1、实验室生物安全工作及危险防范措施实验室生物平安工作及危险防范措施生物平安工作的核心是危险度评估。 可以借助许多方法来对某一个特定的操作程序或实验进行危险度评估, 其中最重要的是专业判断。 危险度评估应当由那些对所涉及的微生物特性、设备和规程、动物模型以及防护设备和设施最为熟悉的人员来进行。 实验室主任或工程负责人应当负责确保进行充分和及时的危险度评估, 同时也有责任与所在机构的平安委员会和生物平安工作人员密切合作, 以确保有适当的设备和设施来进行相关的研究工作。 危险度评估一旦进行,还应当考虑收集与危险程度相关的新资料以及来自科学文献的其他相关的新信息,以便必要时对危险度评估结果进行定期检查和
2、修订。进行微生物危险度评估最有用的工具之一就是列出微生物的危险度等级。 然而对于一个特定的微生物来讲, 在进行危险度评估时仅仅参考其危险度等级是远远不够的, 适当时还应考虑其他一些因素,包括:1、微生物的致病性和感染数量2、暴露的潜在后果3、自然感染途径4、实验室操作所致的其他感染途径非消化道途径、空气传播、食入5、微生物在环境中的稳定性6、所操作微生物的浓度和浓缩标本的容量7、适宜宿主人或动物的存在8、从动物研究和实验室感染报告或临床报告中得到的信息9、方案进行的实验室操作如超声处理、气溶胶化、离心等10、可能会扩大微生物的宿主范围或改变微生物对于有效治疗方案敏感性的所有基因技术11、当地是
3、否能进行有效的预防或治疗干预。根据危险度评估过程中所明确的上述信息, 可以确定所方案开展的研究工作的生物平安水平级别,选择适宜的个体防护装备, 并结合其他平安措施制订标准操作标准 standardoperatingprocedure,SOP,以确保在最平安的水平下来开展工作。每个实验室都应该采用“平安手册或“操作手册,其中定义了的和潜在的危害,并规定了特殊的操作程序来防止或尽量减小这种危害。 标准的微生物学操作技术是实验室平安的根底,而专门的实验设备仅仅是一种补充, 绝不能替代正确的操作标准。 下面列出了一些最重要的概念。一、进入规定1、在处理危险度2级或更高危险度级别的微生物时,在实验室门上
4、应标有国际通用的生物危害警告标志。2、只有经批准的人员方可进入实验室工作区域。3、实验室的门应保持关闭。4、儿童不应被批准或允许进入实验室工作区域。5、进入动物房应当经过特别批准。6、与实验室工作无关的动物不得带入实验室。二、人员防护1、在实验室工作时,任何时候都必须穿着连体衣、隔离服或工作服。2、在进行可能直接或意外接触到血液、体液以及其他具有潜在感染性的材料或感染性动物的操作时,应戴上适宜的手套。手套用完后,应先消毒再摘除,随后必须洗手。3、在处理完感染性实验材料和动物后,以及在离开实验室工作区域前,都必须洗手。4、为了防止眼睛或面部受到泼溅物、碰撞物或人工紫外线辐射的伤害,必须戴平安眼镜
5、、面罩面具或其他防护设备。5、严禁穿着实验室防护服离开实验室,如去餐厅、咖啡厅、办公室、图书馆、员工休息室和卫生间。6、不得在实验室内穿露脚趾的鞋子。7、禁止在实验室工作区域进食、饮水、吸烟、化装和处理隐形眼镜。8、禁止在实验室工作区域储存食品和饮料。9、在实验室内用过的防护服不得和日常服装放在同一柜子内。三、操作标准1、严禁用口吸移液管。2、严禁将实验材料置于口内。严禁舔标签。3、所有的技术操作要按尽量减少气溶胶和微小液滴形成的方式来进行。4、应限制使用皮下注射针头和注射器。除了进行肠道外注射或抽取实验动物体液,皮下注射针头和注射器不能用于替代移液管或用作其他用途。5、出现溢出、事故以及明显
