植物组织培养期末复习资料.docx

1、植物组织培养期末复习资料11.细胞的全能性：指植物体的任何一个有完整细胞核的活细胞都具有该植物的全套遗传基因和产生完整植株的潜在能力。2.分化：指细胞、组织、器官或整株植物从分生组织或幼小状态发育为成熟状态的过程，并在生理、形态上发生的变化。其最大的特征是失去分裂能力。3.脱分化：植物离休的器官、组织、细胞在人工培养基上，经过多次细胞分裂而失去原来的分化状态，形成无结构的愈伤组织或细胞团的过程，使其回复到胚性细胞的状态。其特征是已失去分裂能力的细胞重新获得了分裂能力。4.再分化：指由脱分化的细胞再度分化成另一种或几种类型的细胞、组织、器官，甚至最终再生成完整的植株的过程。5.试管苗：指在无菌离

2、体条件下，对植物组织、细胞、器官进行组培所获得的的再生植株。6.根芽激素理论：根和芽的分化由生长素和细胞分裂素的比率所决定，这一比率高时促进生根，比率低时促进茎芽的分化，比率适中时，组织则倾向于以一种无结构的方式生长。通过改变培养基中这两类生长调节物质的相对浓度可以控制器官的分化。7.污染：批在组培过程中，由于真菌、幼苗等微生物的侵染，在培养容器内滋生大量的菌斑，使试管苗不能生长和发育的现象。8.褐变：指在组培过程中，培养材料向培养基中释放褐色物质，致使培养基逐渐变成褐色，培养材料也随之慢慢变褐而死亡的现象。9.玻璃化现象：指试管苗因生理失调而引起的嫩茎、叶片出现半透明状和水渍状的现象。10.

3、无菌操作：亦称接种。指将经过表面灭菌后的植物材料在无菌环境中切碎或分离出器官、组织或细胞转移到无菌培养基上的过程。由于整个过程均在无菌条件下进行，所以将这个过程称为无菌操作。11.植物组织培养：指在无菌条件下，将离体的植物器官(如叶、花、未成熟的果实、种子)、组织(如形成层、花药组织、胚乳)、胚胎(如成熟和未成熟的胚)、细胞或原生质体，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，使其长成完整的植株或生产具有经济价值的其他产品。这是广义的植物组织培养概念，而狭义的植物组织培养是指以植物各部分离体组织或愈伤组织为外植体的离体无菌培养。12.培养基：培养基是提供植物或其他生物生长发育所需各种养分的

4、介质。13.胚状体：亦称体细胞胚。指在组培过程中，由植物体细胞所形成的类似于合子胚的结构。它具有根、茎结构，能够一次性形成再生植株。其与正常的受精卵发育方式相似，在形成过程中也要经过原胚、球形胚、心形胚等阶段。14.外植体：由活体植物上切取下来，用以进行离体培养的那部分组织或器官。15.愈伤组织：原指植物在受伤后伤口表面形成的一团无序生长的薄壁细胞，在组织培养中，是指在人工培养基上由外植体长出来的一团无序生长的薄壁细胞。其特点是：细胞分裂快，结构疏松，缺少结构组织，颜色浅而透明。16.初代培养：是指在组培过程中，最初建立的外植体无菌培养阶段。即无菌接种完成后，送入培养室的外植体在适宜的光、温、

5、气等条件下被诱导成无菌短枝(或称茎梢)、不定芽(丛生芽)、胚状体或原球茎等中间繁殖体的过程。17.中间繁殖体：通过初代培养所获得的不定芽、无菌茎梢、胚状体或原球茎等无菌材料。18.继代培养：中间繁殖体由于数量有限，所以需要将他们切割、分离后转移到新的培养基中培养增殖的过程。19.繁殖系数：指单位植物种苗的收获量与接种量之比。20.原球茎：亦称绿色小球。多指兰科植物的茎尖经组培，形成一个扁形球状物，其基部生有假根。它们在形态上与种子萌发时由胚形成的原球茎相似。21.悬浮培养：亦称植物细胞悬浮培养。指使细胞团在液体培养基中进行培养的一种方法。通常可分为成批培养和连续培养两种类型。22.后生遗传变异

