食品安全检测第二章样品前处理技术.docx

1、食品安全检测第二章样品前处理技术第二章样品前处理技术样品前处理:样品的制备和对样品中待测组分进 行提取、净化和浓缩的过程。在整个食品安全性的检 测分析中，70%80%甚至更多的时间用在样品的 前处理上，而给实验带来的误差有60%以上来自样 品的前处理。样品前处理的目的就是浓缩被測物质、消除基质 干扰、保护仪器、提髙方法的准确性、精密度、选择 性和灵敏度。主要的样品前处理方法：1、超声萃取；2、微波萃取；3、液一固萃取；4、 加速溶剂萃取；5、超临界萃取；6、固相萃取；7、 固相微萃取；8、基质分散固相萃取；9、液一液萃 取；10、微量化学法技术；11、液一液萃取；12、 柱层析样品制备的基本耍

2、求1、 食品危害残留物质分析,特点：基体复杀；目标化 合物检測限量越来越严格；某些危害残留物质在食品 样品中存在的浓度极低；各目标化合物的性质差异较 大；可能同时存在多种组分。2、 评价前处理方法是否合理，应考虑的因素：操作是 否简便、省时；被測组分的回收率是否高；成本是否 低廉；对人体及环埴是否产生影响。萃取:用有机溶剂等方法把被測物从试样中提取 出来，净化后供測定使用。萃取技术要求溶剂尽可能选择性溶解残留危害 物质，而不是不溶解和少量溶解食品基体，萃取效果 的关键是溶剂的选择，残留危害物质提取回收率的大 小直接决定整个分析步骤的精确度。分类:1、液一固萃取；2、超声萃取；3、微波 萃恥4、

3、液一液萃取；5、加速溶剂萃取；6、超临 界萃取1、 萃取技术 超声萃取超声萃取（SAE）就是在溶剂萃取过程中引入 超声波，提髙溶剂萃取的过程。基本原理：空化效应、热效应、机械作用。高频 声波空化作用产生的极大压力造成生物细胞及整个 生物体破碎，同时超声波产生的振动作用加强了胞内 物质的释放、扩散和溶解。影响SAE的因素:超声波的强度、频率、提取 时间、提取溶剂等。SAE的操作方法:将样品和溶剂放于密闭的容 器中，置于一定能量的超声波水浴中，数秒后拿出， 再放入、拿出2、 萃取技术 微波萃取微波萃取（MAE）就是在溶剂萃取过程中引入 微波，加速溶剂萃取的过程基本原理:（1）微波辐射能穿透萃取介质

4、到达 物料内部，物料吸收微波能，内部温度迅速上升，细 胞内部压力増大而破裂；（2）微波所产生的电磁场, 加速被萃取成分向萃取溶剂界面的扩散速率。微薄萃取工艺流程：微波萃取的设备：微波萃取罐、连续徹波萃取线。微波提取成套生产线工艺组成流程:粉碎、预处 理、微波提取、料液分离、浓缩系统等五个环节。MAE的影响因素:萃取溶剂、萃取温度、时间、 溶剂体积、试样中的水分或湿度、基体物质等。微波提取优点:微波辅助提取是里外同时加 热。没有髙温热源，消除了热梯度，有效地保护功能 成分；由于微波可以穿透式加热，提取的时间大大 节省；微波能有超常的提取能力，大大简化工艺流 程。微波提取没有热惯性易控制，所有參数

5、均可数 据化；微波提取物纯度高，可水提、醇提、油提; 溶剂用量少（可较常规方法少50%90%）; 微波设备是用电设备，不需配备锅炉，无污染、安全、 属于绿色工程；生产线组成简单，节省投资。3、 萃取技术 加速溶剂萃取加速溶剂萃取（ASE）就是采用常规溶剂在髙 温髙压条件下进行自动萃取的技术。基本原理:（1）提高温度（50200 C）能 加速溶质分子的解析动力学过程，减小解析过程的活 化能；降低溶剂的粘度，减小溶剂进入样品基体的阻 力；増加溶剂进入样品基体的扩散；降低溶剂和基体 样品的表面张力，有利于萃取物与溶剂的接触。（2） 升髙压力（10.320.6 MPa）使溶剂的沸点升髙； 可保证易挥发

