生物化学考试习题答案.docx

1、生物化学考试习题答案P391 何谓蛋白质？蛋白质的主要功能是什么？答：蛋白质是指含有氨基的羧酸。是由许多不同的 - 氨基酸按一定的序列通过酰胺键缩合而形成的，具有较稳定的构象并具有一定功能的生物大分子。2 蛋白质化学结构测定得基本原则是什么？答：测定蛋白质中的氨基酸的组成。2蛋白质的 N 端和 C 端的测定。3应用两种或两种以上的不同的方法将所要的测定的蛋白质肽链断裂，各自得到一系列大小不同的肽段。4分离提纯所产生的肽，并测定出它们的序列。5从有重叠结构的各个肽的序列中推断出蛋白质中全部氨基酸的排列顺序。3 常用于蛋白质多肽链 N 端、 C 端测定得方法有哪几种？基本原理是什么？答:Sange

2、r 反应：当 DNP-多肽或 DNP-蛋白质用酸水解时，所有的肽键被切开， DNP 基仍然连 N 端 氨基酸上， DNP-氨基酸经纸层析，从层析图谱上黄色斑点的位置上可鉴定 N 端氨基酸的种类和数目。Edman 反应：蛋白质多肽链 N 端氨基酸的 - 氨基也可以 PITC 反应生成 PTC- 蛋白质，在酸性溶液中，它就释放出末端 PTH 氨基酸和比原来少了一个氨基酸残基的多肽链。所得 PTH- 氨基酸经乙酸乙酯提纯后， 层析鉴定后， 确定肽链的 N 端的氨基酸的种类剩余的肽链可以重复应用这个方法测定 N 端的第二个氨基酸。4 蛋白质的一级结构决定其构象，生物功能又是建立在蛋白质的构象基础上，你

3、是如何理解的？答：多肽链并不是线形延伸的，是按照一定的折叠盘绕成的空间结构。空间结构是以它的一级结构 为基础的。每种蛋白质分子都具有特定的结构来完成它的特定的功能，甚至只有个别氨基酸的变化就能引 起功能的改变或丧失，证实了蛋白质的结构和功能的相适应性。5 根据蛋白质等电点，指出下列蛋白质所指定 pH 条件下，电泳时得泳动方向：（1） 胃蛋白酶（ pI1.0 ），在 pH5.0 ； 向正极移动（2） 血清清蛋白（ pI4.9 ）在 pH6.0 ； 向正极移动（3） -脂蛋白（ Pi5.8 ），在 pH5.0 和 Ph9.0 ； 向负极移动和向正极移动6蛋白质变性作用变构作用有何差别？蛋白质变性后

4、有何特点？答：蛋白质变性作用发生后，一级结构不破坏，其化学性质和生物性质多有所改变。变构效应是指蛋白质的空间构象发生了变化，会影响蛋白质的功能的改变。蛋白质变性后的特点：变性后，氢键等次级键被破坏，蛋白质分子就从原来的有秩序的卷曲紧密结构变为无秩序的松散结构。也就是二三级以上的高级结构发生改变或破坏，但一级结构没破坏，组成成分和相对分子量没有变化。如果不过于激烈，是一种可逆反应。即：恢复到原来的构象，从而恢复原来的理 化性质。7解释下列名词：构象与构型：构象：指蛋白质分子中所有的原子在三维空间的排列分布和肽链的走向。构型：立体异构体原子或基因在空间的不同排列形式。N 端和 C 端：通常书写多肽

5、或蛋白质肽链结构时，习惯总是把肽链末端有 - 氨基的写在左边称之为N 端或氨基端用 “ H表”示。另有 -羧基末端的写在右边，称之为端或羧基末端，用 “ OH”表示。蛋白质的二级结构和三级结构二级结构：主要指蛋白质多肽链本身的折叠和盘绕方式。三级结构：一条多肽链上的所有原子，包括主链和残基侧链三维空的分布。肽：一个氨基酸的羧基和另一个氨基酸的羧基脱水缩合而成的化合物。肽键：氨基酸之间脱水后形成的键叫肽键氨基酸残基与构象单元：组成多肽链的氨基酸单位已不是完整的氨基酸分子，因此每一个 NH-CH-CO- 单位称为氨基酸残基。 在肽链局部区域肽链通过形成氢键而形成有规则的构象单元。R10 蛋白质因变