6、：亦称驯化现象。指细胞在发育、分化过程中，对基因表达的调控上所发生的变化，其不涉及基因结构的变化。后生遗传变异在取消诱发条件后，还能通过细胞分裂在一定时间内继续存在。在一般情况下，它不通通过再生过程遗传给植株，因而这种变异无法继续表现在再生植株的二次组培中。23.嵌合体：亦称异源嵌镶体。植物体的突变往往只影响分生组织的一部分，使突变的组织呈扇状或层状。用这种分生组织所繁殖的植物，因同时具有两个或多个遗传性状不同的组织，而表现出不同的性状和特点的现象。24.原生质体融合;指通过人为的方法，使遗传性状不同的两个细胞的原生质体进行融合，借以获得兼有双亲遗传性状的稳定重组子的过程。25.早熟萌发:果实

7、还没有脱落，种子在树上就已经发芽了 26.单倍体植株:具有配子染色体的细胞或个体。仅由一个染色体组所构成的个体称为单倍体27.外植体:把由活植物体上切取下来以进行培养的那部分组织或器官叫做外植体28.愈伤组织培养：指将母体植物上各个部分切下、形成外植体、接种到无菌培养基上、进行愈伤组织诱导、生长同发育的一门技术。29.玻璃化现象:当植物材料不断地进行离体繁殖时，有些培养物的嫩茎、叶片往往会呈半透明状，呈水浸状，这种现象通常称为玻璃化。30.体细胞胚:是由体细胞发育成的胚。31.无病毒苗:未被病毒感染，或经人工处理去除病毒的植物苗株。32.植板率:每个平板接种细胞总数中形成细胞团的百分率33.c

8、DNA检测法1在通过微茎尖培养脱毒时，外植体的大小应以成苗率和脱毒率综合确定，一般以_mm、带_个叶原基为好。0.30.5，132去除植物病毒的主要方法是_和_两种方法，当把二者结合起来脱毒效果最好。茎尖培养脱毒，热处理脱毒 3花药培养是_培养，花粉培养属于_培养，但二者的培养目的一样，都是利用了花粉粒染色体数目的_，最后发育成_。器官，细胞，单倍性，单倍体，4要配制培养基成分为MS+IAA1.0+6-BA2.0 的培养基2L需要吸取母液浓度均为0.1mg/ml的IAA_ml，6-BA_ml。20，405 比值的高低决定了外植体的发育方向，比值低时促进芽的生长，这时细胞分裂素占主导地位；比值高

9、促进根的生长，这时生长素占主导地位。细胞分裂素，生长素6在组织培养中，不耐热的物质用_灭菌，而培养基常用_灭菌。过滤法，湿热法 7组织培养中有三大不易解决的问题是_、_与_。污染、褐变、玻璃化8组织培养中培养室的温度一般控制在_，湿度一般控制在_。252，70%80%9植物组织培养根据培养方式可分为_和_。固体培养，液体培养10烘箱用于干燥玻璃器皿的温度可以设在_的范围内，用于高温干燥灭菌则需在_的温度下1-3小时；用于烘干植物材料的温度是_。100-130，160-180，8011植物胚胎培养包括幼_、_、_、_以及子房培养。胚培养、成熟胚培养、胚珠培养、胚乳培养12一粒成熟的种子含有一个_

10、，构成胚的所有细胞几乎都处于_的状态和旺盛的细胞_能力，这些细胞叫胚性细胞，或叫分生性细胞或未分化细胞。其特征是具有_。胚，未分化，分裂，分裂能力13一个已分化的细胞或组织若要表现其全能性，一般要经历两个过程：_和_。脱分化，再分化14中间繁殖体由于数量有限，所以需要将他们切割、分离后转移到新的培养基中培养增殖，这个过程就称为继代培养。继代培养是继_之后的连续数代的扩繁培养过程，旨在繁殖_的无根苗，最后能达到边繁殖边生根的目的。初代培养，相当数量15根据培养物的进程和培养基的作用不同，培养基可分为诱导(启动)培养基、_及_。增殖(扩繁)培养基，壮苗生根培养基。16根据其营养水平不同，分为_和_