6、性物质不挥发；在压力下可快速充满萃 取池。4、 萃取技术 超临界流体萃取超临界流体萃取（SPE）是以超临界流体作为萃 取剂，把所需要的组分从复杂的样品中提取出来的一 种分离技术。超临界流体性质:超临界流体的物理性质介干气 体与液体之间。超临界CO?的特点:1、在超临界状态下，流体 具有气液两相的双重特点；2、密度对温度和压力的 变化十分敏感；3、来源广，价格低廉；4、不燃烧、 不助燃、操作安全；无毒、易挥发、操作后残留物少;5、 对备无腐蚀；临界温度低。基圭厘理:超临界流体的溶解能力与其密度的关 系，即利用压力和温度对超临界流体溶解能力的影响 而进行。在萃取的过程中，超临界流体具有很好的流动性

7、 和渗透性，将超临界流体与待分离的物质充分接触, 使其有选择性地把极性大小、沸点髙低和分于量大小 不同的成分依次萃取出来;然后通过改变温度或压力 便超临界流体变成普通气体，被萃取物质析出，从而 达到分离提纯的目的。超临界萃取条件的选择:原料前处理（粒度、水 分含量等）；萃取圧力；萃取温度；流体的流量；改 性剂；萃取时间；分离条件（温度和压力）等。超临界萃取的特点:萃取和分离合二为一，不 存在物料的相变过程，不需回收溶剂，操作方便，萃 取效率高，而且能耗较少，节约成本；压力和温度 都可以成为调节萃取过程的参数，因此工艺流程短、 耗时少；超临界流体的极性可以改变，一定温度条 件下，只要改变压力或加

8、入适宜的夹带剂即可提取不 同极性的物质，可选择范围广；SFE全过程不用有 机溶剂，萃取物绝无残田溶剂，无污染；CO2容易 取得，且在生产过程中循环使用，真正实现生产过程 绿色化，降低生产成本；萃取温度低，可以有效保 留生物活性，而且能把髙沸点，低挥发性、易热解的 物质在其沸点温度以下萃取出来。1、液一液萃取；2、固相萃取；3、固相微萃取； 4、基质分散固相萃取；5、柱层析（凝胶、离于交换、 亲和分配、吸附柱层析等）1、 净化技术 固相萃取固相萃取（SPE）是在液一液萃取和液相色谱的 基础上发展起来的一种的萃取技术。基本原理:利用高效高选择性的固体吸附剂（固 定相）将液体样品中的目标化合物吸附，

9、使其与样品 的基体和干扰化合物分离，然后用合适的洗脱液（另 一种体积较小的溶剂）进行洗脱或加热解吸，达封分 离和富集目标化合物的目的。固相萃取的实质就是一种液相色谱分离,是一个 包括液相和固相的物理萃取过程。分离模式也与液相 色谱相同，分为正相、反相、离子交换等。固相萃取的类型:石墨碳仮相）-SPE、离子交换 树脂-SPE.金属配合物吸附剂-SPE、犍合硅胶 -SPE.聚合物吸附剂-SPE、免疫亲和吸附剂-SPE、 分子嵌入聚台物-SPE等。操作步骤:吸附剂的活化；加样；萃取；淋洗； 洗脱1吸附剂的活化:在样品萃取之前要用适当的溶 剂淋洗萃取柱，使吸附剂保持湿润；加样：加入一 定体积的被处理样

