XXX分析方法转移方案141231.docx

1、XXX分析方法转移方案141231XXXX分析方法转移方案XXXXXX有限公司起草人: _ _ _ 日期: _ _ 审核人: _ _ _ 日期: _ _ 批准人: _ _ _ 日期: _ _ XXXXXXXX有限公司审核人: _ _ _ 日期: _ _ 批准人: _ _ _ 日期: _ _ 1. 目的XXXX有限公司对XXXX分析方法进行确认：性状、鉴别、含量、有关物质、水分、干燥失重、熔点、炽灼残渣、重金属、残留溶剂、粒度以及铜离子含量的测定方法均参照中国药典2010年版二部凡例与附录方法进行测定。2. 文件编号文件编号：3. 样品待测样品由XXX公司提供（批号：）。XXXX标准品由XXX公

2、司提供（批号：）。杂质对照品由XXX公司提供（批号：）。4. 分析部门分析部门：XXX公司 QCXXXX有限公司 QC5. 时间2014年 月 日至2015年 月 日6. 检测项目及规格要求该分析方法转移的检测项目及其各项目下的规格要求如下表6.1所示：表6.1 各项检测项目的分析方法及其规格要求检测项目方法规格外观目视白色或类白色固体，无臭、无味溶解性目视（中国药典2010年版二部凡例）在二氯甲烷中易溶，在甲醇中微溶，在乙腈中略溶，在水中几乎不溶鉴别IR（中国药典2010年版二部附录28页）与标准品谱图一致UV（中国药典2010年版二部附录26页）与标准品谱图一致，max=244 nmLC-

3、MS与分子量一致（347.819）HPLC（中国药典2010年版二部附录36页）主峰保留时间与标准品主峰的保留时间一致含量HPLC99.0101.0%有关物质HPLC(等度法)杂质总和1.0%，单一杂质0.3%HPLC(梯度法)杂质总和1.0%，单一杂质0.3%水分中国药典2010年版二部附录79页，容量滴定法0.1%干燥失重中国药典2010年版二部附录78页0.1%熔点中国药典2010年版二部附录51页，第一法194197 ，熔程2 炽灼残渣中国药典2010年版二部附录80页0.3%重金属中国药典2010年版二部附录75页，第二法20 ppm残留溶剂中国药典2010年版二部附录81页甲醇30

4、00 ppm，乙酸乙酯5000 ppm，乙二醇二甲醚100 ppm，甲苯890 ppm，N,N-二甲基甲酰胺880 ppm，二甲基亚砜5000 ppm，二氯甲烷600 ppm，正庚烷5000 ppm粒度中国药典2010年版二部附录100页，第三法，湿法测定d(0.5)50 m,d(0.9)100 m铜离子含量ICP-OES10 ppm7. 分析方法描述7.1外观取一定数量的样品置于白纸上观察，描述其颜色、结晶性与气味，如果需要，可以使用光学显微镜观察（晶体或结晶性粉末等）。7.2溶解性按照中国药典2010年版二部凡例中的试验方法进行溶解度检查：称取研成细粉的供试品，于252 条件下，转移至一定

5、容量的溶剂（乙腈、甲醇、二氯甲烷、水）中，每隔5分钟强力振摇30秒，观察30分钟内的溶解情况，如无目视可见的溶质颗粒时，即为完全溶解。7.3红外吸收光谱法(IR)按照中国药典2010年版二部附录28页的红外分光光度法规定操作：开启除湿机，控制房间湿度40%以下；以聚苯乙烯膜校正波长；取1 g干燥的溴化钾，在玛瑙研钵中研磨后快速压片，扫描空白；再称取10 mg样品加入到研钵中与溴化钾混合研磨并压片，立即扫描。7.4紫外吸收光谱法(UV)按照（中国药典2010年版二部附录26页）的紫外-可见分光光度法规定操作：开启仪器稳定半小时；用钬玻璃校正UV的波长。准确称取3 mg的样品到10 ml容量瓶中，

6、加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀；必要时用滤膜（0.45 m）滤过；以甲醇扫描空白后，取少量样品溶液润洗比色皿。装样扫描，记录其最大吸收波长（max）与最大吸收波长处的吸光度（Abs）。7.5液相质谱(LC-MS)液相色谱条件：色谱柱型号XDB-C18 4.650 mm1.8 m或相当的柱子UV检测波长A：254 nm；B：220 nm流速1.2 ml/min柱子温度40 进样体积1.0 l运行时间3.50 min流动相A：0.05% TFA水溶液；B：0.05% TFA乙腈溶液梯度条件：时间（min） 0.00 2.00 3.00 3.50 A 90.0 0.00 0.00 90.0 B 10.

