物质分离技术.docx

1、物质分离技术物质分离技术 学习指南 在实际分析工作中，遇到的样品往往含有多种组分，进行测定时彼此发生干扰，不仅影响分析结果的准确度，甚至无法进行测定，因此有必要对样品进行分离处理。本章将重点学习纸层析、薄层层析、萃取分离、离子交换法的基本原理及分离条件的选择，通过训练，能够掌握以上分离方法的基本操作技术。另外，简单介绍膜分离技术。2.1纸层析分离法 基本知识2.1.1基本原理纸层析法适用于少量试样中微量成分或性质相似的物质的分离和鉴定，是一种微量分离方法。纸层析在有机分析、生物化学、植物、医药分析中应用较广。纸层析又称纸上层析，它是在滤纸上进行的色层分析法。滤纸被看作是一种惰性载体，滤纸纤维素

2、中吸附着的水分或其它溶剂，在层析过程中是不流动的，称为固定相，在层析过程中沿着滤纸流动的溶剂或混合溶剂是流动相，又称展开剂。展开时，溶剂在滤纸上流动，试样中各组分在两相中不断地分配，即发生一系列连续不断的抽提作用，根据各物质在两相中的分配系数不同，达到分离的目的。试样经层析后，可得到如图2-1所示的层析图谱。常用比移值Rf 来表示各组分在层析谱中的位置。式中Rf 某组分的比移值；a 斑点中心到原点的距离；b 溶剂前缘到原点的距离。图2-1 纸层析图谱Rf 值在01之间，相差越大，分离效果越好。Rf 值最大等于1，即该组分随展开剂上升至溶剂的前缘，表示溶质不进入固定相。Rf 值最小等于0，即该组

3、分不随展开剂移动，仍在原点位置。每种物质在一定的层析条件下都有它特定的Rf值，因此Rf值的大小也就成为各种物质定性分析的依据，从各物质Rf 值间的差值大小即可判断彼此能否被分离。而物质的Rf 值相差越大就越容易分离；如果斑点比较集中，则Rf 值相差0.02以上时，即可相互分离。2.1.2层析条件的选择(一) 纸的选择选择质地厚薄均匀、纯净、疏松度适当、强度较大、平整的色层滤纸(通常用新华一号滤纸)。(二) 展开剂的选择根据被分离物质的不同，选用合适的展开剂。展开剂应对被分离物质有一定的溶解度，溶解度太大，被分离物质会随展开剂跑到前沿；溶解度太小，则会留在原点附近，使分离效果不好。选择展开剂应注

4、意下列几点：1 能溶于水的化合物 以吸附在滤纸纤维素中的水作为固定相，由于吸附水有部分是以氢键缔合形式与纤维素的羟基结合在一起，在一般条件下难以脱去，因而纸层析不但可用与水不相混溶的溶剂作流动相，而且也可以用丙醇、乙醇、丙酮等与水混溶的溶剂作流动相。2 难溶于水的极性化合物 以非水极性溶剂（如甲酰胺、N，N-二甲基甲酰胺等）作固定相，以不能与固定相混合的非极性溶剂（如环已烷、苯、四氯化碳、氯仿等）作展开剂。3 对不溶于水的非极性化合物 以非极性溶剂（如液体石蜡、-溴萘等）作固定相，以极性溶剂（如水、含水乙醇、含水酸等）作展开剂。2.1.3定性、定量分析的方法(一) 点样 先用铅笔在距纸条一端2

5、3cm处划一直线（起始线），在线的中间划上“”，表示点样位置，即原点。用内径约0.5mm的毛细管吸取试样溶液，轻轻与“”号处接触，使点样斑点的直径为0.20.5cm。如果试液浓度较小，点样之后放在红外线灯下或用热吹风机使其干燥，再在原位置上进行第2次或第3次点样。点样之后，要等干燥后再进行展开。(二) 展开 展开方法中应用较广的是上行展开法。展开剂放在密闭容器的底部，将滤纸点试液的一端浸入展开剂中，注意不要把原点浸入。由于滤纸毛细管的作用，展开剂不断上升，与点在滤纸上的试样相遇，使试样中欲分离组分溶解在展开剂中随之上升，在两相间一次又一次的发生分配过程。经一定时间后，取出滤纸，立即用铅笔划出溶

