第12章 临床即时检测仪器学习指导.docx

1、第12章 临床即时检测仪器学习指导第十二章 临床即时检测仪器首 页基本要求重点难点讲授学时内容提要 1基本要求1.1了 解（1）即时检测仪器的发展前景（2）即时检测常用仪器的分型（3）即时检测仪器的临床应用1.2 熟 悉（1）即时检测的特点及原理（2）即时检测的主要技术（3）即时检测发展中存在的问题及相应对策1.3 掌 握（1）即时检测的概念（1）即时检测仪器的特点（2）即时检测仪器常用的检测技术2重点难点2.1重 点（1）即时检测的概念及特点（2）即时检测仪器的优缺点（3）即时检测仪器常用的检测技术（4）即时检测仪器的临床应用实例2.2 难点（1）即时检测主要技术（2）即时检测仪器的临床应用

2、（3）即时检测发展中存在的问题相应对策3讲授学时建议2学时4内容提要 即时检测（Point-of-care Testing，POCT）也称床边检测，是检验医学发展的新领域。关于POCT有多种解释，指在患者身边，由非检验专业人员（临床人员或病人）利用便携式仪器快速分析患者标本并准确获取结果的分析技术，或者说测试不在主实验室而在一个可移动的系统内进行。它以作为大型自动化仪器的补充，节省分析前、后标本处理步骤，缩短标本检测周期，快速准确报告检验结果，节约综合成本等优势得到人们青睐。4.1 POCT的基本原理及主要技术4.1.1 POCT的基本原理 POCT技术的基本原理大致可分为四类：把传统方法中的

3、相关液体试剂浸润于滤纸和各种微孔膜的吸水材料中，成为整合的干燥试剂块，然后将其固定于硬质型基质上，成为各种形式的诊断试剂条；把传统分析仪器微型化，操作方法简单化，使之成为便携式和手掌式的设备；将上述两者整合为统一的系统；应用生物感应技术，利用生物感应器检测待测物。4.1.2 POCT的主要技术简单显色（干化学法测定）技术 将多种反应试剂干燥、固定在纸片上，加上检验标本后产生颜色反应，用肉眼观察定性或仪器检测(多为半定量)。 多层涂膜（干化学法测定）技术 将多种反应试剂依次涂布在片基上，制成干片，用仪器检测，可准确定量。免疫金标记技术 胶体金颗粒具有高电子密度的特性，金标蛋白结合处，在显微镜下可

4、见黑褐色颗粒，当这些标记物在相应的标记处大量聚集时，肉眼可见红色或粉红色斑点，这一反应可通过银颗粒的沉积被放大。免疫荧光技术 通过检测板条上激光激发的荧光，定量检测以pg/ml为单位的检测板条上单个或多个标志物。生物传感器技术 利用离子选择电极，底物特异性电极，电导传感器等特定的生物检测器进行分析检测。生物芯片技术 其特点是在小面积的芯片上同时测定多个项目。红外和远红外分光光度技术 此类技术常用于无创性检测仪器。其他技术 4.1.3 POCT的特点表12-1 临床实验室检测与POCT的主要不同点比较项目临床实验室检测POCT周转时间慢快标本鉴定复杂简单标本处理通常需要不需要血标本血清、血浆多为

5、全血校正频繁不频繁试剂需要配制随时可用消耗品相对少相对多检测仪器复杂简单对操作者的要求专业人员普通人亦可以每个试验花费低高试验结果质量高一般4.2常用的即时检测仪器介绍4.2.1 常用即时检测仪器分类按照其用途分类 快速血糖检测仪、电解质分析仪、血液分析仪等。根据其体积大小和重量分类 便携型；桌面型；手提式；手提式一次性使用型等。 根据所用的一次性装置分类 卡片式装置；单一或多垫试剂条；微制造装置；生物传感器装置；其他多孔材料等多种装置。4.2.2 基于相关技术的即时检测仪器 多层涂膜技术相关POCT仪器：多层涂膜技术采用干化学技术，将液体样本直接加到固定于特定载体的干试剂上，样本中的水作为溶

