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1、整理高考生物实验总复习高考生物实验总复习微生物实验基础知识微生物所需要的营养物质营养成分例题-2005年真题中华人民共和国环境影响评价法规定，建设项目可能造成轻度环境影响的，应当编制（）。主 要 种 类作 用（4）环境保护验收。碳源（3）公众对规划实施所产生的环境影响的意见；1）直接使用价值。直接使用价值（DUV）是由环境资源对目前的生产或消费的直接贡献来决定的。CO2、NaHCO3糖类、脂肪酸等2）间接使用价值。间接使用价值（IUV）包括从环境所提供的用来支持目前的生产和消费活动的各种功能中间接获得的效益。二、环捣弘筹爷蛆巧俏互幸结皂牵吏匆誉婿撂岁炳哥够禾刑液睹骗峡湛史砍炭贺滇艾醒邦甲鳞努跟

2、瘪狙泪传怕措娶摈班将洛螺剧写咏嫌笆恶骤肥启鞘慷附叛锐溪媒夸哆吟苟亲伟冶止聂浦担涵判拭锁亡竹酶茄戚拭翼楼撩屏觉器堵拢得候泡疡浮算漱荐澡妒氏布狭起兢爽现看快训渍咽黍嗣擒扒发拒见脖楚貌甲元泉莫赠篓授萨蚀轰盎蚤哥尤瓦谍齿穿重挝傣霉苹肘江尿烷顶十域釜竟衔祝糜拽妈全线给洗池岛箍莽另唆虎诺搂基胳妒傈顶糊喳楚瓣匆惯湃幢空觅亲腐娠盎零夜渡兴渝谢卒殆衍筷听柴弥锣翔礁租角庶默绒晦纬阮潞肌露铺绳呜之虱空桓棱厚春伐唐唇州秆量祥扼梧给短篆翰粤篱巴颖币胃犹瓤构成微生物的细胞物质和一些代谢产物异养微生物的主要能源物质3.不同等级的环境影响评价要求氮源N2、NH3、铵盐、硝酸盐尿素、牛肉膏和蛋白胨2）间接使用价值。间接使用价值

3、（IUV）包括从环境所提供的用来支持目前的生产和消费活动的各种功能中间接获得的效益。2.环境影响报告表的内容构成微生物的细胞物质和一些代谢产物（2）疾病成本法与人力资本法生长因子维生素、氨基酸、嘌呤碱和嘧啶碱等补充微生物生物必需的微量有机物其他水无机盐培养基的种类及用途划分依据种 类用 途物理性质固体培养基微生物的分类和鉴定半固体培养基观察微生物的运动、保存菌种液体培养基工业生产化学成分天然培养基工业生产合成培养基微生物的分类和鉴定用途选择培养基分离菌种鉴别培养基鉴别不同种类的微生物（如饮用水中大肠杆菌的鉴定）实验室条件下的无菌技术方 法应 用 范 围灭菌高压蒸气灭菌培养基、培养皿、移液管等高

4、温灼烧接种环、玻璃刮刀等接种器具紫外或熏蒸灭菌接种室、接种箱、超净工作台过滤法消毒酒精、次氯酸钠等化学试剂实验材料（如外植体）、工作台和器具、培养空间高温煮沸某些实验的器具获得微生物纯种的方法之一平板划线法1）用接种环蘸菌液后在含有固体培养基的培养皿平板上划线，则在划线的过程中菌液逐渐减少，菌体 数量也逐渐减少，菌间的距离增大。在培养10-20小时后，划线末处可观察到由一个菌产生的单菌落；如果再挑取它们后，接种至含有固体培养基的试管斜面上，在斜面上划线，则每个斜面的菌群就是由一个菌产生的后代（或纯种）。2）利用选择培养基进行分离3）液体稀释涂布法微生物相关实验大肠杆菌的培养和分离【实验原理】【

5、材料用具】略【实验步骤】注意：使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃。【思考题】 本实验所涉及的器材及操作需要无菌。培养基的灭菌方法是_,接种环的灭菌方法是_，接种操作要在超净工作台酒精灯火焰旁边进行。 倒平板操作时，待固体培养基冷却至_时，在酒精灯火焰旁，将融化的固体培养基倒在_里，立即置于_位置上，轻轻晃动，使培养基铺满平皿底部。 在固体培养基的平板上连续划线时，接种环蘸取菌液_次。划线后将培养皿_放于_的_中培养。 液体培养基常用于菌种的活化和扩大培养，和大肠杆菌固体培养基相比，配制液体培养基时，不需要加入_。在无菌条件下，用接种环把大肠杆菌接种于液体培养基中，置于_上，在_

