LC16高效液相色谱性能确认方案.docx

1、LC16高效液相色谱性能确认方案甘肃*制药有限责任公司文件编号-103-/-00页码第1页共46页LC-16高效液相色谱仪性能确认方案LC16高效液相色谱仪性能确认方案方案批准审批公司/职务姓名签名日期编制人检查人审核人版本日期修订原因00新制订批准人甘肃*制药有限责任公司文件编号-103-/-00页码第2页共46页LC-16高效液相色谱仪性能确认方案1. 介绍 32. 目的 33. 范围 33.1范围内 33.2范围外 34. 职责 45. 缩略语 46. 法规和指南 56.1法规 56.2指南 57. 参考文件 68. 设备描述 69. 文件管理规范 710. 测试项目列表 711. 性能

2、确认测试 811.1人员确认 811.2文件确认 811.3培训确认 911.4测试仪器仪表校准确认 911.5柱温箱准确度与稳定性测试 1011.6泵流量准确度和稳定性测试 1111.7泵流量精密度测试 1211.8泵梯度流量准确度测试 1311.9紫外检测器基线噪音与基线漂移测试 1411.10紫外检测器笊灯光强度测试 1411.11紫外检测器波长示值准确性测试 1511.12进样器准确性测试 1611.13进样器线性测试 1611.14示差折光检测器信噪比测试 1711.15示差折光检测器基线漂移测试 1812. 验收标准 1813. 偏差处理 1914. 变更控制 1915. 性能确认

3、报告 1916. 附件清单 1917. 支持性附录清单 1918. 测试报告 20甘肃*制药有限责任公司文件编号-103-/-00页码第3页共46页LC-16高效液相色谱仪性能确认方案1.介绍甘肃*制药有限责任公司（以下简称：*制药）位于平凉市灵台县工业区，2009 年新建二个大输液车间，用于生产大输液。该厂房名称为大输液车间一、二，共有一层， 建筑面积15999. 68平方米。QC实验室位于综合办公楼东侧一、二、三层，总体占地面积 约为1045静。QC实验室分为理化实验区、微生物实验区和办公区三个部分。职能包括进厂 原辅料、包材、中间体、成品检验工作和环境监控/公用工程相关检验活动等。该项目

4、要 通过中国GMP 2010版。检验中心的设计按中国新版GMP （2015修订版）、GMP设计、施工。LC-16高效液相色谱仪根据系统影响性评估的方法确定为直接影响系统。所有直接影响系统将按照检验中心验证总计划（VMP）（文件编号：JY-VMP-001）所 附的验证矩阵进行确认，本方案为高效液相色谱仪的安装、运行、性能确认，因此所有 的安装、运行、性能确认活动将按照本方案执行并记录。2.目的按照GMP的要求，需要对该仪器继续安装、运行、性能确认，以确定目前的实验室环境能够 满足该仪器的操作和使用，以确认高效液相色谱仪的运行、性能符合相应的要求，是否可满 足确认所接收标准及日常分析检测工作的需要

5、，测试和检查的结果将按照该方案进行记录。3.范围3.1范围内：本仪器性能确认的范围为检验中心二层化测仪器室，型号为LC-16 （设 备编号:HFM-JY-045）的高效液相色谱仪性能的确认。3.2范围外：无甘肃*制药有限责任公司文件编号-103-/-00页码第4页共46页LC-16高效液相色谱仪性能确认方案4.职责参与人员公司/职务职责质量负责人本次确认小组组长，负责本次确认方案的审核、实施， 相关技术支持，工作总体安排和实施，监督整个确认 过程的实施，组织调查和处理本次确认过程中出现的 异常情况。负责本次确认过程参与人员的培训工作。QA负责确认方案的起草及培训工作，按照确认内容进行 分析工作

6、，完成所有图谱、数据分析，试验记录。QC主管负责方案技术审核。质量负责人负责批准方案实施5.缩略语缩略语定义CCA部件关键性评估CFDA国家食品药品监督管理总局DQ设计确认GMP药品生产质量管理规范ID标识IQ安装确认ISPE国际制药工程协会N/A不适用甘肃*制药有限责任公司文件编号-103-/-00页码第5页共46页LC-16高效液相色谱仪性能确认方案OQ运行确认PQ性能确认SIA系统影响性评估SOP标准操作规程URS用户需求说明6.法规和指南为编写本方案，参考了以下法规和指南。6.1法规/国家食品药品监督管理总局（CFDA）,中国，药品生产质量管理规范（2010年修 订）,2011年03月