6、剂的前沿位置。(三) 显色 试样在滤纸上展开以后，如各个组分是有色的，在滤纸上可以看到各个色斑；如为无色，可根据物质的特色喷洒适宜的显色剂进行显色。配制显色剂时，尽量选择挥发性大的溶剂，以免喷在滤纸上之后引起斑点扩散、移动或变形。显色之后，立即用铅笔划出各斑点的位置，以免退色或变色后不易寻找。(四) 定性分析 在一定的操作条件，每种物质都有一定的Rf 值，测定Rf 值与手册对照。但应注意，手册中的数据是在一定条件下测得的，仅供参考。最好是在同一张层析纸上用标准品进行对照试验，比较它们的Rf 值是否一致。当一个未知物在纸上不能直接鉴定时，可分离后剪下，再用适当的方法鉴定。(五) 定量测定 在相同

7、条件下制得一系列标准色，与待测斑点颜色相比较，测定其含量。也可将斑点剪下，用适当溶剂溶解后，再用其他方法测定。 技能训练技能训练2.1 纸层析分离操作训练目的 通过分离混合液中Cu2+、Fe2+、Co2+、Ni2+的操作，学会选择和使用层析纸、层析缸、展开剂等工具，熟悉纸层析的操作技术。训练时间 4h训练目标 通过训练，能正确选择和使用层析纸和展开剂，熟练掌握纸层析操作技术，并在4h内完成测定任务。安全 正确使用易挥发有机试剂。仪器、试剂与试样图2-2常用喷雾器 仪器1 层析筒2 微量注射器 50L3 电吹风机4 噴雾器（见图2-2） 试剂1 氨水2 显色剂（二硫代乙二酰胺溶液）3 展开剂 丙

8、酮:浓盐酸:水=90:5:5 试样 含有Cu2+、Fe2+、Co2+、Ni2+的混合液测定步骤 用剪刀将滤纸剪成长25cm、宽约2cm的纸条。于纸的一端2cm处，用铅笔划一条直线。2 在直线的中心处用微量注射器点10L试样液，样点的直径应小于或等于5mm,用电吹风机将样点吹干。若样品溶液过稀，可在样点干燥后重复点样，必要时可反复数次。图2-3 层析筒1- 层析筒 2-纸条3-展开剂 4-原点3 晾干后，将滤纸悬挂在盛有10mL展开剂，丙酮:浓盐酸:水=90:5:5的层析筒中，滤纸浸入展开剂约0.51cm，盖上层析筒盖（见图2-3）。4 待溶液前沿离试液原点20cm处（约1h），取出滤纸并放入盛

9、有氨水的层析筒中熏5min。取出晾干，用二硫代乙二酰胺溶液噴洒显色，可观察斑点颜色。5 用铅笔画出斑点的轮廓，量出原点至斑点中心的距离和原点至溶剂前沿的距离，计算各元素的Rf 值。Fe2+离子斑点显黄色，移动最快，其Rf =1.0；Cu2+离子斑点显绿色，居第二位，其Rf =0.7；Co2+离子斑点显深黄色，居第三位；其Rf =0.46；Ni2+离子斑点为蓝色，位居最后，其Rf =0.17。(见图2-4)图2-4 Fe2+、Cu2+、Co2+、Ni2+的纸上层析1- Ni2+; 2- Co2+; 3- Cu2+; 4- Fe2+ 注意事项 不要用手指直接接触层析部分的滤纸，以防手上油脂污染滤纸

10、。 滤纸条必须剪得平整。 滤纸周围必须为溶剂蒸气所饱和。随溶剂蒸气压的大小和层析容器大小的不同，使容器中饱和地充满溶剂蒸气的时间可以由几分钟至数小时。 练习1 什么是Rf 值，它在分析上有何应用？2 混合液中存在A、B两种物质，用纸层析分离法，它们的比移值分别为0.45和0.63，欲使分离后斑点中心之间相隔2cm，问层析纸应截多长为好？2.2薄层层析分离法 基本知识薄层层析又称薄板层析，是将吸附剂（固定相）涂于玻璃或聚酯片上，以展开剂作流动相的色层分离法。2.2.1 基本原理薄层层析法是把固定相吸附剂铺在玻璃板上铺成均匀的薄层，层析就在玻璃板上的薄层进行。把试液点在层析板的一端，离边缘有一定距

