细胞生物学.docx

1、细胞生物学细胞生物学1、细胞生物学（cell biology): 从细胞整体水平、亚显微结构水平和分子水平三个层面来研究细胞的结构及其生命活动规律的科学。2、内膜系统（endomembrane system）：细胞内结构、功能及其发生上相互密切关联的模型结构细胞器总称。主要包括内质网、高尔基复合体、溶酶体、各种转运小泡以及核膜（过氧化物酶体）等。3、细胞连接cell junction：是指细胞质膜的特定化区域，通过膜蛋白，细胞支架蛋白或者细胞外基质形成的细胞与细胞之间，细胞与胞外基质之间的连接方式4、细胞分化cell differentiation：细胞在形态结构和功能产生稳定差异性变化的过程

2、5、细胞凋亡apoptosis：一种有序的或程序性的死亡方法，是细胞接受某些特定的刺激信号后进行的正常生理应答反应5载体蛋白carrier protein：生物膜中运载离子或分子穿膜的蛋白质6协同转运cotransport：两种化学物质的协同穿膜运动，该两溶质分子的同时转运是由单个转运蛋白完成的。分为反向转运和同向转运两类。7信号识别颗粒SRP：由6个不同的多肽和一个小RNA分子构成RNP颗粒，识别并结合核糖体中合成出来的内质网信号序列，指导新生多肽及核糖体和mRNA附着到内质网膜上8细胞通讯cell communication：是指一个细胞发出的信息通过介质传递到另一个细胞并与靶细胞相应的受

3、体相互作用，然后通过细胞信号转导产生胞内一系列生理生化变化，最终表现为细胞整体的生物学效应的过程9受体receptor：是一中能够识别和选择性结合某种配体的大分子10管家基因house-keeping gene：是指所有细胞均表达一类基因，其产物是维持生命活动所必须的11转分化transdifferentiation：一种分化类型的细胞转化另一种分化类型的细胞的现象12细胞衰老cell aging;cell senescence：指体外培养的细胞经过有限次的分裂后，停止分裂，细胞形态和功能发生显著改变的过程13、信号肽（signal peptide） ：是蛋白质合成中最先被翻译出来的一段氨基酸

4、序列，通常由18-30个疏水氨基酸组成，能指引核糖体与内质网结合，并引导合成的多肽链进入内质网腔。细胞连接：细胞连接是多细胞有机体中相邻细胞之间通过细胞膜相互联系、协同作用的重要组织方式，在结构上常包括质膜下、质膜及质膜外细胞间几个部分，对于维持组织的完整性非常重要，有的还具有细胞通讯作用。信号斑（signal patch）：存在于完成折叠的蛋白质中，构成信号斑的信号序列之间可以不相邻，折叠在一起构成蛋白质分选的信号。微粒体(microsome)：在细胞匀浆和差速离心过程中获得的由破碎的内质网自我融合形成的近似球形的膜囊泡状结构,在体外实验中,具有蛋白质合成、蛋白质糖基化和脂类合成等内质网的基

5、本功能。肌质网(sarcoplasmic reticulum)：心肌和骨骼肌细胞中的一种特殊的内质网,其功能是参与肌肉收缩活动。1、生物膜结构流动镶嵌模型的主要特点。膜的流动性，膜蛋白和膜脂均可侧向运动。膜蛋白分布的不对称性，有的镶在膜表面，有的嵌入或横跨脂双分子层。2、跨膜运输的主要方式、特点及生物学功能。主要方式有：被动运输、主动运输、胞吞作用与胞吐作用一、被动运输（passive transport）通过简单扩散或协助扩散实现物质由高浓度向低浓度的跨膜转运。1、简单扩散：特点由高浓度向低浓度扩散；不消耗ATP;无需膜蛋白。2、协助扩散（facilitated diffusion）特点：速

6、率高。 有Vm。有特异性 与特定载体膜转运蛋白结合。 载体蛋白(carrier proteins）既介导被动运输也介导主动运输。与特定溶质分子结合，通过一系列构象改变介导溶质分子跨膜转运。通道蛋白(channel proteins) 只介导被动运输。无需与溶质分子结合。多为多次跨膜的离子通道，有的呈开放状态（如钾泄漏通道）；有的具选择性和门控性（又称门通道， 为什么水分子很容易通过生物膜？（水通道蛋白AQP既起到水通道的作用，有起细胞结合部粘着因子的作用）二、主动运输（active transport）特点；由载体蛋白介导（选择性和特异性）；逆浓度梯度(逆化学梯度)运输；需要与某种释放能过程相