7、/国家食品药品监督管理总局（CFDA）,中国，药品生产质量管理规范（2010年修 订），附录，确认与验证，2013年03月21日，征求意见稿6.2指南/国家食品药品监督管理总局（CFDA）药品认证管理中心，中国，药品GMP指南（第 五卷，调试与确认）,2001年，第1版。,药品监管公约，药品监管合作计划，“有关验证主计划、安装和运行确认、非无 菌工艺验证、清洁验证的建议”，2004年7月。/关于GMP要求的指南，第二部分：验证，2011年./良好自动化生产实践指南，2008年第5版。甘肃*制药有限责任公司文件编号-103-/-00页码第6页共46页LC-16高效液相色谱仪性能确认方案7.参考文

8、件序号文件名称文件编号版本生效日期1新建验证总计划JY-VMP-001002设备安装和验收管理规程SMP-SB-004003计量器具管理规程SMP-SB-012004LC-16操作说明书HFM-JY-045005文件管理规程SMP-WJ-001006偏差处理管理规程SMP-ZL-007007确认与验证管理规程SMP-YZ-001008变更控制管理规程SMP-ZL-008009培训管理规程SMP-JG-0030010培训计划REC-XZ-0010011培训记录REC-XZ-003008. 设备描述该高效液相色谱仪位于检验中心二层化测仪器室，是根据质量控制的目的和要求购置的精密 仪器，主要用于样品

9、的含量测定、鉴别、有关物质的检查等，该仪器由输液泵、在线脱气机、 自动进样器、紫外检测器、柱温箱及Class VP色谱工作站、电脑、打印机等组成。甘肃*制药有限责任公司文件编号-103-/-00页码第7页共46页LC-16高效液相色谱仪性能确认方案9. 文件管理规范依文件管理规程（文件编号：SMP-WJ-001）严格执行。10. 测试项目列表在下面的表格列出了本方案将要执行的测试。测试编号测试名称12.1人员确认12.2文件确认12.3培训确认12.4测试仪器仪表校准确认12.5柱温箱准确度与稳定性测试12.6泵流量准确度与稳定性测试12.7泵流量精密度测试12.8泵梯度流量准确度测试12.9

10、紫外检测器基线噪音和基线漂移测试12.10紫外检测器笊灯光强度测试12.11紫外检测器波长示值准确性测试12.12进样器准确性测试12.13进样器线性测试12.14示差折光检测器信噪比测试12.15示差折光检测器基线漂移测试甘肃*制药有限责任公司文件编号-103-/-00页码第8页共46页LC-16高效液相色谱仪性能确认方案11. 性能确认测试11.1 A员确认/目的确认所有执行本方案的人员以及签名。列出所有执行本方案的人员（姓名、公司、部门和职位）。执行方案人员本人在签名处使用黑色签字笔书写本人签名以及日期。/可接受标准所有执行本方案人员本人使用黑色签字笔正确书写本人签名及日期。所有执行本方

11、案的人员（姓名、签名、公司、部门、职位和日期）已记录。/测试报告测试结果填写在测试报告2人员确认表内。11.2文件确认/目的确认LC-16高效液相色谱仪相关文件的文件状态。在测试报告3文件确认中记录运行LC-16高效液相色谱仪确认所需要文件 名称。记录文件编号，以及文件审核状态。/可接受标准 LC-16高效液相色谱仪运行所需要的文件都存在。文件处于已批准或草稿状态。甘肃*制药有限责任公司文件编号-103-/-00页码第9页共46页LC-16高效液相色谱仪性能确认方案/测试报告测试结果填写在测试报告3文件确认表内，如有偏差记录在偏差报告中。11.3培训确认/目的确认所有参与方案实施的人员经过验证

