残留溶剂顶空分析方法验证方案模版.docx

1、残留溶剂顶空分析方法验证方案模版方案批准起 草者日期：质量研究室审核日期：QC 审核日期：法规事务部审核日期：QA 审核日期：批准日期：注：在方案批准部分签字表明签字者同意方案中规定的检测项目检测方法和记录要求。在执行 本方案的过程中可能会出现影响严格执行本方案的偏差，对较小的偏差将通过偏差报告的形式 来解决，对于关键性偏差，如对方法的调整、对参数或接受标准的调整必须制定出增补方案并 按照原方案批准程序得到批准才能进行。所有的偏差报告和增补方案必须在提交验证报告供批 准时一同提交。1.概述 3.2.参考资料 4.3.职责 4.4.色谱系统及色谱条件 .4.5.器材与试剂 5.6.验证试验 5.

2、6.1系统适应性 5.6.2专届性 6.6.3耐用性 .7.6.4定量限 .7.6.5检测限 8.6.6线性与范围 8.6.7准确度 9.6.8精密度 .1.17.再验证周期 128.偏差及纠正措施 .129.最终审核和批准 .12药品残留溶剂顶空分析方法草案 .141.概述1.1根据ICH对药品中残留溶剂含量的要求及 盐酸嚓氯匹定生产工艺，必须控制 盐酸嚓氯匹 定生产工艺中使用到的溶剂 乙醇、丁酮、甲苯、N,N-二甲基甲酰胺(DMF)的残留量。限度分 别为：乙醇 5000ppm、丁酮 5000ppm、甲苯 890ppm、DMF 880ppm。1.2分析方法草案见附件。1.3本分析方法属于杂质

3、定量分析，因此需要验证的项目有： 系统适应性、专属性、线性、准确度、检测限、定量限、精密度、耐用性，具体参数及接受标准要求见下表：项目参数接受标准系统适应性残留溶剂峰曲枳的RSD-理论塔板数(N)拖尾因子(T)分离度(R)(残留溶剂间)(1)RSD W0.0%(2)N 沼0000(3)T 乜0(4)R 源.0专属性溶剂和已知杂质的干扰(1)空白溶液图谱中目标峰出峰位置附近无显著 干扰峰。(2)供试品-标准溶液图谱中目标峰与相邻峰的 分离度应不小于1.5 o(3)对各残留溶剂出峰位置进行定位，用 RRT表不。线性及范围研究范围为：定量限，10% , 20%, 40% , 60% , 80% ,

4、100% , 120% 残留溶 剂限度水平，进行线性研究(1)列出残留溶剂浓度与峰面积的线性回归方程，要求相关系数不小于 0.99;(2)Y轴截距绝对值与100%线性浓度水平响应 值比值应小于5%。(3)计算残差平方和；(4)报告Y轴截距95%置信区间(5)每个浓度水平三次重复进样峰面积 RSD不大于10% o检测限信噪比S/NS/N在35范围内定量限信噪比S/N(1)S/N在1015范围内(2)定量限应不高于残留溶剂限度的 50%(3)三次重复进样定量限溶液准确度(回收率)选取 80%、 100%、120% 三种浓度，每一浓度配制3份，用9次测定结果评价方 法的回收率。(1)单一回收率应在

5、80.0%120.0%之间(2)各浓度水平内的回收率及各浓度水平回收率 平均值之间的RSD不大于2.0%。(3)报告平均回收率95%置信区间精密度重复性实验员A、仪器1测定标准溶液峰面积RSD不大于10.0%中间精密度实验员A、仪器1连续三 天测定同一实验人员不同日期之间峰面积的 RSD不超过 10.0%实验员A、使用仪器2测 定同一实验人员在不同仪器之间峰面积的 RSD不超过10.0%实验员B、使用仪器1测 定不同实验员，采用相同仪器，供试品峰面积结果的RSD不超过10.0%耐用性1.改变流速(土 XX%)同“系统适应性要求”2.改变初始柱温(土 XX C)3改变色谱柱的批号2.参考资料IC