10、品溶液，便其完全通过吸附剂； 淋洗：用溶剂强度较弱的溶剂选择性洗去部分杂质;4洗脱：用溶剂强度较强的溶剂洗脱被測物。SPE的特点:可以获得高的回收率和高的富集 倍数；减少了高纯有机溶剂的用量，减少了对环埴 的污染，同时减少了有机溶剂中的杂质对被测分析物 的影响；无相分离操作，避免了乳化影响，易于收 集分析物组分；操作简单、快速、易于实现自动化;5但目标化合物的回收率和精密度低干液一液萃取。2、 净化技术 固相徹萃取固相微萃取（SPEM）是在固相萃取基础上发展 起来的新型萃取分离技术，是一种基于液一固吸附平 衡的样品富集方法，属于非溶剂型选择性萃取。基钮理:利用待测物在样品基质与萃取相之间 的非

11、均相平衝将棗合物涂层纤维浸润在水相萃取物 中，或保留在样品顶空使待測组分扩散吸附到石英纤 维表面的固定相涂层（顶空回相徹萃取），待吸附平 衡后，涂层纤维/进样头立即转移到GC或HPLC的进 样口。SPME的萃取模式主要有三种:1、直接法，即 将涂层纤维保留在样品中，主要用于半挥发性的气体 液体样品萃取；2、顶空法，即将涂层纤维放置在样 品顶空中，主要用于挥发性固体或废水水样萃取；3、 膜方法，将涂层纤维放在经过微波萃取及膜处理过的 样品中，主要用于难挥发性复杂样品的萃取。样品萃取:将SPME针管穿透样品瓶隔塑，插 入瓶中；推手柄杆使纤维头伸出针管，纤维头可以 浸入水溶液中（浸入方式）或直于样品

12、上部空间（顶 空方式），萃取时间大约2-30min;缩回纤维头, 然后将针管退出样品瓶。GC分析:将SPME针管插入GC仪进样口； 推手柄杆，伸出纤维头，热脱附样品进色谱柱；缩 回纤维头，移去针管。HPLC分析: 将SPME针管插入SPME/HPLC 接口解吸池，进样阀置于“Load”位置； 推丰柄 杆伸出纤维头，关闭阀密封夹； 将阀賈于“Inject”位置，流动相通过解吸池洗脱样品进样； 阀重新直于“Load”位直，缩回纤维头，移走SPME针管影响SPEM的因素:涂膜纤维性能、萃取时间、 离于强度、解吸附时间和温度等。SPEM的特点:集釆集、浓缩于一体，简单方便, 不造成二次污染。与液-液萃

13、取或固相萃取相比，具 有操作时间短、样品量少、无需萃取溶剂、适干分析 挥发性和非挥发性物质、重现性好等优点。免疫检測妬免疫检測技术是以抗原抗体的特异性、可逆性结 合反应为基础的分析检测技术。在此基础上结合一些 生化或物理方法作为信号显示或放大系统即可建立 免疫测定法即抗原可以特昂性地与抗体结合，通过 抗原-抗体的特异性识别反应来进行检測。趣是能在机体中引起特异性免疫应答的物质， 抗原进入机体后,可刺激机体产生抗体和引起细胞免 疫。在免疫測定中，抗原是能与抗体结合的物质，能 在机体中引起抗体产生的抗原多为分子量大于5000 的蛋白。址是能与抗原特异性结合的免疫球蛋白（Ig）, 与免疫測定有关的主

14、要为IgG和IgM。抗原与抗体间的反应是依靠局部的分子间作用 力结合的。主要有四种：氢犍、范德华力、静电和疏 水相互作用。抗原抗体结合反应具有高度特异性、交 叉反应和可逆性。抗原抗体结合的理化特性主要表现 为由亲水胶体转化为疏水胶体。一个成功的免疫学测定法必须具备的3个要素： 性能优良的抗体、灵敏而专一的标记物和高效的分离 手段。现有的免疫測定方法很多，按照不同的方法分 类。经典的免疫測定法不需要标记物；标记免疫测定 法分为放射性标记測定法和非放射性标记测定法,按 反应介质分为均相和非均相免疫测定法。经典免疫测 定法在負品安全卫生分析上较少采用，而灵敏度高的 非均相、非放射性标记免疫测定法种类