6、性发生沉淀作用和与硫酸铵盐析发生沉淀作用， 两者在本质上有何差别？如何区分？（前者失活）DNA 分子比较刚硬，呈比较伸展答：差别：蛋白质由于变性而导致氢键等次级键被破坏，即二、三高级结构发生改变或破坏，从而失去活性形成聚集沉淀，而与硫酸铵盐发生沉淀作用只是破坏了蛋白质周围的水膜，中和了蛋白质分子的 电荷，从而产生沉淀，但是蛋白质的活性并没有丧失。区分：前者失活，后者依然有生物活性。P661 列表说明 DNA 和 RNA 在化学组成、分子结构和生物学功能各方面主要特点。化学组成分子结构生物学功能1） 级结构DNA含有 D-2 脱氧核糖含有胞嘧啶、胸腺嘧啶鸟嘌呤、腺嘌呤-双螺旋DNA 中的核苷酸序

7、 列决定了生物体的遗传特 征RNA含有 D- 核糖含有胞嘧啶、尿嘧啶含有嘌呤、腺嘌呤大多数为一条单链在 DNA 的复制、转 录翻译中起到一定的调控 作用，与细胞内或细胞间 的一些物质的运输核定位 有关2 列述 DNA 双螺旋结构的要点，从分子大小和形成氢键两个方面 A-T 配对和 G-C 配对是碱基配 对的最佳方案，概要说明碱基配对规律在生命科学中的意义。答：双螺旋的要点：（1） DNA 分子是由两条方向相反的平行的多核苷酸链构成的一条链的 5- 末端与另一条的 3末端相对两条链的主链都是右手螺旋，由共同的螺旋轴。（2） 两条链上的碱基均在主链的内侧 A 与 T配对， G与 C 配对。（3 ）

8、 成对的碱基大致处于同一平面，改平面与螺旋轴基本垂直。（4） 大多数 DNA 属双链 DNA （ dsDNA ），某些病毒 DNA 的单链 DNA （ ssDNA ）。5） 双链上的化学键手碱基配对等因素的影响旋转手限制。使的结构。亦可作进一步的扭曲成三3 列述 RNA 的主要类型及其结构和功能的特点型类结构功能tRN二级结构三叶草形将氨基酸转运到核糖体 -mRNA复合物的相应的位置， 用于合A三级结构倒 L 形蛋白质。ArRN复杂的多环多臂结构与其他的蛋白质组成核糖体，完成蛋白质的合成。mR分子长度差异很大进入细胞质指导蛋白质的合成。NAsnR有些具有帽子结构在翻译水平，抑制基因的表达，DN

9、A 的复制和转录NA4 简述核酸结构的稳定因素。答：( 1)许多碱基间的氢键的能量是很大的。2 )双螺旋区相邻的碱基的距离使平面上下分布的电子云可以相互作用 ,对核酸的结构起重要的作用.(3)螺旋区外侧的带负电荷的磷酸基在不与正离子结合的状态下有静电斥力 .5 简述核酸变性和复性的过程，列述影响 Tm 和复性的主要因素。答 :变性的过程 :双螺旋区的氢键断裂 ,空间结构被破坏 ,形成单链的无规则的线团状态 .复性的过程 :变性的核酸的互补链在适当的条件下重新缔合成双螺旋的过程 .影响 Tm 主要因素 :(1)G-C 对的含量 G-C 含量愈高 Tm 愈高 (2) 溶液的离子强度 强度愈高 Tm

10、 愈高(3) 高 pH 值下碱基广泛失去质子而丧失形成氢键的能力 (4) 变性剂也可以影响影响 Tm 的主要因素 :1单链片断浓度越高 ,随机碰撞的频率越高 , 复性速度越快 .2较大的单链片断扩散困难 , 链检错配的几率高 , 复性较慢 .3片断内的重复序列多 , 侧容易形成互补区 , 因而复性较慢 .4维持溶液一定的浓度 ,消除林6 简述分子杂交及有关应用技术的要点。答：在退火的条件下，不同来源的 DNA 互补区形成双链，或 DNA 单链和 RNA 链的互补区形成DNA-RNA 杂和双链的过程 .叫分子杂交 .要点:通常对天然的或人工合成的 DNA 或 RNA 片段进行放射性同位素或荧光标

11、记 ,做成探针 .直接用探针与菌落或组织细胞中的核酸杂交 ,因而未改变核酸的位置 ,叫原位杂交 .将核酸直接点在膜上 ,在与探针杂交称点杂交 ,使用狭缝点样器时亦称狭缝印记杂交 .主要用于分析基因拷贝数和转录水平的变化 ,亦可用于检测病原微生物和生物制品中的核酸污染状况 .P122 1.什么是酶 ?答:在生物体内 ,催化生化反应在体内顺利和迅速进行的一类物质 .2.简述目前采用的酶的分类法及其优点 ?答:国际酶学委员会曾制定一套完整的酶的分类系统 ,优点:一切新发现的酶都能按照这个系统得到适当的编号 ,而不是破坏原来已有的系统 .为不断发现的新酶编号留下了无限的余地 .3.解释酶的活性部位、必

