版药典培养基适用性验证.docx

1、版药典培养基适用性验证 培养基验证文件验证文件名称验证文件编码计数培养基适用性检查验证方案TS-YZ-2522-01 制 药 有 限 公 司 制 药 有 限 公 司验证立项申请表验证立项题目计数培养基适用性检查的验证立项编号TS-YZ-2522-01验证形式 验 证立 项 部 门质量部申请日期年 月 日验 证 对 象计数培养基适用性验证目的及验证内容需氧菌、霉菌及酵母菌计数用的培养基应进行培养基的适用性检查。本次验证的目的是确认胰酪大豆胨琼脂培养基和沙氏葡萄糖琼脂培养基是否适合需氧菌、霉菌及酵母菌数测定。主管部门审核意见同意对计数培养基适用性检查试验方案进行验证。 年 月 日对验证方案的编制及

2、实施要求验证方案编制应科学，合理，方法应切实可行，实施必须按照方案进行。验证总负责人批准经审核批准对计数培养基适用性检查进行验证。签字： 年 月 日验证方案的审批起草部门签 名日 期化验室质量部批准部门签 名日 期质量部验证总负责人验 证 方 案 目 录 1、概述 2、验证目的 3、验证范围 4、验证项目小组成员及职责 5、验证合格标准 6、试验材料 7、菌液制备 8、适用性检查 9、验证记录 10、验证结论及综合评价计数培养基适用性检查的验证方案1. 验证目的：需氧菌、霉菌及酵母菌计数用的培养基应进行培养基的适用性检查。本次验证的目的是确认胰酪大豆胨琼脂培养基和沙氏葡萄糖琼脂培养基是否适合需

3、氧菌、霉菌及酵母菌总数测定。2. 参照标准：中国药典2015年版四部1105非无菌产品微生物限度检查法。3. 验证项目：胰酪大豆胨琼脂培养基和沙氏葡萄糖琼脂培养基的适用性检查。4.验证小组人员及职责：人员组成姓名部门职务/职称职责组长 质量部副部长负责验证期间各部门的协调及整个验证过程的具体实施。成员 化验室主任负责验证方案的起草及具体实施，确保验证过程能按方案规定的程序进行，负责各种验证资料（检查结果）的整理，负责验证报告的编写。 化验室化验员 化验室化验员负责验证方案的审核及批准；负责出具检验报告；审查验证报告及发放验证报告；负责验证文件的管理 化验室化验员负责验证报告的编写规范；审查验证

4、报告及发放验证报告。5. 合格标准：被检固体培养基上的菌落平均数与对照培养基上的菌落平均数的比值应在0.52范围内，且菌落形态大小与对照培养基上的菌落一致。6. 试验材料：6.1. 被验证产品：胰酪大豆胨琼脂培养基、沙氏葡萄糖琼脂培养基。6.2. 仪器设备：6.2.1. YXQ-LS-100G型立式压力蒸汽灭菌器6.2.2. GHT-00双人净化工作台 6.2.3. BSC-110011A2-X 生物安全柜6.2.4. MJ-250I型霉菌培养箱 (2025)6.2.5. LRH-250生化培养箱 (3035)6.2.6. 电热恒温干燥箱6.2.7微波炉6.3. 验证用培养基 名称生产厂家批号

5、 6.4. 验证用菌株：(第 代)验证菌株培养基培养温度培养时间（小时） 7. 菌液制备 按6.4规定程序培养各试验菌株。取金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌的新鲜培养物，用pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液制成约为50100cfuml的菌悬液；取黑曲霉的新鲜培养物加入35ml含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液，将孢子洗脱。然后，采用适宜的方法吸出孢子悬液至无菌试管内，用含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液制成约为50100cfuml的黑曲霉孢子悬液。8. 适用性检查： 8.1. 取金黄色葡萄球菌

