PCR仪使用手册.docx

1、PCR仪使用手册Biometra Tgradient用户手册型号050-810 Tgradient48050-811 Tgradient96Biometrabiomedizinische Analytik GmbHRudolf-Wissell-Str. 30, D-37079 GoettingenTel.: 0551/50 686-0; Fax: 0551/50 686-66email: 1 目录1 目录2 介绍3 使用前 安全警告 警告标志4 Tgradient的初始操作步骤 Tgradient前视图 Tgradient后视图 Tgradient控制板 初始自检 Tgradient的显示 操

2、作可调节的热盖 盖子卡住时如何放开转轮5 创建一个程序 选择一个目录 选择一个程序储存库 输入子目录的名称 输入程序名 输入热盖的温度 选择/取消热盖预热 输入温度和时间设置 设置温度梯度 查看模块的温度梯度值 设置循环次数 冷却到环境温度以下 储存程序6 浏览/编辑程序数据 删除/插入程序档 拷贝程序 删除程序7 其他选项的设置 设置时间增量 设置“触地”（touch down）PCR 调节加热和冷却坡度8 运行程序 选择和开始程序 操作过程中的显示 浏览剩余的运行时间 察看当前的温度梯度 暂停/停止程序9 特别功能 打印协议 警报声的开关 选择语言 标准模式/测试模式 RS232-控制器1

3、0 微板的密封 在PCR中密封微板 取下热封膜11 维护12 问题解答 减慢加热和冷却的速度 由于断电重新启动 来自其他PCR仪的协议的更改13. Tgradient 96技术参数2 介绍Tgradient是Biometra产品系列中新型的高端热循环仪。开发一款快速优化反应参数以及常规分析的高性能仪器一直是Biometra的目标。而通过新型的模块构建和最先进的Peltier技术，实现了这两个目标。为了增加PCR反应的特异性，退火温度是最关键的参数之一。利用新型的Tgradient，通过一次试验可以测试出最佳的退火温度，在程序的任何步骤设定的温度梯度最大可以达到40C。Biometra通过不懈努

4、力使温度梯度尽可能的呈线性。同时确保每一排均一的温度分布也非常重要，每一排的温度可以通过帮助菜单进行查看。新型的Tgradient是一款出众的仪器，不仅提供先进的温度梯度，还保证了常规运用时的高速度和可靠的准确性。镀金银模块设计保证了高效的热传导性，确保了快速的升降温速度和模块的温度平衡。新型的Tgradient会大大加快实验室的工作效率，因为它在优化反应条件和常规运用中节省了大量的时间。3 使用前 安全警告设备连接电源之前，请确认仪器后部的电压选择器设置在正确的电压上了。电击危险！打开Tgradient之前请拔下电源线。没必要在试管和槽之间加油，以促进热量传输。如果您仍然决定用油，不要使用硅

5、油，只能用矿物油。 警告标志在操作过程中热槽和热盖会达到很高的温度。如果用裸露的皮肤接触会烫伤。样品的快速加热可以导致液体滚动翻腾。在操作过程中一定要带好护目镜。启动一个程序之前应关好盖子。保证设备后部和底部的通风口没有堵塞。通风不充分可能会导致设备的温度过高。4 Tgradient的初始步骤 Tgradient前视（图形见英文说明书）热盖的高度调节轮图形显示键盘电源开关 Tgradient后视（图形见英文说明书）平行打印端口（centronics）串行接口RS232电源线插头保险丝盒，可放2个保险丝，具体规格见设备后面的型号标识板 Tgradient控制板（图形见英文说明书）（由左向右）图形

6、显示电源开关：背光电源打开功能键：相应的具体功能在屏幕上指示光标键：用来在设置程序的时候自由移动。用来在列表中滚动。容易清洁的键盘 初始自检启动Tgradient之后，会显示设备的序号和软件版本。TgradientSerial No 1234567Tgradient检查所有目录下的程序（也叫RAM检查）。 Tgradient的显示Tgradient的显示提供关于设备的信息和运行程序的状态。ProgStepTemp CTimeLid CA info B start/stop C programs D +A,B,C,D键的各自的具体功能是由显示屏指出的，与所处状态相关。 可调节的热盖的操作为了向试