7、0 100.0 100.0 10.0配样溶剂乙腈样品溶液浓度0.2 mg/ml进样序列配样溶剂1针；样品溶液1针质谱参数设置：离子源EI-API干燥气温度250 干燥气流速10 l/min雾化器压力35 psig毛细管电压3000 V扫描范围80.00900.00 m/z7.6高效液相色谱法(HPLC)HPLC条件参照含量测定条件。对比含量测定项下记录的色谱图中样品溶液主峰的保留时间与标准品溶液主峰的保留时间。7.7含量按照中国药典2010年版二部附录36页的高效液相色谱法规定进行检测：7.7.1色谱条件HPLC系统Agilent 1260或相类似带PDA检测器设备色谱柱型号XDB-C18 5

8、 m，4.6150 mm或相当的柱子UV检测波长244 nm流速1.0 ml/min进样体积10 l柱子温度30 运行时间25 min流动相A:水 B：乙腈=（37：63）等度洗脱配样溶剂乙腈7.7.2溶液配制样品溶液：准确称取25.0 mg的样品到25 ml的容量瓶中，乙腈溶解，定容，摇匀；精密量取该溶液1 ml至25 ml容量瓶中，乙腈定容，摇匀即得。平行制备两份。工作标准溶液：准确称取25.0 mg的XXXX标准品到25 ml的容量瓶中，乙腈溶解，定容，摇匀；精密量取该溶液1 ml至25 ml容量瓶中，乙腈定容，摇匀即得。平行制备两份，用于系统适用性，核对标准及过程控制（PCS）7.7.

9、3进样序列配样溶剂至少1针，系统适用性5针，核对标准溶液2针，PCS1针，样品溶液各1针，PCS1针。7.7.4系统适用性标准配样溶剂色谱图中没有与XXXX保留时间相同的色谱峰；理论板数按主峰计算应不低于3000；连续5针工作标准溶液色谱图中主峰峰面积的%RSD2.0%；核对标准溶液的相应系数与工作标准溶液的相应系数的比值必须在98.0102.0%之间。7.7.5含量计算以干燥品计算XXXX的含量，计算公式如下式（1）所示：含量（%）=Asamp/AstdWstd/(Wsamp(100-Water)Pstd100% （1）式（1）中，Asamp=样品溶液主峰面积； Astd=标准溶液主峰面积；

10、 Wsamp=样品质量（mg）； Wstd=标准品质量（mg）； Pstd=标准品纯度（%）。7.8有关物质按照中国药典2010年版二部附录36页的高效液相色谱法规定进行检测：7.8.1色谱条件HPLC系统Agilent 1260或相类似设备色谱柱型号XDB-C18，4.6150 mm5 m或相当的柱子UV检测波长244 nm流速1.0 ml/min进样体积10 l柱子温度30 运行时间25 min流动相A:水 B：乙腈；分等度与梯度两种条件配样溶剂乙腈7.8.2流动相等度条件：A:水 B：乙腈=（37：63）梯度条件：时间（min）0.004.0016.021.0A70.060.00.000

11、.00B30.040.0100.0100.07.8.3溶液配制供试品溶液：准确称取25.0 mg的样品到25 ml的容量瓶中，乙腈溶解，定容，摇匀即得，作为供试品溶液。对照溶液：精密量取样品溶液1 ml至100 ml容量瓶中，乙腈定容，摇匀；作为对照溶液。工作标准溶液：准确称取25.0 mg的XXXX标准品至25 ml容量瓶中，乙腈溶解，定容，摇匀作为标准溶液储备液，精密量取该1 ml储备液至100 ml容量瓶中，乙腈定容，摇匀，作为工作标准溶液用于系统适用性及过程控制（PCS）。定量限溶液：精密量取样品溶液1 ml至100 ml容量瓶中，乙腈定容，摇匀；再精密量取该溶液5 ml至100 ml

12、容量瓶中，乙腈定容，摇匀，作为定量限溶液。分离度溶液：取少量杂质：2-(5-对甲苯基-1H-咪唑-1-基)-5-甲磺酰基吡啶，以样品溶液溶解，摇匀并稀释作为分离度溶液。7.8.4进样序列配样溶剂至少1针，0.05%定量限溶液1针，分离度溶液1针，对照溶液1针，系统适用性溶液6针，供试品溶液2针，PCS1针。7.8.5系统适用性标准配样溶剂色谱图中没有与XXXX和样品溶液中杂质保留时间相同的色谱峰；理论板数按主峰计算应不低于3000；分离度溶液中主峰与已知杂质的分离度应大于2.00.05%定量限溶液中主峰的S/N10；7.8.6有关物质计算XXXX有关物质的计算公式如下式（2）、（3）所示：单杂