11、离，试样中各组分被吸附剂所吸附。把层析板放入层析缸中，使点有试样的一端浸入流动相展开剂中。由于薄层的毛细管作用，展开剂将沿着吸附剂薄层渐渐上升，遇到点着的试样时，试样就溶解在展开剂中，随着展开剂沿着薄层上升。于是试样中的各组分就沿着薄层在固定相和流动相之间不断的发生解吸、吸附、再解吸、再吸附的过程。经过一段时间的展开，试样中吸附能力最弱的组分最容易被解吸，它将随展开剂在薄层中移动最大的距离；吸附能力较强的组分将在薄层中移动较短的距离。于是试样中的各种组分将按其吸附能力强弱的不同而被分离开。试样中各个组分在薄层中的位置同样也用Rf 来表示。和纸层析一样,在相同条件下进行层析时，某一组分的Rf 值

12、是一定的，因此可根据Rf 值进行定性。由于影响Rf 值的因素很多，例如吸附剂的种类，粒度的活化程度，展开剂的组成和配比，层析缸的形状和大小，层析时的温度等。要严格控制一致是困难的，因此文献上查的Rf 值只供参考。薄层层析法是在纸层析的基础上发展起来，和它们相比具有如下优点： 快速 只需1060min； 分离效率高 可使性质相似的化合物如同系物，异构体等分离； 灵敏度高 可检出0.01g（10-8g）的物质； 层析后可以用各种方法显色； 应用范围广 它可以进行定性和定量测定。适用于医药、食品、染料等产品中微量组分的测定。2.2.2 层析条件的选择在薄层分析中，为了获得良好的分离，必须选择适当的吸

13、附剂和展开剂。(一)吸附剂的选择吸附剂必须具有适当的吸附能力，而与溶剂、展开剂及欲分离的试样又不会发生任何化学反应。吸附剂都做成细粉状，一般以200300目较为合适。吸附剂种类较多，有硅胶、氧化铝、纤维素和聚酰胺等。应用最多的是氧化铝和硅胶。用吸附剂制层析板时，一般将板制成软板和硬板两种。软板（又称干板）是直接用吸附剂铺成的板。硬板是在吸附剂中加入一定量的粘合剂（煅石膏、淀粉等），按一定比例加入水制成的板。这种板可以增大板的机械强度。制成的硬板在使用前应于1051100C烘干活化，驱除水分，增强其吸附能力。根据活化后含水量的不同，其活性可分为五个等级，如表2-1所示。级活度最大，级活度最小，这

14、两种都很少使用，使用最多的是级或级。一般制成的板在1100C活化30min后活度可达级。表2-1 吸附剂活度级吸 附 剂含 水 量，%活 度 级硅 胶05152538氧 化 铝0361015(二) 展开剂的选择 对于吸附层析，主要根据极性的不同来选择流动相展开剂。常见的功能团按其极性增强次序排列为：烷烃烯烃醚类硝基化合物二甲胺酯类酮类醛类胺类酰胺醇类酚类羧酸类 除要考虑展开剂的极性外，也要考虑被分离组分的极性和吸附剂的活性。这三者是相互关联相互制约的。在选择展开剂时，一般先用单一的溶剂，然后再用两种混合溶剂，这要根据分离效果而定。一般说来，类似结构的同系物，往往可以用相同组成的展开剂。例如在中

15、性氧化铝薄层上分离氨基蒽醌、甲基氨基蒽醌、氨基氯蒽醌的各种异构体时，都可用环己烷：丙酮（3：1）混合剂作展开剂。 分配层析是基于试样中各组分在展开剂中溶解度的不同，或者更严格地讲是基于各组分在固定相和流动相中分配系数的不同达到分离的目的。分配系数大的能达到很好的分离。也要考虑到展开剂是否易挥发，粘度是否较小。易挥发的展开剂在展开后能很快挥发逸去，不影响定性和定量的测定。粘度小的展开剂一般展开速度较快。另外，也要选择纯度比较高的展开剂，一般可用分析纯或化学纯。试剂含有杂质如含水、含氧酸等都会使溶剂的极性发生明显的改变，影响分离。2.2.3 定性、定量分析的方法(一) 定性分析显色后可以根据各个斑

16、点在薄层上的位置计算出Rf 值，然后与文献记载的Rf 值比较以鉴定物质。但是薄层层析Rf 值的影响因素很多，重现性较差，文献上查到的Rf 值只能供参考。Rf 值受到下列因素的影响：吸附剂的性质和质量（粒度、纯度等）与展开剂中的杂质如水分等，当用同一种吸附剂和展开剂时，被测物质的Rf 值受到薄层厚度、含水量（活度）、点样量、展开方式、层析缸的大小、形状和缸内展开剂蒸气的饱和度、展开的距离等等因素的影响。为了解决Rf 值重现性差的问题，应用待测化合物的纯品作对照，在两种或者两种以上展开剂中同时展开，若未知物的Rf 值与已知纯品的Rf 值都相同，即可肯定两者为同一物。(二) 定量分析定量方法与纸层析