12、活动培训。/程序对方案实施人员进行LC-16高效液相色谱仪方案培训，记录方案名称、方案 编号、版本号，并由培训人根据培训管理规程（文件编号：SMP-JG-003版 本：00）对方案实施人员培训效果进行评价。方案实施人员取得并且熟悉LC-16高效液相色谱仪构造和运行，并填写培训记 录。/可接受标准所有方案实施人员已经过LC-16高效液相色谱仪方案培训，培训效果合格。所有本方案实施人员对LC-16高效液相色谱仪构造和运行进行培训，培训记录 存在。/测试报告测试结果填写在测试报告4培训确认表内，如有偏差记录在偏差报告中。11.4测试仪器仪表校准确认/目的确认测试使用仪器仪表均经过校准，且在有效期内。

13、/暨在测试报告5测试仪器仪表校准确认中记录测试对LC-16高效液相色谱仪用仪器仪表名称、编号、型号、用途、校准证书编号、校准日期以及下次校甘肃*制药有限责任公司文件编号-103-/-00页码第10页共46页LC-16高效液相色谱仪性能确认方案准日期。并检查是否能够追溯到中国国家计量基准。复印检查过的校准证书，签上姓名和日期，附在报告中。/可接受标准测试使用仪器仪表均经过校准，且在有效期内。用于校准的计量标准至少应该能够追溯到中国国家计量基准。/测试报告测试结果填写在测试报告5测试仪器仪表校准确认表内，如有偏差记录在偏 差报告中。11.5柱温箱准确度与稳定性测试该测试用以确认柱温箱控温的准确度与

14、稳定性。/暨将温度探头放置于柱温箱中，设置柱温箱分别为20C、35C和45C,然后根据程序 开始升温。待温度稳定后，记录温度与时间，并开始计时，间隔10分钟进行一次记录，共计录 6次数据（包括开始数据）。计算算术平均值。设定值与平均值的误差为, 代表了柱温箱控温的准确度。测 试数值中的最大值和最小值之差为，代表了柱温箱控温的稳定性。/可接受标准柱温箱设定值与实际测定值的平均值不超过1C。测试数值最大值与最小值之差不超过土1笆。/测试报告测试结果填写在测试报告6柱温箱准确度与稳定性测试表内，如有偏差记录甘肃*制药有限责任公司文件编号-103-/-00页码第11页共46页LC-16高效液相色谱仪性

15、能确认方案在偏差报告中。11.6泵流量准确度和稳定性测试/目的该测试用以确认泵流量控制的准确度与稳定性。系统不接色谱柱，直接通过两通连接，用纯化水作为流动相，通过管路冲洗系统， 使系统中充满纯化水。准备一个容量瓶，记录其重量，记录为1,精确到万分之一。.断开两通，设置泵流速为0. 5ml/min 1. Oml/min、1. 5ml/min,待有水流稳定流出 后，用容量瓶接取流出的纯化水，同时进行计时，釆集样品5分钟。称量带有纯化水的容量瓶，记录其数值为2。 重复测试3次。根据当时温度下的纯水密度，折算出水的体积，进而得到泵流量的数值，精确到万 分之一。根据下面公式分别计算泵流量设定值误差和流量

16、稳定性误差。Ss=（Fm-Fs） / FsX 100%；Sr= （Fmax-Fmin） /FX100%Fm= （W2-W1） /p tFm为流量实测值（ml/min）；W2为容量瓶+流动相的重量（g）；W1为容量瓶的重量（g）；Fs为流量设定值（ml/min）；p为实验温度下流动相的密度（g/cm3）；t为收集流动相的时间；Fmax同一组测量中流量最大值（ml/min）；甘肃*制药有限责任公司文件编号-103-/-00页码第12页共46页LC-16高效液相色谱仪性能确认方案Fmin同一组测量中流量最小值（ml/min）；F同一组测量值的算术平均值（ml/min）；分别更换到B、C、D流路，重复

17、前面的测试。/可接受标准 SsW2%, SrW2%。,测试报告测试结果填写在测试报告7泵流量准确度和稳定性测试表内，如有偏差记录 在偏差报告屮。11.7泵流量精密度测试,目的该测试用以确认泵流量控制的精密度。/陞系统不接色谱柱，直接通过两通连接，用纯化水作为流动相，流速设置为1. Oml/min, 分别设置A、B、C、D管路为25%。准备一个容量瓶，记录其重量，精确到万分之一。断开两通，待有水流稳定流出后，用容量瓶接取流出的纯化水，同时进行计时，每 10钟称取一次，共釆集样品6次。根据当时温度下的纯水密度，折算出水的体积V,进而得到泵流量的数值，精确到 万分之一。计算6次结果的值。/可接受标准