13、%=Aimp/Astd100% （2）总杂%=Aimp/Astd100% （3）式（2）、（3）中，Aimp=供试品溶液中单个杂质的峰面积； Astd=自身对照溶液中主峰峰面积； Aimp=供试品溶液中所有杂质峰面积之和。7.9水分按照中国药典2010年版二部附录79页的容量滴定法规定进行测试：7.9.1水分测试条件溶剂：甲醇（加入一定量的二氯甲烷助溶）滴定液：卡尔费休滴定液5仪器：卡尔费休容量法滴定仪7.9.2系统适用性开启房间除湿机，控制房间湿度40%以下。用定量的标准水确认，平行测定3次。3次标准水水分的回收率在95.0%105.0%，RSD%2.0%。7.9.3样品测试系统适用性符合标

14、准时，装0.30.5 g样品至固体进样器中，清零，注入滴定池，输入样品质量，开始滴定。待读数显示，记录结果。平行测定两份，取其平均值。7.10干燥失重按照中国药典2010年版二部附录78页的干燥失重法规定进行检测：准确称取1.0 g样品均匀的铺于已经恒重的称量瓶中，放入电热鼓风干燥箱中于105 下烘约4 h，立即放入干燥器中冷却至常温，30 min后立即取出称量，再次放入105 下干燥1h，取出放入干燥器中冷却至常温，30 min后取出立即称量，直至恒重（恒重接受标准：不得超出0.3 mg），平行测定两份，取其平均值。计算公式如下式（4）所示：LOD=(W1-W2)/(W1-W0)100% （

15、4）式（4）中，W0=恒重之称量瓶重量； W1=烘前称量瓶+样品重量；W2=恒重重量。7.11熔点按照中国药典2010年版二部附录51页第一法规定进行测定：测试样品准备：取测试过干燥失重的样品适量，研细，放入熔点测定毛细管中，将毛细管置于长60 cm的空心管中自由落下多次，使样品填实。样品高度约为3 mm。测试过程：将样品放入熔点仪中，180 以前快速升温，在温度达到180 时，调节升温速率为1.0 /min。记录样品初熔至全熔的温度。重复测定3次，取三次测定之平均值。7.12炽灼残渣按照中国药典2010年版二部附录80页的炽灼残渣法规定进行检测：开启马弗炉，设定600 ，开启天平室除湿机，控

16、制房间湿度40%以下；将两只坩埚置于马弗炉中灼烧30 min，立即称定空坩埚重量，再次置于马弗炉中灼烧30 min，干燥器中冷却30 min，立即称定空坩埚重量，直至恒重；立即在空坩埚中加入1.0 g样品后，再次精密称定；在封闭电炉上缓缓加热至样品烧焦，注意样品加热时不得溢出；放冷至室温，加硫酸1 ml使残渣润湿，放在封闭电炉上继续炭化，直至无硫酸烟冒出，注意样品加热时不得溢出；放入600 马弗炉中灼烧完全，取出置于干燥器中冷却30 min，立即称定重量；再次放入马弗炉中灼烧30 min，取出置于干燥器中冷却30 min，立即称定其重量。平行测定两份，取其平均值。计算公式如下式（5）所示：RO

17、I=(W2-W0)/(W1-W0)100% （5）式（5）中，W0=恒重之空坩埚重量；W1=炽灼前坩埚与样品重量之和；W2=炽灼后恒重。7.13重金属按照中国药典2010年版二部附录75页的第二法规定进行检测：样品配制：取7.8中炽灼过之残渣加硝酸0.5 ml，蒸干，至蒸汽除去后，放冷；加入盐酸2 ml，置于水浴上蒸干；再加15 ml纯化水，滴入氨试液至酚酞指示液显微粉色；再加入2 ml醋酸盐缓冲液（pH=3.5），微热溶解后，移至纳氏比色管中，加水稀释至25 ml。铅标准液配制：取铅储备液5 ml，加纯化水稀释至50 ml（10 g/ml）测定前，取一空白坩埚按上述样品残渣处理方法处理后，加

18、15 ml纯化水和2 ml醋酸盐缓冲液微热溶解后，移至纳氏比色管中，加入1 ml铅标准液后，加纯化水稀释至25 ml；测定：在样品管和标准管中分别加2 ml硫代乙酰胺试液，放置2 min。将样品及标准液同置于白纸上，自上向下透视，比较其颜色，样品颜色应不深于标准液颜色。7.14溶剂残留按照中国药典2010年版二部附录36页的残留溶剂测试方法规定进行检测：7.14.1色谱条件GC参数设置：柱子型号DB-624，30 m0.53 mm3.0 m或相当的柱子检测器FID模式分流比10:1进样口温度230 检测器温度300 程序升温40 保持2 min，6 /min升至80 （保持1 min）,20