7、耦联。基本类型 1.由ATP直接供能的主动运输（ 1）钠钾泵(Na+- K+- ATP酶）（2）钙泵（Ca2+- ATP酶）（3）质子泵：P-型质子泵、V-型质子泵、H+-ATP酶 2.间接消耗ATP供能的协同运输（cotransport） 由Na+-K+泵（或H+-泵）与转运蛋白协同作用（耦联），靠间接消耗ATP所完成的主动运输方式。在动物细胞主要是靠Na+泵、在植物细胞则是由H+泵完成。三、胞吞作用与胞吐作用 胞吞作用endocytosis：通过细胞膜内陷形成囊泡（胞吞泡），将外界物质裹进并输入细胞的过程。包括胞饮作用和吞噬作用。胞饮作用(pinocytosis) 吞入的物质为液体或极小的

8、颗粒物质；存在于白细胞、肾细胞、小肠上皮细胞、肝巨噬细胞和植物细胞 。吞噬作用(phagocytosis) 内吞较大的固体颗粒物质，如细菌、细胞碎片等；原生动物获取营养物质的主要方式。在后生动物中亦存在（如哺乳动物中的中性粒细胞和巨噬细胞具有极强的吞噬能力，保护机体)。 受体介导的胞吞作用：受体同配体结合启动内化作用,网格蛋白组装在网格蛋白的作用下形成网格蛋白衣被小泡进入胞质，脱去衣被蛋白、网格蛋白等；蛋白再循环胞内体分选溶酶体消化或穿胞运输 。胞吐作用（exocytosis）将细胞内的分泌泡或其他某些膜泡中的物质通过细胞质膜运出细胞的过程，也称外排作用。 组成型外排途径：真核细胞均从高尔基体

9、分泌囊泡向质膜运输以更新膜蛋白和膜脂、形成质膜外周蛋白、细胞外基质或作为营养成分和信号分子 调节型外排途径：分泌细胞产生分泌物(如激素、粘液或消化酶)储存在分泌泡内，受胞外信号刺激时分泌泡与质膜融合并将内含物释放出去比较各种跨膜运输方式的异同点。（被动与主动比较；胞吞与胞吐比较） 主动运输与被动运输的比较 3、钠钾泵、钙泵和质子泵的转运特点和功能 1）钠-钾泵（Na+-K+ ATPase）由两个大亚基(亚基)和两个小亚基(亚基)组成；亚基是跨膜蛋白,在胞质面有ATP结合位点;在亚基上有Na+和K+结合位点。 功能：维持细胞的渗透性，保持细胞的体积；维持低Na+高K+的细胞内环境；维持细胞的静息

10、电位。（2）钙泵（Ca2+ ATPase）胞质面有 Ca2+结合位点，一次可结合两个 Ca2+。Ca2+结合后使酶激活，并结合一分子 ATP,伴随着 ATP 水解,酶被磷酸化，Ca2+泵构型发生改变，结合的Ca2+转到细胞外侧被释放，此时酶发生去磷酸化，构型恢复到原始的静息状态。功能：维持细胞内较低的Ca2+浓度（胞内10-7M,胞外10-3M)；与信号传递有关：Ca2+浓度变化触发细胞内信号途径，导致相应的生理变化。 （3）质子泵：V型质子泵：位于泡膜上，水解ATP产生能量，但不自身磷酸化。从胞质中泵出H+入细胞器。维持细胞质中性和细胞器内酸性pH P型质子泵：位于真核细胞膜上，载体蛋白自身

11、磷酸化发生构象变化而协同运输 F型质子泵：位于细菌、线粒体内膜和叶绿体的类囊体膜。H+顺浓度梯度运动，所释放的能量与ATP合成耦联（ATP核酶）分泌蛋白的合成过程1：信号肽引导核糖体结合到内质网膜上 2：新生肽链到内质网腔的跨膜转运 3：蛋白质在内质网腔内的折叠 4：蛋白质在内质网腔内的糖基化 5：蛋白质由内质网向高尔基体的运输4、红细胞质膜蛋白及膜骨架的成分是什么？ 用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分析血影蛋白成分，红细胞膜蛋白主要包括血影蛋白（或称红膜肽）、锚蛋白、带3蛋白、带4.1蛋白和肌动蛋白，还有一些血型糖蛋白。膜骨架蛋白主要成分包括：血影蛋白、肌动蛋白、锚蛋白和带4.1蛋白等。5、膜蛋白