15、繁多，发展较 快、检测灵敏度高，使用范围广。2、免疫学检测技术一 疫吸附试验（ELISA）酶联免疫吸附试验（ELISA）的基础是抗原与抗 体的固相化及抗原或抗体的酶标记。基本鯉:使抗原或抗体结合到某种固相载体 表面，并保持其免疫活性；使抗原或抗体与某种酶 连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留 其免疫活性，又保田酶的活性;结合物与相应的抗 原或抗体反应后,结合的酶仍能催化底物生成有色物 质，而颜色的深浅可定量抗体或抗原的含量。材料和试剂:完整的ELISA试剂盒包括：已包被 抗原或抗体的固相载体（免疫吸附剂）酶标记的抗 原或抗体（结合物）、酶僵化的底物、阴性对照样品 和阳性对照样品（定性

16、检測）参考标准品和控制血 清（定量测定）、结合物及标本的稀释液、洗涤液和 酶反应终止液。类型:双抗体夹心法測定抗原；双抗原夹心法测 抗体；间接法测抗体；竞争法测抗体；竞争法测抗原。3、免疫弹测妬W免疫测定法（RIA）放射免疫测定法（RIA）是将放射性同位素检测 的髙度敏感性与免疫反应的髙度选择性相结合的一 种免疫标记检測技术。RIA的基础是待测抗原和标记 抗原对有限量抗体进行竞争性结合。基本原理:待测抗原是指人体内某种微量活性物 质（如微生物和寄生虫抗原、激素、酶或药物等）, 标记抗原是将已知的上述物质标记上同位素（食品安 全快速检测中最常用的是3H和14C）,具有示踪作 用。这两种抗原具有共

17、同的决定簇，都能与相应的抗 体发生特异的结合。将标记抗原（AgT和未标记抗 原（Ag）与恃异性抗体（Ab）相混合，两者竞争与 抗体结合结果形成标记的和未标记的抗原抗体复合 物。采用分离技术（如用活性炭）将AAb、Ag-Ab 复合物（B）和游的Ag、Ag* （F）分离，测定B和F 的放射活性，绘制B/F对Ag量的关系曲线。測定时 需先用一系列已知浓度的未标记抗原和一定量标记 抗原及抗体相混合，然后测出标准浓度抗原参加下的 标记抗原抗体复合物的放射结合率（B/F）,绘出标 准竞争抑制曲线。试验时，在相同条件下，根据待测 抗原的放射性结合率，在标准曲线上即可查得相应的 抗原含量.4、免疫酗測PCRP

18、CR又称聚合酶链式反应（PCR）,即通常说 的PCR体外扩増技术，又称无细胞克隆技术，是一 种对特定的DNA片段在体外进行快速扩增的新方 法，该方法操作简便，可使微量的特定DNA片段在 几小时内迅速扩增至几百万倍，目前已在分于生物 学.生物医学等领域得到了广泛的应用。依据DNA摸板的特性，模仿体内的复制过程， 在体外合适的条件下以单链DNA为模板，以人工合 成的寡核昔酸为引物，以四种脱氧核昔酸（dNTP） 为底物，利用热稳定的聚合酶延5 3的方向摻 入核昔酸来特异地扩増DNA片段。PCR反应过程 通常由2040个循环组成，每个循环由高温变性一 低溫复性一适温延伸三个基本反应步骤构成：1模板DN

