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1、PCR试题【A型题】 在五个选项中选出一个最符合题意的答案(最佳答案)。1.以下哪种物质在PCR反应中不需要( )A.Taq DNA聚合酶B.dNTPsC.Mg2+D.RNA酶E.合适pH缓冲液2.以下哪种酶可耐高温( )A.Taq DNA聚合酶B.Hind C.T4连接酶D.RNA酶E.Klenow片段3.PCR反应正确过程应为( )A.退火变性延伸B.变性退火延伸C.退火延伸变性D.变性延伸退火E.延伸变性退火4. PCR技术的本质就是( )A. 核酸杂交技术B. 核酸重组技术C. 核酸扩增技术D. 核酸变性技术E. 核酸连接技术5.Taq DNA聚合酶酶促反应最适温度为( )A.37B.

2、5055C.7075D.8085E.94956.温度均一性较好的PCR仪为( )A.水浴锅PCR基因扩增仪与压缩机PCR基因扩增仪B.半导体PCR基因扩增仪与离心式空气加热PCR基因扩增仪C.压缩机PCR基因扩增仪与半导体PCR基因扩增仪D.压缩机PCR基因扩增仪与离心式空气加热PCR基因扩增仪E.水浴锅PCR基因扩增仪与离心式空气加热PCR基因扩增仪7.一步就可以摸索出最适合反应条件的PCR仪为( )A.普通PCR仪B.梯度PCR仪C.原位PCR仪D.荧光PCR仪E.实时PCR仪8.能在细胞内进行PCR扩增的PCR仪为( )A.普通PCR仪B.梯度PCR仪C.原位PCR仪D.荧光PCR仪E.

3、实时PCR仪9.SteadySlope技术就是下列哪一家公司的专利技术( )A.eppendorf公司B.MJ公司C.Cepheid公司D.Roche公司E.ABI公司10.应用SteadySlope技术的就是哪种PCR仪( )A.普通PCR仪B.梯度PCR仪C.原位PCR仪D.荧光PCR仪E.实时PCR仪11.在下列哪种PCR仪扩增样品可以了解样品中DNA原始拷贝数( )A.普通PCR仪B.梯度PCR仪C.原位PCR仪D.荧光实时PCR仪E.定性PCR仪12.以下就是经过PCR扩增后得到的Ct值,哪个样品的DNA原始拷贝数最多( )A.样品A,Ct = 20B.样品A,Ct = 22C.样品

4、A,Ct = 24D.样品A,Ct = 26E.样品A,Ct = 2813.以空气为加热介质的PCR仪就是( )A.金属板式实时定量PCR仪B.96孔板式实时定量PCR仪C.离心式实时定量PCR仪D.各孔独立控温的定量PCR仪E.荧光实时定量PCR仪14.以下哪个PCR扩增仪的PCR扩增样品槽被设计为离心转子( )A.ABI 7500B.ABI 7900C.Light CycleTMD.SmartCyclerE.RG300015.以下哪个PCR扩增仪使用的就是同一个激发光源与检测器( )A.ABI 7500B.ABI 7900C.Light CycleTMD.SmartCyclerE.RG30

5、0016.可以在同一台定量PCR仪上分别进行不同条件定量PCR反应的就是( )A.ABI 7500B.ABI 7900C.Light CycleTMD.SmartCyclerE.RG300017.拥有独立智能升降温模块的就是( )A.ABI 7500B.ABI 7900C.Light CycleTMD.SmartCyclerE.RG300018.容纳样品量大,无需特殊耗材的就是( )A.ABI 7500B.ABI 7900C.Light CycleTMD.SmartCyclerE.RG300019.PCR基因扩增仪最关键的部分就是( )A.温度控制系统B.荧光检测系统C.软件系统D.热盖E.样

6、品基座20.“位置的边缘效应”就是指( )A.温度的准确性欠佳B.温度的均一性欠佳C.边缘升降温速度快D.边缘升降温速度慢E.梯度模式与标准模式温度不一致21.PCR扩增仪升降温速度快有很多优点,以下哪一项应除外( )A.缩短反应时间B.提高工作效率C.消除位置的边缘效应D.缩短非特异性反应时间E.提高反应特异性22.在梯度模式下得出最佳反应条件,并以此条件在标准模式下单独做,但结果却不如人意,最有可能的原因就是( )A.样品孔温度与设定温度不一致B.样品孔间的温度有差异C.样品孔位置的边缘效应较高D.升降温速度不够快E.不同模式温度特性有差异23.定量PCR扩增仪的关机次序一般为( )A.关

7、软件关PCR仪关电脑B.关软件关电脑关PCR仪C.关PCR仪关软件关电脑D.关PCR仪关电脑关软件E.关电脑关PCR仪关软件24、PCR技术扩增DNA,需要的条件就是( )目的基因 引物 四种脱氧核苷酸 DNA聚合酶等 mRNA 核糖体A、B、C、D、25、镁离子在DNA或RNA体外扩增反应的浓度一般为( )A、0、3-1mmol/LB、0、5-1mmol/LC、0、3-2mmol/LD、0、5-2mmol/L26、多重PCR需要的引物对为( )A、一对引物B、半对引物C、两对引物D、多对引物27、PCR就是在引物、模板与4种脱氧核糖核苷酸存在的条件下依赖于DNA聚合酶的酶促合成反应,其特异性