12、需基团及二者关系 .答：活性部位的基团都是必需基团 ,但是必需基团也可以包括那些活性部位以外的 ,对维持酶的空间构象必需的基团 .酶除了活性部位以外 ,其它部位不是可有可无的 .4.试述酶催化的作用机理 .(1)邻近定向效应大大的提高了活性部位上底物的有效浓度 ,使分子见反应近似于分子内的反应 ,同时还为分子轨道交叉提供了有利的条件 .(2)“张力”和“形变”底物结合可以诱导酶分子构象的变化 ,而变化的酶分子又使底物分子的敏感键产生“张力”甚 至“形变”从,而促进酶 -底物中间产物进入过渡状态 .(3)酶活性部位上的某些基团可以作为良好的质子供体或受体对底物进行酸碱催化 .(4)某些美可以和底

13、物生成不稳定的共价中间物 ,这种中间物进一步生成产物要比非催化反应容易得多.5.什么是酶活力 ?测定酶活力使用注意什么 ?答：酶的活力就是酶所加速催化的化学反应的能力 .测定酶活力使用注意 (1) 测定的反应速度必须是反应初速度 .否则不能得到准确的结果 .(2)酶反应速度受反应条件的影响 ,因此在测定酶活力时 ,要维持在一套固定的条件下进行 .6.影响酶催化反应的速度的因素有哪些 ?答：( 1)酶浓度对酶作用有影响。在底物足够过量而其他条件固定的条件下，并且反应系统中不含有抑制剂酶活性的物质，及其他不利于酶发挥作用的因素时，酶促反映的速度和酶的浓度成反比。(2)底物浓度对酶作用也有影响。在底

14、物浓度较低时，浓度增大速度增加，近乎成正比。底物浓度 较高时，浓度增加速度增加不明显。当底物浓度达到一定限度时速度达到一极限值时，底物在增加反应速 度几乎不变。(3)pH 对酶的作用也有影响 .不同的酶的最使 pH 不是固定的常数 ,其数值受酶的纯度底物的种类和浓 度缓冲液的种类和浓度的影响 , 因此酶的最适 pH 值只在一定条件下才有意义(4)温度对酶作用的影响 .在低温时温度升高反应速度增加 ,在温度升到一定限度 ,酶活性逐渐失去 ,反应变慢.(5)激活剂对酶作用的影响 .激活剂能够提高酶活力 .(6)抑制剂对酶作用的影响 .一直技能是酶的必需基团霍梅的活性部位中的基团的化学性质改变而降低

15、美的活力甚至丧失活性 .(7)酶的别构效应 .酶的别构效应可能激活也可能抑制酶的反映 .7.试写出米氏方程 ?v=VS/Km+s 或 Km=S(V/v 1) 当 v=V/2 时 Km=S8.解释:全酶 : 酶蛋白余辅因子单独存在时 ,均无催化活力 ,只有二者结合成完整的分子时才具有活力次完整的酶分子称为全酶 .辅酶 :通常把与酶蛋白结合比较松的 ,用透析法可以出去的小分子有机物称为辅酶 .辅基 :通常把与酶蛋白结合比较紧的 ,用透析法不易去除的小分子有机物称为辅基多酶复合物 :几个每嵌合而成的复合物称为多酶复合物调节酶 :催化活性可以被调节的酶称之为调节酶 .同工酶 : 从同一种属或同一个体的

16、不同组织或同一组织 , 同一细胞中发现有的酶具有不同分子形式但却催化相同的化学反应 ,这类酶就称为同工酶 .9.什么称为别构酶 ?答 :是一类调节酶 ,在生物体内具有类似血红蛋白那样的别构现象 .P139什么是维生素 ?答 :维持机体正常生命活动不可缺少的一类小分子化合物 ,不是机体的结构物质和能源物质 ,主要生理功能是对物质代谢起着重要调节的作用 .P88（1） 生物膜的功能是什么 ?细胞及各种内膜系统 ,统称为生物膜 .（一）.细胞膜的功能 :1. 物质传送作用 细胞在生命活动中 ,不断地与外界进行物质的交换 ,需依赖于细胞 膜上专一性的传送载体蛋白或通道蛋白 ,实现细胞内外物质的交换 .

