1、新高考生物一轮复习加试特训九浙科版加试特训(九)1请回答下列有关微生物的相关问题。资料一微生物在现代生物技术中应用非常广泛,如酿酒制醋等。获取纯种酿酒酵母菌的基本程序是:配制培养基接种培养观察记录纯化培养。(1)酵母菌的培养最好使用下列哪种培养基()A牛肉膏蛋白胨培养基B麦芽汁琼脂培养基C无土栽培培养基DMS培养基(2)采用划线分离法接种时,开始接种时要灼烧接种环,目的是_。要把接种后的培养基和一个未接种的培养基同时放入恒温箱培养,设置“未接种的培养基”的目的是_。(3)如果将分离出来的纯种酿酒酵母接种到葡萄汁中发酵,如何获得酒精含量更高的果酒?_。(4)把从酵母细胞中提取的淀粉酶固定在尼龙布
2、上制成固定化酶,与传统酶应用技术相比,此技术最显著的优点是_。(5)某实验小组欲按上述方法从土壤中筛选出能分泌淀粉酶的芽孢杆菌,应将菌液涂布接种于以_为唯一碳源的固体培养基上,30 条件下培养。为避免污染,需将培养皿呈_状态放置;筛选时应将适量的碘液滴加在平板中的菌落周围,如果菌落周围的现象是出现透明圈,则说明此种菌能够_。从平板中挑取实验效果明显的目的菌株,采用_法接种于新的培养基平板,可对菌株进行进一步的纯化。资料二基因工程中常选用一些微生物作为工程菌,下图为大肠杆菌及质粒载体的结构模式图。(6)a代表的物质和质粒的化学本质相同,都是_,二者还具有其他共同点,如_,_(写出两条即可)。(7
3、)若质粒DNA分子的切割末端为,则与之连接的目的基因的切割末端应为_;可使用_把质粒和目的基因连接在一起。(8)氨苄青霉素抗性基因在质粒DNA上被称为_,其作用是_。(9)下列常在基因工程中用做载体的是()A苏云金芽孢杆菌抗虫基因B土壤农杆菌环状RNA分子C大肠杆菌的质粒D动物细胞的染色体答案(1)B(2)灭菌检验培养基是否被污染(3)往葡萄汁中加入适量的蔗糖(4)可重复使用(产品易纯化)(5)淀粉倒置分泌淀粉酶使淀粉发生水解划线分离(6)DNA能够自主复制具有遗传效应(7)DNA连接酶(8)标记基因筛选到含有重组DNA分子的受体细胞(9)C解析(1)“细菌喜荤,霉菌喜素”,A培养基适用于细菌
4、培养,B培养基适用于真菌培养;C培养基适用于植物体培养,D培养基适用于植物组织培养。(2)开始接种时要对接种环灼烧灭菌,接种后的培养基和一个未接种的培养基同时放入恒温箱培养,目的是检验培养基在接种中是否被污染。(3)葡萄汁中添加蔗糖发酵能促进酵母菌快速生长,加快发酵产生酒精更多。(4)使用固定化酶的优点是酶制剂更加稳定、可以重复使用、产品易纯化等。(5)以淀粉为唯一碳源的固体培养基通常只生长能利用淀粉的微生物。培养皿在培养过程中会有冷凝水从盖上滴落到培养基上,培养皿倒置培养可以防止菌体随水滴扩散,使分离菌种失败。培养基中含淀粉遇碘液会显蓝色,若菌体能分解利用淀粉,其菌落周围会出现透明圈。通过划
5、线分离法可以进一步分离纯化菌种。(6)a为拟核,与质粒的化学本质相同,都为DNA,均为大肠杆菌的遗传物质,可以自主复制,并具有遗传效应。(7)相同的限制性核酸内切酶切割目的基因和质粒,产生粘性末端的碱基序列互补,可以通过DNA连接酶连接。(8)质粒上的抗性基因作为标记基因,可以用于筛选含有重组DNA分子的受体细胞。(9)作为基因工程中的载体,应能够自主复制,并具有标记基因和多个限制性核酸内切酶切点。2在工业生产中,淀粉酶主要是通过固定化酶技术将其用于淀粉的分解,淀粉酶广泛分布于动物、植物和微生物中。请回答下列相关问题:(1)在上个世纪50年代,酶已经大规模地应用于各个生产领域,到了70年代又发
6、明了固定化酶技术。固定化酶技术将酶固定在不溶于水的载体上,使酶既能与_接触,又能与_分离,同时固定在载体上的酶还能_。常用的固定方法有_。(2)“淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测”实验中:淀粉酶固定在_上,使用了下图中方法_(填出号码及名称)。实验中,用滴管滴加淀粉溶液时,使淀粉溶液以_流速过柱,目的是_。灌注了固定化酶的注射器在使用完后要_,放置在_中保存。(3)正常大鼠体内因含有淀粉酶基因可以正常利用淀粉。但研究发现某一突变型大鼠因体内缺少淀粉酶基因无法利用淀粉。现科研人员通过基因改造使其可以正常利用淀粉。具体流程如下:卵母细胞除从活体输卵管中采集外,还可从已处死的雌鼠_中获取。图中的淀