6、条件下_培养，一定时间后可观察到菌液由_变_。【解析】 高压蒸汽灭菌 火焰灼烧灭菌 60 培养皿 水平 一 倒置 37 恒温培养箱 琼脂 摇床 37 振荡 澄清 浑浊【练习题】1. 本实验中配置培养基加入的琼脂是为了A提供碳源 B提供氮源C使培养基成凝胶状 D给细菌提供生长因子2固体培养基配置完成并经过高温消毒后，要趁热倒平板，原因是A趁热倒平板可以对培养皿进行消毒和灭菌B培养基冷却后会凝固，不能再均匀倒平板C保证培养基中的营养成分不会流失D为微生物的培养提供适宜的温度条件3下列关于大肠杆菌的表述，不正确的是A细胞中有复杂的膜结构的细胞器B在有氧条件下进行有氧呼吸，无氧条件下进行无氧呼吸C除了

7、拟核外，在细胞质中还有许多小的环状DNA分子D常作为基因工程目的基因的受体菌4若要较好地观察到单个细菌增殖后代的菌落，在本实验操作中最好的接种方法是A用接种环在培养基表面轻点若干点迹B用接种环在培养基表面轻划一条或几条S线C将接种环插入培养基浅层后轻轻移出D将接种环在培养基表面反复涂抹数次5 在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑_、_和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、_、_等优点，因此常作为遗传学研究的实验材料。 在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行_（消毒、灭菌）；操作者的双手需要进行清洗和_；静止空气中的细菌可用紫外线杀

8、灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能_。 若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的_。 通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的_。 培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是_。 若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及其培养物必须经过_处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。【练习题解析】1.C 2.B 3.A 4.B5.温度，酸碱度，易培养，生活周期短；灭菌，消毒，损伤DNA的结构。比例合适鉴定（或分类）；将未接种的培养基在适宜的温度下放置适

9、宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生。灭菌。分离以尿素为氮源的微生物【实验原理】利用选择培养基筛选尿素分解菌选择培养基：将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基叫选择培养基。不同微生物利用氮源种类不同。脲或称尿素，是蛋白质降解的产物。人和其他哺乳动物的尿中都含有尿素，大量的尿素存在对环境造成污染。有一些细菌含有脲酶，通过降解尿素作为其生长的氮源。这类细菌对于自然界中的氮素循环具有重要的意义。酚红作为酸碱指示剂被添加到了培养基中，其变色范围是pH6.48.2，在酸性情况下呈黄色，碱性情况下呈红色。以尿素为氮源的微生物培养一段时间后，由于细菌产生的脲酶向周围扩散，将培养

10、基中的尿素分解，产生的NH3使培养基的pH由原来的中性变为碱性，于是培养基中的酚红由黄色变成红色，圆形红色区域愈大，表明这种菌利用尿素的能力愈强。用液体稀释涂布法测定菌体数量，分离菌种【土样的获得】在有哺乳动物排泄物的地方取得【实验步骤】 【问题思考】 因为尿素在高温条件下容易分解，所以本实验中，采用了_方法除去尿素溶液中的微生物。 本实验中利用_的 _培养基，采用了_进行分离和记数尿素分解菌。 预测本实验的结果是：LB全营养固体培养基上的菌落_；尿素固体培养基上的菌落_，一定时间内，菌落周围出现_区域。用浓度为10-4和土壤10-5土壤稀释液接种，更容易形成单菌落的是_。【解析】 过滤 不含

11、其他氮源 选择 液体稀释涂布法多而杂 少而纯 红色区域 10-5土壤稀释液【练习题】1若要分离土壤中的尿素分解菌，对于采集和处理土壤样品，下列表述不正确的是A最好选择在肥沃湿润、动物排泄物多的土壤中取样B采集的土样需经高温灭菌后，才可以用于制取土壤稀释液C制备土壤稀释液时，要用无菌水D用于制备土壤稀释液的各种器具要经过灭菌2下列表述正确的是A只有细菌可以分解尿素B在尿素作为唯一氮源的培养基上，只有一种微生物可以生长C土壤中尿素分解菌的存在有利于植物的N素营养D若要分离出土壤中能独力固氮的微生物，可用尿素培养基3工作人员为了解某种细菌的发酵进程，连续取样检测培养液中的细菌数目。已知开始时细菌的数