7、管施加理想的压力，Tgradient装有一个可调节高度的热盖，可以进行自动的压力控制（智能盖技术）。关上盖子：把样品放置到槽中之后，把盖子关上。顺时针旋转盖子，直到听到咔哒一声。在这种状态下，即使你继续旋转转轮，压力不会再增加了。注意：盖子的压力在满槽的时候达到最佳。如果槽中的试管很少，你应该在四个角的位置上放置一些空薄壁管，以避免压力过大使试管损坏。打开热盖：逆时针旋转转轮释放压力。不再有阻力的时候就说明压力已经释放了。现在您可以打开盖子。重要：请注意顺序！有压力的时候千万不能打开盖子，因为这样可能会损坏门锁系统。 在盖子卡住的情况下释放转轮注意：如果盖子处于最高或最低的位置上，转轮可能脱钩

8、了。在这种情况下，离合器机械装置在两个方向上都可以启动（在任一方向都可以发出咔哒的声音）。要把转轮打开，用一支圆珠笔按住金属针，小心的旋转转轮。这个针会克服自动离合器装置。因此，要注意不要施加过大的压力。盖子卡在顶部：按住金属针，顺时针小心的旋转转轮，直到您可以感觉到正常的阻力（不再有咔哒声，离合器已经放开了）。把金属针松开，把盖子放下，直到离合器装置启动（咔哒声，施加理想压力）盖子卡在底部：按住金属针，逆时针小心的旋转转轮，直到您可以感觉到正常的阻力（不再有咔哒声，离合器已经放开了）。把金属针松开，逆时针旋转转轮，直到压力全部放出。打开盖子。重要：在离合器装置启动的状态下（施加理想压力时），

9、千万不要使用金属针继续增加压力。这会导致试管和设备的损坏！5 创建一个程序 选择一个目录在Tgradient中，程序既可以储存在主目录中，也可以储存在9个单独的子目录中。在每个子目录中，最多可以储存100个程序。为了方便的识别选择的储存位置，子目录可以被命名。（见）由主菜单开始。ProgStepTemp CTimeLid CA info B start/stop C programs D +按C programs进入编辑模式。Edit | -3. subdirect.: | -4. subdirect.:main | -5. subdirect.:| -6. subdirect.:| -7.

10、subdirect.:A B C quit D enter现在您位于主目录中。屏幕显示出子目录的结构。 选择一个程序储存库程序可以储存在主目录或者子目录中。要在主目录中创建一个程序请按D enter。要进入一个子目录，用光标键将光标向右移动，然后用光标键 选择一个子目录。选择的目录会以强光突出出来。Edit | -3. subject.: | -4. subject.:main | -5. subject.: | -6. subject.:| -7. subject.:A B name C quit D enter 输入子目录的名称为子目录和程序命名的方法是一样的。有关程序的命名见。按D en

11、ter进入选择的子目录。Directory: 5Program no: name:EditA list B C quit D enter按A list浏览该目录下所有已建立文档和空文档的列表。0 empty 1 empty2 empty3 empty4 emptyA back B forward C quit D enter用光标键在列表中滚动，然后用D enter确认其中一个记忆库。注意：如果既没显示程序名，又没显示“empty”，那这个位置可能存了一个没有命名的程序。对于新的协议，应选择一个空的记忆库。没有用的程序应该删除，以提供新的记忆库。 输入程序名每一个程序都指定了一个程序号和一个子

12、目录号。要想更方便的检索一个程序，您可以输入一个由字母，数字和符号组成的名称。Directory: 5Program no: 0 name: ABCDEFGHIJKLMNOPQRST UVWXYZ - () # C/,&+.%!A ABC B files C quit D enter要输入程序名请按A ABCDirectory: 5Program no: 0 name: ABCDEFGHIJKLMNOPQRST UVWXYZ - () # C/,&+.%!A name B blank C name OK D enter用光标键从字母中选择一个，用D enter确认。Directory: 5Pr

13、ogram no: 0 name: T ABCDEFGHIJKLMNOPQRST UVWXYZ - () # C/,&+.%!A name B blank C name OK D enter选择的字母会在显示屏上出现，光标会向右移动一格。选择下一个字母，用D enter确认。注意：如果系统接受了一个错误的字母该怎么办按A name在名称内移动光标。现在您可以用光标键在名称上移动光标了。按了A ABC之后，您可以输入新的字母。您也可以使用这个功能去更改一个已存程序的名称。一旦名称输入完成了，用C name ok确认。Directory: 5Program no: 0 name: TEST 1Li