7、粉酶基因作为_,质粒作为_,二者需用_切割后连接成重组载体,该过程与质粒上含有_有关。子代大鼠如果_和_,即可分别在分子水平和个体水平上说明淀粉酶基因已成功表达。在上述转基因大鼠的培育过程中,所用到的主要胚胎工程技术是_、早期胚胎培养和胚胎移植。答案(1)反应物产物反复利用吸附法、共价偶联法、交联法和包埋法(2)石英砂乙0.3 mL/min使淀粉充分与酶接触用10倍柱体积的蒸馏水洗涤4 冰箱(3)卵巢目的基因载体同一种限制性核酸内切酶限制性核酸内切酶的切割位点检测到相应蛋白质(淀粉酶)可利用淀粉体外受精解析(1)固定化酶技术将水溶性的酶通过物理或化学的方法固定在不溶于水的载体上,使酶既能与反应
8、物接触,又能与产物分离,酶可以重复利用。常用的固定方法有吸附法、共价偶联法、交联法和包埋法。(2)教材实验中淀粉酶固定在图乙所示的石英砂上。为了使淀粉充分与酶接触,淀粉溶液以较慢的速度0.3 mL/min流速过柱。使用完毕的注射器要用10倍柱体积的蒸馏水洗涤后放置在4 冰箱中保存。(3)获取卵母细胞的途径有2条:从活体输卵管中采集或从已处死的雌鼠卵巢中获取。目的基因为淀粉酶基因,质粒为载体,两者必须用相同的限制性核酸内切酶切割,有相同的粘性末端才能连接,能被限制性核酸内切酶切割,是因为具有限制性核酸内切酶的切割位点。如果检测到相应蛋白质(淀粉酶),即可在分子水平上说明目的基因已经表达,如果检测
9、到大鼠可以利用淀粉,即可在个体水平上说明目的基因已经表达。在上述转基因大鼠的培育过程中,所用到的主要胚胎工程技术是体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植。3在我们的周围存在着各种各样的微生物,比如大肠杆菌、酵母菌、乳酸菌、霉菌等。微生物与人类的生活、健康有着密切的联系。请回答下列相关问题:(1)检查饮用水中大肠杆菌数量时必须进行无菌操作。实验前所需的各种器材如三角烧瓶、培养皿等需要经过_法灭菌。在微生物培养或分离过程中,下列操作不恰当的是_。A在超净台中进行接种时应该关闭紫外灯B扩大培养时必须保证氧气的供应C控制液体培养基中营养物质的浓度D空白的培养基平板需进行无菌实验(2)微生物与人类的生活关系越
10、来越密切,在制作果酒、果醋、泡菜的过程中,用到的主要微生物分别是_。在果醋、泡菜和果酒的制作过程中,均利用相应微生物的代谢特点进行条件控制,其中需要提供氧气的是_的制作。泡菜腌制原理是_和_等主要微生物利用菜中的_和其他营养物质进行发酵,产生有机酸和醇类物质。(3)因为培养基里面含有微生物或动植物细胞生长所必需的营养物质和成分,所以常用培养基来保存或增殖微生物或动植物细胞。配制培养大肠杆菌的培养基时,根据“细菌喜荤,霉菌喜素”的规律,通常在培养基中加入_作为营养物质,还需要考虑温度、渗透压和_等条件。大肠杆菌培养和分离的实验中,在LB液体培养基中进行_,培养液经_后,在LB固体培养基上进行_,
11、并将培养皿_放在恒温培养箱中培养,可以获得如图效果。通常对获得的纯菌种可以依据_的形状、大小等特征进行初步的鉴定。根据微生物的特点,可以利用相应的培养基进行分离或培养,例如用_的培养基分离能产生脲酶的微生物,用_的培养基培养苹果青霉,可提高果胶酶的产量。利用固体培养基可以进行微生物培养和植物细胞培养,两者的培养基明显不同的是()A琼脂的添加 B有机物的添加C激素的添加 D灭菌的处理答案(1)高压蒸汽灭菌B(2)酵母菌、醋化醋杆菌、乳酸菌果醋假丝酵母乳酸菌糖(3)蛋白胨和酵母提取物pH扩大培养稀释涂布分离倒置菌落仅以尿素为氮源富含果胶C解析(1)无菌操作包括多种灭菌方法,对实验器皿如培养皿等采用