6、或可能暴露于感染性物质时,必须向实验室主管报告。实验室应保存这些事件或事故的书面报告。6、必须制订关于如何处理溢出物的书面操作程序,并予以遵守执行。7、污染的液体在排放到生活污水管道以前必须去除污染采用化学或物理学方法。根据所处理的微生物因子的危险度评估结果,可能需要准备污水处理系统。8、需要带出实验室的手写文件必须保证在实验室内没有受到污染。四、实验室工作区1、实验室应保持清洁整齐,严禁摆放和实验无关的物品。2、发生具有潜在危害性的材料溢出以及在每天工作结束之后,都必须去除工作台面的污染。3、所有受到污染的材料、标本和培养物在废弃或清洁再利用之前,必须去除污染。4、在进行包装和运输时必须遵循
7、国家和或国际的相关规定。5、如果窗户可以翻开,那么应安装防止节肢动物进入的纱窗。五、生物平安管理1、实验室主任对实验室直接负责的人员负责制订和采用生物平安管理方案以及平安或操作手册。2、实验室主管向实验室主任汇报应当保证提供常规的实验室平安培训。3、要将生物平安实验室的特殊危害告知实验室人员,同时要求他们阅读生物平安或操作手册,并遵循标准的操作和规程。实验室主管应当确保所有实验室人员都了解这些要求。实验室内应备有可供取阅的平安或操作手册。4、应当制订节肢动物和啮齿动物的控制方案。5、如有必要,应为所有实验室人员提供适宜的医学评估、监测和治疗,并应妥善保存相应的医学记录。六、实验室的设计和设施在
8、设计实验室和安排某些类型的实验工作时,对于那些可能造成平安问题的情况要加以特别关注,这些情况包括:1、气溶胶的形成2、处理大容量和或高浓度微生物3、仪器设备过度拥挤和过多4、啮齿动物和节肢动物的侵扰5、未经允许人员进入实验室6、工作流程:一些特殊标本和试剂的使用。七、设计特征1、必须为实验室平安运行、清洁和维护提供足够的空间。2、实验室墙壁、天花板和地板应当光滑、 易清洁、防渗漏并耐化学品和消毒剂的腐蚀。地板应当防滑。3、实验台面应是防水的,并可耐消毒剂、酸、碱、有机溶剂和中等热度的作用。4、应保证实验室内所有活动的照明,防止不必要的反光和闪光。5、实验室器具应当巩固耐用,在实验台、生物平安柜
9、和其他设备之间及其下面要保证有足够的空间以便进行清洁。6、应当有足够的储存空间来摆放随时使用的物品,以免实验台和走廊内混乱。在实验室的工作区外还应当提供另外的可长期使用的储存间。7、应当为平安操作及储存溶剂、放射性物质、压缩气体和液化气提供足够的空间和设施。8、在实验室的工作区外应当有存放外衣和私人物品的设施。9、在实验室的工作区外应当有进食、饮水和休息的场所。10、每个实验室都应有洗手池,并最好安装在出口处,尽可能用自来水。11、实验室的门应有可视窗,并到达适当的防火等级,最好能自动关闭。12、二级生物平安水平时,应在靠近实验室的位置配备高压灭菌器或其他去除污染的工具。13、平安系统应当包括
10、消防、应急供电、应急淋浴以及洗眼设施。14、应当配备具有适当装备并易于进入的急救区或急救室。15、在设计新的设施时, 应当考虑设置机械通风系统,以使空气向内单向流动。如果没有机械通风系统,那么实验室窗户应当能够翻开,同时应安装防虫纱窗。16、必须为实验室提供可靠和高质量的水。 要保证实验室水源和饮用水源的供给管道之间没有交叉连接。应当安装防止逆流装置来保护公共饮水系统。17、要有可靠和充足的电力供给和应急照明, 以保证人员平安离开实验室。 备用发电机对于保证重要设备的正常运转如培养箱、生物平安柜、冰柜等以及动物笼具的通风都是必要的。18、要有可靠和充足的燃气供给。供气设施必须得到良好维护。19