12、的类型 种类繁多, 是膜功能的主要体现者。据估计核基因组编码的蛋白质中约30%为膜蛋白。1、分类：根据膜蛋白与脂分子的结合方式，分为三类：外周蛋白（peripheral protein）膜内在蛋白（integral protein ）或整合蛋白脂锚定蛋白（lipidanchored protein）外周蛋白是水溶性蛋白，暴露在脂双层的外侧或内侧；与质膜以非共价键形式连接；改变溶液的离子强度甚至提高温度就可以从膜上分离下来。膜内在蛋白 整合蛋白多数为跨膜蛋白（tansmembrane proteins），是两性分子；与膜的结合非常紧密，只有用去垢剂才能从膜上洗涤下来，如SDS（离子型），Trit

13、onX-100（非离子型）。膜内在蛋白与膜脂的结合方式 7、简述细胞膜的基本特性。 答案要点：细胞膜的最基本的特性是不对称性和流动性。细胞膜的不对称性是由膜脂分布的不对称性和膜蛋白分布的不对称性所决定的。膜脂分布的不对称性表现在：膜脂双分子层内外层所含脂类分子的种类不同；脂双分子层内外层磷脂分子中脂肪酸的饱和度不同；脂双分子层内外层磷脂所带电荷不同；糖脂均分布在外层脂质中。膜蛋白的不对称性表现在：糖蛋白的糖链主要分布在膜外表面；膜受体分子均分布在膜外层脂质中；腺苷酸环化本科分布在膜内表面。膜的流动性是由膜内部脂质分子和蛋白质分子的运动性所决定的。膜脂的流动性和膜蛋白的运动性使得细胞膜成为一种动

14、态结构；膜脂分子的运动表现在侧向扩散；旋转运动；摆动运动；翻转运动；膜蛋白的分子运动则包括侧向扩散和旋转运动。简述细胞膜的生理作用。 答案要点：（1）限定细胞的范围，维持细胞的形状。（2）具有高度的选择性，（为半透膜）并能进行主动运输使细胞内外形成不同的离子浓度并保持细胞内物质和外界环境之间的必要差别。（3）是接受外界信号的传感器，使细胞对外界环境的变化产生适当的反应。（4）与细胞新陈代谢、生长繁殖、分化及癌变等重要生命活动密切相关14、钠钾泵（Na+K+ pump）：是动物细胞中由ATP驱动的将Na+输出到细胞外同时将K+输入细胞内的运输泵，实际上是位于细胞膜脂双分子层中的载体蛋白，是一种N

15、a+/K+ATP酶，在ATP直接提供能量的条件下能逆浓度梯度主动转运钠离子和钾离子。25、G蛋白：由GTP控制活性的蛋白，当与GTP结合时具有活性，当与GDP结合时没有活性。既有单体形式（ras蛋白），也有三聚体形式（Gs蛋白）。在信号转导过程中起着分子开关的作用。5、分子伴侣：又称分子“伴娘”，细胞中，这类蛋白能识别正在合成的多肽或部分折叠的多肽，并与多肽的一定部位相结合，帮助这些多肽的转移、折叠或组装，但其本身并不参与最终产物的形成。 3、比较主动运输与被动运输的异同。 答案要点：运输方向不同：主动运输逆浓度梯度或电化学梯度，被动运输：顺浓度梯度或电化学梯度；是否需要载体的参与：主动运输需

16、要载体参与，被动运输方式中，简单扩散不需要载体参与，而协助扩散需要载体的参与；是否需要细胞直接提供能量：主动运输需要消耗能量，而被动运输需要消耗能量；被动运输是减少细胞与周围环境的差别,而主动运输则是努力创造差别,维持生命的活力。1、 试论述Na+-K+泵的结构及作用机理。 2、 答案要点：1、结构：由两个亚单位构成：一个大的多次跨膜的催化亚单位（亚基）和一个小的单次跨膜具组织特异性的糖蛋白（亚基）。前者对Na+和ATP的结合位点在细胞质面，对K+的结合位点在膜的外表面。2、机制：在细胞内侧，亚基与Na+相结合促进ATP水解，亚基上的一个天门冬氨酸残基磷酸化引起亚基的构象发生变化，将Na+泵出