12、高压蒸汽灭菌法灭菌。扩大培养一般用液体培养基,是否要通入空气要根据微生物的需求而定,不能一概而论。(2)在制作果酒、果醋、泡菜的过程中,分别用到的主要微生物是酵母菌、醋化醋杆菌和乳酸菌。果醋发酵属于需氧发酵,需要向发酵装置中通入空气。泡菜腌制原理是假丝酵母和乳酸菌等主要微生物利用菜中的糖和其他营养物质进行发酵,产生有机酸和醇类物质。(3)细菌需要的营养物质主要为蛋白胨、酵母提取物等。培养基配制除考虑营养物质、温度、渗透压等之外还要特别注意pH适宜。通常液体培养基用于菌种扩大培养或生产,固体培养基用于研究鉴定和菌种分离,菌种分离常用划线分离和涂布分离,其中涂布分离前常常需要稀释样品。接种后的培养
13、皿应倒置培养,避免培养皿盖上的冷凝水滴落到培养基上,造成菌体随水滴扩散,不能获得单菌落。固体培养基上生长的微生物能形成菌落,菌落的形状、大小、颜色、软硬等特征可用于菌种的鉴定。分离能产生脲酶的微生物应用以尿素为唯一氮源的培养基。培养苹果青霉获得大量果胶酶时应用含果胶丰富的培养基。植物组织培养的培养基中必须加入植物激素作为生长调节物质才能完成,有机物的需求较少但不能缺少,而一般微生物培养时不需要激素添加,有机物较多。4人参果果实有淡雅的清香,果肉清爽多汁,风味独特。具有高蛋白、低糖、低脂,还富含维生素C,以及多种人体所必需的微量元素,尤其是硒、钙的含量大大地高于其他的果实和蔬菜。某兴趣小组将人参
14、果制成果酒,并尝试将其口感欠佳的叶子制作泡菜。请回答下列相关问题:(1)下图为人参果果酒生产工艺流程简图,据图回答问题:选料“?”粉碎灭菌接种发酵“?”果酒流程中“?”处的内容依次应为_、_。制作果酒时,温度应该控制在_,果酒酿造过程中如果果汁灭菌不合格,含有醋化醋杆菌,在酒精发酵旺盛时,醋化醋杆菌能否将果汁中的糖发酵为醋酸?说明理由。_。果酒制作离不开酵母菌,与醋化醋杆菌相比,酵母菌在结构上的主要特点是_。人参果果酒制作过程中,接种完成后要先向发酵罐中通入一段时间的无菌空气,目的是_。(2)下图是人参果叶子的腌制及亚硝酸盐含量测定的实验流程示意图,请据图回答:制作泡菜宜选用新鲜的蔬菜或其他原
15、料,原因是_。泡菜腌制过程中起主要作用的菌种是_。在制作泡菜的过程中,因为操作不当,造成泡菜腐烂。下列原因中正确的是()A罐口密闭缺氧,抑制了乳酸菌和需氧腐生细菌的生长繁殖B罐口密闭不严,氧气使乳酸菌的生长繁殖受到抑制,需氧腐生细菌的生长繁殖加快C罐口密闭不严,氧气使酵母菌和需氧腐生细菌的生长繁殖减慢D罐口密闭缺氧,促进了乳酸菌和需氧腐生细菌的生长繁殖测定亚硝酸盐含量的方法是_。亚硝酸盐可与对氨基苯磺酸发生重氮化反应,反应产物再与N1萘基乙二胺偶联,形成_色产物。绘制标准曲线时,应以亚硝酸钠质量为横坐标,以_为纵坐标。三坛泡菜分别在腌制过程中的第3、5、7、9、11、13天分别对食盐浓度为4%
16、、6%、8%的泡菜做了亚硝酸盐含量的检测,得到以下数据:食盐浓度发酵天数1号坛4%2号坛6%3号坛8%第3天1.61.20.5第5天3.25.52第7天3.84.01.8第9天3.51.81.6第11天3.41.21.5第13天3.21.21.2请根据表中数据,对泡菜的制作提出两条建议_、_。(3)科学家将分离得到的人参果韧皮部细胞进行克隆,最终由单个细胞发育成了完整的新人参果植株。具体操作步骤如下所示:科学家所用的这种植物克隆技术叫做_。该项技术表明,当植物细胞处于_状态时,在一定的营养物质、_和其他外界条件的作用下,可能表现出_,发育成完整植株。答案(1)冲洗过滤2530 不能因醋化醋杆菌
17、是好氧型细菌,而果酒发酵是无氧环境(或因醋化醋杆菌需要在有氧且温度是3035 条件下,才能将糖转化为醋酸,而此时发酵罐中的条件是无氧且温度是2530 )有成形的细胞核在有氧条件下,使酵母菌迅速繁殖,增加数量(2)亚硝酸盐的含量低假丝酵母和乳酸菌B光电比色法紫红光密度值泡菜腌制时间最好长于13天适当地增加食盐的浓度(3)(植物)组织培养离体(植物)激素细胞的全能性解析(1)果酒生产的工艺流程为:选料冲洗粉碎灭菌接种发酵过滤果酒。醋化醋杆菌的最适生长温度为3035 。如果果汁灭菌不合格,含有醋化醋杆菌,由于果酒发酵旺盛时是无氧环境,且温度为2530 ,不适合醋化醋杆菌生存,故醋化醋杆菌不能将果汁中