17、相似。一是在展开后直接在薄层上进行测定，另一是将欲测定的物质自薄层上洗脱后再选择适当的方法测定。前一种方法是用眼睛观察或用仪器测量薄层上斑点的面积、颜色深浅或荧光强度，从而确定化合物的量。洗脱法一般较目视法准确，又不需要特殊仪器。展开后用对照法或非破坏性显色剂确定斑点位置，用小刀将斑点连同吸附剂一起刮入玻璃漏斗中，置于抽滤装置上，用适当的溶剂将被测物洗脱。由于试样量很少，一般的化学方法较难于定量。多采用比色法或分光光度法测定，以空白洗脱液为参比溶液。洗脱时，一般选用被测物有较大溶解度的溶剂浸泡，多次洗涤以达定量洗脱。一些物质吸附性较强而不易洗脱时，要用极性较大的洗脱液，或直接于吸附剂中加入显色

18、剂，使其定量反应，然后离心分离，再进行比色测定。(三) 应用1 痕量组分的检测。用薄层层析法检测痕量组分既简便又灵敏。例如，3,4-苯并芘是致癌物质，在多环芳烃中含量很低。可将试样用环己酮萃取，并浓缩到几毫升。点在含有2%咖啡因的硅胶G板上，用异辛烷-氯仿（1+2）展开后，置紫外灯下观察，板上呈现紫至桔黄色斑点。将斑点刮下，用适当的方法进行测定。2 同系物或异构体分离。用一般的分离方法很难将同系物或同分异构体分开，但用薄层层析可将它们分开。例如，C3C10的二元酸混合物在硅胶G板上，以苯-甲醇-乙酸（45+8+4）展开10cm，就可以完全分离。3 无机离子的分离。薄层层析法不仅能用于有机物质的

19、分离和检测，而且也能用于无机离子的分离。例如硫化铵组阳离子的分离，将试液点在硅胶G板上，以丙酮-浓盐酸-己二酮（100+1+0.5）作展开剂，展开10cm后，用氨熏，再以0.5%8-羟基喹啉的60%乙醇溶液喷雾显色，得到各组分的Rf 顺序为FeZnCoMnCrNiAl。薄层层析法在产品质量控制分析，纯试剂的制备及未知物质的剖析等方面应用也十分广泛。 技能训练技能训练2.2 薄层层析分离操作训练目的 通过分离对硝基苯胺与邻硝基苯胺，学会使用玻璃板、层析缸、毛细管或微量注射器等工具正确制板和点样，熟悉薄层层析的操作技术。训练时间 4h训练目标 通过训练，能正确制板，熟练掌握薄层层析操作技术，并在4

20、h内完成分离任务。安全 正确使用易挥发或有毒试剂。仪器、试剂与试样 仪器 玻璃板 100mm150mm 烘箱 微量注射器 50L 不锈钢刀 721型分光光度计 离心机 离心试管及玻棒容量瓶 10mL 50mL 试剂1 硅胶G2 羧甲基纤维素钠（CMC）溶液 0.5%、3 展开剂 苯：乙酸乙酯=7：1 试样标准样 准确称取0.150.20g邻硝基苯胺于50mL容量瓶中，以甲醇作溶剂，稀至刻度。混合样 准确称取对硝基苯胺、邻硝基苯胺各0.150.20g置于50mL容量瓶中，以甲醇作溶剂，稀至刻度。测定步骤 制板取3g硅胶G和9mL0.5%羧甲基纤维素钠（CMC）于研钵中，研匀至提起呈细丝状，然后将

21、其铺在100150mm2的玻璃板上，风干后（注）,于105110烘箱内活化30min,稍冷,置于干燥皿中备用。 点样用微量注射器吸取20L标准样，在距底边约20mm处点样，（样点越小越好，可用洗耳球边点边吹，加速溶剂挥发），再用另一支微量注射器吸取20L混合样，在距底边约20mm处同一条线上不同点点样。 展层在层析缸内放入10mm高的展开剂，盖上层析缸盖，让展开剂在层析缸内饱和10min；然后将点好样的薄层板倾斜放入层析缸中（见图2-5或图2-6），密闭、展层；当混合样斑点明显分离后，取出薄层板,风干。图2-5 近水平式展开 图2-6直立式展开1-展开缸；2-薄层板 1-展开缸；2-薄层板；3