17、细胞外，同时将细胞外协同转运 两种溶质协同跨膜的过程。两种溶质运输方向相同称为同向协同运输，相反则称为反向协同运输。一：内质网（endoplasmic reticulum，ER）化学组成：磷脂酰胆碱含量丰富，鞘磷脂少；所含蛋白质比细胞膜多；标志酶：葡萄糖-6-磷酸酶形态结构：单位膜结构的小管、小泡或扁囊连接成的三维网状膜系统粗面内质网（重点）粗面内质网与外输性蛋白质的分泌合成、加工修饰及转运过程密切相关内质网功能：1：作为核糖体附着的支架（合成分泌性蛋白、内质网腔驻留蛋白、膜蛋白、溶酶体蛋白）;2:内质网为新生多肽链的正确折叠和装配提供了有利的环境（分子伴侣：帮助新生肽链其折叠、装配及转运，自

18、身不参与蛋白质的形成；分子伴侣蛋白共同特点是含有KDEL序列，也称驻留蛋白）；3：蛋白质的糖基化（内质网上为N-连接糖基化）；4：蛋白质的胞内运输二：高尔基体（Golgi Complex）标志酶：糖基转移酶 形态结构：小囊泡、大囊泡、扁平囊泡（顺面、形成面；反面、成熟面）；有极性 顺面高尔基复合体筛选与转运；中央扁平囊泡蛋白质的糖基化、糖脂及多糖合成；反面高尔基复合体蛋白质分选高尔基复合体：细胞内蛋白质运输分泌的中转站高尔基体功能：1：糖蛋白的加工合成 （O-连接糖基化）2：蛋白质的水解加工 3：胞内蛋白质的分选和膜泡定向运输的枢纽（经高尔基复合体单独分拣和包装的溶酶体酶，以有被囊泡的形式被转

19、运到溶酶体；分泌蛋白以有被囊泡的形式运向细胞膜或被分泌释放到细胞外；以分泌泡的形式暂时性地储存于细胞质中） 高尔基体蛋白滞留：特异信号是高尔基体膜蛋白的跨膜结构域；内质网回流运输：特异信号是内质网驻留蛋白KDEL序列； 溶酶体酶的甘露糖6磷酸分选途径（高尔基体反面的M6P受体蛋白）主要功能：将内质网合成的蛋白质进行加工、分类与包装，然后分门别类地送到细胞特定的部位或分泌到细胞外。 分选主要是依据蛋白质上的信号肽或信号斑 1、参与细胞分泌活动 2、蛋白质的糖基化及其修饰 3、进行膜的转化功能（mov文件）4、将蛋白水解为活性物质 5、参与形成溶酶体 6、参与植物细胞壁的形成7、合成植物细胞壁中的

20、纤维素和果胶质三： 溶酶体（lysosome）形态：单层膜，高度异质性 化学组成：多种酸性水解酶，酸性水解酶（标志酶）；ph为3.5-5.5，膜上有质子泵维持酸性环境溶酶体分类：内体性溶酶体：运输小泡和内体合并而成（无活性）吞噬性溶酶体：细胞膜包围大颗粒物质形成吞噬体后再与内体性溶酶体结合三级溶酶体：在次级溶酶体作用到末期时还残留一些未被消化和分解的物质，并保留在溶酶体内，这种溶酶体称为残余小体（residual body）异溶酶体：底物为外源性异物 自噬溶酶体：底物为内源性物质溶酶体功能：1:分解外来异物和老损细胞器 2：物质消化细胞营养 3：免疫防御 4：参与激素的合成、释放和细胞内激素的

21、降解 5：个体发生、发育与溶酶体有关的疾病：矽肺、类风湿性关节炎四、过氧化物酶体过氧化物酶体中的酶：氧化酶和过氧化氢酶； 标志酶：过氧化氢酶五、囊泡运输 衣被小泡在细胞内沿微管或微丝运输囊泡形成及转运过程：出芽运输停泊融合衣被蛋白的主要类型：网格蛋白、COPI、COPII网格蛋白：质膜内体、高尔基体内体、高尔基体溶酶体COPI：高尔基体内质网 COPII：内质网高尔基体在网格蛋白结构外框与囊膜之间的间隙中填充着衔接蛋白（adaptin）；囊泡颈部有缢断蛋（ dynamin ） 。缢断蛋白：膜囊芽出时，小泡断离形成GTP耗能。COP有被囊泡的形成：Sar蛋白亚基与GDP结合时，处于非活性状态；当