17、2.保护作用 生物膜具有自我封闭的特点 , 细胞膜作为细胞外周届膜 ,对保持细胞内环境的稳定起着重 要的作用 .3.信息传递作用 细胞膜上有各种受体 ,能特异的结合激素等信号分子 .一旦受体与激素结合 ,就可将信 号跨膜串乡细胞内的酶系 ,产生特定的生理效应 .高等生物中细胞内膜系统的功能已经高度分化（二 ）. 线粒体内膜机叶绿体类囊体含有许多酶积极蛋白质组成的复杂体系 ,是进行氧化磷酸化和广和磷酸化的主要场所 ,具有能量转换的功能 .（三 ）. 内质网的糟面内质网膜于蛋白质合成及运输有关 ,光华内质网则和脂肪胆固醇代谢与糖原的分截脂溶性的毒素解毒有关 .（四）.高尔基体膜的主要功能是为细胞提

18、供一个内部的运输系统 .（五）. 核膜作为细胞核与细胞质之间的重要界膜 ,对稳定核的形态和化学成分起着重要的作用 .（2）. 为什么说信息传递和细胞识别与细胞膜有关 ?答 : 细胞膜上有各种受体 ,能特异的结合激素等信号分子 .一旦受体与激素结合 ,就可将信号跨膜串乡细胞内的酶系 ,产生特定的生理效应 . 所以信息传递与细胞膜有关 .细胞识别作用是一种发身在细胞表面的现象 ,其本质是细胞通过细胞膜上的特定的膜受体或膜抗原与外来的信号物质的特异结合 .相同个体内的合组织器官都有相同的相容性抗原 ,可自相识别 . 不同个体间因相容性抗原不同而相互排斥 .所以细胞识别与细胞膜有关 .P1581.什么

19、是新陈代谢 ?生物体的新陈代谢有哪些共同的特点 ?研究代谢有哪些主要方法 ?答: 新陈代谢是生物与外界环境进行物质交换与能量交换的全过程 .是生物体把从外界摄取含低能量的较简单的化合物 ,转换成含高能量的复杂的细胞结构的化合物的过程 .新陈代谢的共同的特点 :1生物体内的绝大多数代谢反应式在温和的条件下 ,由酶所催化进行的 .2生物体内反应与步骤虽然繁多 ,但互相配合 ,有条不紊 , 彼此协调 ,而有严格的顺序性 .3生物体对内外反应条件有高度的适应性和灵敏的自动调节 .研究的方法有 :1活体内和活体外实验 .2同位素示踪法 .3代谢途径阻断法 .2.解释下列名词 ?生物氧化 :有机物质在生物

20、体细胞内的氧化称之为生物氧化 .呼吸链 :代谢物上的氢原子 ,被脱氢酶及或脱落后 ,经过一系列的传递体 ,最后传递给被激活的氢原子 , 而生成水的全部体系叫呼吸链 .通常也称之为电子传递体系 ,或电子传递链 .细胞色素氧化酶 : 是一类以铁卟啉为辅基的蛋白质 , 在呼吸链中依靠贴得的化合价的变化而传递电子 的酶类 .标准氧化还原电位 E:E：底物水平磷酸化 : 是在被氧化的底物上进行的磷酸化作用 ,其过程中形成了某些高能磷酸化合物的中间产物 ,通过酶的的作用可使 ADP 生成 ATP.磷氧比 :指每消耗一摩尔氧所消耗无机磷酸的摩尔数 .磷酸甘油穿梭 :在真核生物胞液中的 NADH 不能通过正常

21、的线粒体内膜， 糖酵解所产生的 NADH 在线 粒体外将其所携带的 H 转交给能穿透线粒体膜的甘油 -磷酸后，再穿梭进入县里体内后在氧化。3.说明生物体内的水、二氧化碳、 ATP 都是怎样生成的 ?水的生成：生物氧化中代谢物脱下的氢，经过生物氧化作用和吸入的氧结合而形成的。二氧化碳：由于生物体内的糖脂类蛋白质等有机物转变为羧基化合物进行脱酸反应所致。ATP ：生物体通过氧化反应所产生的能量， 除一部分用于维持体温外， 大部分能量通过磷酸化作用转移形成了高能化合物 ATP 。4.已知共轭氧化 -还原对 NAD+/NADH 和丙酮酸 /乳酸的分别为 -0.32V 和-0.19V, 试问:1mol

22、丙酮酸彻底氧化为 CO2 与H2O 时,净生成多少 ATP?以至鱼藤因抑制 NADH 脱H 酶的活性而成为一种重要的杀虫剂 . 当鱼藤酮存在时 ,理论上 1mol 丙酮酸又净生成多少 ATP ？5.在呼吸链中 ,NAD+ 、FAD 、CoQ 及细胞色素类物质是如何传递氢原子核电子功能的 ?答： NDA+或NADP+ 先和酶的活性部位结合，再拖下来。它与代谢物脱下来的氢结合而后还原成NADH 和 NADPH 。当有 H 受体存在时， NADH 和 NADPH 上的 H 可被脱下来二氧化为 NAD+ 或NADP+ 。 NAD+ 2H（2H+ 2e） NADH H+ NADP+2H（2H+2e）NADPH H+以 FAD 作为辅基的酶脱氢时是将代谢物上的一对氢原子直接传给 FAD 而形成 FADH2MH2 + 酶-FAD M + 酶-FADH2