6、H Q3C (R3), November 2005.ICH Q2 (R1), November 2005. Residual Solvents, United States Pharmacopoeia 31, November 2007. Residual Solvents, European Pharmacopoeia 6.0, June 2007.3.职责姓名部门资质职责XXX质量研究室助理工程师负责起草XX残留溶剂分析方法验证方案及执行XXX质量研究室检验员协助XX残留溶剂分析方法验证执行伍蔚萍质量研究室工程师负责审核XX残留溶剂分析方法验证方案并提供指导XXX质量检验部负责审核XX残留

7、溶剂分析方法验证方案并提供指导何利军法规事务部工程师负责审核XX残留溶剂分析方法验证方案并提供指导周俊林质量保证部工程师负责审核XX残留溶剂分析方法验证方案陆本乐质量副总经理负责批准XX残留溶剂分析方法验证方案4.色谱系统及色谱条件4.1色谱系统项目第一台第二台第三台GC主机Agilent 7890AAgilent 7890AAgilent 6890N顶空进样器Agilent G1888AAgilent G1888AAgilent 7694E自动液体进样器Agilent 7683BAgilent 7683BAgilent 7683B工作站及版本号Chemstation B.03.01Chems

8、tation B.03.01Chemstation B.02.01校正有效期2009.09.202009.09.202009.09.204.2色谱条件GC参数柱温40 C 保持 20min , 10 C /min 升温至 240 C ,并在 240 C 保持 20min检测器温度【c】250进样口温度【c】140载气N2载气流速【ml/min】4.8分流比10: 1运行时间【min】60氢气流速【ml/min 40空气流速【ml/min】400色谱柱型号DB-624检测器类型FID色谱柱规格30e 0.53mm, 3 叩顶空进样器参数平衡温度【C】80定量管温度【C】90传输线温度【C】105

9、顶空瓶振摇方式low顶空瓶平衡时间【min 45加压时间【min】0.5顶空进样器参数:min 】0.20.17E用吕填允廿Y同正用官甲衡时间【min】进样时间【min ：1.0进样量【mL】1.05.器材与试剂表2.器材列表名称级别/规格编号校正有效期厂家分析天平分度值0.01mgQC-BA-012009.09.20Mettler Toledo分析天平分度值0.1mgQC-BA-022009.09.20Mettler Toledo移液管A/1.0ml, 10.0ml容量瓶A/10ml, 50ml, 100ml表3. 试剂列表品石批号级别（纯度）供应商/来源有效期/复测期乙醇609995AR临

10、安青山化学试剂厂丁酮050306AR汕头金砂化工厂甲苯20060601AR临安青山化学试剂厂DMF501124ARTEDIA盐酸唾氯匹定供试 品20069028EP企业自制6.验证试验6.1系统适应性目的：对由分析设备、实验操作、被分析供试品组成的完整的系统进行评估。接受标准：计算标准溶液图谱中目标峰各检测参数:连续六次进样标准溶液所得图谱中目标峰峰面积 RSEK 10%理论塔板数（N）: 10000分离度（R）:法2.0残留溶剂间）拖尾因子：206.1.1溶液配制空白溶液：DMI。标准储备溶液： 精密称取乙醇0.25g、丁酮0.25g、甲苯0.0445g、DMF0.044g置于已有20ml

11、DMI的100.0ml容量瓶中，以 DMI稀释至刻度，混匀。标准溶液：移取标准储备溶液 10.0ml ,置100.0ml容量瓶中，用 DMI稀释至刻度，混匀。即得 乙醇 250 昭/ml、丁酮 250（_g/ml、甲苯 44.5 四/ml、DMF44 四/ml。分别移取5.0ml空白溶液、标准溶液，置于顶空瓶中，密封，即得。6.1.2分析色谱系统稳定后，按下列顺序进样分析:编勺名称进样次数1空白溶液12标准溶液66.2专属性目的：对分析方法准确可靠测定被分析物的能力进行测试。接受标准空白溶液图谱中目标峰出峰位置附近无显著干扰峰。供试品-标准溶液图谱中目标峰与相邻峰的分离度应不小于 1.5。对各