18、 RSDW1%。/测试报告测试结果填写在测试报告8泵流量准确度和稳定性测试表内，如有偏差记录甘肃*制药有限责任公司文件编号-103-/-00页码第13页共46页LC-16高效液相色谱仪性能确认方案在偏差报告中。11.8泵梯度流量准确度测试,目的该测试用以确认泵梯度流量控制的准确度。系统不接色谱柱，直接通过两通连接，将管路A充满纯化水，管路B充满0. 5%丙酮水溶液。编辑梯度表，如下。Time(min)Flow rateChannel AChannel B时间（分钟）流速ml/min通道A通道B0-22ml/min100%0%2-42ml/min80%20%4-62ml/min60%40%6-8

19、2ml/min40%60%8-102ml/min20%80%10-122ml/min0%100%运行梯度程序并记录图谱。梯度实际比例二设定比例B管路响应值的峰高/100%通道B时的响应值的峰高。误差值二理论比例-实际比例。测试完成后更换为C、D管路重复上述测试。测试完成后更换为、管路重复上述测试。/可接受标准误差值不超过3%。甘肃*制药有限责任公司文件编号-103-/-00页码第14页共46页LC-16高效液相色谱仪性能确认方案/测试报告测试结果填写在测试报告9泵梯度流量准确度测试表内，如有偏差记录在偏 差报告中。11.9紫外检测器基线噪音与基线漂移测试/目的该测试用以确认紫外检测器的基本性能

20、。系统不接色谱柱，直接通过两通连接，用纯化水作为流动相，设置流速为Iml/min 冲洗系统，使系统中充满纯化水。紫外检测器检测器应为开启状态，设置波长为254nmo当系统基线平稳后，釆集基线图谱60min(釆集期间室温变化不应超过2C)。由测得的基线峰-峰高对应的记录仪标度，计算基线噪声，用检测器自身的物理量 (AU)做单位表示。,可接受标准基线噪声不超过5X10_4AU,基线漂移不超过5X10_3AU/ho/测试报告测试结果填写在测试报告10紫外检测器基线噪音与基线漂移测试表内，如 有偏差记录在偏差报告中。11.10紫外检测器笊灯光强度测试,目的该测试用以确认紫外检测器気灯的光强度。系统不接

21、色谱柱，直接通过两通连接，用纯化水作为流动相，设置流速为Iml/min 冲洗系统，使系统中充满纯化水。紫外检测器应为开启状态，且开启超过30分钟甘肃*制药有限责任公司文件编号-103-/-00页码第15页共46页LC-16高效液相色谱仪性能确认方案进入工作站诊断界面，点击检测器图标，选择“ShowModule Test”，进入界面后，再选择“VWD Intensity Test进入测试界面，点击“Start”图标进入测试。（测 试过程为自动运行，测试完成后结果会自动弹出）。/可接受标准光强度最高值10000ctso光强度平均值5000o光强度最低值200o,测试报告测试结果填写在测试报告11紫

22、外检测器笊灯光强度测试表内，如有偏差记录在偏 差报告中。11.11紫外检测器波长示值准确性测试,目的该测试用以确认仪器的紫外检测器気灯的示值准确性。系统不接色谱柱，直接通过两通连接，用纯化水作为流动相，设置流速为lml/min 冲洗系统，使系统中充满纯化水。检测器应为开启状态，且开启超过30分钟。进入工作站“诊断”界面，点击检测器图标，选择“Show Module Test”，进入界 面后，再选择“VWD Holmium Test进入测试界面，然后点击“Start”图标进入 测试。（测试过程为自动运行，测试完成后结果会自动弹出）。,可接受标准 360. 8 lnm0 418. 5+ lnmo