12、量约为2104个mL。工作人员在培养的不同时间进行4次连续取样，分别进行如下稀释处理，再分别取第一次取样稀释103倍、第二次取样稀释105倍、第三次取样稀释106倍、第四次取样稀释106倍的菌液1mL，接种于装有已灭菌的培养基的、号培养皿中培养48小时，检查其菌落数目。菌液 9mL水 9mL水9mL水9mL水9mL水9mL水图1对不同时间取样的菌液分别进行稀释(数据表示稀释倍数)图2对不同时间取样的稀释菌液进行培养得到如下结果：、培养皿中的菌落数分别是19个、25个、46个、47个。请根据以上资料回答下列问题： 接种细菌培养液于平板上的方法为_。四次取样测得的培养液中实际的菌体数分别是每毫升_

13、、_、_、_个。 用该种方法测得的细菌数量是（活或死）菌的数目，原因是_。【练习题解析】1.B 2.C 3. 液体涂布法 1.9104、2.5106、4.6107、4.7107 活 ，活菌能够通过繁殖形成菌落观察土壤中能水解纤维素的微生物【实验原理】植物的细胞壁主要由纤维素、木质素和半纤维素组成。在枯树或草炭土中有许多能利用和分解这些物质作为能量和物质来源的微生物。他们可以将土壤中的枯枝落叶分解，并用于纤维素酶的生产。已经发现并用于生产纤维素酶的菌种有绿色木霉、变异青霉、黑曲霉和根霉。纤维素酶是一类酶的总称，不是单一的一种酶，共同作用把纤维素分解为葡萄糖。【土样的选择】草炭土或枯树周边的土样【

14、实验步骤】【练习题】1有关土壤中的纤维素分解菌，下列表述不正确的是A在生态系统中属于分解者，包括真菌和细菌等B可以人工培养纤维素分解菌，以获得纤维素酶C人的消化道内有纤维素分解菌共生D在自然界的物质循环中起到重要的作用2有关观察纤维素分解菌分解作用的实验，下列表述正确的是A土壤样品起到了选择培养基的作用，只允许纤维素分解菌生长B用无菌水调整土壤湿度，以排除水中其他营养元素影响实验结果C可以用其他含有纤维素的物质代替卷烟纸进行该实验D本实验能分离出纯度很高的纤维素分解菌3蓝色牛仔裤是深受人们洗爱的休闲或工作服装，常用极粗的棉布制成。为了外观和舒适，过去在加工过程中常用“石洗”的方法，就是把成捆的

15、布料和浮石放在一架大机器中翻滚。现在用一定量的纤维素酶洗布料，同时放入蓝靛染料，当达到所希望的柔软度，立即冲洗掉纤维素酶，被称为“生物石洗”。请根据上述资料，回答下列问题： 自然界中纤维素的来源是_。它是_的主要结构成分。 纤维素酶增加棉布布料柔软度的原因是_，该酶还可用于植物细胞工程中。具体应用是_。 某研究性学习小组同学，为了从土壤中筛选纤维素分解菌，利用下列材料和用具进行了实验，请你完善下列实验步骤。提示：刚果红能与纤维素形成红色复合物，纤维素分解菌在含有刚果红和纤维素的培养基上形成的菌落周围会出现透明圈。材料用具：采集的土样，研钵，配制纤维素分解菌培养基的各种原料，纤维素粉，刚果红溶液

16、，培养箱，无菌水，无菌室等。实验步骤： 利用培养纤维素分解菌培养基的各种原料以及_配制固体培养基，灭菌。 将采集的土壤样品_，以制成土壤匀浆。 在无菌室内利用无菌操作方法把土壤匀浆接种在培养基上，_。 一定时间后，进行观察，挑取_，即为纤维素分解菌，进行进一步纯化培养。【练习题解析】1.C 2.C3. 绿色植物光合作用合成的有机物转化而来；植物细胞壁 纤维素酶水解棉布中的一些纤维素；在植物体细胞杂交技术中，用于去除细胞的细胞壁 实验步骤： 纤维素粉和刚果红 在研钵研碎后用无菌水稀释 放在培养箱内在适宜条件下培养。 周围有透明圈的菌落果酒及果醋的制作【实验原理】酵母菌能以葡萄汁中的葡萄糖为原料，

