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1、单元卷17微生物的利用单元卷17微生物的利用（时间：15分钟分数：50分）1.（2015新课标卷）已知微生物A可以产生油脂，微生物B可以产生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产。回答有关问题：（1）显微观察时，微生物A菌体中的油脂通常可用染色。微生物A产生的油脂不易挥发，可选用（填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”）从菌体中提取。（2）为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落，可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样，并应选用以为碳源的固体培养基进行培养。（3）若要测定培养液中微生物B的菌体数，可在显微镜下用直接计数；若要测定其活菌数量，可选用法进行计数。（4）为了确定微生物B产生的脂肪酶

2、的最适温度，某同学测得相同时间内，在35 、40 、45 温度下降解10 g油脂所需酶量依次为4 mg、1 mg、6 mg，则上述三个温度中， 条件下该酶活力最小。为了进一步确定该酶的最适温度，应围绕设计后续实验。2.（2014新课标全国卷）为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌分离等工作。回答下列问题：（1）该小组采用稀释涂布平板法检测水样中细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是；然后，将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1 mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38

3、和37，据此可得出每升水样中的活菌数为。（2）该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时，接种环通过灭菌，在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线，这样做的目的是_。（3）示意图A和B中，表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。（4）该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液中的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高的利用率。3.（2014新课标全国卷）植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解。回答下列问题：（1）分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤

4、维素酶，该酶是由3种组分组成的复合酶，其中的葡萄糖苷酶可将分解成。（2）在含纤维素的培养基中加入刚果红（CR）时，CR可与纤维素形成色复合物。用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌时，培养基上会出现以该菌的菌落为中心的。（3）为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落，某同学设计了甲、乙两种培养基（成分见下表）：酵母膏无机盐淀粉纤维素粉琼脂CR溶液水培养基甲培养基乙注：“”表示有，“”表示无。据表判断，培养基甲（填“能”或“不能”）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是；培养基乙（填“能”或“不能”）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是_。4.（2013新课标全国卷）临床使用抗生素前，有时需

5、要做细菌耐药实验。实验时，首先要从病人身上获取少量样本，然后按照一定的实验步骤操作，以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。回答下列问题：（1）为了从样本中获取致病菌单菌落，可用法或法将样本接种于固体培养基表面，经过选择培养、鉴别等步骤获得。（2）取该单菌落适当稀释，用法接种于固体培养基表面，在37 培养箱中培养24 h，使其均匀生长，布满平板。（3）为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性，将分别含有A、B、C、D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，培养一段时间后，含A的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素A；含B的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该致病菌对抗生素B；含C的滤纸片周围的透

6、明圈比含A的小，说明；含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小，且透明圈中出现了一个菌落，在排除杂菌污染的情况下，此菌落很可能是抗生素D的。（4）根据上述实验结果，为达到抗菌目的，最好应选用抗生素。（时间：60分钟分数：100分）1.（2016西安模拟）（8分）有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题：（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于培养基。（2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即和。（3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小

7、，分解圈大说明该菌株的降解能力。（4）通常情况下，在微生物培养过程中实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、和，无菌技术要求试验操作应在酒精灯附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。2.（2015广西四市一次联考）（7分）如图是某细菌纯化培养过程中划线接种的培养结果。回答问题：（1）在（填图中编号）区域出现了单个菌落，产生每个菌落的最初细菌数目是个。据图分析，在培养基上划线接种时，划线的顺序依次是（用编号表示）。（2）下表是某微生物培养基成分。编号成分含量编号成分含量粉状硫10 g（NH4）2SO40.4 gK2HPO44 gMgSO49.25 gFeSO40.5 gCaCl20.5 gH2O100

8、mL若培养从土壤中分离出来的自生固氮菌，该培养基应添加，去除。若要鉴别纤维素分解菌，可用法，若要鉴别尿素分解菌，可在培养液中加入。3.（2015保定二模）（6分）某地盛产石榴，酿制的石榴酒深受大众喜爱，请回答以下问题。（1）用石榴发酵制作石榴酒的过程中，起主要作用的微生物是，其发酵液因具有的特点，可以抑制大多数其它微生物的生长。（2）发酵装置内加入石榴汁后要留约的空间，目的是_。（3）石榴汁发酵后，可用来鉴定发酵液中的酒精，有人将石榴酒酿成了石榴醋，可能的原因是_。（4）选择优质石榴品种利用组织培养法培育幼苗，可提高石榴产量，培养过程中若控制离体组织细胞能分裂但不分化，常用的两种激素及使用顺序