19、A的变性：加热9395,模板DNA 双链或经PCR扩増形成的双链DNA变性，解离成单 链，作为扩增的模板；2模板DNA与引物的复性：温度降至55C左右, 引物与单链DNA模板的互补序列特异性地结合3引物的延伸：在适宜的温度条件下，DNA模 板一引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下，以 dNTP为反应原料，靶序列为模板，按碱基配对与半 保留复制原理，合成一条与模板DNA链互补的半保 留复制链。車复循环变性一复性一延伸三过程，DNA扩增量 呈指数上升.最终的扩增量可用N = N0 （ 1 +E） n 计算。理论上，单一拷贝基因经过40个循环，产物 的拷贝数为1012。 注：扩増逍循酶促反应动力学

20、 原理。第三車农药残留量的检验 食品中农药残BJ的分类概1、 农药农药：是指用于预防、消灭或者控制危害农业、 林业的病、虫、草和其他有害生物以及有目的地调节 植物、昆虫生长的化学合成或者来源于生物、其他天 然物质的一种物质或者几种物质的混合物及其制剂。分类：按用途分：杀（昆）虫剂、杀菌剂、除草 剂、杀线虫剂、杀精剂、杀鼠剂、落叶剂和植物生长 调节剂等；按化学组成分:有机磷、氨基甲酸酯、拟 除虫菊酯、有机氯、有机碑、有机汞等.2、 农药残留农药残留:是指农药使用后残存于生物体、食品 （农副产品）和环壇中的微量农药原体、有毒代谢物、 降解物和奈质的总称。当农药过量或长期施用，导致 食物中农药残存数

21、量超过最大残留限量（MRL）时, 将对人和动物产生不良影响，或通过食物链对生态系 统中其他生物造成毒害。我国近年生产的高毒杀虫剂主要有甲按磷、甲基 对硫磷氧乐果、久效磷、对硫磷、甲拌磷等，因而, 这些农药目前在农作物中残留最严重。3、 食品中农药残留的来源:1、施用农药对农作物的直接污染；2、农作 物从污染的环埴中吸收农药；3、通过食物琏污染 食品；4、其他来源：粮库内使用熏蒸剂等对粮食 造成的污染；禽畜饲养场所及廊畜身上施用农药对动 物性食品的污染；粮食贮存加工、运输销售过程中容 器、车船的混装；事故性污染，用错农药品种和剂量， 课食等。传统的农药残留量分析技术的一般过程常用的农药残留分析样

22、品前处理技术1、 样品采集:（以蔬菜农药残留量检测的样品釆 集为例）釆集对象：蔬菜基地：上市前的蔬菜市 场：正在售卖的蔬菜检测部位:大白菜、小白菜（去根、 去外测菜叶）；萝卜、胡萝I、（取叶、根）;番茄、茄子 等（去蒂）。2、 提取方法：萃取分离法、索氏抽提法、微波 加热提取法、超声辅助提取法等（传统技术）。3、 净化方法：液液分配法、吸附柱色谱法、磺 化法、凝结沉淀法、冷冻法、薄层色谱法等。4、 浓缩方法：自然挥发法、吹气法、真空旋转 蒸发法。农药残留分析样品前处理新技术:固相萃取技 术；固相微萃取技术；超临界流体萃取技术；基质固 相分散萃取技术；凝胶渗透色谱技术；免疫亲和色谱 技术；衍生化

23、技术等农药残留检验技术概述：目前我国农药残留检測方法主耍有两大类: 农药残留色憎检测法和快速检测法。色谱检测法是为 农药残留执法提供依据。农药残毒快速检測法主要是 防止有机磷和氨基甲酸酯类农药残留要重超标的蔬 菜和水果流入市场。常用的色谱检验技术:薄层色谱法、纸色谱、气 相色谱、液相色谱法、GC-MS联用技术。1、 薄层色谱（TCL）:半定量和定性检測技 术。TCL不需要特殊设备和试剂，方法简单、快速、 直观、灵活，TCL除用特殊的显色剂观察斑点颜色和 用Rf定性外，与其它技术联用，不仅可以定性，而且 可以对样品中待分离的一种或多种成分进行定量分 析。但是灵敏度不高，多把它作为分离手段。可同时