22、-展开剂 3-小皿盛开剂；4-展开剂蒸气 洗脱方法A 离心洗脱用不锈钢刀将展层后的斑点从薄层板上分别刮于称量纸上，再分别转入离心试管中，同时取一空白点；以甲醇作溶剂，离心洗脱（注），吸取上层溶液于10mL容量瓶中定容。方法B 抽滤洗脱法用不锈钢刀将展层后的斑点从薄层板上分别刮起，并削成粉末；分别倒入G4漏斗中，漏斗下接10mL比色管，比色管装入吸滤瓶中，加小量甲醇于G4漏斗中，使试样溶解，并将其抽入比色管中，最后以甲醇稀至刻度。 比色用721型分光光度计分别测出它们的吸光度A值（波长选400nm，用空白溶液作参比液）。结果处理邻硝基苯胺的含量按下式计算：式中C 混合样中邻硝基苯胺的浓度，mg.

23、mL-1；C1标准样中邻硝基苯胺的浓度，mg.mL-1；A混合样中邻硝基苯胺的吸光度；A1标准样中邻硝基苯胺的吸光度。注1 若室内气温低于10，风干时，薄层板上的硅胶会结冰；在此情况下，可用红外灯照射薄层板以代替风干。注2 采用离心法洗脱时甲醇每次用量12mL即可,注意不能使总体积超出10mL。 练习1 为什么要用薄层板上的硅胶作空白试验？而不直接用甲醇？2 为什么纸层析和薄层层析点样时样点越小分离效果越好？3 乙胺样品在硅胶板A上用（丁醇：乙醇：水）=4：1：5展开，得Rf 值为0.37，相同样品用同一展开剂在硅胶板B上展开得Rf 值为0.65。问哪一块硅胶板的活性大？为什么？4 解释薄层层

24、析分离混合物时产生斑点拖尾的原因。2.3萃取分离法 基本知识萃取分离法是根据物质在两种互不混溶的溶剂中分配特性不同进行分离的方法。2.3.1基本原理(一) 萃取过程的本质根据“相似相溶”的原则，离子型或有极性的无机化合物，易溶于极性强的水溶液中，而难溶于非极性或弱极性的有机溶剂中，这种性质称为物质的亲水性。例如ZnCl2、CuSO4等都能与水分子结合成水化离子溶于水。许多有机化合物如烷烃、芳香烃等属于共价型化合物，无极性或极性很弱，难溶于水而易溶于非极性或弱极性的有机溶剂中，这种性质称为物质的疏水性。无机离子大都是亲水性的，在用有机溶剂萃取前，先向溶液中加入某种试剂，使待萃取的离子转为疏水性的

25、物质，然后再进行萃取，这种能将待萃取离子由亲水性转化为疏水性的试剂，称为萃取剂。例如，Ni2+在水溶液中以水化离子Ni(H2O)2+6形式存在。在pH=9的氨性溶液中加入丁二酮肟，与Ni2+生成不带电荷、难溶于水的丁二酮肟镍，易被有机溶剂如CHCl3萃取。这种能溶解疏水性物质的有机试剂，称为萃取溶剂。显然，萃取过程的本质是将待分离组分由亲水性物质转为疏水性物质，进入有机溶剂中的过程。有时由于分析测试的需要，把已进入有机溶剂中的化合物，在一定条件下再转为亲水性物质，重新回到水溶液中，这一过程称为反萃取。(二) 分配定律当用有机溶剂从水溶液中萃取溶质A时，如果物质A在两相中存在的型体相同，平衡时物

26、质A在两相中的浓度比值，在温度一定时为一常数，这就是分配定律。该常数称为分配系数,用KD 表示。分配系数KD 越大，说明物质在有机相的溶解度越大，物质越容易被萃取。分配定律对于物质在液体与液体、气体与液体、液体与固体等任何两相间的分配都适用。分配系数KD只适用于体系比较简单的情况。在实际萃取过程中，由于萃取体系可能伴随着离解、缔合和配位等多种化学作用，使物质在两相中可能以多种型体形式存在。在这种情况下，不能再用KD值来表示萃取过程的平衡问题。如用CCl4萃取I2时，在水相中I2以I2及I3二种型体存在，而在有机相中只有I2一种型体存在，如果用来表示萃取的实际效果，显然是不符合实际的。这时应当用