22、与GTP结合时，会被激活，并导致Sar-GTP结合于内质网膜上。此引发其它蛋白亚基组分在内质网膜上聚合、装配。COPI：蛋白亚基（ARF）类似于COP的Sar蛋白，即作为一种GTP结合蛋白，可调节控制外被蛋白复合物的聚合、装配及膜泡的转运。COPI功能：内质网逃逸蛋白的捕捉、回收转运（KDEL序列-回收信号）；高尔基体膜内蛋白的逆向运输（retrograde transport）囊泡与靶细胞的识别：在转运囊泡表面有一种VAMP（囊泡相关膜蛋白）类似蛋白，被称之为囊泡SNAREs（vesicle-SNAREs,v-SNAREs）；联接蛋白是存在于靶细胞器膜上的SNAREs的对应序列，被称之为靶S

23、NAREs（target-SNAREs,t-SNAREs）.二者互为识别，特异互补。囊泡运输的意义：1：内膜系统之间的物质传递的载体2：内膜系统重要的功能结构组分，但非稳定的细胞内固有成分3：内膜系统的统一性的重要物质基础线粒体（mitochondion）形态：光镜下呈线状、粒状或杆状；形态可变性：线状变为粒状（低渗膨胀） 粒状变为线状（高渗伸长） 短变长（生长）；排列异质性线粒体结构特征：线粒体是由双层单位膜套叠而成的封闭性膜囊结构；内膜与外膜构成线粒体支架；两层膜将线粒体内部空间与细胞质隔离，并使线粒体内部空间分隔成两个：内腔、外腔外膜：透过离子和小分子物质； 内膜：高度选择透过性，膜向内

24、腔突起形成嵴，膜上附着有基粒； 基粒：基粒是氧化磷酸化的结合部位，其本质是F0F1ATP合成酶 转位接触点：线粒体的内膜与外膜相互接触式膜间隙变狭窄，成为转位接触点，是物质进出线粒体的通道。线粒体特点：含酶最多的细胞器、内膜为膜蛋白最丰富的细胞器、唯一含DNA的核外细胞器两膜两腔：内膜、外膜、内腔（嵴间腔）、外腔（膜间隙或嵴内腔）线粒体基因组特点：突变率高，异质性，阈值效应线粒体增殖方式：间壁分离（鼠肝和植物产生组织）、收缩后分离（蕨类和酵母线粒体）、出芽（酵母和藓类）核编码蛋白向线粒体转运 转运方式：翻译后转运（膜结合核糖体合成的蛋白质为共翻译转运）导向序列：游离核糖体上合成的蛋白质的N端的

25、信号，又称转运肽转运特点：蛋白质特异线粒体转运肽决定作用、需要线粒体膜特异受体、从膜接触点进入、蛋白质折叠（需分子伴侣作用）、需要能量、需要转运肽转运方向：核编码蛋白质膜间腔、线粒体基质、线粒体内外膜转运过程（重点 以向基质转运为例）：1：前体蛋白在分子伴侣（热休克蛋白）的协助下在线粒体外去折叠 2：解折叠的多肽链与受体结合穿越线粒体膜（线粒体基质hsp70协助穿膜，需要消耗能量，非折叠蛋白通过转运酶与转位接触点结合） 3：多肽链切除转运肽，在线粒体基质内重新折叠（热休克蛋白促进折叠）线粒体功能：线粒体与能量代谢the power center；线粒体与遗传信息传递线粒体基因组；线粒体与细胞凋

26、亡7、膜泡运输（三种介导机制） 真核细胞特有的蛋白转运方式，各种蛋白通过转运泡，从高尔基体TGN区细胞各部位；（一）膜泡的形成 目前发现的三种不同类型的有被小泡： 网格蛋白有被小泡 COP 有被小泡 COP 有被小泡1、网格蛋白有被小泡 :小泡从高尔基体被转运到溶酶体、胞内体、液泡或质膜，小泡的结构同内吞作用。2、COP有被小泡 ： 由内质网向高尔基体的物质运输；跨膜受体在内质网腔中捕获并浓缩转运物质， COP蛋白、Sar蛋白和内质网膜受体装配小泡，并出芽；3、COP有被小泡：负责将逃逸蛋白（escaped proteins）返回内质网。内质网内正常的驻留蛋白的C端都有一段回收信号序列（ret