24、 分析多个样品，多用于复杂混合物的分离和筛选。2、 气相色谱技术（GC） 基本原理：残留的 农药经有机溶剂提取并经净化、浓缩后，注入气相色 谱仪、气化后在栽气携带下于色谱柱中分离，并由检 測器检测。GC是应用最多的方法，占有关色谱法 报道的70%以上。气相色谱法具有高选择性、高分 离效能、髙灵敏度、快速等优点。易气化，气化后又 不发生分解等的农药均可采用GC检测。用于GC 的检測器主要有FID、ECD、NPD、TCD、FPD、 MSD 等。3、 髙效液相色谱技术（HPLC） HPLC可以 分离检测极性强、分子量大及离子型农药，尤其对不 易气化或受热易分解的化合物更能显示出它的突出 优点。 常用

25、的液相色谱柱有C8柱、C18柱、氨基 柱、硅胶柱等，检测器有紫外检测器、荧光检測器等。近年来，HPLC的检測效率、灵敏度、速度和操 作自动化程度现已成为农药残留检测不可缺少的重 要技术，其缺点是溶剂消耗量大，检测器种类较GC 少，灵敏度不如GC高。4、 气相色谱-质谱联用技术（GC-MS）GC-MS是将气相色谱仪和质谱仪串联成为一个整 机使用的检測技术。它既具有气相色谱高分离效能, 又具有质谱准确鉴定化合物结构的特点，可达到同时 定性定量的检測目的。用于农药和药物残田量检测工 作，特别是应用干农药和药物代谢物、降解物的检测 和多残留检測等具有突出的特点。5、 液相色谱一质谱联用技术（LC-MS

26、） LC-MS将气相色憎仪和质谱仪串联成为一个整机使用的检測技术。LC-MS可以首先将混合物分 离为单一组分，之后再用质谱检测器进行检测。如此 过程不仅可以得到更有意义的质谱数据，而且可以在 一定程度上排除基质干扰，克服离子抑制现象，优化 质谱检测信号。液质联用系统是殘留分析理想的检测 手段。对于需要高灵敏度、宽适用范围、复余基质的 多残留快速筛选工作而言，液质联用无疑是首选的最 佳检测手段 农药残留检验新技术：超临界流体色谱；毛细管电 泳技术；直接光谱技术（近 红外光谱分析、荧光光谱 分析）；酶联免疫吸附试 验技术；酶抑制技术；生 物传感器技术；实验室机 器人1、 超临界流体色谱超临界流体色

27、谱（SCF）是以超临界流体为流动 相的色憎分离检測技术。特点:超临界流体黏度小、传质阻力小、扩散速 度快，其分离能力和速度可与GC相比；其密度、溶 解力和速度可与HPLC相比；且超临界流体的物理、 化学性质都是密度的函数。超临界流体色谱仪的工作流程:SFC的部件组成 与HPLC很相似，包括流动相输送系统（泵、流量缓 冲器和混合柱等）、色谱分离系统（进样器、色谱柱 和柱温箱等）、检测系统（检测器等）和计算机软件。SCF以超临界流体作为流动相，它的密度随压力 增加而増加，而密度的增加引起流动相溶剂效率的提 髙，同时可缩短淋洗时间。在SFC中釆用程序升密度 相对于GC中的程序升温和HPLC中的梯度洗

28、脱，并 且SFC可以与大部分GC和HPLC的检測器相连，许 多在GC上需经过衍生化才能分析的农药，都可以用 SFC直接測定。2、 毛细管电泳（CE）毛细管电泳（CE）是以高压（可达30 kV）下 产生的强电场为驱动力，以小内径的石英毛细管（常 用25100pm）为分离通道，依据乞组分之间电泳 涓度或分配系数的差异实现分离。特点:CE是电泳技术与色谱技术的完美结台， 分离速度快，分离效果好，仪器结构比较简单。CE根据分离模式的不同，可分为毛细管区带电 泳、毛细管凝胶电冰、毛细管等电聚焦电沐、胶束电 动毛细管色谱和毛细管电色谱。传统的农药残留量分析技术的优缺点：农药残留快速检測方法1、 生化检测法