19、/min升至220 （保持2 min）运行时间19 min流速恒流4.0 ml/min总流速40 ml/min氢气流速30 ml/min空气流速300 ml/min尾吹流速N230 ml/min顶空进样器参数：定量环体积1 ml炉温115 定量环温度180 传输线温度200 振摇模式Low样品平衡时间20 min顶空加压时间0.05 min定量环加载时间0.10 min定量环平衡时间0.05 min进样时间1 minGC程序时间25 min顶空压力15 psi7.14.2样品及标准溶液制备稀释剂：N-甲基吡咯烷酮（NMP）标准储备液配制：分别称取2002.2 mg二甲基亚砜，1997.6 mg

20、正庚烷，2005.6 mg乙酸乙酯，1234.6 mg甲醇，263.7 mg二氯甲烷，355.2 mg N,N-二甲基甲酰胺，55.1 mg乙二醇二甲醚和369.6 mg甲苯至同一100 ml容量瓶中，用NMP溶解，定容，混匀待用。标准溶液配制：精密量取1.0 ml标准储备液至一100 ml容量瓶中，用NMP定容，混匀密封即得。样品溶液：准确称取200.0 mg样品至一20 ml顶空瓶中，加入5 ml NMP溶解，密封混匀，平行制备两份。7.14.3进样序列稀释剂5针，标准溶液2针，样品溶液各一针。7.14.4计算按照下列公式（6）计算各溶剂的含量（扣除空白中的峰）：溶剂残留量（ppm）=As

21、pl/AstdCstd/WsplDFspl106 （6）式（6）中，Aspl=样品中各溶剂的峰面积； Astd=平行两针标准液中各溶剂的峰面积的平均值； Cstd=标准溶液中各溶剂的浓度（mg/ml）； Wspl=样品重量（mg）； DFspl=样品的稀释体积（5 ml）。7.15粒度参照中华人民共和国兽药典二部（2010 年版）附录98 页粒度和粒度分布测定法第三法（光散射法）湿法进行测定：称取本品400500 mg，置于玻璃样品瓶中，加1%吐温80的水溶液0.81.0 ml，震荡使固体充分润湿，后加纯化水810 ml摇匀后得混悬液，备用。将800 ml纯化水作为分散剂，放入激光粒度仪湿法进

22、样器容器中，同时以2500 rpm的泵速进行搅拌并消除气泡，之后开启测量，空白背景进行测量12 秒。然后将混悬液加入至分散剂中，直到遮光度达到10%20%之间。再用仪器内置超声将待测样品超声1分钟，之后开启测量，对样品进行粒度分布测量12秒。每份样品在仪器中循环测量3次，并得到平均测量结果。每个样品重复测量两次。7.16铜离子含量7.16.1仪器设备电感耦合等离子体发射光谱仪（ICP-OES）7.16.2溶液的配制稀释剂（空白溶液）：准确量取5 ml浓盐酸到245 ml二甲基亚砜中，混合均匀即得（二甲基亚砜：浓盐酸=98:2）。储备液：准确量取1.0 ml铜标准试液（1000 g/ml）至10

23、0 ml容量瓶中，稀释剂溶解定容，混匀，浓度为10 g/ml（相对0.05 g/ml的样品溶液是20 ppm）。线性溶液：溶液进样储备液体积（l）定容体积（ml）铜浓度（g/ml）铜含量（基于原料药0.05 g/ml）11空白溶液100021250100.255 ppm31500100.5010 ppm41750100.7515 ppm511000101.0020 ppm样品溶液：准确称取0.5 g的样品，置于10 ml容量瓶中，稀释剂溶解定容，混匀，平行制备3份，取其平均值。7.16.3进样序列每个线性溶液各1针，空白溶液1针，样品溶液各1针。（注：根据需要，序列中可随时插入空白溶液。）7.

24、16.4系统适用性标准空白溶液中没有影响铜发射光谱积分的干扰峰；线性溶液的线性相关系数0.99；定量限0.25 g/ml；三个样品测试结果的RSD%20.0%。8. 方法转移过程XXXX与XXX双方公司的QC人员均按照7节中的分析方法对XXXX的性状、鉴别、含量、有关物质、水分、干燥失重、熔点、炽灼残渣、重金属、残留溶剂、粒度以及铜离子含量进行分析确认，所有测定项目均使用同一批样品（批号： ）。各项检测的结果必须确保在规格范围之内，而且双方公司的结果偏差必须在一定的接受范围之内，如下表8.1所示：表8.1 各项分析结果偏差接受标准检测项目结果偏差接受标准含量有关物质水分干燥失重熔点炽灼残渣残留溶剂粒度铜离子含量9. 总结报告所有检测项目测试结束后需将所有分析数据和相关图谱汇总成XXXX分析方法转移报告，并报于XXX进一步确认。待XXXX所有分析结果得到XXX的认可后，由XXX完成XXXX分析方法转移的总结报告，双方对该方法转移的总结报告达成共识后，XXXX的分析方法转移结束。另外，所有与该分析方法转移方案不同的部分必须在分析方法转移报告及总结报告中说明。