11、。基本培养基，完全培养基17外植体的消毒原则是既要_离体材料表面的全部微生物，又不_植物材料。杀死，损伤或只轻微损18胚胎培养是将植物的 和母体分离，培养在已知化学成分的培养基上，胚胎培养包括 、 、以及 和培养。19细胞平板培养法一般包括 、 、 、 、和 五个步骤。20无病毒原种苗只是脱除了原母株上的特定病毒， 并末增加， 因而在自然条件下易变 而丧失其利用价值，同时受自然条件影响，无病毒原种易 。正确保存无病毒原种苗的方法有 和 两种。21花粉植株的形成有两条途径：一是划分形成 愈伤组织 ，再分化诱导成苗，二是花粉分化成 胚状体 而直接成苗。22植物组织培养的发展过程大致可分为三个阶段：

12、 阶段（初至30年代中） 阶段（30年代末至 年代中） 阶段（ 年代至现在）23请写出下列响应的名称或代号A.维生素C 抗坏血酸B.NAA 萘乙酸C.6-BA 6-D.吲哚-3-丁酸 IAAE.水解酪蛋白FCMGIAA H维生素B1I维生素CJNAAK6-BA24愈伤组织的形成一般要经过 诱导期 、分裂期 、成熟期 三个时期。25FDA染色法是常用且比较理想的检测原生质体活性的方法，FDA本为无 荧光 无极性，可自由透过原生质体质膜，在原生质体内易受 内酯酸 的分解，而产生有极性荧光的 物质，它不能自由进出原生质体的质膜，所以在荧光显微镜下可观察到的原生质体，表明是有活力的原生质体， 红色荧光

13、的原生质体，则是无活力的原生质体。26在花药培养中花粉粒经 或 途径形成孢子体（植株）。27在细胞培养中，目前常用 果胶 酶和 纤维素 酶从植物不同组织中直接制备单细胞，然后再通过 固体培养、液体培养或 微室培养方法，即可获单细胞 无性 系。28植物脱毒一般包括 、 、 、 四种途径，其中脱毒效果最好的是 。29胚乳再生植物根据细胞核变化与分化器官的表现可分为 和 两类。30植物组织培养按培养的方式分为_固体_培养和_液体_培养。31植物组织培养的应用有：_单倍体育种_、快速繁殖_、作物脱毒 、突变育种_、 生物制品 、 等。32花粉细胞通过和 途径形成再生植株33在组织培养中，不耐热的物质用

14、_过滤_法灭菌，而培养基常用_湿热_法灭菌。346-BA / NAA的高低决定了外植体的发育方向，比值_低_促进根的生长，这时_NAA_占主导地位；比值_高_促进芽的生长，这时_6-BA_占主导地位。35在通过微茎尖培养脱毒时，外植体的大小应以成苗率和脱毒率综合确定，一般以_mm、带_个叶原基为好。36一个已停止分裂的成熟细胞转变为_分生状态_状态，并形成_愈伤组织_的现象称为脱分化。37.植物组织培养按培养对象分为_器官、_茎尖分生组织_、_细胞_、_原生质体、 等几种类型。1.灭菌是指用物理或化学的方法，杀死物体表面和孔隙内的一切微生物或生物体，即把所有有生命的物质全部杀死。()2.消毒是

15、杀死、消除或充分抑制部分微生物，使之不再发生危害作用。()3.草莓一般利用花药培养进行脱毒。（）4.禾本科植物和芸薹科植物的花粉培养的最适时期是单核晚期。（ ）5.在小麦胚培养过程中，小麦胚的褐色面向上。（ ）6.由性细胞发育而成的胚叫做合子胚，而由体细胞发育而成的胚叫做胚状体。()7.一个已分化的细胞若要表现其全能性，首先要经历脱分化过程。（ ）8.由胚乳培养获得的三倍体植株，也一定要进行染色体倍数的检查。（ ）9.一般来说，光照强度较强，幼苗容易徒长，而光照强度较弱幼苗生长的粗壮。（ ）10.经过花药培养所获得的植株都是单倍体。（ ）11.幼年细胞和组织比成年细胞和组织诱导愈伤组织容易。（