9、为_。4.（2016甘肃张掖市天一中第一次质检）（8分）炭疽病是由炭疽杆菌引起的一种人畜共患传染病。对炭疽病疑似患者，可通过噬菌体裂解实验确诊。（1）为从炭疽病疑似患者体内分离出炭疽杆菌，将采集到的患者皮肤脓胞渗出物稀释后滴于培养基表面，用涂布器涂匀， 这种接种方法称为。（2）用该方法统计样本菌落数时是否需要对照组？。为什么？_。（3）下图为细菌鉴定的实验流程。图中的液体培养基由澄清变浑浊的原因是。在实验中，先用无菌滴管吸取滴于平板培养基表面，再用涂布器涂匀，经培养得到如图中的6个菌落。然后在平板培养基的（填数字标号）菌落上滴加。观察并记录结果。（4）用炭疽杆菌进行实验后，所有用过的培养液、培

10、养基等必须经过处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散，污染环境。5.（2015黑龙江佳木斯重点中学联考）（9分）同学们为了探究土壤中的微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能高效降解尿素的细菌（目的菌）。培养基成分如下表所示，实验步骤如下图所示。请分析回答问题：KH2PO41.4 gNa2HPO42.1 gMgSO47H2O0.2 g葡萄糖1 g尿素10 g琼脂15 g将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL（1）简述土壤中可分解尿素的细菌的鉴定方法及原理：在以尿素为唯一氮源的培养基中加入指示剂，细菌合成的将尿素分解为，pH升高，使指示剂变为红色。（2）培养基中加入尿素的

11、目的是筛选目的菌，这种培养基属于培养基。（3）“目的菌”生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的和，实验中需要振荡培养，原因是_。（4）下图是利用法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。（5）关于右图的操作方法和结果，叙述正确的是。A.操作前要将接种环放在火焰边灼烧灭菌B.划线操作须在火焰上进行C.在5区域中才可以得到所需菌落D.在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环灭菌6.（2015湖北武汉二中模拟）（8分）某生物兴趣小组的同学利用新鲜葡萄榨取果汁并制作葡萄酒，简要流程如下：（1）在葡萄酒的自然发酵过程中，起主要作用的是附着在葡萄皮上的酵母菌，榨汁前需要除去枝梗，此操

12、作是在冲洗之（填“前”或“后”）进行的。（2）葡萄酒的颜色通常呈现深红色，原因是，酒精发酵时的温度一般在。（3）为提高果酒的品质，更好地抑制其他微生物的生长，除接入合适的菌种外，还应对原料和装置分别进行。（4）利用果酒可以制作果醋，制作果醋时利用的微生物是，最适生长温度是，当时，该生物将乙醇变为乙醛，最终变为醋酸。7.（2016襄阳市调研）（7分）生活饮用水经过沉淀、过滤、加氯消毒等处理，含微生物很少，但当其水源水不洁或处理达不到要求时，仍然会含相当量的微生物甚至含有致病性微生物。供水管道破损及二次供水等环节也可能导致生活饮用水的污染。因此生活饮用水的微生物安全性日常检测是很重要的。我国生活饮

13、用水水质标准（GB574985）中规定生活饮用水中细菌总数不得大于100个/mL，大肠杆菌不得大于3个/L。（1）检验大肠杆菌的含量时，通常将水样进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，记录菌落数量，这种方法称为。（2）用该方法统计样本菌落数时是否需要设置对照组？为什么？_（3）如分别取0.1 mL已稀释102倍的水样分别涂布到四个琼脂固体培养基的表面进行培养，培养基记录到大肠杆菌的菌落数分别为161、155、158、170，则每升原水样中大肠杆菌数为。（4）纯化大肠杆菌时使用的培养基一般用法灭菌，（填“可”或“不可”）用加入抗生素的方法防止

14、杂菌感染。（5）如果要测定水中的病毒种类，可以用技术使其遗传物质扩增，然后用技术进行鉴定。8.（2016成都模拟）（7分）醋酸菌是食品工业中常用的微生物，不仅可用于生产醋酸，某些类型还可用于生产细菌纤维素，回答下列问题：（1）醋酸菌在缺少糖源的情况下，可将乙醇氧化为，进而生成醋酸，进行醋酸发酵时，为了维持醋酸发酵培养液pH的相对稳定，可向培养液中加入。（2）筛选接种时，为了避免环境中微生物的污染，实验操作应在附近进行；某同学采用平板划线法进行接种，在适宜条件下培养一段时间后，发现一个培养皿中某部位的菌落分布呈沟槽状，与其他部位的菌落分布有明显差异，其原因最可能是划线时该部位。（3）鉴定菌种的依