27、分配比（D）表示。对CCl4萃取I2的分配比D应为：当物质在两相中均以同一型体的简单体系存在时，低浓度，D=KD；体系复杂、浓度大时，D与KD相差较大。分配比D的大小与萃取条件、萃取体系及物质性质有关。例如，用苯萃取水中的苯甲酸（苯甲酸以HB表示），当苯甲酸在两相中达到分配平衡时，苯甲酸在水溶液中的总浓度应等于它在水溶液中各型体之和。CHB（水）=HB水+B-水则 可见分配比随着溶液中的酸度变化而变化。当溶液中H+增大时，D也增大，此时苯甲酸基本以HB分子形式存在，易被苯萃取。反之，苯甲酸以B-形式留在水溶液中。因而，在实际工作中可以利用改变萃取的条件，使分配比按所需的方向进行，以达到定量分离

28、的目的。(三) 萃取效率萃取效率又称萃取百分率，指物质在有机相中的总物质的量占两相中的总物质的量的百分率，以E%表示。式中c有、c水表示物质在有机相和水相中物质的量浓度；V有、V水表示有机相和水相的体积。若将上式分子、分母同除以c水V有，再经整理，则得到E%与D的关系式：由式可以看出，萃取效率的大小与分配比D和体积比V水/V有有关。D越大，体积比越小，则E%值越大，也就说明物质进入有机相中的量越多，萃取越完全。当等体积（V有=V水）一次萃取时，上式可写成：此式说明，对于等体积一次萃取时，E%只与D值有关。当D=1000时，E%=99.9，可以认为一次萃取完全；当D=100时，E%=99.5，一

29、次萃取不能满足定量要求，需要萃取两次；若D=10时，E%=90，则需要连续萃取数次，方能满足定量要求。因此，对于D值不大的物质，常采用连续萃取的方式提高萃取效率，以达到完全萃取分离的目的。连续萃取效率的计算公式可按下述方法导出。设体积为V水的水溶液中含有待萃取物质的质量为m0 g，用体积为V有的有机溶剂萃取一次，水相中剩余的待萃取物质的质量为m1 g，此时进入有机相中的该物质的质量则为（m0-m1）g。其分配比D为：整理得同理，若用体积为V有的有机溶剂连续萃取2次至n次，则留在水相中的待萃取物质的质量分别为m2至mn g。则有，萃取效率E%则为或上式就是连续萃取时计算萃取效率的公式。2.3.2

30、萃取条件的选择(一) 萃取溶剂的选择一般来讲，与水不相溶的有机试剂，均可作为萃取溶剂。如苯、环己烷、戊醇、氯仿、四氯化碳、醚、酮、酯、胺等都是萃取分离中常用的萃取溶剂。在选择萃取溶剂时应考虑如下几个条件。1 选择对萃取组分有较大分配比，而对杂质有较小的分配比的溶剂；2 选择与待萃取液的密度有较大差别的溶剂，有利于分层；3 选择化学稳定性强的溶剂，即在萃取过程中，萃取溶剂不受待萃取液的酸、碱或氧化等因素影响；4 尽量选择毒性小、可燃性及爆炸性较差的溶剂。(二) 萃取体系和萃取剂根据所形成的可萃取物质的不同，可把萃取体系分为以下两类：1 螯合萃取体系这类萃取体系在分析化学中应用最为广泛。它是利用萃

31、取剂与金属离子作用形成难溶于水、易溶于有机溶剂的螯合物进行萃取分离。所用的萃取剂一般是有机弱酸，也是螯合剂。例如，8-羟基喹啉在不同酸度下，可与多种金属离子作用，生成难溶于水而易被氯仿或四氯化碳萃取的螯合物。这里8-羟基喹啉是萃取剂。常用的萃取剂还有，双硫腙（又称打萨腙 ）,可与Ag+、Bi3+、Cd2+、Hg2+、Cu2+、Co2+、Mn2+、Ni2+、Pb2+等离子形成螯合物，易被CCl4萃取；乙酰基丙酮（ ），可与Al3+、Cr3+、Cu2+、Fe3+、Co2+、Ca2+、Be2+等离子形成螯合物，易被CHCl3、CCl4萃取；二乙基胺二硫代甲酸钠（ 简称DDTC），可与Ag+、Hg2+、Cu2+、Cd2+、Co2+、Ni2+、Fe3+、Mn2+等离子形成螯合物，易被CCl4或乙酸乙酯萃