12、残留溶剂出峰位置进行定位，用 RRT表示。6.2.1溶液配制注：分别配制各残留溶剂限度水平的定位溶液，及残留溶剂混合定位溶液 （标准溶液）。乙醇定位溶液：称取乙醇0.25g，置于已有20mlDMI的100ml容量瓶中，以 DMI稀释至 刻度，混匀。移取上述溶液 10ml，置100ml容量瓶中，以DMI稀释至刻度，混匀。浓度250 四/ml。丁酮定位溶液：称取丁酮0.25g，置于已有20mlDMI的100ml容量瓶中，以 DMI稀释至 刻度，混匀。移取上述溶液 10ml，置100ml容量瓶中，以DMI稀释至刻度，混匀。 丁酮 250 ml。DMF定位溶液：称取DMF0.044g，置于已有20ml

13、DMI的100ml容量瓶中，以 DMI稀释 至刻度，混匀。移取上述溶液 10ml，置100ml容量瓶中，以DMI稀释至刻度，混匀。DMF44 昭/ml。甲苯定位溶液：称取 甲苯0.0445g，置于已有20mlDMI的100ml容量瓶中，以 DMI稀释 至刻度，混匀。移取上述溶液 10ml，置100ml容量瓶中，以DMI稀释至刻度，混匀。 甲 苯 44.5 昭/ml标准溶液：配制同“6.1系统适应性”项下。供试品-标准溶液：称取0.25g供试品，置20ml顶空瓶中，向其中加入 5.0ml标准溶液， 密封，即得供试品-标准溶液。分别移取5.0ml空白溶液、标准溶液、各定位溶液，置于顶空瓶中，密封，

14、即得。6.2.2分析色谱系统稳定后，按下列顺序进样分析：编p名称进样次数1空白溶液22标准溶液63r乙醇定位溶液14丁酮定位溶液15甲苯定位溶液16:DMF定位溶液17供试品-标准溶液18标准溶液16.3耐用性目的：确认在测定条件有微小变动时，测定结果不受影响的承受程度。接受标准各项改变测试结果均应满足系统适应性要求。6.3.1柱温改变试验（戋%）,其他条件不变。原柱温：40 C改变后柱温 （1 ） 39 C （2） 41 C溶液配制：同6.1系统适应性”项下。分析进样：同6.1系统适应性”项下。6.3.2改变载气流速（d5%）,其他色谱条件不变。原载气流速：4.8ml/min改变后载气流速：

15、 （1） 4.6ml/min （2） 5.0 ml/min溶液配制：同6.1系统适应性”项下。分析进样：同6.1系统适应性”项下。6.3.3改变色谱柱批号，其他色谱条件不变。用同一型号、不同批号的色谱柱对系统适应性进行测试。溶液配制：同6.1系统适应性”项下。分析进样：同6.1系统适应性”项下。6.4定量限在仪器系统稳定后，连续进样空白溶液 3次，记录空白溶液图谱基线噪声值。按信噪比 （S/N）在1015范围的要求，配制定量限溶液，进样 3次。以下式计算信噪比（S/N）:2HS/N = h上式中:H一定量限溶液图谱中待测残留溶剂峰高;h 一空白溶液图谱中在待测残留溶剂出峰位置附近的基线噪声。如

16、有可能，基线噪声范围 应对称地覆盖待测残留溶剂出峰位置。接受标准：残留溶剂定量限应不大于其限度的 50% , 3次重复进样所得目标峰面积 RSD不大于10%。6.5检测限在仪器系统稳定后，连续进样空白溶液 3次，记录空白溶液图谱基线噪声值。按信噪比 （S/N）35范围之内的要求，配制检测限溶液。信噪比 （S/N）计算方法同“ 6.4定量限”项下。6.6线性与范围目的：测试在给定的范围内，待测物的响应值与供试品中被分析物的浓度成正比例关系的程度。注：线性范围从各待测残留溶剂定量限到标准溶液浓度的 120%，共8个点，分别为：定量限、10%水平、20%水平、40%水平、60%水平、80%水平、10