8、决定因素为( )A、模板B、引物C、dNTPD、镁离子28、在PCR反应中,下列哪项可以引起非靶序列的扩增的扩增( )A、TaqDNA聚合酶加量过多B、引物加量过多C、A、B都可D、缓冲液中镁离子含量过高29、PCR技术就是一种DNA的扩增技术。在一定条件下,加入模板DNA、DNA聚合酶、dATP、dCTP、dGTP、dTTP可以实现DNA的扩增。据此判断不合理的就是 A.dATP在DNA扩增中可以提供能量,同时作DNA合成的原料B.dTTP完全水解后产物有胸腺嘧啶、磷酸、核糖C.DNA扩增过程未加解旋酶,可以通过先适当加温的方法破坏氢键,使模板DNA解旋D.CTP水解脱去两个磷酸基后就是组成

9、RNA的基本单位之一 30、多聚酶链式反应(PCR)就是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。PCR过程一般经历下述三十多次循环:95下使模板DNA变性、解链55下复性(引物与DNA模板链结合)72下引物链延伸(形成新的脱氧核苷酸链)。下列有关PCR过程的叙述中不正确的就是:( )A.变性过程中破坏的就是DNA分子内碱基对之间的氢键,也可利用解旋酶实现B.复性过程中引物与DNA模板链的结合就是依靠碱基互补配对原则完成C.延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸D.PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高31、下列有关PCR技术的叙述,不正确的就是:( )A.PCR技术经过变形、

10、复性、延伸三个阶段B.PCR技术可用于基因诊断,判断亲缘关系等 C.PCR技术需在体内进行 D.PCR技术就是利用碱基互补配对的原则32、PCR技术扩增DNA,需要的条件就是( )目的基因 引物 四种脱氧核苷酸 DNA聚合酶等 mRNA 核糖体A、 B、 C、 D、33、在基因工程中,把选出的目的基因(共1000个脱氧核苷酸对,其中腺嘌呤脱氧核苷酸460个)放入PCR仪中扩增4代,那么,在PCR仪中放入胞嘧啶脱氧核苷酸的个数至少应就是A.640 B.8100 C.600 D.864034、对禽流感的确诊,先用PCR技术将标本基因大量扩增,然后利用基因探针,测知待测标本与探针核酸的碱基异同。下图

11、P表示禽流感病毒探针基因在凝胶的电泳标记位置,M、N、Q、W就是四份送检样品在测定后的电泳标记位置, 哪份标本最有可能确诊为禽流感 ( )A.M B.N C.Q D.W 35、某考古学家在西伯利亚泰加林地区的冰中,发现了一种冰冻的已灭绝的巨大动物的肌肉。她想了解该巨型动物的DNA与现今印度大象的DNA的相似性,于就是做了如下检测工作,其中正确的操作步骤及顺序就是降低温度,检测处理后形成的杂合DNA双链区段 通过PCR技术扩增巨型动物与大象的DNA 把巨型动物的DNA导入大象的细胞中 在一定的温度条件下,将巨型动物与大象的DNA水浴共热A、 B、 C、 D、36、 PCR的发明人就是A、 Mul

12、lis B、 牛顿 C、Kenny D、 James37、 退火温度一般比引物的熔解温度(Tm)低多少合适A、 7 B、 10 C、 5 D、 2 E、 2038、引物的最佳浓度为A、 0、1-0、5 M B、 1-2M C、 5-10M D、 100M E、 200M39、专门用于制备单链DNA的PCR技术就是A、对称PCRB、反向PCRC、RTPCRD、不对称PCRE、嵌套PCR40、PCR变性温度一般为A. 96 B、 85 C、 72 D、 55 E、 10041、pre-mRNA 内含子的5-末端一般为 ( )A、AUB、GUC、AGD、CGE、AC42、在大肠杆菌的DNA损伤修复时

13、,对于填补缺口可能最重要的酶就是A、DNA聚合酶B、DNA聚合酶C、DNA聚合酶D、RNA聚合梅E、以上都不就是43、 可用于扩增未知序列的PCR方法就是( )A、 对称PCRB、 反向PCRC、 RT-PCRD、不对称PCRE、 嵌套PCR44、在聚合酶链反应(PCR)中最常用的DNA聚合酶就是 A.T4 DNA连接酶 B.T7 DNA聚合酶 C. Taq DNA聚合酶D.E、 coli DNA聚合酶I E.E、 coli DNA聚合酶II45、下列关于PCR引物设计的说法错误的就是( )A.设计引物时应考虑使3端引物与5端引物具有相似的Tm值B.每条引物自身不应有稳定的发夹结构C.上下游引