16、 ）12.一般的说，PH值高于6.5时，培养基全变硬；低于5时，琼脂不能很好地凝固。（ ）13.在配制6-BA母液时，要先加少量的1mol的HCl溶解，再加蒸馏水定容。（ ）14.无病毒苗指一点病毒也没有的苗。（ ）15.通过子房的培养，即可能等到单倍体植株，有能得到二倍体植株。（ ）16.用于外植体、手、超净台等的表面消毒酒精浓度越大，消毒效果越好越好。（ ）17.1/2 MS培养基的所有成分都是MS培养基用量的一半。（ ）18.利用芦荟的吸芽和侧芽进行组织培养时，采集外植体是最好用手掰，而不用刀割。（ ）19.组织培养中，一般木本植物比草本植物易发生褐变。（ ）20.诱发融合产生的一定是异

17、核体。（ ）21.植物病毒遗传信息大多数都是DNA。（ ）22.禾本科植物和芸薹科植物的花粉培养的最适时期是单核早期。（ ） 23.在叶片培养时，叶组织上表皮朝上接种在培养基上有利于愈伤组织的生长和分化。（ ）24.幼胚培养需要的培养基比成熟胚简单。（）25.由性细胞发育而成的胚叫做胚状体，而由体细胞发育而成的胚叫做合子胚。26.在配制培养基时，加入琼脂的作用是丰富培养基的营养成分。（ ）27.培养是指把接种后的培养材料放在培养室里，使之生长脱分化形成愈伤组织或进一步分化成再生植株的过程。()28.用10倍的大量母液配制10L培养基，其用量为100ml。 错29.在细胞的成批培养整个过程中，一

18、般要先后经过对数生长期、延迟期、减慢期、静止期这四个阶段。30.在诱导器官分化培养中，愈伤组织能否变绿是芽分化的前提。 31.一般来说，幼年植株的花药反应能力较好。 32.一般来说，在配制生根培养的培养基是，应降低无机盐浓度，增大蔗糖浓度，有利幼苗发根。错33.经高压高温灭菌后，培养基的PH值会下降0.5个单位左右。对34.植物材料不断地进行离体繁殖时，有些培养物的嫩茎、叶片往往会呈半透明水迹状，这种现象通常称为玻璃化现象。玻璃化苗一般增殖容易，生根也较普通苗容易。错35.“KT/IAA的比值高时，利于根分化，比值低时，利于芽分化，比值适中时，产生愈伤组织。”此为激素控制理论。激素控制理论最早

19、是由Steward提出的。错36.山梨醇、甘露醇是我们常用的渗透压稳定剂，且易被吸收，可促进细胞增殖和生长。37.花粉在单核靠边期时最易做花粉培养，因为此时期的花粉对离体培养的刺激最敏感。 38.外植体中已分化的活细胞，在外源激素的诱导下通过脱分化后形成愈伤组织，这一过程被大致划分为三个时期（诱导期、形成期和分裂期）。对39.幼年细胞和组织比成年细胞和组织诱导愈伤组织容易。对40.一般的说，PH值高于6.5时，培养基全变硬；低于5时，琼脂不能很好地凝固。对41.在配制6-BA母液时，要先加少量的1mol的HCl溶解，再加蒸馏水定容。对42.未成熟胚较小、较嫩、颜色浅，易培养；成熟胚较大、较硬、

20、颜色较深，不易培养。错43.环境的相对湿度可以影响培养基的水分蒸发，一般要求80-90的相对湿度。错44.经过花药培养所获得的植株都是单倍体。45.压高温灭菌后，培养基的PH值会下降0.5-1个单位左右。 46.细胞分裂素的浓度过低，易导致玻璃化现象。 错47.在植物幼胚培养中，我们选用的蔗糖浓度为4%，因为这样的蔗糖浓度已足够幼胚的生长发育所需。 对48.升汞（氯化汞）是我们常用的外植体表面消毒剂浓度为0.1-1%，消毒时间为2-10分钟。49.用于愈伤组织培养的外植体，一般在0.51cm，因太大会增加污染机会，太小，则不便操作，生长缓慢。对50.在细胞的成批培养整个过程中，一般要先后经过对