23、536. 4lnmo甘肃*制药有限责任公司文件编号-103-/-00页码第16页共46页LC-16高效液相色谱仪性能确认方案/测试报告测试结果填写在测试报告12紫外检测器波长示值准确性测试表内，如有偏差记录在偏差报告中。11.12进样器准确性测试/目的该测试用以确认仪器的进样器的准确性。配置50ug/ml的咖啡因水溶液。 使用C18色谱柱，流动相为40%甲醇，波长为273nm,流速为1. 0ml/min。平衡色谱柱，当系统平衡后，精密量取10ul咖啡因溶液注入色谱仪，连续进样6 次，记录色谱图。以咖啡因的峰面积和保留时间计算进样器的准确性。,可接受标准.峰面积W2%。 保留时间W1%。/测试报

24、告测试结果填写在测试报告13进样器准确性测试表内，如有偏差记录在偏差 报告中。11.13进样器线性测试,目的该测试用以确认仪器的进样器的线性。配置0. 5ug/ml, 1. Oug/ml, 5. Oug/ml, 25ug/ml, 50ug/ml的咖啡因溶液。使用C18色谱柱，流动相为40%甲醇，波长为273nm,流速为1. Oml/min。甘肃*制药有限责任公司文件编号-103-/-00页码第17页共46页LC-16高效液相色谱仪性能确认方案平衡色谱柱，当系统平衡后，分别精密量取10ul咖啡因溶液注入色谱仪，记录色谱图。重复3次。以咖啡因的峰面积计算线性相关系数。/可接受标准线性相关系数应20

25、.999。,测试报告测试结果填写在测试报告14进样器线性测试表内，如有偏差记录在偏差报 告中。11.14示差折光检测器信噪比测试,目的确认示差折光检测器信噪比是否符合要求。,程序配置4. Omg/ml的D-左旋糖溶液标准溶液(将200. Omg左旋糖+20ml水+25. 0ml乙腊， 用色谱纯水稀释至50. 0ml) o使用NH2基色谱柱，柱温箱为38C,流动相为25. 3mg/inl磷酸氢二钠的乙腊-水(78:22) 溶液，流速为1. Oml/min,进样量20卩1。平衡色谱柱，当系统平衡后，以流动相为空白进样三针，系统稳定运行适当时间， 测定适当时长内噪音基线。左旋糖溶液0. 4mg/ml

26、进样三针，计算平均值，并用平均值计算信噪比。,可接受标准基线噪音：三次平行进样平均值1000卩O信噪比10。/测试报告测试结果填写在测试报告15示差折光检测器信噪比测试表内，如有偏差记甘肃*制药有限责任公司文件编号-103-/-00页码第18页共46页LC-16高效液相色谱仪性能确认方案录在偏差报告中。11.15示差折光检测器基线漂移测试,目的确认示差折光检测器的基线漂移是否符合要求。系统不接色谱柱，直接通过两通连接，用纯化水作为流动相，设置流速为Iml/min 冲洗系统，使系统中充满纯化水。示差折光检测器应为开启状态。当系统基线平稳后，釆集基线图谱60min（釆集期间室温变化不应超过2C）。

27、由测得的基线峰-峰高对应的记录仪标度，计算基线漂移。,可接受标准基线漂移不超过0. lmV/min。,测试报告测试结果填写在测试报告16示差折光检测器基线漂移测试表内，如有偏差 记录在偏差报告中。12.验收标准12.1所有测试项目步骤都已经执行，并且结果记录在实际结果一栏中，各个步骤被 认为合格或不合格。12. 2已经附上所有支持测试结果的数据。12. 3所有产生的偏差已经得到解决和批准，并且已经附在文件中。12. 4所有参与执行此方案的人员都在人员确认中签名。12. 5所以数据页都由相关执行人署名及日期。12. 6所有数据页都由相关审核人署名及日期。甘肃*制药有限责任公司文件编号-103-/-00页码第19页共46页LC-16高效液相色谱仪性能确认方案12. 7确认所有记录都已完成。12. 8开始进入下一确认阶段前，确认文件包应已完成，且包括了最终报告、已执行 的方案，相关附件以及/或支持性附录，并且最终报告已经经过了书面批准。13. 偏差处理如运行确认执行过程中出现任何偏差之处，需按照偏差处理管理规程，文件编号： SMP-ZL-007,版本：00处理。对运行确认中出现每