11、、实验室和动物房偶尔会成为某些人恶意破坏的目标。 必须考虑物理和防火平安措施。必须使用巩固的门、纱窗以及门禁系统。适当时还应使用其他措施来加强平安保障。八、实验室设备处理生物平安危害时, 使用平安设施并结合标准的操作将有助于降低危险。 本节阐述了适用于所有生物平安实验室的相关设备的根本原那么。实验室主任应咨询生物平安官员和平安委员会如果有,确保配备足量的设备,并能正确使用。选择设备时应符合一些根本原那么,即:1、在设计上应能阻止或限制操作人员与感染性物质间的接触2、建筑材料应防水、耐腐蚀并符合结构要求3、设备装配后应无毛刺、锐角以及易松动的部件4、设备的设计、建造与安装应便于操作、易于维护、清
12、洁、去除污染和进行质量检验。应尽量防止使用玻璃及其他易碎的物品。 需要详细咨询设备的性能和结构规格, 以确保设施具备必要的平安特性。九、根本生物平安设备1、移液辅助器防止用口吸的方式移液。有不同设计的多种产品可供使用。2、生物平安柜,在以下情况使用: 处理感染性物质;如果使用密封的平安离心杯,并在生物平安柜内装样、取样,那么这类材料可在开放实验室离心 空气传播感染的危险增大时 进行极有可能产生气溶胶的操作时包括离心、研磨、混匀、剧烈摇动、超声破碎、翻开内部压力和周围环境压力不同的盛放有感染性物质的容器、 动物鼻腔接种以及从动物或卵胚采集感染性组织。3、一次性塑料接种环,也可在生物平安柜内使用电
13、加热接种环,以减少生成气溶胶。4、螺口盖试管及瓶子。5、用于去除感染性材料污染的高压灭菌器或其他适当工具。6、一次性巴斯德塑料移液管,尽量防止使用玻璃制品。7、在投入使用前,像高压灭菌器和生物平安柜等设备必须用正确方法进行验收。应参照生产商的说明书定期检测。十、健康和医学监测主管机构有责任通过实验室主任来确保实验室全体工作人员接受适当的健康监测。 监测的目的是监控职业获得性疾病。为到达这些目的,应进行如下工作:1、根据需要提供主动或被动免疫2、促进实验室感染的早期检测3、应禁止高度易感人群如孕妇或免疫损伤人员在高危险实验室中工作4、提供有效的个体防护装备和方法。十一、在一级生物平安水平操作微生
14、物的实验室工作人员的监测指南历史证据说明,在一级生物平安水平操作的微生物不太可能引起人类疾病或兽医学意义的动物疾病。但理想的做法是,所有实验室工作人员应进行上岗前的体检,并记录其病史。疾病和实验室意外事故应迅速报告,所有工作人员都应意识到应用标准的实验室操作技术的重要性。十二、在二级生物平安水平操作微生物的实验室工作人员的监测指南1、必须有录用前或上岗前的体检。 记录个人病史,并进行一次有目的的职业健康评估。2、实验室管理人员要保存工作人员的疾病和缺勤记录。3、育龄期妇女应知道某些微生物如风疹病毒的职业暴露对未出生孩子的危害。保护胎儿的正确措施因妇女可能接触的微生物而异。十三、培训人为的失误和
15、不标准的操作会极大地影响所采取的平安措施对实验室人员的防护效果。因此,熟悉如何识别与控制实验室危害的、有平安意识的工作人员,是预防实验室感染、差错和事故的关键。 基于这一原因,不断地进行平安措施方面的在职培训是非常必要的。 一个有效的平安规程首先始于实验室管理者, 管理者应确保将平安的实验室操作及程序融合到工作人员的根本培训中。 平安措施方面的培训是新工作人员岗前培训的有机组成局部, 应向工作人员介绍生物平安操作标准和实验室操作指南, 包括平安手册或操作手册。 应采用诸如签名传阅的方法,来确保工作人员阅读并理解了这些规程。 实验室主管在对属下工作人员进行标准性实验室操作技术培训时起关键作用,
16、生物平安官员可以帮助进行人员培训并研制教具和教案。人员培训的内容应始终包括如何采用平安的方法来进行以下所有实验室工作人员都会经常遇到的高危操作,包括:1、吸入危险气溶胶产物,如使用接种环、划线接种琼脂平板、移液、制作涂片、翻开培养物、采集血液血清标本、离心等2、食入危险,如处理标本、涂片以及培养物3、在使用注射器和针头时刺伤皮肤的危险4、处理动物时被咬伤、抓伤5、处理血液以及其他有潜在病理学危害的材料6、感染性材料的去除污染和处理。十四、废弃物处理废弃物是指将要丢弃的所有物品。在实验室内,废弃物最终的处理方式与其污染被去除的情况是紧密相关的。 对于日常用品而言,很少有污染材料需要真正去除出实验