15、据通常包括菌落的形状、大小、等菌落特征，将鉴定的菌种进行临时保存时，可在低温下使用试管斜面保存，但该方法除保存时间短外，菌种还易；若需较长时间保存菌种，可用的方法是。（4）利用筛选出的优质菌种进行生产时，研究人员测得培养过程中的细菌纤维素产量、培养液中的残糖量和残氮量如图所示，图中代表培养液中残氮量的是曲线，与B曲线相比，A曲线下降更快的主要原因是_。9.（2015洛阳市三模）（8分）（1）在微生物培养中，牛肉膏和蛋白胨都能提供的主要营养包括；配制培养基除了考虑营养物质的要求外，还需满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的需求，例如培养霉菌时需要。在果酒的发酵中，绝大多数微生物都因无法适应

16、环境而受到抑制，而酵母菌却可以生长繁殖，在腐乳的制作过程中，若卤汤中酒精的含量超过12%会导致。（2）菊花的组织培养中，常用的MS培养基中蔗糖的作用包括提供碳源和；植物激素的以及用量比例都会影响实验结果。（3）运用蒸馏法提取植物芳香油时，应控制好等因素，否则会影响产品的品质，胡萝卜素宜采用萃取法提取的原因是_。10.（2015河南安阳二模）（8分）据报道，从部分企业生产的速冻食品中检出葡萄球菌超标，“细菌门”事件引起公众普遍关注。葡萄球菌能分解卵黄中的卵磷脂，在含卵黄的固体培养基上形成的菌落周围会出现特有的乳白色的乳浊环。请回答下列问题。（1）某兴趣小组欲检测某果汁类食品中是否含有葡萄球菌，请

17、帮他们完善下列步骤。配制培养基：称取适量的牛肉膏、蛋白胨、NaCl、琼脂等，加入蒸馏水，搅拌加热至完全溶解后调节pH，分装到锥形瓶后进行，在无菌状态下加入卵黄液（100mL10%灭菌NaCl溶液中加一个鸡蛋黄，振荡均匀）摇匀后立即倒平板。接种：取待检测果汁2.5 mL加入22.5 mL灭菌生理盐水中，制成接种样液。实验组：将接种样液用法接种在含卵黄的固体培养基上。对照组：将用平板划线法接种在含卵黄的固体培养基上或不接种作为对照。将上述接种后的培养皿同时放在36 的恒温箱中培养48 h。观察：观察培养基表面。（2）培养基中的牛肉膏和蛋白胨为葡萄球菌生长和繁殖提供。葡萄球菌能耐受高浓度的NaCl溶

18、液，所以在配制培养基时加入高浓度的NaCl溶液可以将它分离出来，此培养基属于培养基。（3）若要统计某土壤样品中该活菌数目，宜采用法。11.（2015东北三校联合模拟）（8分）酸菜，古称菹，周礼中就有其大名。制作酸菜的初衷是为了延长蔬菜保存期限。请回答：（1）酸菜制作起主要作用的微生物是。但是在发酵初期，很多杂菌会大量繁殖，其中导致泡菜水的表面长白膜的微生物是。（2）实验室可采用法进行菌种纯化，在对该菌种进行培养时，与常规培养基相比还需要额外在培养基中添加。（3）为了保持所获得菌种纯净，需要进行菌种的保藏。若采用临时保藏，将菌种接种在上，放入4 冰箱中可保藏36个月；若要长期保存，可将菌液与灭菌

19、的混匀，放在20 的冰箱中保存一年。（4）市场上购买的真空包装酸菜，在没有发生漏气状态下发生了“涨袋”现象，A同学怀疑是杂菌污染导致的，B同学怀疑是乳酸菌大量繁殖导致的，说出你支持谁的观点并说出理由。支持，理由是_。12.（2015温州八校联考）（8分）下面是关于固定化酶和细菌培养实验的问题，请回答：（1）某兴趣小组欲利用固定化酶进行酶解淀粉的实验，分组见下表。组别固定化酶柱长度/cm淀粉溶液的流速/（mLmin1）甲100.3乙100.5丙150.3丁150.5将吸附了淀粉酶的石英砂装入柱中后，需用蒸馏水充分洗涤固定化酶柱，以除去。按上表分组，将配制好的淀粉溶液加入到固定化酶柱中，然后取一定

20、量的流出液进行KII2检测。若流出液呈红色，表明有生成，若各组呈现的颜色有显著差异，则流出液中淀粉水解产物浓度最高的是组。（2）下列关于上述固定化酶实验的叙述，错误的是。A.固定化酶柱长度和淀粉溶液流速决定了酶柱中酶的含量B.淀粉溶液流速过快会导致流出液中含有淀粉C.各组实验所用的淀粉溶液浓度应相同D.淀粉溶液的pH对实验结果有影响（3）现有一份污水样品，某兴趣小组欲检测其中的细菌数，进行以下实验。将一定量的污水样品进行浓度梯度稀释。取适量不同稀释度的稀释液，用法分别接种于固体平面培养基上，经培养后进行计数。该实验应注意，接种前，从盛有的容器中将玻璃刮刀取出，放在酒精灯火焰上灼烧，冷却后待用；

