温2530为宜,温差小于3。(2)
14、未清醒的动物注意摆正头颈部位置,保持呼吸通畅,及时清除口腔鼻腔的呕吐物及分泌物,以防误入气管。(3)术后疼痛可以引起实验动物的嘶叫、行为异常、饮食异常、心率加快甚至循环衰竭等。(4)手术创口一般用纱布或绷带固定,防止细菌感染,必要时采取抗生素治疗。(5)术后恢复期要喂饲高蛋白能量饲料,体质虚弱者应补救。(6)严格控制观察环境条件,加强消毒防疫,防止并发症发生。9.实验动物分组中设置对照组、空白对照组和标准对照组的含义是什么 (1)对照组指随机抽取的实验对象的子集.在这个子集中.每个单位不接受实验组成员所接受的某种特别的处理 (2)空白对照指不做任何实验的对照组或不给对照组以任何处理因素。常用于
15、评定测量方法的准确度以及观察实验是否处于正常状态,能明白地对比和衬托实验组的变化和结果,增加说服力 (3)标准对照组:生物生理、生化的某些项目也都有相应的标准,将观察测定的实验数值与规定的标准值相比较,以确定其正常与否的对照方法.标准对照不设立专门的对照组,而是用现有标准值或正常值做对照。例如,用一种已确认的药物作标准对照组,比较新药的药效。10.家兔开胸后打开心包膜暴落心脏进行实验操作时,不需作人工呼吸的原因 胸腔内构造与其它动物不同,胸腔中央由纵隔连于顶壁、底壁及后壁之网将胸腔分为左右两部,互不相通,纵隔由膈胸膜和纵隔胸膜两层纵隔膜组成。肺被肋胸膜和肺胸膜隔开,心脏又被心包膜隔开。因此,开
16、胸后打开心包胸膜暴露心脏进行实验操作时,只要不弄破纵膈膜,动物不需要作人工呼吸。11.屏障系统用来饲养什么级别的实验动物,并简述实验操作人员从进入到退出该系统的流程及注意事项。 (1)进入:先到第一更衣室处换拖鞋、脱衣、洗头、清洗身体尤其是双手双脚,进入第二更衣室擦干身体,戴口罩帽子,穿洁净衣裤、工作服,双手消毒,戴手套,风淋三分钟,依次进入洁净走廊、饲养室。 注意事项:换洁净工作服时要站立操作,洁净服不能接触到任何物品.进(出)洁净区必须按顺序穿戴洁净服。在不同的洁净区应穿不同的洁净服,禁止不更换或未按要求穿戴工作服进入洁净区。(2)退出:二作完毕后把废弃物、用过的用具和笼具一同整理装车,推
17、出房间,进入污染走廊并随手锁门。工作人员把运输车推入缓冲间后撤回污染走廊,经由人流缓冲间通道返回一更间,随手关好缓冲间门,进行更衣;将穿过的消毒服放置更衣室指定地点,待重新洗涤消毒处理。注意事项:工作完成后出屏障设施时,应脱掉工作服,并将其按规定放入收集箱内.洗手、洗脸或淋浴即可离开。离开清洁区时必须锁门.12.在做药物毒性实验时选择实验动物应注意的四个要点。 (1)动物的进化程度越高,对药物毒性的敏感性越好:(2)选用未成年的实验动物较为合适,因在动物迅速生长时期,可以发现药物对生长及各器官,包括对性器官成熟的影响3)选择做毒性试验时,动物应雌雄各半,因为它们对毒性物质反应有差异,而且动物数
18、量不宜太少,要满足统计学处理的要求;(4)实验要求至少采用两种不同种属的动物:一种为啮齿类(大鼠、小鼠、兔等);另一种为哺乳类(犬、猴等),一般采用大鼠和犬。三、问答1.请说明根据随机数据表如何将12只动物完全随机地分为3组。 先将实验动物按体重编号,再从随机排列表中随机指定第21行,舍去大于12的数,将0-11之间的数字一次录于实验动物号下。按预先规定,将随机数字为0-3的分人甲组,4-7的分入乙组,8-11分入丙组即可。2实验动物标准化的主要研究内容是什么 (1)实验动物标准化是指实验动物遗传背景清楚,微生物控制、环境、营养、饲养条件等均执行相应标准规定,动物实验达到规范化管理要求,常规公