27、rieval signals ），如KDEL。转运泡一般将其排斥在外；如果有少数意外逃逸到高尔基体的CGN，会被CGN膜结合受体识别并形成COP小泡将其送回内质网。凡是送往高尔基体的蛋白质，如果没有回收信号序列，则不会返回内质网。1975年, G.Blobel和 B.Dobberstein 根据对信号序列的研究成果,正式提出了信号假说(signal hypothesis),要点是:(1)分泌蛋白的合成始于细胞质中的游离核糖体;(2)合成的N-端信号序列露出核糖体后,靠自由碰撞与内质网膜接触,然后靠N-端信号序列的疏水性插入内质网的膜;(3)蛋白质继续合成,并以袢环形式穿过内质网的膜;(4)如果

28、合成的是分泌的蛋白,除了信号序列被信号肽酶切除外,全部进入内质网的腔,若是膜蛋白,则由一个或多个停止转移信号将蛋白质锚定在内质网膜上。 信号假说证明: 基因重组实验 新蛋白复合物的发现与信号假说的补充信号识别颗粒(signal recognition partical, SRP)1981年发现了信号识别颗粒(signal recognition partical, SRP),是一种核糖核酸蛋白复合体,作用是识别信号序列,并将核糖体引导到内质网上。停靠蛋白 (docking protein, DP) ：SRP在内质网膜上的受体蛋白。 蛋白质共翻译转运的机理:信号假说 新信号假说的基本内容ER转运

29、蛋白质合成的起始。信号序列与SRP结合。核糖体附着到内质网上。 SRP释放与蛋白质转运通道的打开。信号序列与通道中受体结合。信号肽酶切除信号序列。膜蛋白的共翻译转运机理 起始转移信号(start-transfer signal)内含信号序列(internal signal sequence) 与单次跨膜蛋白停止转移肽(stop-transfer peptide)与单次跨膜蛋白Bip在ER蛋白的转移和装配中的作用研究发现进入内质网腔中的蛋白质片段很快被一些称为Bip的蛋白结合。Bip蛋白是重链结合蛋白 (heavy-chain binding protein) 的简称,因为它能够同IgG抗体的重

30、链结合。Bip是一类分子伴侣,属于Hsp70家族,在内质网中有两个作用：Bip同进入内质网的未折叠蛋白质的疏水氨基酸结合，防止多肽链不正确地折叠和聚合(图)。 蛋白质在内质网中的修饰 N-连接糖基化(N-linked glycosylation) 羟基化(hydroxylation) 形成脂锚定蛋白五、膜泡运输产生： 大多数运输小泡是在膜的特定区域以出芽的方式产生的。其表面具有一个笼子状的由蛋白质构成的衣被（coat），衣被在运输小泡与靶细胞器的膜融合之前解体。衣被具有两个主要作用：选择性的将特定蛋白聚集在一起，形成运输小泡相同性质的运输小泡具有相同的形状和体积。类型：笼形蛋白 COPI CO

31、PII与膜泡运输有关的马达蛋白有3类：一类是动力蛋白（dynein），可向微管负端移动；另一类为驱动蛋白（kinesin）可牵引物质向微管的正端移动；第三类是肌球蛋白（myosin）,可向微丝的正极运动。说明细胞分裂后期染色单体分离和向两极移动的运动机制？后期A假说(微管去聚合假说) 染色体动粒微管在动粒处去组装而缩短，在分子马达的作用下染色体向两极移动 .后期B 假说(纺锤体微管滑动假说) 极微管长度加长,极微管间产生滑动，两极之间的距离逐渐拉长，介导染色体向极运动。举例说明CDK激酶在细胞周期中是如何执行调节功能的?答：CDK1激酶（）与周期蛋白B结合, Cyclin B在G1期开始合成，通过S期到G2期达到最大含量，MPF开始表现激酶活性（CDK1激酶使一些蛋白磷酸化。如将核纤层蛋白磷酸化导致核纤层解体、核膜消失；将H1磷酸化导致染色体的凝缩等。），到G2晚期MPF活性到达最大并维持到M期的中期阶段，细胞周期运转到中期后，M期周期蛋白A和B降解