17、0%水平、120%水平。残留溶剂线性范围最低浓度应为定量限浓度；若残留溶剂定量限溶液图谱峰面积大于某浓度水平线性溶液图谱中残留溶剂峰面积，则该浓度水平溶液及以下各浓度水平溶液不计算。接受标准用峰面积和与其相对的浓度绘制标准曲线 y=mx+b。计算残差平方和；I %bias I 5%相关系数不小于0.99。报告Y轴截距95%置信区间。每个浓度水平溶液三次重复进样所得峰面积 RSD%不大于10%。%bias=100b/（mC+b）其中： C为100%水平线性溶液浓度， 四/mlm为线性曲线斜率b为线性曲线Y轴截距6.6.1溶液配制空白溶液：DMI。标准储备溶液： 精密称取乙醇0.25g、丁酮0.2

18、5g、甲苯0.0445g、DMF0.044g置于已有20ml DMI的100.0ml容量瓶中，以 DMI稀释至刻度，混匀。其中 乙醇2500旧/ml、丁酮2500 四/ml、甲苯 445 四/ml、DMF440 四/ml标准溶液：移取标准储备溶液 10.0ml ,置100.0ml容量瓶中，用 DMI稀释至刻度，混匀。即得 乙醇250昭/ml、丁酮250旧/ml、甲苯44.5四/ml、DMF44四/ml。线性溶液：按照下列水平配制各水平线性溶液。水平(%)标准储备溶液体积(ml)容量瓶体积(ml)浓度(卬g/ml)乙醇丁酮甲苯DMF12065030030053.452.8100550250250

19、44.544.08045020020035.635.26035015015026.726.44025010010017.817.62015050508.98.810110025254.454.4定量限按6.5定量限浓度6.6.2分析在获得稳定的基线后，按下列顺序进样分析:编勺名称进样次数1空白溶液22标准溶液63定量限溶液3410%线性溶液3520 %线性溶液3640 %线性溶液37标准溶液1860 %线性溶液3980 %线性溶液310100 %线性溶液311120 %线性溶液312标准溶液16.7准确度目的：考察残留溶剂分析方法测定结果与真实值或参考值接近的程度。注：分别向供试品中加入 80

20、%、100%、120%浓度水平稀释溶液，得三个水平准确度溶液。 每个水平配制三份。接受标准单一回收率应在 80.0%120.0%之间各浓度水平内的回收率及各浓度水平回收率平均值之间的 RSD不大于10.0%。报告平均回收率95%置信区间6.7.1溶液配制空白溶液：DMI。标准溶液：同6.保统适应性”项下。80%稀释液：称取乙醇0.20g、丁酮0.20g、甲苯0.0356g、DMF0.0352g 置于已有20mlDMI的100ml容量瓶中，以 DMI稀释至刻度，移取上述溶液 10ml，置100ml容量瓶中，用DMI稀释至刻度，混匀。80 %准确度溶液： 称取供试品0.25g，置20ml顶空瓶中，

21、加入 80 %稀释液5.0ml ,密封 瓶盖，即得。同法配制三份。100%稀释液：称取乙醇0.25g、丁酮0.25g、甲苯0.0445g、DMF0.044g ,置于已有 20ml DMI的100ml容量瓶中，以 DMI稀释至刻度，移取上述溶液 10ml，置100ml容量瓶中，用DMI稀释至刻度，混匀。100%准确度溶液： 称取供试品0.25g，置20ml顶空瓶中，加入100 %稀释液5.0ml ,密 封瓶盖，即得。同法配制三份。120%稀释液：称取乙醇0.30g、丁酮0.30g、甲苯0.0534g、DMF0.0528g ,置于已有20ml DMI的100ml容量瓶中，以 DMI稀释至刻度，移取

22、上述溶液 10ml，置100ml容量瓶中，用DMI稀释至刻度，混匀。120%准确度溶液： 称取供试品0.25g，置20ml顶空瓶中，加入120 %稀释液5.0ml ,密 封瓶盖，即得。同法配制三份。6.7.2分析在获得稳定的基线后，按下列顺序进样分析：编P名称进样次数1空白溶液12标准溶液63供试品溶液114供试品溶液21580%准确度溶液116 80%准确度溶液21780%准确度溶液318100%准确度溶液119100%准确度溶液2110100%准确度溶液3111120%准确度溶液1112120%准确度溶液2113120%准确度溶液3114标准溶液16.7.3计算以外标法计算准确度溶液中残留