14、物之间不宜形成稳定的二聚体结构D.引物的5与3端必须与模板严格配对结合E.引物与非特异扩增区的序列无同源性46、Taq DNA聚合酶可以不依赖模板在dsDNA的3末端加上一个碱基为( )A、 G B、 A C、 T D、 C E、 I 【X型题】 每题的备选答案中有两个或者两个以上正确答案。1.PCR技术每一个循环均包含以下哪些环节( )A.酶切B.变性C.退火D.延伸E.连接2.以下哪些酶可用于PCR反应( )A.KlenowB.Hind C.Taq DNA聚合酶D.RNaseE.DNase3.目前常用的PCR基因扩增仪控温方式有( )A.水浴锅控温B.压缩机控温C.半导体控温D.离心式空气

15、控温E.金属控温4.普通PCR基因扩增仪除通常的定性PCR仪外,还包括( )A.水浴式PCR仪B.梯度PCR仪C.原位PCR仪D.变温金属块式PCR仪E.变温气流式PCR仪5.按变温方式不同,PCR基因扩增仪可分为( )A.水浴式PCR仪B.梯度PCR仪C.原位PCR仪D.变温金属块式PCR仪E.变温气流式PCR仪6.目前市场上实时荧光定量PCR仪一般有哪些类别( )A.金属板式实时定量PCR仪B.梯度定量PCR仪C.原位定量PCR仪D.离心式实时定量PCR仪E.各孔独立控温的定量PCR仪7.下列产品哪些属于金属板式实时定量PCR仪( )A.Light CycleTM荧光定量PCR仪B.ABI

16、 7500荧光定量PCR仪C.MJ公司Chromo 4荧光定量PCR仪D.Bio-rad公司iCycler荧光定量PCR仪E.Rotor-Gene 3000荧光定量PCR仪8.下列产品哪些属于离心式实时定量PCR仪( )A.Light CycleTM荧光定量PCR仪B.ABI 7500荧光定量PCR仪C.MJ公司Chromo 4荧光定量PCR仪D.Bio-rad公司iCycler荧光定量PCR仪E.Rotor-Gene 3000荧光定量PCR仪9.PCR基因扩增仪的温度控制主要就是指( )A.温度的准确性控制B.温度的均一性控制C.退火温度控制D.升降温速度控制E.延伸温度控制10.荧光定量P

17、CR仪的荧光检测系统主要包括( )A.发光二极管B.激发光源C.检测器D.光度计E.光电倍增管11.荧光定量PCR仪的荧光强度减弱或不稳定,可能的原因有( )A.滤光片发霉B.光源损耗C.半导体模块故障D.荧光染料污染E.光电倍增管灵敏度下降12、PCR实验室应具备至少几个区域A、 试剂准备区 B、 标本制备区 C、 扩增区 D、 污染处理区 E、 观察区13、PCR时,在样品的收集、抽提与扩增的所有环节都应该注意:A.使用一次性吸头,严禁与PCR产物分析室的吸头混用,吸头不要长时间暴露于空气中,避免气溶胶的污染;B、 避免反应液飞溅,打开反应管时为避免此种情况,开盖前稍离心收集液体于管底。若

18、不小心溅到手套或桌面上,应立刻更换手套并用稀酸擦拭桌面;C、 操作多份样品时,制备反应混合液,先将dNTP、缓冲液、引物与酶混合好,然后分装,这样即可以减少操作,避免污染,又可以增加反应的精确度;D、 最后加入反应模板,加入后盖紧反应管;E、 操作时设立阴阳性对照与空白对照,即可验证PCR反应的可靠性,又可以协助判断扩增系统的可信性;14、关于PCR引物正确的就是A、引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。B、 引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。C、 引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。

19、ATGC最好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶 核苷酸的成串排列。D.避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别就是3端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。E.引物3端的碱基,特别就是最末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。、关于Taq DNA聚合酶的生物学活性已下正确的就是:.7080 150核苷酸/S/酶分子.70 60核苷酸/S/酶分子.55 24核苷酸/S/酶分子.高于90时, DNA合成几乎不能进行.温度要先高后低、PCR扩增出现假阳性可能原因就是A、 引物设计不合适 B、 整个基因组或大片段的交叉污染 C、 空气中的小片

20、段核酸污染 D、 试剂或器材均消毒不彻底 E、 退火温度不合适【A型题】1.D 2.A 3.B 4.C 5.C 6.E 7.B 8.C 9.A 10.B 11.D 12.A 13.C 14.C 15.C 16.D 17.D 18.B 19.A 20.B 21.C 22.E 23.A 24、A 25、D 26、D 27、B 28、C 29、B30、C 31、C 32、A 33、B 34、 C 35、D 36、 A 37、 C 38、 A39、 D 40、 A 41、 B 42、 A 43、 B 44、 C 45、D 46、B【X型题】1.BCD 2.AC 3.CD 4.BC 5.ADE 6.ADE 7.BCD 8.AE 9.ABD 10.BC 11.ABE 12、 ABC 13、 ABCDE 14. .16、ABCD