17、室或销毁。 大多数的玻璃器皿、 仪器以及实验服都可以重复或再使用。废弃物处理的首要原那么是所有感染性材料必须在实验室内去除污染、高压灭菌或燃烧。用以处理潜在感染性微生物或动物组织的所有的实验室物品,在被丢弃前应考虑的主要问题有:1、是否已采取规定程序对这些物品进行了有效的去除污染或消毒?2、如果没有,他们是否以规定的方式包裹,以便就地燃烧或运送到其他有燃烧设施的地方进行处理?3、丢弃已去除污染的物品时,是否会对直接参与丢弃的人员,或在设施外可能接触到丢弃物的人员造成任何潜在的生物学或其他方面的危害?十五、去除污染高压蒸汽灭菌是去除污染时的首选方法。需要去除污染并丢弃的物品应装在容器中如根据内容
18、物是否需要进行高压灭菌和或燃烧而采用不同颜色标记的可以高压灭菌的塑料袋。也可采用其他可以除去和或杀灭微生物的替代方法。十六、污染性材料和废弃物的处理和丢弃程序要对感染性物质及其包装物进行鉴别并分别进行处理,相关工作要遵守国家和国际规定。废弃物可以分成以下几类:1、可重复或再使用,或按普通“家庭废弃物丢弃的非污染非感染性废弃物2、污染感染性锐器皮下注射用针头、手术刀、刀子及破碎玻璃;这些废弃物应收集在带盖的不易刺破的容器内,并按感染性物质处理3、通过高压灭菌和清洗来去除污染后重复或再使用的污染材料4、高压灭菌后丢弃的污染材料5、直接燃烧的污染材料。锐器皮下注射针头用过后不应再重复使用, 包括不能
19、从注射器上取下、 回套针头护套、截断等,应将其完整地置于盛放锐器的一次性容器中。单独使用或带针头使用的一次性注射器应放在盛放锐器的一次性容器内燃烧,如需要可先高压灭菌。盛放锐器的一次性容器必须是不易刺破的,而且不能将容器装得过满。当到达容量的四分之三时,应将其放入“感染性废弃物的容器中进行燃烧,如果实验室规程需要,可以先进行高压灭菌处理。盛放锐器的一次性容器绝对不能丢弃于垃圾场。高压灭菌后重复使用的污染有潜在感染性材料任何高压灭菌后重复使用的污染有潜在感染性材料不应事先清洗,任何必要的清洗、修复必须在高压灭菌或消毒后进行。废弃的污染有潜在感染性材料除了锐器按上面的方法进行处理以外, 所有其他污
20、染有潜在感染性 材料在丢弃前应放置在防渗漏的容器 如有颜色标记的可高压灭菌塑料袋中高压灭菌。高压灭菌后, 物品可以放在运输容器中运送至燃烧炉。 如果可能,即使在去除污染后, 卫生保健单位的废弃物也不应丢弃到垃圾场。 如果实验室中配有燃烧炉, 那么可以免去高压灭菌: 污染材料应放在指定的容器如有颜色标记的袋子 内直接运送到燃烧炉中。 可重复使用的运输容器应是防渗漏的,有密闭的盖子。这些容器在送回实验室再次使用前,应进行消毒清洁。应在每个工作台上放置盛放废弃物的容器、 盘子或广口瓶,最好是不易破碎的容器 如塑料制品。当使用消毒剂时,应使废弃物充分接触消毒剂即不能有气泡阻隔,并根据所使用消毒剂的不同
21、保持适当接触时间。盛放废弃物的容器在重新使用前应高压灭菌并清洗。污染材料的燃烧必须得到公共卫生、环保部门以及实验室生物平安官员的批准。十七、化学品、火、电、辐射以及仪器设备平安化学品、火、电或辐射事故可以间接导致病原微生物屏障系统的破坏。因此,所有微生物实验室在这些方面必须坚持很高的平安标准。国家或地方的主管部门通常会制订相关的法规和条例,必要时可以从他们那里寻求帮助。爱人者,人恒爱之;敬人者,人恒敬之;宽以济猛,猛以济宽,政是以和。将军额上能跑马,宰相肚里能撑船。最高贵的复仇是宽容。有时宽容引起的道德震动比惩罚更强烈。君子贤而能容罢,知而能容愚,博而能容浅,粹而能容杂。宽容就是忘却,人人都有