6、剂，样本中的待测成分与试剂进行化学反应，然后进行分析检测。它包括采用化学涂层技术和差示电位多层膜法(其结构如图12-1、12-2)。化学涂层技术多用于全自动生化分析仪，采用差示电位多层膜法的仪器多用于电解质的测定。图12-1 多层涂膜技术化学法结构示意图 图12-2 多层涂膜技术差示电位法结构示意图 免疫金标记技术相关的POCT仪器：免疫金标记技术是将胶体金颗粒与标记的抗原、抗体形成免疫金复合物的一种技术，它包括免疫渗滤和免疫层析技术。其免疫渗滤装置及操作见图12-3，免疫层析实验原理见图12-4。用该类技术的即时检测仪器有HCG、FSH等金标定量检测仪。 图12-3 免疫渗滤装置及操作示意图

7、 图12-4 免疫层析实验原理示意图 免疫荧光测定技术相关POCT仪器：免疫荧光技术是以荧光物质标记抗体而进行抗原定位或抗原含量检测的技术，又称为荧光抗体技术（fluorescent antibody technique），其技术原理如图12-5所示。它具有特异性强、敏感性高、速度快等特点。采用该类技术的即时检测仪器有i-CHROMATM Reader全定量免疫荧光检测仪等。基于新的时间分辨荧光免疫测定（time resolved fluorescence immunoassay，TR-FIA）技术的有时间分辨荧光免疫测定。图12-5 免疫荧光技术原理示意图 生物传感器技术相关的POCT仪器：

8、生物传感器是对生物物质敏感并能将其浓度转换成电信号进行检测的仪器，由感受器和换能器组成。采用该类技术的即时检测仪器有葡萄糖酶电极传感器相关的血糖仪和荧光传感器相关血气分析仪。 生物芯片技术的相关POCT仪器：生物芯片以微电加工技术为基础，具有高效、高信息量，有在小面积的芯片上同时测定多个项目等突出优点。生物芯片检测仪器是利用强光照明生物芯片上的生物样品以激发荧光，并通过灵敏度高的光电探测器探测荧光强度，最后由计算机对探测结果进行分析处理以获取相关的生物信息。 红外和远红外分光光度技术相关的POCT仪器：多用于经皮检测仪器，这类检验仪器可连续监测患者血液中的目的成分，无需抽血，还可避免抽血可能引

9、起的交叉感染和标本间的污染，降低检验的成本和缩短报告时间。采用该类技术的即时检测仪器有无创伤自测血糖仪、无创全血细胞测定仪等。4.2.3 POCT仪器的特点理想的POCT仪器应具备以下特点：仪器小型化，便于携带；操作简单化、一般34个步骤即可完成检测；缩短检验周期，报告即时；能获得权威机构的质量认证；仪器和配套试剂中应配有质控品，可监控仪器和试剂的工作状态；仪器检验项目具备临床价值和社会学意义；仪器的检测费用合理；仪器试剂的应用不会造成对病人和工作人员的健康损害或对环境污染等不利影响。4.3 即时检测仪器的临床应用4.3.1即时检测仪器的临床应用在糖尿病诊治方面的应用 在心血管疾病方面的应用在

10、感染性疾病中的应用在发热性疾病方面的应用 在ICU病房内的应用 在儿科诊疗中的应用 在循证医学中的应用在医院外的应用4.3.2几种临床常用的即时检测仪器快速检测血糖仪：（1）检测原理：目前快速检测血糖仪多采用葡萄糖脱氢酶法，根据酶电极的响应电流与被测血样中的葡萄糖浓度呈现线性关系计算血标本中的葡萄糖浓度值。当被测血样滴在电极的测试区后，由于电极施加有一定的恒定电压，电极上固定的酶与血中的葡萄糖发生酶反应，血糖仪显示葡萄糖浓度值。（2）基本结构：快速血糖仪的基本结构主要包括设置键、显示屏、试纸插口、试纸槽、密码牌、标本测量室等。（3）使用与维护：血糖仪应定期进行清洁与校准。（4）常见故障和处理：