21、分组时，需用作为对照。（4）在上述细菌培养实验中进行计数时，应计数的是接种了。A.各个稀释度样品的培养基上的细菌数B.合理稀释度样品的培养基上的细菌数C.各个稀释度样品的培养基上的菌落数D.合理稀释度样品的培养基上的菌落数13.（2015中原名校联考）（8分）有机农药苯磺隆是一种除草剂，长期使用会污染环境。研究发现，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分离降解苯磺隆的菌株和探索其降解机制的实验过程如图甲、乙所示。（1）微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、四类，该实验所用的选择培养基只能以苯磺隆作为唯一碳源，其原因是_。（2）与微生物培养基相比，植物组织培养的培养基常需添加生长素和，这些植物

22、激素一般需要事先单独配制成保存备用。（3）纯化菌株时，通常使用的划线工具是。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌，第二划线区域所划的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有。（4）为探究苯磺隆的降解机制，将该菌种的培养液过滤离心，取上清液做图乙所示实验。该实验的假设是，该实验设计是否合理？为什么？。单元卷17微生物的利用三年真题优化重组练1.解析(1)脂肪可被苏丹()染液染成橘黄色(红色)；题干中说明微生物A产生的油脂不易挥发，则可以采用萃取法提取微生物A中的脂肪。(2)油脂为有机化合物，富含C元素，故为了从自然界获得能够分解油脂的单菌落，应以

23、油脂为唯一碳源来配制培养基。在该培养基上，能分解油脂的微生物可以正常生长，其他微生物不能正常繁殖。(3)可利用血细胞计数板计数法测定菌液中的微生物数量，计数时，活菌和死亡的细菌都会被计数，所以测定培养液中的活菌数应采用稀释涂布平板法。(4)在45 时，降解10 g油脂所需酶的数量最大，则该温度下酶活性最低；由题干可知，40 时分解10 g油脂所需的酶的数量最少。应在40 左右范围内设置不同温度梯度来探究酶的最适温度。答案(1)苏丹(或苏丹)萃取法(2)油脂(3)血细胞计数板稀释涂布平板(4)45402.解析本题考查微生物培养、细菌分离的相关知识。(1)为了确定培养基的灭菌是否合格，微生物学实验

24、一般会设置空白对照：随机取若干灭菌后的空白平板培养一段时间，观察培养基上是否有菌落生成；利用平板菌落计数法的计算公式估算水样中的活菌数：M(稀释倍数)1003.8107/L。(2)接种时接种环需要灼烧灭菌；在第二次及以后划线时，总是从上一次划线的末端开始划线，这样做的目的是通过划线次数的增加，使每次划线时菌体的数目逐渐减少，以便得到单个菌落。(3)根据示意图A和B中生长出的菌落形态，判定B图为稀释涂布平板法接种培养的结果(菌落分布相对均匀)。(4)振荡培养可以增加液体培养基溶解氧的含量，促进好氧型微生物的生长；另外振荡培养还可以使菌体与培养液充分接触，提高营养物质的利用率。答案(1)检测培养基

25、平板灭菌是否合格3.8107(2)灼烧将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落(3)B(4)溶解氧营养物质3.解析本题主要考查纤维素酶的作用、刚果红染色法、分离和鉴别纤维素分解菌的方法。(1)纤维素是一种由葡萄糖首尾相连而成的高分子化合物，是含量最丰富的多糖类物质。纤维素能被纤维素酶分解为葡萄糖，如图：纤维素纤维二糖葡萄糖。(2)刚果红与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物无法形成，出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。(3)分离和鉴别纤维素分解菌的培养基为固体培养基，且需要以纤维素为唯一碳源。答案(1)纤维二糖葡萄糖(2)红透明圈(3)

26、不能液体培养基不能分离单菌落不能培养基乙中没有纤维素，不会形成CR纤维素红色复合物，即使出现单菌落也不能确定其为纤维素分解菌4.解析本题考查微生物接种和抗生素抗菌能力判断。(1)在微生物的培养过程中，常用来分离微生物的方法是稀释涂布(平板)法或平板划线法。(2)为了使微生物在培养基上能够均匀分布，一般用涂布法将微生物接种在培养基上。(3)在抗药性检验过程中，如果在菌落周围出现透明的圆圈，说明此种抗生素可抑制该细菌生长；透明圈的大小表示此种抗生素抗菌能力的强弱，据此可判断A、B、C抗菌能力强弱依次是A、C、B；D的透明圈中出现了一个菌落，说明该菌落对此种抗生素具有耐药性。(4)实验结果表明抗生素A对该致病菌的抗菌效果最好。答案(1)划线稀释涂布(平板)(或涂布)