19、认的动物实验捡测项目执行国家或行业标准,从而形成统一、科学、规范的实验动物管理体系,即实脸动物饲养管理和动物实验实行标准化管理。 (2)主要研究内容:实验动物遗传学质量标准化、实验动物微生物学质橄标准化、实验动物设施环境标准化和实验动物饲料营养标准化。 (3)我国把实验动物分为四个等级:一级:普通级动物:二级:消洁级动物;三级:SPF级动物无特定病原体动物;四级:无菌动物实验动物生产与动物实验环境标准化:开放环境:一级动物(普通级);屏障系统:清洁动物、SPF动物;隔离系统:无菌动物3.实验动物选择的基本要求如何 (1)选择与人的功能、代谢、结构和疾病特点相似的实验动物(2)选择遗传背景明确、
20、体内微生物得到控制或模型症状显著的动物(3)选用解剖、生理特点符合实验目的要求的动物(4)选择对实验因素最敏感的动物(5)选择与实验目的相适应的动物(6)选择要符合3R原则:替代、减少、优化原则(7)选择要注意动物福利4.家兔在生物医学中的应用主要有哪些,它们都分别利用了家兔的哪些生物生理学特点 (1)免疫学研究:免疫学研究中常用的各种免疫血消,大多数是采川家兔来制备的.家兔血清量产生较多,胸淋巴结明显,耳静脉大,易于注射和采血,其制品广泛地用于人、畜各类抗血清和诊断血清的研究。(2)生殖生理和避孕药的研究:利用家兔可诱发排卵的特点进行各种研究。也可用于避孕药的筛选研究。(3)皮肤反应实验:家
21、兔皮肤对刺激反应敏感,其反应近似于人。(4)眼科的研究:家兔的眼球甚大、几乎呈圈形,眼球体积约5-6cm2.重约3-4g,便于进行手术操作和观察。同时在同一只家兔的左右眼进行疗效观察,可以避免动物年龄、性别、产地、品种等个体差异,是眼科研究中最常用的动物。(5)微生物学研究:家兔对许多病毒和致病菌非常敏感,适用于各种微生物学的研究,如对过敏、免疫、狂犬病、天花、脑炎等的研究。5.比较SPF级与无菌实验动物在生物学特点、饲喂管理等方面的异同。 (1)形态学改变:消化系统:主要在肠道,无菌动物的肠道肌层薄,盲肠肥大,一般为SPF级动物的56倍。常因盲肠扭转或肠壁破裂死亡,肠粘膜绒毛增加,肝重量下降
22、。循环系统:心脏相对缩小。血液系统:白细胞增加且总数波动范围大,无菌动物较恒定。网状内皮系统:脾脏缩小,无三级滤泡,网状内皮细胞功能下降。(2)生理学改变:免疫功能由于免疫系统发育不完全,体内无细菌,无寄生虫,无抗体,比SPF级耐微生物敏感性弱。生长率:无菌条件下,对不同种属的影响不同,无菌鸟类高于SPF,无菌大小鼠无明显差别。代谢:无菌动物血中含N量少,肠管对水的吸收率低,代谢周期更长。营养:无菌动物肠道上皮细胞的更换率低,肠壁的物质交换也慢,因肠内无菌,不能帮助消化纤维素以提供机体所需营养。寿命:无菌大小鼠比SPF长寿。饲喂管理:SPF饲养于温湿度恒定的屏障系统,空气经过过滤,进入其中的所有物品都要求严格灭菌,工作人员进入时必须严格穿戴消毒过的隔离衣,饮水经高压消毒或的酸化水,或过滤净化水。无菌动物必须在与自然界隔绝的无菌隔离器内饲养,隔离器应对微生物隔绝,其内部空间级内容物能接近高压蒸汽或者化学药品的灭菌处理,其空间及内容物可被随时观察,可在不破坏其无菌环境前提下进行无菌操作,饮食换气等。无菌动物的水应无活的微生物和寄生虫及虫卵,必须经充分灭菌,且应补充灭活而破坏的营养成分,因其肠道无正常菌群,饲料中还必须补充这些细菌的营养成分,以保证其营养平衡。
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