21、数生长期、延迟期、减慢期、静止期这四个阶段。 51.在实验操作中，往往使用95%的酒精进行消毒，因为95%浓度的酒精比75%酒精的消毒效果要好。52.花粉在单核靠边期时最易做花粉培养，因为此时期的花粉对离体培养的刺激最敏感。53.实验证明，通过早期茎尖培养，利用顶芽、腋芽增殖，是最少发生突变的方法。对1以菊花茎段培养为例简述无菌操作规程？（1）先用水和肥皂清洗双手，然后穿上灭菌后的专用实验服、帽子与鞋子，进入接种室，打开超净工作台的紫外灯，照射20分钟，然后关闭紫外灯。（2）在准备室将菊花嫩茎剪成1.0.5cm长茎段，每段带一芽，放入已灭菌的培养瓶中，带入无菌超作室。用70%的酒精擦拭双手及超

22、净工作台，点燃酒精灯。把剪刀、镊子等放入95%的酒精中，在火焰上灭菌。（3）先用70%酒精消毒30秒，倒掉酒精，再倒入0.1%的HgCl2溶液消毒58分钟，无菌水冲洗34次。用剪刀在广口瓶内，将茎段两端各剪去一小段，使剩下的茎段大约为1.0cm左右。（4）打开培养基，用火焰灼烧一下培养基的瓶口和瓶盖，用镊子夹住茎段，插入培养基中，在灼烧一下瓶口和瓶盖，拧好盖子。接种过程中常用70%的酒精擦拭工作台和双手，用火焰灼烧手术刀和镊子。（5）接种完毕后，整理超净工作台，将培养瓶放在25的培养室中培养，清洗所有工具。2试管苗与野生苗生境有何差异？试管苗生境与野生苗生境的比较生境光照温度相对湿度养分气体菌

23、态试管苗弱，易调控适宜且恒定高丰富光下CO2低，有害气体量高无菌野生苗强，波动大波动性大较低，波动大较贫瘠各种气体成分较恒定有菌3试管苗与野生苗在形态结构及功能上的差异？试管苗与野生苗形态结构与功能上的差异叶片及其功能根系及其功能试管苗角质层薄，水孔多，气孔的生理活性差，保水能力差；此外，叶绿体的光合性能也差。根系不发达，吸水能力差。野生苗角质层较厚，水孔少，气孔的生理活性强；叶绿体的光合性能好。根系发达，吸水能力强。4简述茎尖脱毒原理？（1）利用植物细胞的全能性，在特定条件下可获得不同的细胞、组织、器官，可能产生无病毒的细胞、组织、器官。（2）根据病毒在植物体内分布特点，一般距离植物顶端分生

24、组织越近，病毒浓度越低。（3）根据病毒的运输途径，一般病毒是通过维管束和胞间连丝进行运输的，在植物顶端分生组织维管系统尚未形成，因此茎尖病毒浓度低。（4）另外，顶端分生组织细胞生长旺盛、代谢活跃，病毒无法复制。综上所述利用茎尖培养可达到脱毒效果。5以矮牵牛叶片培养为例简述组织培养的大概步骤或工序？（1）配制培养基MS+BA1+NAA0.1，并进行灭菌。（2）采集外植体：采集矮牵牛的肥厚嫩叶装入广口瓶中带回实验室。（3）外植体的灭菌和消毒：取回的外植体先用洗衣粉清洗叶表面。然后装入广口瓶带入无菌超作室。用70%的酒精擦拭双手及超净工作台，点燃酒精灯。把手术刀、镊子等放入95%的酒精中，在火焰上灭

25、菌。用70%酒精消毒30秒，倒掉酒精，再倒入0.1%的HgCl2溶液消毒58分钟，无菌水冲洗34次。（4）接种：将灭菌后的叶片放在已灭菌的装有无菌滤纸的培养皿中，用手术刀将叶片切成0.5cm0.5cm的小叶片。打开培养基，用火焰灼烧一下培养基的瓶口和瓶盖，用镊子夹住叶片，放入培养基中，在灼烧一下瓶口和瓶盖，拧好盖子。接种过程中常用70%的酒精擦拭工作台和双手，用火焰灼烧手术刀和镊子。（5）培养：将接种后的培养基放在培养室中，培养条件为252，湿度为70%80%。（6）试管苗驯化：经过增殖培养和生根培养的矮牵牛试管苗在半遮阴的自然光下锻炼，并在培养瓶内加少量的自来水，逐渐使试管苗由无菌向有菌过度