6、、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌的菌液（50100cfu/ml）各1ml，每株试验菌平行制备2个平皿，分别注入2个无菌平皿中，立即倾注胰酪大豆胨琼脂培养基，并作阴性对照，混匀，凝固，置3035培养24小时，计数；取白色念珠菌的菌液（50100cfu/ml）各1ml，分别注入2个无菌平皿中，立即倾注沙氏葡萄糖琼脂培养基，并作阴性对照，混匀，凝固，置2025培养72小时，计数；取黑曲霉菌的菌液（50100cfu/ml）1ml，注入无菌平皿中，立即倾注沙氏葡萄糖琼脂培养基，每株试验菌平行制备2个平皿，并作阴性对照，混匀，凝固，置2025培养168小时，计数。8.2. 取金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草

7、芽孢杆菌的菌液（50100cfu/ml）各1ml，分别注入无菌平皿中，立即倾注胰酪大豆胨琼脂对照培养基，每株试验菌平行制备2个平皿，并作阴性对照，混匀，凝固，置3035培养24小时，计数；取白色念珠菌的菌液（50100cfu/ml）各1ml，分别注入无菌平皿中，立即倾注沙氏葡萄糖琼脂对照培养基，每株试验菌平行制备2个平皿，并作阴性对照，混匀，凝固，置2025培养72小时，计数；取黑曲霉菌的菌液（50100cfu/ml）各1ml，分别注入无菌平皿中，立即倾注沙氏葡萄糖琼脂对照培养基，每株试验菌平行制备2个平皿，并作阴性对照，混匀，凝固，置2025培养168小时，计数。 9. 验证记录10. 验证

8、结论及综合评价评价人： 日期：附表1：计数培养基适用性检查验证记录试验时间 年 月 日 完成时间 年 月 日验证菌株平皿号验证培养基组（cfuml）阴性对照（cfuml）对照培养基组(cfuml)阴性对照（cfuml）菌落平均数的比值（应在0.52范围内）大肠埃希菌(培养3天计数)1-2-平均值金黄色葡萄球菌(培养3天计数)1-2-平均值枯草芽孢杆菌(培养3天计数)1-2-平均值白色念珠菌(培养5天开始计数)1-2-平均值黑曲霉菌(培养5天开始计数)1-2-平均值结论 复核人 试验人 复核人 试验人 验证报告的审批起草部门签 名日 期 化验室质量部批准部门签 名日 期质量部验证总负责人验 证

9、报 告1. 验证目的：需氧菌、霉菌及酵母菌计数用的培养基应进行培养基的适用性检查。本次验证的目的是确认胰酪大豆胨琼脂培养基和沙氏葡萄糖琼脂培养基是否适合需氧菌、霉菌及酵母菌总数测定。2. 参照标准：中国药典2015年版四部1105非无菌产品微生物限度检查法。3. 验证项目：胰酪大豆胨琼脂培养基和沙氏葡萄糖琼脂培养基的适用性检查。4.验证小组人员及职责：人员组成姓名部门职务/职称职责组长 质量部副部长负责验证期间各部门的协调及整个验证过程的具体实施。成员 化验室主任负责验证方案的起草及具体实施，确保验证过程能按方案规定的程序进行，负责各种验证资料（检查结果）的整理，负责验证报告的编写。 化验室化

10、验员 化验室化验员负责验证方案的审核及批准；负责出具检验报告；审查验证报告及发放验证报告；负责验证文件的管理 化验室化验员负责验证报告的编写规范；审查验证报告及发放验证报告。5. 合格标准：被检固体培养基上的菌落平均数与对照培养基上的菌落平均数的比值应在0.52范围内，且菌落形态大小与对照培养基上的菌落一致。6. 试验材料：6.1. 被验证产品：胰酪大豆胨琼脂培养基、沙氏葡萄糖琼脂培养基。6.2. 仪器设备：6.2.1. YXQ-LS-100G型立式压力蒸汽灭菌器6.2.2. GHT-00双人净化工作台 6.2.3. BSC-110011A2-X 生物安全柜6.2.4. MJ-250I型霉菌培