11、表12-3 快速检测血糖仪常见故障及排除方法常见故障排除方法插入错误的密码牌或不能识别密码牌取出密码牌，重新插入与试纸配套的密码牌检测光路出现错误或测量光路污染清洁光路，检查试纸在插槽内是否平整和垂直。若显示该信息，联系客服服务中心。试纸插入有误将检测垫面朝上，沿箭头方向插入试纸，直至其嵌入插槽。血糖仪暴露于强电磁场移至别处测定，不要靠近移动电话。（5）检测结果的质量控制：严格按照仪器要求进行维护；测定方法要正确；注意某些药物对检测结果的影响；对于临床护理中的一些末梢部位不适合采血者（如：过度水肿；角质层过厚），在需要紧急检测的时候一定要因人而异，具体问题具体分析，以求结果的准确；要定期采用已

12、知值的标本对仪器进行校正，对仪器的准确性做出评价。（6）临床应用价值：快速检测血糖仪具有小型化，便于携带，操作简单，报告即时等优点，且检测费用合理，仪器试剂的正确应用不会对病人和工作人员的健康或对环境污染造成不利影响。快速血气分析仪：（1）检测原理：IRMA血气分析仪由7.5V电池供电。血样通过微型电极传感器，由传感器通过电化学的原理将各种电信号转化为参数（ADC），最后由微处理机对这些数据处理后将结果存储和显示。（2）基本结构：IRMA血气分析仪主要由IRMA分析仪、电池充电器、电源供给、两个可充电的电池、温度卡及两卷热敏打印机纸组成。（3）使用与维护：为了获得最佳的电池性能，使用电池接近“

13、空”时要及时充电，充完电的电池不要继续留在充电器中；气压表要每年校准一次,确保分析仪的准确度；常需清洁的系统部件有打印机、触摸屏、充电器、电源供给器及分析仪表面，电池接触点、红外探头、边缘连接器等。（4）常见故障和处理：表12-4 IRMA血气分析仪的常见故障及排除办法常见故障排除方法TQC测试失败(1) 清洁红外探头。(2) 清洁温控卡的接口。(3) 验证是否使用了正确的温控卡的校准码。(4) 验证分析仪与温控卡均已达到室温。EQC测试失败重复EQC 测试。传感器出错(1)验证血盒已正确平衡。(2)用新血盒重新按程序进行测试。(3)如果出错率一直很高, 清洁红外探头与边缘连接器后再运行EQC

14、 测试仍然不通过时, 这时就要按照清洁边缘连接器顺序更换电子接口。温度出错(1)血盒温度超过工作温度范围 ( 15 30 /59 86 ) , 换一个新血盒在工作范围内进行测试。(2)分析仪温度超过工作温度范围 ( 12 30 /54 86 ) , 按退出键, 断开分析仪电源, 让分析仪平衡到工作温度范围内至30min再测试。（5）检测结果的质量控制： 12500IU的肝素钠用100ml生理盐水稀释做抗凝剂；不用抗凝剂，采血量仅为0.5ml，须在3min内检测完毕；用抗凝剂，采血量需大于1.5ml，在30min内检测完毕；测试片保存温度在430，从冰箱取出后不可再放入冰箱；按保养规程菜单行仪器