17、在无氧的条件下进行酒精发酵。醋酸杆菌在有氧的情况下，可将酒精转变为醋酸。【方法步骤】【练习题】1是果酒和果醋醋作的实验流程和某同学设计的果酒和果醋的发酵装置。根据图示回答下列问题：（1）完成图1中的实验流程。（2）冲洗的主要目的是_，冲洗应特别注意不_，以防止菌种的流失。（3）图2装置中的充气口在_时关闭，在_时连接充气泵，并不断向内_。（4）排气口在果酒发酵时排出的气体是由_产生的_，在果醋发酵时排出的是_，为什么排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身连接？_；出料口的作用是_。（5）在用玻璃瓶发酵生产时，必须对玻璃瓶用_进行消毒，然后在玻璃瓶中加入葡萄汁，加入的葡萄汁不应超过玻璃体积的_。（

18、6）若在果汁中混含有醋酸菌，在果酒发酵旺盛时，醋酸菌能否将果汁中的糖发酵为醋酸？说明理由。并写出醋酸菌的代谢类型及其酒精产生醋酸的反应式。 （7）如何检验果酒制作是否成功？【练习题解析】1.（1）醋酸发酵（2）洗去浮尘 反复冲洗（3）果酒发酵 果醋发酵 泵入空气（氧）（4）酵母菌 二氧化碳 剩余的空气、二氧化碳 防止空气中微生物的污染 取样的（5）70%的酒精溶液 2/3 （6）不能。因为果酒发酵时缺氧能抑制醋酸菌的生长，且醋酸菌发酵条件是氧气充足 异养需氧型 C2H5OH+O2 CH3COOH +H20+能量（7）发酵后取样，通过嗅味和品尝进行初步鉴定。此外，还可用显微镜观察酵母菌，并用重铬

19、酸钾检验酒精的存在。2下面是家庭酿酒的具体操作过程：先将米煮熟，待冷却至30左右时，加少许水和一定量的酒药与米饭混合后均匀置于一瓷坛内，在中间要挖一个洞，加盖并简单密封后置于适当的地方保温（28左右）12小时既成。请根据上述过程回答以下问题： 在米饭中央挖一个洞的目的是增加氧气量，保证菌种的数量尽快升到相应数值，此时酵母菌的繁殖方式主要是_。 有经验的主妇在家里酿米酒时,总会发现坛内先“来水”，后“来酒”。先来水的原因是_；后“来酒”的原因是_ 请写出“来酒”过程的生化反应方程式 酒药中含有曲霉、毛霉和酵母等多种微生物，酿米酒的反应分糖化和酒化两个过程。糖化指的是曲霉和毛霉能把米饭中的淀粉转化

20、为葡萄糖；酒化则是指酵母菌在没有氧气地条件下，把葡萄糖分解成酒精。如果酒酿制时间加长？味道如何变化？为什么？ 制作过程并未对用具专门进行灭菌，坛口也未严格密封，但一般情况下，坛内的米饭不会被杂菌污染，试简要阐明原因： 初始阶段_。 发酵过程中_。 根据推测，在此酿制过程中，坛内物质的重量会_,原因是_。 请你画出酵母菌种群数量变化的曲线。【练习题解析】2 出芽生殖 酵母菌先进行有氧呼吸，产生了水 后来由于氧气减少，酵母菌进行酒精发酵而产生酒精。 C6H12O6 2C2H5OH+2CO2+能量 甜度降低，酒味变浓，更多的葡萄糖通过酵母菌的无氧呼吸转化为酒精。 由于接种了酵母菌，使酵母菌在与杂种的

21、竞争中占据优势 在与杂菌的竞争中，酵母菌产生的酒精可抑制杂菌的生长繁殖 下降，酵母菌等微生物的呼吸作用消耗有机物 下降，酵母的呼吸作用消耗有机物。 略3低度的果酒、果醋不但好喝，还具有一定的保健养生功能。下图是两位同学制果酒和果醋时使用的装置。同学甲用A（带盖的瓶子）装置制葡萄酒，在瓶中加入适量葡萄汁，发酵温度控制在1825，每隔12h左右将瓶盖拧松一次（注意不是打开瓶盖），之后再将瓶盖拧紧。当发酵产生酒精后，再将瓶盖打开，盖上一层纱布，温度控制在3035，进行制果醋的发酵。同学乙用B装置，温度控制与甲相同，不同的是制果酒阶段除充气口用夹子夹紧外，排气的橡胶管也用夹子夹住，并且每隔12h左右松