22、痛苦,都有伤疤,动辄去揭,便添新创,旧痕新伤难愈合,忘记昨日的是非,忘记别人先前对自己的指责和谩骂,时间是良好的止痛剂,学会忘却,生活才有阳光,才有欢乐。不要轻易放弃感情,谁都会心疼;不要冲动下做决定,会懊悔一生。也许只一句分手,就再也不见;也许只一次主动,就能挽回遗憾。世界上没有不争吵的感情,只有不肯包容的心灵;生活中没有不会生气的人,只有不知原谅的心。感情不是游戏,谁也伤不起;人心不是钢铁,谁也疼不起。好缘分,凭的就是真心真意;真感情,要的就是不离不弃。爱你的人,舍不得伤你;伤你的人,并不爱你。你在别人心里重不重要,自己可以感觉到。所谓华美的转身,都有旁人看不懂的情深。人在旅途,肯陪你一程
23、的人很多,能陪你一生的人却很少。谁在默默的等待,谁又从未走远,谁能为你一直都在?这世上,别指望人人都对你好,对你好的人一辈子也不会遇到几个。人心只有一颗,能放在心上的人毕竟不多;感情就那么一块,心里一直装着你其实是难得。动了真情,情才会最难割;付出真心,心才会最难舍。你在谁面前最蠢,就是最爱谁。其实恋爱就这么简单,会让你智商下降,完全变了性格,越来越不果断。所以啊,不管你有多聪明,多有手段,多富有攻击性,真的爱上人时,就一点也用不上。这件事情告诉我们。谁在你面前很聪明,很有手段,谁就真的不爱你呀。遇到你之前,我以为爱是惊天动地,爱是轰轰烈烈抵死缠绵;我以为爱是荡气回肠,爱是热血沸腾幸福满满。我
24、以为爱是窒息疯狂,爱是炙热的火炭。婚姻生活牵手走过酸甜苦辣温馨与艰难,我开始懂得爱是经得起平淡。爱人者,人恒爱之;敬人者,人恒敬之;宽以济猛,猛以济宽,政是以和。将军额上能跑马,宰相肚里能撑船。最高贵的复仇是宽容。有时宽容引起的道德震动比惩罚更强烈。君子贤而能容罢,知而能容愚,博而能容浅,粹而能容杂。宽容就是忘却,人人都有痛苦,都有伤疤,动辄去揭,便添新创,旧痕新伤难愈合,忘记昨日的是非,忘记别人先前对自己的指责和谩骂,时间是良好的止痛剂,学会忘却,生活才有阳光,才有欢乐。不要轻易放弃感情,谁都会心疼;不要冲动下做决定,会懊悔一生。也许只一句分手,就再也不见;也许只一次主动,就能挽回遗憾。世界
25、上没有不争吵的感情,只有不肯包容的心灵;生活中没有不会生气的人,只有不知原谅的心。感情不是游戏,谁也伤不起;人心不是钢铁,谁也疼不起。好缘分,凭的就是真心真意;真感情,要的就是不离不弃。爱你的人,舍不得伤你;伤你的人,并不爱你。你在别人心里重不重要,自己可以感觉到。所谓华美的转身,都有旁人看不懂的情深。人在旅途,肯陪你一程的人很多,能陪你一生的人却很少。谁在默默的等待,谁又从未走远,谁能为你一直都在?这世上,别指望人人都对你好,对你好的人一辈子也不会遇到几个。人心只有一颗,能放在心上的人毕竟不多;感情就那么一块,心里一直装着你其实是难得。动了真情,情才会最难割;付出真心,心才会最难舍。你在谁面前最蠢,就是最爱谁。其实恋爱就这么简单,会让你智商下降,完全变了性格,越来越不果断。所以啊,不管你有多聪明,多有手段,多富有攻击性,真的爱上人时,就一点也用不上。这件事情告诉我们。谁在你面前很聪明,很有手段,谁就真的不爱你呀。遇到你之前,我以为爱是惊天动地,爱是轰轰烈烈抵死缠绵;我以为爱是荡气回肠,爱是热血沸腾幸福满满。我以为爱是窒息疯狂,爱是炙热的火炭。婚姻生活牵手走过酸甜苦辣温馨与艰难,我开始懂得爱是经得起平淡。
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