23、溶剂的测得量，减去供试品中残留溶剂的量，以此差值除以加入的稀释液中残留溶剂量，即得回收率，计算公式如下：wfbfr贵 测得量-样品原有量 CfS-WC%回收率 = 100 = 100加入量 CaW%上式中：Cf为准确度溶液各残留溶剂的测定浓度， g/ml；W为供试品的称重，g；C为供试品中残留溶剂的含量， ppm ;计算公式见附件CA为加入的稀释液各残留溶剂的浓度， g/ml。P为残留溶剂标准品纯度；测定浓度CF =Af Cs pAs上式中：A f为准确度溶液图谱中残留溶剂峰面积；A s为标准溶液图谱中残留溶剂峰面积；Cs为标准溶液中各残留溶剂浓度， H g/ml;6.8精密度注：由于实际供试

24、品中目标残留溶剂有些能够检出，有些未检出，此时比较供试品含量测定结果无法反映精密度。故以标准溶液代替供试品考察精密度。6.8.1重复性目的：在相同的操作条件下，测试在较短时间间隔精密度。接受标准连续六次进样标准溶液所得图谱中目标残留溶剂峰面积的 RSD不超过10%。6.8.1.1溶液配制空白溶液：DMI。标准溶液：同6.1 系统适应性”项下。6.8.1.2分析在获得稳定的基线后，按下列顺序进样分析：编P名称进样次数1空白溶液22标准溶液66.8.2中间精密度目的：按照重复性实验的测定程序，在同一实验室，评价在改变实验员、日期条件下所的结果之间的精密度。接受标准不同实验者、不同日期、不同仪器的测

25、试结果对应的RSD分别不大于10%。6.8.2.1不同日期测定：由实验员 A,以仪器I不同日期 1, 2, 3天按照重复性实验的测定程序测定。6.8.2.1.1溶液配制同“6L1重复性”项下。6.8.2.1.2进样顺序同“6L1重复性”项下。6.8.2.2不同仪器的测定：由实验员 A,以仪器II按照重复性实验的测定程序测定。6.8.2.2.1溶液配制同“6L1重复性”项下。6.8.2.2.2进样顺序同“6L1重复性”项下。6.8.2.3不同实验员的测定：由实验员 B,以仪器I按照重复性实验的测定程序测定。6.8.2.2.1溶液配制同“6L1重复性”项下。6.8.2.2.2进样顺序同“6L1重复

26、性”项下。7.再验证周期若分析方法的改变超出方法验证范围，或产品生产工艺发生改变，需对分析方法进行再验证。8.偏差及纠正措施应将所出现的所有偏差和所采取的纠正措施应记录在 偏差清单”中。对因发生偏差而导致的任何变更控制，应将变更控制表附在本验证文件后或指出其所在位置。应验证纠正措施并在相应 的栏目内签名并注明日期。偏差清单偏差序号偏差内容纠正措施负责人完成日期9.最终审核和批准验证结束后，应分析所有验证数据，完成分析方法验证报告。如果：a.本分析方法验证方案中的内容均已执行，并附相应的实验报告，结果符合要求。b.所有偏差均已被明确列出且得到纠正。c.验证报告均已经过质量研究室主管、 QC代表、

27、法规事务部代表、QA代表审核。则：公司质量负责人批准验证报告。药品残留溶剂顶空分析方法草案1.试剂与试液:(AR)正庚烷3.色谱条件GC参数柱温Temp0 : 80 C Time0 : 3min Rate1 : 15 C /minTemp1 : 140 C Time1 : 0min Rate2 : 35 C /minTemp2 : 245 C Time2 : 10min检测器温度【C】250进样口温度【c】200载气n2载气流速【ml/min】4.8分流比10:1运行时间【min 20氢气流速【ml/min】40空气流速【ml/min】400色谱柱型号DB-624检测器类型FID色谱柱规格30nm 530 m 3.00 卬m顶空进样器参数顶空瓶加热温度【C】100r定量管温度【c】130传输线温度【C】140顶空瓶振摇方式High顶空瓶平衡时间【min】30顶空瓶加压时间【min】0.400.200.10正用吕填允时日J【min】正用官甲衡时间【min】进样时间【min】1.00进样量【mL】1.04.溶液配制空白溶液：DMI。标准储备溶液：称取正庚烷0.100g、DMF