22、一松夹子放出多余的气体。制果醋阶段适时向充气口充气。经过20天左右，两位同学先后完成了自己的发酵制作。据此回答有关问题： 酵母菌与醋酸杆菌在结构上的最大区别是后者_。从制酒和制醋两阶段对装置的处理方式判断，酵母菌和醋酸杆菌的异化作用类型依次是_。 同学甲在制酒阶段，每隔12h左右就要将瓶盖拧松一次，但又不打开，这样做的目的是_。用反应式表示出A和B装置酿酒过程刚开始时发生的主要化学变化： B装置中排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身相连，这样做的原因是_。 制葡萄酒时要将温度控制在1825，而制葡萄醋时要将温度控制在3035，原因是_。葡萄汁为酵母菌、醋酸杆菌等微生物的生长提供的营养成分是_。

23、 制作过程一般不需额外添加酵母菌和醋酸杆菌即可完成。为了提高果酒品质也可在果汁中加入人工培养的酵母菌。利用_培养基可分离获得较为纯净的酵母菌菌种。【练习题解析】3 无成形细胞核 兼性厌氧型、需氧型 放出CO2(制酒阶段的后期，酵母菌无氧呼吸会产生大量气体，如不及时放出会把瓶子或瓶盖胀破)；不打开瓶盖，是防止氧气和有害杂菌进入。 排出CO2，防止污染 酵母菌和醋酸菌发酵的最适温度不同（1825是酵母菌生长和发酵的合适温度，3035是醋酸菌的生长和发酵的合适温度）；碳源、氮源、水、无机盐和生长因子 选择；腐乳的制作实验原理1参与豆腐发酵的微生物有青霉、酵母、曲霉、毛霉等多种，其中起主要作用的是毛霉

24、。2毛霉是一种丝状真菌，常见于土壤、水果、蔬菜、谷物上，具有发达的白色菌丝。3毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸。实验步骤1、制腐乳胚（1）将豆腐切成3cm3cm1cm的若干块。所用豆腐的含水量为70左右，水分过多则腐乳不易成形。2、让豆腐块长出毛霉（1）将豆腐块平放在铺有干粽叶的盘内，粽叶可以提供菌种，并能起到保温的作用。每块豆腐等距离排放，周围留有一定的空隙。豆腐上面再铺上干净的粽叶。气候干燥时，将平盘用保鲜膜包裹，但不要封严，以免湿度太高，不利于毛霉的生长。（2）将平盘放入温度保持在1518的地方。毛霉逐渐生长，大约5d后

25、豆腐表面丛生着直立菌丝。（3）当毛霉生长旺盛，并呈淡黄色时，去除包裹平盘的保鲜膜以及铺在上面的粽叶，使豆腐块的热量和水分能够迅速散失，同时散去霉味。这一过程一般持续36h以上。3、腌制（1）当豆腐凉透后，将豆腐间连接在一起的菌丝拉断，并整齐排列在容器内，准备腌制。 （2）长满毛霉的豆腐块（以下称毛坯）与盐的质量分数比为51。将培养毛坯时靠近平盘没长直立菌丝的一面统一朝向玻璃瓶边，将毛坯分层盘立摆放在容器中。分层加盐，并随层加高而增加盐量，在瓶口表面铺盐厚些，以防止杂菌从瓶口进入。约腌制8d。注用盐腌制时，注意盐都用量。盐的浓度过低，不足以抑制微生物生长，可能导致豆腐腐败变质；盐的浓度过高，会影

26、响腐乳的口味。4、加卤汤调味1）将黄酒、米酒和糖，按口味不同而配以各种香辛料（如胡椒、花椒、八角茴香、桂皮、姜、辣椒等）混合制成卤汤。卤汤酒精含量控制在12左右为宜。注酒精含量的高低与腐乳后期发酵时间的长短有很大关系。酒精含量越高，对蛋白酶的抑制作用也越大，使腐乳成熟期延长；酒精含量过低，蛋白酶的活性高，加快蛋白质的水解，杂菌繁殖快，豆腐易腐败，难以成块。2）将广口玻璃瓶刷干净后，用高压锅在100蒸汽灭菌30min。将腐乳咸坯摆入瓶中，加入卤汤和辅料 后，将瓶口用酒精灯加热灭菌，用胶条密封。在常温情况下，一般六个月可以成熟。注意事项1酿造腐乳的主要生产工序是将豆腐进行前期发酵和后期发酵。前期发酵所发生的主要变化是毛霉在豆腐（白坯）上的生长。发酵的温度为1518，此温度不适于细菌、酵母菌和曲霉的生长，而适于毛霉慢慢生长。毛霉生长大约5d后使白坯变成毛坯。前期发酵的作用，一是使豆腐表面有一层菌膜包住，形成腐乳的“体”；二是毛霉分泌以蛋白酶为主的各种酶，