14、d temp: C preheating: onEditA B files C pgm OK D enter 输入热盖的温度您现在可以输入热盖的温度了。一般来说，盖子的温度应该比协议中的最高温高10C。例如：如果变性（denaturation）步骤的温度是95C，那盖子温度就输入105C。Directory: 5Program no: 0 name: TEST 1Lid temp: C preheating: onEditA B files C pgm OK D enter注意：进行微板的热封应该把盖子温度设置为110C（见10）。 选择/取消盖子的预热您可以在程序启动之前选择盖子是否需要预热

15、。目的是避免在初始加热阶段出现凝结现象。注意：在大多数操作中建议使用的默认设置是：preheating: on。在盖子预热过程中，槽的温度保持在25C。Directory: 5Program no: 0 name: TEST 1Lid temp: C preheating: onEditA on/off B files C pgm OK D enter完成了所有的预先设置之后，按D enter打开设置页。 输入温度和时间设置在这个设置页中，您可以输入您的循环协议中需要的所有参数。此外，您可以设置特殊参数，如触地(touch down)，坡度率，或时间增量。有关特殊参数的详细信息见6。设置页：T

16、empC time # gradientC options 1: 2:3:4:A B insert/delete C pgm OK D enter每一个设置都用D enter来确认。光标自动移动到下一个区域。或者，您可以通过向前移动光标键来确认一个数值。注意：您可以使用四个光标键在设置页中自由移动。用光标键您可以回到预先设置中。您可以随时用A 启动帮助功能。现在输入协议中第一档的温度：Temp C time # gradientC options 1: 2:3:4:A B insert/delete C pgm OK D enter用D enter确认温度，或则会只是将光标键向前移动。如果您移

17、动到了下一行，设置将会储存在临时记忆库中。Temp C time # gradientC options 1: 2:3:4:A B insert/delete C pgm OK D enter为第一档输入一个时间。注意：BIOMETRA所有PCR仪的时间的设置都是相同的：小时分钟秒钟如果您输入了一个没有“”的数字，这个数值将会被认为是秒钟（“300”=5分钟）。要设置分钟，应在输入了分钟数之后输入一个“”。要设置小时，在小时数后面输入 。当然，您也可以输入小时，分钟和秒钟的组合。例如1小时，30分钟，20秒钟应该这样输入：“1 30 20”。这个时间数值将用以下形式表示出来：0h 00m 00

18、s。用D enter确认时间设置，或者用光标键移动到下一个区域。设置温度梯度每一个温度梯度由两个设定值确定，(1)模块中部的温度和(2)温度梯度的范围。例如，如果想设定温度梯度的范围为50到60C，那么在“gradient”下面输入的温度值为55C。TempC time # gradientC options 1: 0h 5m 0s 2: 0h 0m30s 3: 0h 0m30s 10 4: 0h 0m30s 2 29A B insert/delete C pgm OK D enter最大温度梯度可达40C，当程序运行到第三步时模块的第1列（左起）至第12列温度为55C至65C。通过在grad

19、ient下面的梯度值前加一“”号，可以形成反向的温度梯度，即从右到左温度不断升高。查看模块的温度梯度值查看12排各排的温度时，选择A ，显示如下：TempC time # gradientC optionsT1 6 : CT7 12: C3: 0h 0m30s 10C4:Temperature difference left side / right side第1和2排分别显示的是模块中16和712排的温度。设置循环次数（）一般来说，循环是通过选择返回循环的目标和返回循环的次数来定义的。在用标记的列中，您可以选择返回循环的目标档。TempC time # gradient options 1:

20、 0h 5m 0s 2: 0h 0m30s3: 0h 0m30s4: 0h 0m30s 2 A B insert/delete C pgm OK D enter现在输入返回循环次数（）。注意：总循环数（n 返回循环）1，即，总循环数为30时应输入“29”。TempC time # gradient options 1: 0h 5m 0s 2: 0h 0m30s3: 0h 0m30s4: 0h 0m30s 2 29A B insert/delete C pgm OK D enter 冷却到环境温度以下TempC time # gradient options 2: 0h 0m30s3: 0h 0

21、m30s4: 0h 0m30s 2 295: pauseA B insert/delete C pgm OK D enter要想无限长的保持这个温度，输入“0”。按了D enter后显示“pause”。注意：您可以设置的最低温是-3C。 储存程序用C pgm ok来储存一个完整的程序。程序数据永久的储存在记忆中：Directory: 5Program no: 0 name: TEST 1Number of steps: 5Run time: 0h43m 19sA B C D运行时间计算并显示出来。注意：要想随时浏览当前剩余的运行时间，按主菜单中的A info。6 浏览/编辑程序数据您可以通过在