18、的糖发酵为醋酸。醋化醋杆菌是原核生物,无细胞核,酵母菌是真核生物,有细胞核及多种细胞器。果酒制作过程中,接种完成后要先向发酵罐中通入一段时间的无菌空气,在有氧条件下,使酵母菌迅速繁殖,增加数量,有利于后期发酵。(2)制作泡菜宜选用新鲜的蔬菜是因为其中亚硝酸盐的含量低,蔬菜中的氮元素会被微生物分解产生亚硝酸盐。泡菜腌制过程中起主要作用的菌种是假丝酵母和乳酸菌,先期发酵以假丝酵母为主,以后发酵以乳酸菌为主。在制作泡菜的过程中,罐口密闭不严,氧气使乳酸菌的生长繁殖受到抑制,需氧腐生细菌的生长繁殖加快,造成泡菜腐烂。测定亚硝酸盐含量的方法是光电比色法,亚硝酸盐可与显色剂反应产生紫红色物质。绘制标准曲线
19、时,应以标准溶液中亚硝酸钠质量为横坐标,以光密度值为纵坐标。分析表中数据可以发现,泡菜中亚硝酸盐的含量随时间延长,先增加,13天后开始下降;泡菜中亚硝酸盐的含量还与使用盐水浓度有关,盐水浓度适当增大亚硝酸盐的含量相对减少。(3)由图可知,为植物组织培养过程,A为离体培养,B为脱分化形成愈伤组织,C为再分化形成胚状体,D表示胚状体经过有丝分裂发育成幼苗,E为幼苗成长为植株。植物组织培养的原理是植物细胞的全能性。5如图为某同学根据杂交瘤技术的方法,设计生产破伤风杆菌抗体的实验方案。请据图回答问题。(1)该方案的目的是_。该方案能达到预期效果吗?_。原因是_。(2)图中为_过程,常用_作为诱导剂。该
20、细胞继承了_,因此,不仅能_,还能产生_。图中进行细胞培养的目的是_。图中的培养能获得_细胞,便于大规模培养。(3)在制备破伤风杆菌抗体的过程中,进行了两次筛选,其目的是不相同的,是通过筛选获得_,是通过筛选获得_。(4)破伤风杆菌的抗体最终可从_和_中提取。(5)破伤风杆菌是原核生物,可归为微生物。一般而言,为了获得纯净的微生物培养物,最为关键的是无菌操作。下列有关无菌操作的叙述中,错误的是()A对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行灭菌B将培养器皿、接种用具和培养基等进行灭菌C为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在酒精灯火焰附近进行D实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围物品相接
21、触答案(1)制备单克隆抗体不能没有将抗原注入小鼠体内,无法获得产生单一抗体的B淋巴细胞(2)细胞融合和筛选灭活的病毒双亲细胞的遗传物质大量繁殖特异性抗体在体外条件下使杂交瘤细胞大量增殖足够量产生特定抗体的杂交瘤(3)杂交瘤细胞产生特定抗体的杂交瘤细胞(4)细胞培养液小鼠腹水(5)A解析(1)由图示的程序图可知,该方案的目的是制备单克隆抗体。B淋巴细胞有以下特点:在体外不能无限增殖;只有受到抗原刺激后才能产生相应抗体;与骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞后既可无限增殖,又能产生大量所需抗体。所以单克隆抗体制备过程首先需要注射与生产单克隆抗体发生特异性免疫反应的抗原,否则小鼠体内不会发生特异性免疫反应,产生合成所需抗体的B淋巴细胞。(2)获得B淋巴细胞后,因为B淋巴细胞不能大量增殖,虽能产生抗体,但数量有限,因此需要与骨髓瘤细胞融合,融合必须在诱导剂的诱导下才能发生,常用的是灭活的病毒。两细胞融合有三种类型:B淋巴细胞B淋巴细胞,骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞,B淋巴细胞骨髓瘤细胞,我们需要的是杂种细胞,它结合了双亲的遗传物质,具备大量增殖和产生抗体的能力,所以需培养筛选。单克隆抗体生产中,经筛选获得的杂交瘤细胞需要体外培养获得大量的克隆细胞。图中的培养能获得足量的杂交瘤细胞。(3)第一次筛选是选择需要的杂交瘤细胞,第二次筛选是在
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