15、保养。（6）临床应用价值：广泛应用于手术室、化验室及救护车等现场工作中，特别适用于ICU病房患者的血气监测和急诊病人的快速有效诊断。4.4即时检测仪器的展望4.4.1 即时检测仪器的发展前景由于准确、快速检测方法的不断问世、病人对立即获取结果的要求以及家用检测试剂需求的增多，未来几年POCT市场将会保持均衡增长，POCT的增长将成为中心实验室的有效补充。 微型芯片技术和非创伤性POCT检测系统的应用；一些即时检验新技术（胶体金技术、时间分辨荧光、免疫层析、免疫斑点渗滤技术、生物传感器技术以及生物芯片）不断出现，将会给POCT的发展带来新的突破。4.4.2 即时检测发展中存在的问题质量保证问题：

16、各种POCT分析仪的准确度和精密度各不相同，且没有统一的室内和室间质量控制。POCT主要由非检验人员（如医师和护士等工作人员）进行检测，他们没有经过适当的培训，不熟悉设备的性能和局限性，缺乏临床检验操作经验，不懂质量控制和质量保证，是导致POCT产生质量不稳定的重要原因，将会影响POCT的开展和应用。质控措施的缺乏和仪器试剂科技含量的不足：POCT质量控制与传统的生化大型仪器不同。POCT所用的试剂板、条、块，每个检测单位都是自成体系。大型生化仪所用的液体试剂，有标准品和曲线校正。而POCT所用的每块试剂板，受保管条件等多种因素的影响，每块试剂板间可能存在误差，因而试剂板的要求比液体试剂要求更

17、高。质量控制对于不同的对象应有所区别。医院POCT应用者应参考传统检验的模式，建立质量控制程序。接受临检中心室内质控的监督和室间质控，盲点现场检测的考核，质量控制应主要由检验科负责。POCT仪器试剂应用的终端客户是病人，其质量管理的难度更大。这些使用者大都没有医学背景，而且年龄偏大者居多。这方面工作面广、量多，质量控制只能由仪器和试剂供应商来完成。在购买仪器时作一次全面的培训，要明确可能遇到的问题及解决的办法。仪器的日常维护和校验应通过使用者在试剂消耗品供应点校验仪器，供应商应强化责任服务意识，确保仪器始终处于良好状态。循证医学评估问题 从疾病的诊断和治疗来说，POCT缩短了检验周期，对中心实

18、验室有很好的补充，但对POCT仪器及检测结果本身来说，尚缺乏循证医学的评估。费用问题 在目前条件下，POCT单个项目的检测费用高于常规性检测。报告书写不规范问题 如使用热敏打印纸直接发报告，报告单上患者资料填写不完整，报告内容不规范（包括检测项目或英文缩写、检测结果、计量单位等）和检测报告者签名不规范等。思想认识上的误区 人们对POCT没有全面正确的认识，总认为POCT是定性的床边检测，结果的可靠性较差。4.4.3 相应对策尽快建立POCT分析仪严格的质量保证体系和管理规范 目前，许多国家和地区已经或将要颁布适合本国或地区的POCT使用原则。我国已经出台了关于POCT的管理办法（试行草案）。对

19、医、护等非检验人员做POCT仪器使用的严格操作培训 据调查，POCT大部分的不准确结果均由操作误差或仪器使用不当导致。虽然POCT可允许非检验人员操作，但是严格操作培训是保证质量的前提，应放在首位。培训合格、上岗证确认后方可上岗操作。降低单个POCT检测项目的高检验费用 开展POCT的主要目的是方便病人尽快而又价廉地得到可靠的检验结果”，因此，降低POCT的检测费用势在必行。随着高科技的应用，开发研制出价廉、简便而性能好的POCT仪器和成本低试剂是最有效的措施。此外更普遍的增加POCT仪器使用量亦可节约综合成本。加强检测结果的管理与联通 保证POCT设备与常规实验室设备检验结果一致，定期将POCT检测与常规实验室检测进行比对分析，建立有效的质控措施，参与室内和室间质控。建立POCT与医院信息系统的联通，保证检测结果传输的正确性。 对POCT仪器使用应加强组织管理及多部门协调的管理 省市临检中心对POCT仪器使用应做好组织管理，与各部门协调开展POCT仪器质控、校正、使用的管理。