22、编辑模式下移动光标键来检查任何已存的程序。按照所述选择需要的程序。注意：在PCR仪工作的过程中，只能浏览正在运行的程序，不能更改。如果您想要改变运行程序的设置，以进行下面的实验，您必须将这个程序拷贝到另一个记忆库中，有关拷贝程序的内容见。 删除/插入程序档设置页：TempC time # gradient options 2: 0h 0m30s3: 0h 0m30s4: 0h 0m30s 2 295:A B insert/delete C pgm OK D enter要删除或者插入一个程序档，请按B insert/delete。Insert/delete step: 2: 0h 0m30s3:

23、 0h 0m30s4: 0h 0m30s 2 295:A B insert/delete C pgm OK D enter输入您想要插入/删除的档号。增加的档会插入到选择的档之前。下面的档会移动一个位置。Insert/delete step: 3 2: 0h 0m30s3: 0h 0m30s4: 0h 0m30s 2 295:A B insert/delete C pgm OK D enter注意：如果您输入了一个错误的数字，可以用B delete input来清除。用D enter确认档号。Insert/delete step: 3 2: 0h 0m30s3: 0h 0m30s4: 0h 0

24、m30s 2 295:A insert B delete C quit D 按A insert在选择的位置插入一个档。按B delete删除选择的档。删除一个档后，下面的档会向前移动一个位置。注意：插入和删除档的操作可能会对已经存在的循环有影响。要确保循环中的所有的最新设置都是正确的。 拷贝程序按照和所述的方法选择您想要拷贝的程序。Directory: 5Program no: 0 name: TEST 1Lid temp: C preheating: onEditA B files C pgm OK D enter按B files。Directory: 5Program no: 0 name

25、: TEST 1Lid temp: C preheating: onEditA copy B delete pgm C quit D enter按A copy将程序拷贝到另一个记忆库中。Copy to | -3. subdirect.: | -4. subdirect.:main | -5. subdirect.: | -6. subdirect.:| -7. subdirect.:A B C quit D enter用光标键选择需要的子目录。选择的子目录会用强光突出出来。Copy to | -3. subdirect.: | -4. subdirect.:main | -5. subdire

26、ct.: | -6. subdirect.:| -7. subdirect.:A B C quit D enter用D enter确认您的选择。Copy from directory 5 program 0To derectory 6 program A list B C quit D enter用A list选择一个空的记忆库。Copy from directory 5 program 0To derectory 6 program 4 Enter=okTarget program contains 0 stepsA B C quit D enter在您用D enter确认之前，会检查目标记

27、忆库。如果目标记忆库中没有程序，会显示“target program contains 0 steps”(目标程序中包括0个档)。如果记忆库中有一个程序，就会显示档的数目。注意：如果您把程序拷贝到一个已经含有程序的记忆库，原来的程序将被删除！用D enter将程序的拷贝储存在新的目录下。 删除程序按照和的方法选择一个程序。Directory: 5Program no: 0 name: TEST 1Lid temp: C preheating: onEditA copy B delete pgm C quit D enter按B delete pgm可以删除这个程序。Directory: 5Pr

28、ogram no: 0 name: TEST 1Lid temp: C preheating: onDelete program 0 enter= yesA B C quit D enter用D enter确认您的选择，一旦删除了一个程序，就不能重新储存了！7 其他选项的设置要设置一些特殊的参数，您可以将显示向右滚动。用光标键移动到显示屏的最右边。TempC time # gradient options 1: 0h 5m 0s 2: 0h 0m30s3: 0h 0m30s4: 0h 0m30s 2 29A B header C pgm OK D enter会出现下列显示：Main funct

29、. dTC dts /s1: 2: 3: 4: A B insert/delete C pgm OK D enter注意：要返回带有基本参数的显示请按光标键。或者，您可以将光标移动到最右边。TempC time # options 1: 0h 5m 0s 2: 0h 0m30s3: 0h 0m30s 4: 0h 0m30s 2 29A B insert/delete C pgm OK D enter注意：在主显示中会指示一个特殊参数已经更改了。在options这行中用指示。 设置时间增量为了对酶的活性降低作出补偿，在一个连续循环中的不同工作流程之间，档的长度可以逐渐增加。在标有dts的行中输入需要的时间增量秒。这一数值将会被加在每个工作流程的时间数值上。Main funct. dTC dts /s2: 3: 4: 2 5： A B delete C quit D enter注意：时间增量会对总的运行时间造成影响，改变多少由流程数目和增量的大小决定。一个包含很多流程，并且时间增量很大的程序会比标准协议