29、（胆碱酯酶抑制法）：速測卡、酶片、 速測仪、生物传感器等2、 免疫分析法（抗体一抗原反应）：ELISA试剂盒、 免疫传感器等3、 活体生物測定法（发光细菌或敏感性家蝇）速測卡法：速测卡法（纸片法）是国家标准快速检验 方法蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量快速 检测。1、 測定范围:由酶抑制法测定蔬菜中有机磷和 氨基甲酸酯类农药残留量的快速检验方法，适用于蔬 菜中有机隣和氨基甲酸酯类农药残留量的快速筛选 測定。2、 原理：3、 试剂:速測卡:固化有胆碱酯酶和靛酚乙酸 酯的纸片；PH7.5缓冲溶液:分别取15.0g Na2HPO4 12H2O与 1.59g KH2PO4,用500mL 蒸IS水溶

30、解。4、 仪器:常量天平；有条件时配备37乜2 恒温装直;有条件时配备专为速測卡而设计的“农药 残留速测仪”和超声波提取器。5、 分析步骤（1）表面測定法（粗筛法）：1）擦去菟菜表面泥土，滴23滴缓冲溶液在蔬 菜表面，用另一片蔬菜在滴液处轻轻摩撩。2）取一片 速测卡，将蔬菜上的液滴滴在白色药片上。放直 lOmin进行预反应，有条件时在379恒温装富中进 行。注：预反应后的药片表面必须保持湿润。3）将速 测卡对折，用手捏3min或用恒温装置恒温3niino 4）每批测定应设一个缓冲液的空白对照卡。（同时进 行） 思考：空白对照卡不变蓝的原因？（2）整体测定法:1）选取有代表性的蔬菜样品，擦去表面

31、泥土，剪 成lcm左右见方碎片，取5g放入带盖瓶中，加入 10mL缓冲溶液，振摇50次，静直2min以上。2） 取一片速測卡，用白色药片沾取提取液，放SlOmin 进行预反应c注:预反应后的药片表面必须保持湿润。 3）将速测卡对折，用手捏3min或用恒温装置恒温 3mino 4）每批测定应设一个缓冲液的空白对照卡。 思哮：蔬菜剪得太碎对试验结果有怎样的影响？6、 结果判定和表述:检測结果以酶被有机磷或 氨基甲酸酯类农药抑制（阳性）和未抑制（阴性）来 表示。&速测卡法检测注意事项葱、蒜、萝卜、韭菜、芹菜、香菜、菱白、蘑菇 等含有对酶有影响的植物次生物质的样品,应采取整 株（体）蔬菜浸提或采用表面

32、测定法；对一些含叶绿 素较髙的蔬菜,也可采取整株（体）蔬菜浸提的方法, 减少色素的干扰。当温度低于379时,酶反应的速度随之放慢， 药片加液后放直反应的时间应相对延长。延长时间的 确定，以空白对照卡用手指捏3min时可以变蓝，且 样品放直的时间应与空白对照卡放亶的时间一致才 有可比性。红色药片与白色药片査台反应时间以3min为 准。速測卡对农药非常敏感，测定时如果附近喷洒农 药或使用杀虫剂，以及操作者和器具沾有微量农药， 都会造成对照和測定药片不变蓝。肆抑制車法：酶抑制率（分光光度法）是国家标准快 速检验方法蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留 量快速检测O定范围:由酶抑制法测定蔬菜中有机磷和 氨基甲酸酯类农药残留量的快速检验方法，适用于蔬 菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速筛选 測定。2