26、，然后进行移栽。6生长素类在植物组培中有何主要作用？并简述其稳定性与溶解性？作用：在组织培养中，生长素主要用于诱导愈伤组织形成，促进根的生长。此外，协助细胞分裂素促进细胞分裂和伸长。稳定性：天然的生长素热稳定性差，高温高压或受光条件易被破坏。在植物体内也易受到体内酶的分解。组织培养中常用人工合成的生长素类物质。 图3-5生长素类除了IAA外，其他生长调节剂对热和光均稳定。溶解性：生长素类多溶于酒精、丙酮等有机溶剂。配制母液时多用稀NaOH溶液助溶，然后用蒸馏水定容。生长素类常配成0.1mg/ml0.5 mg/ml的母液贮于冰箱中备用。7细胞分裂素类在植物组培中有何主要作用？并简述其稳定性与溶解

27、性？作用：抑制顶端优势，促进侧芽的生长。当组织内细胞分裂素生长素的比值高时，诱导愈伤组织或器官分化出不定芽；促进细胞分裂与扩大，延缓衰老；抑制根的分化。因此，细胞分裂素多用于诱导不定芽的分化、茎、苗的增殖，而避免在生根培养时使用。稳定性与溶解性所有细胞分裂素对光、稀酸和热均稳定。但它的溶液在常温中时间长了会丧失活性。能溶解于稀酸和稀碱中，所以在配制常用稀HCl助溶，然后用蒸馏水定容。在植物组培中常配制成1 mg/ml，贮藏在低温环境中。8简述活性炭在植物组培中的作用？加入活性炭的目的主要是利用其吸附性，减少一些有害物质的不利影响，例如能吸附一些酚类物质，可减轻组织的褐化（这在兰花组培中效果很明

28、显）。其次，活性炭能使培养基变黑，有利于某些植物生根。再次，发现0.3%活性炭能降低玻璃化苗的发生率；最后还发现活性炭能恢复胡萝卜悬浮培养细胞胚状体的发生能力。9灭菌与消毒有何区别？灭菌与消毒的主要区别在于前者的杀菌强烈，杀死所有活细胞；后者作用缓和，主要杀死或抑制附在植物材料表面的微生物但芽胞、厚垣孢子一般不会死亡。但灭菌与消毒是相对的，如果消毒时间过长或消毒剂浓度过高，也可杀死全部活的细胞，这时，消毒就成为灭菌了。反之，灭菌剂只能起到消毒作用。10试管苗移栽成活率低的原因有哪些？(1)内因内因主要有植物种类与试管苗的质量。不同种类的植物，移栽成活率不同，如菊花、薰衣草试管苗对移栽的条件要求

29、不高，容易成活；而仙客来试管苗对移栽的条件较苛刻，稍不小心，就会引起大量死亡。此外，试管苗细长、黄化、根系发育不良，移栽时极易死亡。而试管苗叶片浓绿、茎粗壮、根系发达及长势好则容易成活。(2)外因外因主要有环境条件、管理措施及管理人员的责任心。A、环境条件不适如基质湿度过大引起烂根或水分不足使小苗萎蔫；温度过高加上高湿则极易引起烂苗和烂根，温度过低则使组培苗根系生长缓慢，形成僵苗，同时低温也会直接造成幼苗死亡。此外，光照过强易引起过苗度失水而死亡等。B、管理粗放有些管理人员技术水平低、责任心不强、管理粗放，也容易降低试管苗移栽的成活率。11试管苗驯化的目的是什么？若把试管苗直接移栽到室外，由于生存环境发生了剧烈的变化，绝大多数试管苗难以适应而死亡。驯化的目的是人为创设一种由试管苗生境逐渐向自然环境过渡的条件，促进试管苗在形态、结构、生理方面向正常苗转化，使之更能适应外界环境，从而提高试管苗移栽的成活率。12试管苗驯化的原则是什么？根据试管苗的特点及其生长环境与田