11、养箱 (2025)6.2.5. LRH-250生化培养箱 (3035)6.2.6. 电热恒温干燥箱6.2.7微波炉6.3. 验证用培养基 名称生产厂家批号 6.4. 验证用菌株：(第 代)验证菌株培养基培养温度培养时间（小时） 7. 菌液制备 按6.4规定程序培养各试验菌株。取金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌的新鲜培养物，用pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液制成约为50100cfuml的菌悬液；取黑曲霉的新鲜培养物加入35ml含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液，将孢子洗脱。然后，采用适宜的方法吸出孢子悬液至无菌试管内，用含0.05%

12、（ml/ml）聚山梨酯80的pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液制成约为50100cfuml的黑曲霉孢子悬液。8. 适用性检查： 8.1. 取金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌的菌液（50100cfu/ml）各1ml，每株试验菌平行制备2个平皿，分别注入2个无菌平皿中，立即倾注胰酪大豆胨琼脂培养基，并作阴性对照，混匀，凝固，置3035培养24小时，计数；取白色念珠菌的菌液（50100cfu/ml）各1ml，分别注入2个无菌平皿中，立即倾注沙氏葡萄糖琼脂培养基，并作阴性对照，混匀，凝固，置2025培养72小时，计数；取黑曲霉菌的菌液（50100cfu/ml）1ml，注入无菌平皿中，立即倾注

13、沙氏葡萄糖琼脂培养基，每株试验菌平行制备2个平皿，并作阴性对照，混匀，凝固，置2025培养168小时，计数。8.2. 取金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌的菌液（50100cfu/ml）各1ml，分别注入无菌平皿中，立即倾注胰酪大豆胨琼脂对照培养基，每株试验菌平行制备2个平皿，并作阴性对照，混匀，凝固，置3035培养24小时，计数；取白色念珠菌的菌液（50100cfu/ml）各1ml，分别注入无菌平皿中，立即倾注沙氏葡萄糖琼脂对照培养基，每株试验菌平行制备2个平皿，并作阴性对照，混匀，凝固，置2025培养72小时，计数；取黑曲霉菌的菌液（50100cfu/ml）各1ml，分别注入无菌平

14、皿中，立即倾注沙氏葡萄糖琼脂对照培养基，每株试验菌平行制备2个平皿，并作阴性对照，混匀，凝固，置2025培养168小时，计数。 9. 验证记录10. 验证结论及综合评价附表1：计数培养基适用性检查验证记录试验时间 年 月 日 完成时间 年 月 日验证菌株平皿号验证培养基组（cfuml）阴性对照（cfuml）对照培养基组(cfuml)阴性对照（cfuml）菌落平均数的比值（应在0.52范围内）大肠埃希菌(培养3天计数)1-2-平均值金黄色葡萄球菌(培养3天计数)1-2-平均值枯草芽孢杆菌(培养3天计数)1-2-平均值白色念珠菌(培养5天开始计数)1-2-平均值黑曲霉菌(培养5天开始计数)1-2-

15、平均值结论 复核人 试验人 复核人 试验人 制 药 有 限 公 司验 证 证 书验证文件名称计数培养基适用性检查的验证验证文件编号TS-YZ-2522-01验 证 对 象计数培养基适用性检查验 证 结 论 合 格 证 书 编 号 YZ-2522验证文件审核验证方案已按规定程序立项、审批，验证项目及标准的制定科学、合理，验证方法切实可行。实施记录记录内容真实、全面、完整，严格按验证方案要求进行，已按期完成。验证报告总结内容简洁、全面、准确，评价客观合理，记录结果与结论相符。该验证方案及报告已经审核，并归档保存。通过验证该系统各类SOP文件可以正常使用，该系统可以正常运行,特发此证。 质量部负责人： 年 月 日 验证总负责人： 年 月 日